Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Билет 12
1. Основные биологические свойства бактерий и методы их изучения:
1)морфологические св-ва (изучают с помощью микроскопа);
2)тинкториальные св-ва (изучают при окраске по Граму);
3)культуральные св-ва (макро- и микроскопически изучают свойства колоний, выращенных на плотной питательной среде и характер роста на жидкой питательной среде и на скошенном агаре, используемом ка среда накопления );
4)сахаролитические свойства (изучают с помощью посевов в среды Гисса (полужидкие среды, содержащие один из углеводов и индикатор, реагирующий на продукты распада этого углевода, возникающие под сахаролитическим действием бактерий);
протеолитические св-ва (изучают при посеве бактерий на желатин или лакмусовое молоко);
пептолитические св-ва (изучают при посеве на мясо-пептонный бульон с помощью индикаторных полосок, вставленных под пробку пробирки, изменяющих цвет под действием летучих продуктов распада пептонов - индола, сероводорода, аммиака);
Сахаролитические, протеолитические и пептолитические свойства - это биохимические или ферментативные свойства.
5)антигенные свойства (изучают в реакциях агглютинации или преципитации с помощью диагностических агглютинирующих или преципитирующих сывороток);
6)токсигенные свойства (изучают в реакции преципитации в геле с помощью антитоксических преципитирующих сывороток или с помощью биологических проб на лабораторных животных);
наличие факторов вирулентности - с помощью специальных методик изучают наличие ферментов агрессии и защиты;
7)чувствительность к антибиотикам (методом индикаторных дисков или методом серийных разведений).
2. По своей природе антитела являются иммуноглобулинами (Ig), по химическому составу они относятся к гликопротеидам, по электрофоретической подвижности иммуноглобулины относятся в основном к гамма- и бета- глобулиновым фракциям сыворотки крови.
Иммунные глобулины подразделяются на пять классов: IgG, IgM, IgA, IgE, IgD. Они отличаются друг от друга физическими, химическими и антигенными свойствами:
- IgG составляют основное количество (около 80%) сывороточных иммуноглобулинов. Характерной их особенностью является высокая скорость связывания с антигеном, особенно бактериальной или вирусной природы. Это единственный класс антител, способный проникать через плаценту в организм развивающегося плода.
- IgM появляются первыми в организме плода и в сыворотке крови после введения в организм антигена.
- IgA обладают способностью проникать в различные секреты (молозиво, слюну, содержимое кишечника, бронхов и др.). - IgE несут основную ответственность за аллергические реакции, способствуют освобождению из тучных клеток гистамина, играют важную роль в местном иммунитете.
- IgD находятся на поверхности В- лимфоцитов и вместе с IgM составляют их рецепторы.
Молекулы иммуноглобулинов всех классов построены одинаково. Наиболее простая структура у молекул IgG: две пары полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями. Каждая пара состоит из тяжелой и легкой цепи, которые отличаются по молекулярной массе. Каждая цепь имеет постоянные участки, предопределенные генетически, а также переменные участки, образующиеся под воздействием антигена. Эти специфические участки называют активными центрами. Они вступают во взаимодействие с антигеном, который вызвал образование антител.
Изменения антигенов под влиянием антител происходит в результате их взаимодействия со специфическими иммуноглобулинами.
Иммунные сыворотки – это иммунобиологические препараты, приготовленные из сыворотки крови человека или животных, которые применяются для лечения, профилактики и диагностики инфекционных заболеваний.
Иммунные сыворотки по характеру антител делятся на антимикробные (против бактерий, спирохет, хламидий, микоплазм, вирусов, актиномицетов, простейших) и антитоксические (дифтерийная, столбнячная, ботулиновая, газовогангренозная). Есть еще группа антимикробных сывороток, представленная высоко очищенной гамма – глобулиновой фракцией белка. Эти сыворотки известны под названием «гаммаглобулины» (коревой, гриппозный, чумной, стафилококковый, сибиреязвенный, гепатитный, лептоспирозный, энцефалитный и пр.) и используются они с лечебной целью.
Иммунобиологическую основу иммунных сывороток составляют антитела, относящиеся к гамма – глобулинам (IgG, IgM, IgA, IgE, IgD).
В защите человека от патогенных микроорганизмов наиболее важная роль принадлежит иммуноглобулинам G, M и А.
Существует несколько классификаций иммунных сывороток: по источникам получения – иммунные сыворотки получают от человека (гомологичные) или от животных (гетерологичные); по целям, с которыми они применяются – лечебные, профилактические (лечебно – профилактические) и диагностические.
В медицинской практике нередко возникают ситуации, при которых в организм необходимо ввести готовые специфические антитела для усиления защиты от микробов или их продуктов жизнедеятельности.
В настоящее время с лечебной и профилактической целью применяются антимикробные и антитоксические сыворотки. Проведение пассивной иммунизации (введение готовых антител) основывается на знании антигенной структуры возбудителя.
Одной из первых иммунных сывороток примененных с лечебной целью была антитоксическая дифтерийная сыворотка.
История ее создания берет начало в 1888 году, когда французские ученые Ру и Иерсен установили, что возбудитель дифтерии продуцирует экзотоксин и определили его роль в развитии болезни.
Немец Беринг и японец Китазато в 1890 году впервые попытались получить иммунные дифтерийную и столбнячную сыворотки, но получили противодифтерийную иммунную антитоксическую сыворотку Ру и Бардах в 1893 году.
Эти исследования явились основой для получения иммунных противотоксических сывороток и применения их с лечебной целью.
Иммунные сыворотки, применяемые с целью серопрофилактики или серотерапии, получают от многократно иммунизированных лошадей или людей.
Иммунобиологические препараты называемые иммуноглобулинами получают используя сыворотку крови иммунизированного человека. Эти иммуноглобулины являются гомологичными. А иммуноглобулины приготовленные из сыворотки крови лошади, называют гетерологичными.
Для получения иммунных сывороток, вводимых человеку, были отобраны лошади по некоторым очень важным показателям.
Белки сыворотки крови лошади по своей структуре значительно близки к таковым сыворотки крови человека. Это немаловажный фактор, поскольку повторное введение гетерологических белков, являющихся полноценными антигенами, приводит к сенсибилизации человека с последующим развитием аллергических реакций (анафилактический шок, сывороточная болезнь).
При введении человеку сыворотки крови лошади частота аллергических осложнений значительно меньше, чем после введения сыворотки крови другого животного.
Кроме того, человек и лошадь имеют единственное общее очень опасное инфекционное заболевание – сап. Сап у лошадей протекает только в острой форме, что облегчает отбор животных для гипериммунизации, а в дальнейшем и процесс стерилизации этого иммунобиологического препарата.
И третий важный фактор, позволивший избрать лошадь для получения иммунных сывороток – это то, что у лошадей, по сравнению с другими животными, легче формируется состояние гипериммунизации. Такое состояние обеспечивает большое количественное накопление антител в единице объема.
По современным требованиям качественной считается иммунная сыворотка, в одном миллилитре которой содержится 1000 МЕ.
Для освобождения сыворотки крови лошади от балластных белков, а также для концентрации антител применяют различные методы, в том числе и метод диализа и ферментации. Среди методов, используемых для обработки сыворотки, есть позволяющие получить чистую фракцию гамма – глобулинов.
С профилактической целью антитоксические сыворотки и иммуноглобулины вводят при подозрении на заражение (столбняк, бешенство и др.). Целесообразно эти препараты вводить до развития патологического процесса, в первые дни после заражения.
При введении этих препаратов с лечебной целью более выраженный эффект наблюдается при раннем их применении.
Антитоксические сыворотки и иммуноглобулины вводят внутримышечно, а по жизненным показаниям – внутривенно
3. Риккетсии представляют собой самостоятельный класс, который делится на подклассы a1, a2, b и g.
a1 включает в себя семейство Rickettsiaceae, наиболее важными из которого являются два рода.
1. Род Rickettsia, виды делят на две группы:
1) группу тифов:
а) R. provacheka – возбудитель эпидемического (вшивого) сыпного тифа;
б) R. typhi – возбудитель эндемического (крысино-блошиного) тифа;
2) группу клещевых риккетсиозов:
а) R. rickettsi – возбудитель лихорадки скалистых гор;
б) R. conori – возбудитель геморрагической лихорадки;
в) R. sibirika – возбудитель североазиатского риккетсиоза.
2. Род Erlihia, выделяют виды: E. canis и E. sennetsu (могут быть возбудителями инфекционного мононуклеоза).
a2 включает в себя семейство Bartonellaceae, род Bartonella, подразделяемые на виды:
1) B. kvintana – возбудитель пятидневной (траншейной) лихорадки;
2) B. hensele – возбудитель «болезни кошачьих царапин».
g включает в себя род Coxiella, вид C. burneti – возбудитель ку-лихорадки.
Риккетсии – это бактерии, отличительной чертой которых является облигатный внутриклеточный паразитизм. По своему строению близки к грамотрицательным бактериям. Имеются собственные ферментные системы. Неподвижны, спор и капсул нет.
Для риккетсий характерен выраженный полиморфизм. Выделяют четыре формы:
1) форму А – кокковые, овальные, расположенные одиночно или в виде гантелей;
2) форму В – палочки средней величины;
3) форму С – бациллярные риккетсии, крупные палочки;
4) форму D – нитевидные, могут давать ответвления.
Морфология зависит от стадии инфекционного процесса. При острой форме в основном встречаются формы А и В, при хронической, вялотекущей – С и D.
Взаимодействие риккетсий с клеткой включает в себя несколько этапов.
1. Адсорбция на рецепторах соответствующих клеток.
2. После прикрепления мембрана делает инвагинацию, риккетсия погружается в клетку в составе вакуоли, стенки которой образованы мембраной клетки.
3. Далее возможны два варианта:
1) одни виды риккетсий продолжают оставаться внутри вакуоли и там размножаются;
2) другие лизируют мембрану и свободно лежат в цитоплазме.
4. Риккетсии интенсивно размножаются, мембрана разрушается, и они выходят из клетки.
Облигатный внутриклеточный паразитизм риккетсий реализуется на клеточном уровне.
Поскольку риккетсии – внутриклеточные паразиты, то в питательных средах они не размножаются. Для их культивирования применяются те же методы, что и для культивирования вирусов:
1) заражение ткани;
2) заражение куриных эмбрионов;
3) в организме экспериментальных животных;
4) в организме эктопаразитов.
2. Риккетсиозы
К наиболее распространенным риккетсиозам относят эпидемический сыпной тиф. Возбудитель – R. Provacheka. Источник инфекции – больной человек. Переносчик – платяные и головные вши.
Это полиморфные микроорганизмы. Размножаясь в клетках хозяина, образуют микрокапсулу. Аэробы. Культивируются в куриных эмбрионах.
Имеют два антигена:
1) группоспецифический (обладает иммуногенными свойствами и является протективным);
2) корпускулярный, видоспецифический (имеется только у данного вида).
Заболевание начинается после поступления возбудителя в кровь. Адгезия риккетсий происходит на эндотелиоцитах капилляров. В цитоплазме этих клеток происходит их размножение. После разрушения клеток новая генерация риккетсий выходит в кровь. Поражение капилляров приводит к образованию тромбов и гранулем. Наиболее опасная локализация поражения – ЦНС. На коже появляется сыпь. Помимо прямого действия, риккетсии выделяют эндотоксин, вызывающий парез капилляров.
После заболевания остается напряженный антимикробный иммунитет.
Диагностика:
1) серодиагностика – основной метод (РПГА, РСК с диагностикумом из R. Provacheka);
2) бактериологическое исследование; исследуемый материал – кровь; проводится только в лабораториях специального режима;
3) ПЦР-диагностика.
Специфическая профилактика: живая сыпнотифозная вакцина.
Этиотропная терапия: антибиотики – тетрациклины, фторхинолоны.
К наиболее распространенным риккетсиозам относят и эндемический (крысино-блошиный) тиф. Возбудитель – R. typhi. Источник инфекции – крысиные блохи, вши, гамазовые клещи. Пути заражения – трансмиссивный, воздушно-капельный.
Патогенез и клинические проявления заболевания сходны с эпидемическим сыпным тифом.
R. typhi имеют видоспецифический антиген, по которому их дифференцируют от других риккетсий.
Диагностика:
1) биологическая проба – заражение материалом от больных морских свинок;
2) серодиагностика – РСК, ИФ.
Нужно сказать и о ку-лихорадке. Возбудитель – C. burneti. Источник инфекции – домашний скот. Пути передачи – алиментарный, контактно-бытовой.
Это мелкие палочковидные или кокковидные образования, окрашивающиеся по Романовскому—Гимзе в ярко-розовый цвет. Они образуют L-формы. Культивируются в желточном мешке куриного эмбриона.
Имеют два антигена: растворимый и корпускулярный.
Устойчивы к факторам внешней среды.
После проникновения C. burneti в организм возникает риккетсемия. Размножение микроорганизмов происходит в гистиоцитах и макрофагах, после разрушения которых отмечаются генерализация процесса и токсинемия. В процессе инфекции развивается реакция гиперчувствительности замедленного типа, формируется напряженный иммунитет.
Заболевание характеризуется неясной клинической картиной.
Диагностика:
1) серологическое исследование (РСК, РПГА);
2) кожно-аллергическая проба (как ретроспективный метод диагностики).
Специфическая профилактика: живая вакцина М-44.
Лечение: антибиотики – тетрациклины, макролиды.
4. Рабдовирусы отличают пулевидная форма, наличие оболочки, спиральная симметрия; геном образован РНК. Средние размеры вириона 180х75 нм; один конец закруглён, другой – плоский; поверхность выпуклая с шарообразными структурами. Сердцевина вириона симметрично закручена внутри оболочки по продольной оси частицы. Вирусная оболочка состоит из двойного липидного слоя, включающего внешние поверхностные гликопротеиновые структуры. Мембрану образуют поверхностный гликопротеин (G) и два негликозилированных белка (Ml и М2).Репликативный цикл реализуется в цитоплазме клетки.
Бешенство. Острая инфекция ЦНС, сопровождающаяся дегенерацией нейронов головного и спинного мозга; летальность для человека составляет 100%; возбудитель – вирус рода Lyssavirus. Заболевание известно с глубокой древности; во всяком случае, ещё в «Илиаде» греки называли троянца Гектара «бешеной собакой» (очевидно, это первое литературное упоминание бешенства).
Везикулярный стоматит. Возбудитель относят к роду Vesiculovirus; выделяют два антигенных варианта. По своей эпидемиологии и экологии – типичный арбовирус. Переносчики – различные комары, в организме которых он размножается. Отличительная особенность вирусов везикулярного стоматита способность индуцировать выработку ИФН в больших титрах и высокая чувствительность к нему. Клинически заболевание проявляется везикулярными высыпаниями на слизистой оболочке рта, дёсен и глотки.
Клещевой (русский дальневосточный) и центрально-европейский энцефалиты. Возбудитель выделен Л.А. Зильбером, Е.Н. Левкович, М.П. Чумаковым и др. (1937). Резервуар и переносчик вируса – клещи Ixodes persulcatus и Ixodes ricinus (переносит вирус более благоприятно протекающего европейского варианта). Дополнительный резервуар – различные животные и птицы. У последних развивается бессимптомная инфекция с вирусемией. Заражение человека происходит после укусов инфицированных клещей или употребления в пищу сырого молока коз и коров. После укуса переносчика вирус попадает в кровоток и первично реплицируется в лимфатических узлах, эндотелиоцитах, клетках печени и селезёнки. В дальнейшем возбудитель распространяется гематогенным и лимфогенным путями, проникая в ЦНС. Вирус поражает двигательные нейроны передних рогов шейного отдела спинного мозга, мозжечок и мягкую оболочку головного мозга. Инкубационный период варьирует от 1 сут. до месяца. Острые формы разделяют на лихорадочные, менингеальные, менингоэнцефалитические, полиомиелитические и полирадикулоневритические. Для них характерны явления общей инфекционной интоксикации, общемозговые, оболочечные и очаговые неврологические симптомы. Преобладание ряда из перечисленных симптомов определяет клиническую форму болезни. Благоприятно протекают лихорадочная и менингеальная формы; прогноз прочих поражений сложен. Хронические поражения – синдром хронического полиомиелита; синдром бокового амиотрофического склероза и эпилепсия кожевниковского типа.
Омская геморрагическая лихорадка. Возбудитель выделил М.П. Чумаков (1947). Резервуар и переносчик вируса – клещи рода Ixodes; дополнительный резервуар – различные животные и птицы; у последних развивается бессимптомная инфекция с вирусемией. Заражение человека происходит после укусов инфицированными клещами; при контакте с заражёнными животными (например, ондатрами) или употреблении в пищу сырой воды. После укуса переносчика вирус проникает в кровоток и реплицируется в эндотелии капилляров кожи и различных органов. Клинически проявляется лихорадкой и геморрагиями различной локализации; прогноз благоприятный (летальность не превышает 0,5-3%).
Лабораторная диагностика арбовирусных инфекций включает выделение возбудителя и выявление противовирусных AT. Для выделение вируса наиболее универсальный способ – внутримозговое заражение 1-3-дневных мышат-сосунков; после появления признаков болезни мозг пассируют, через 3-4 пассажа вирус достигает высокого титра, и его можно использовать для приготовления Аг для идентификации в РТГА и РСК с наборами иммунных сывороток. Окончательную идентификацию проводят в РН – наиболее специфичной реакции. Следует помнить, что работа с материалом (обычно кровь) представляет большую опасность (в плане ингаляционного заражения) и должна производиться в специализированных лабораториях.
Вируспецифические AT. Через 6-7 дней после заражения в крови появляются антигемагглютинины, к концу 2 нед. – комплементсвязывающие AT, а на 3-4 нед. – нейтрализующие AT.