У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.net

по теме- Анализ желудочного сока

Работа добавлена на сайт samzan.net:

Поможем написать учебную работу

Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.

Предоплата всего

от 25%

Подписываем

договор

Имя

Выберите тип работы:

Принимаю Политику конфиденциальности

Скидка 25% при заказе до 29.12.2024

Методическое указание к занятию № 1

по биохимии для студентов 2 курса по специальности «Общая медицина» 04-09.02.2013 уч.г.

Лабораторное занятие по теме: «Анализ желудочного сока. Определение метаболитов и ферментов азотистого обмена в крови».

Практические работы:

Анализ желудочного сока:

обнаружение лактата (реакция Уффельмана); Верболович П.А. Практикум. 1973. 268.
обнаружение крови (бензидиновая проба). Верболович П.А. Практикум.1973. 218 .
реакция на свободную HCl (реакция с парадиметиламиноазобензолом). Верболович П.А. Практикум.1973. 264.
определение кислотности желудочного сока в одной пробе. Верболович П.А. Практикум.1973.раб. 266.

Определение активности трансаминаз (АСТ, АЛТ) в сыворотке крови Биохимический анализатор. при себе иметь: бахилы или сменную обувь, мед.колпак, мед.халат )Описание.

Определение АЛТ

Метод:

Кинетический метод для попределения АЛТ в сывортке крови.

Принцип реакции:

АЛТ

2 – оксоглутарат + L- аланин L- глутамат + пируват

ЛДГ

Пируват + НАДН + Н + L-лактат + НАДН+

Активность АЛТ в пробе пропорциональна уменьшению поглошения при 340, 334 иди 365 нм.

Монореагентный метод – старт образцом

	25 или 30 С	37 С
Образец	0,200 мл	0, 100 мл
Рабочий раствор	1 ,0 00 мл	1,000 мл
Смешать, инкубировать 1 мин, измерить поглащение. Измерить поглащение точно через 1, 2 и 3 минуты. Рассчитайте среденне изменение поглощения в минуту ( дельта А)

Расчеты:

Рассчитайте активность АЛТ в пробе, используя

1. Калибратор

дельта А образец

АЛТ (Е/Л мккат/л) = С кал _________________

дельта А калибратор

С кал – концентрация калибратора

2 . Факторы

АЛТ – Ф х дельта А/мин

Ф – фактор пересчета

Факторы	Старт пробой	Старт субстратом
	250 или 30 0С	37 0С	250 или 300С	370 С
Длина волны	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л
330 nm	971	16,2	1780	29,7	1173	19,55	2184	36,4
340 nm	952	15,9	1845	29,1	1151	19,2	2143	35,7
365 nm	1765	59,4	3235	53,9	2132	35,5	3971	66,2

Коэффициент переcчета

1 кат/л = 1 моль/л сек

1 мккат/л = 60 Е/л

Нормальные величины - АЛТ сыворотка, 37 С

Ф. С добавлением П-5 - Ф	25 0С	300С	370С
	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л
Мужчины	-	-	7-34	0,12-0,60	10-51	0,17-0,85
Женщины	-	-	7-24	0,12-0,60	10-35	0,17-0,60
2. Без добавления П-5-Ф 250 С 30 0С	370С
	Е/л мккат/л		е/л	Мккат/л	е/л	Мккат/л
Мужчины	<18	<0,60	<25	<0,42	<37	<0,62
Женщины	<15	<0,25	<21	<0,35	<31	<0,52

Определение АСТ

Метод:

Кинетический метод для определения АСТ в сывортке крови

Принцип реакции

АСТ

2 – оксоглутарат +L - аспарагин L глутамат + оксалоацетат

МДГ

Оксалоацетат + НАДН + Н+ + L- малат+ НАД+

Активность АСТ в пробе пропорциональна уменьшению поглощения при 340, 334 иди 365 нм

Монореагентный метод – старт образцом

	25 или 30 С	37 С
Образец	0,200 мл	0, 100 мл
Рабочий раствор	1 ,0 00 мл	1,000 мл
Смешать, инкубировать 1 мин, измерить поглощение. Измерить поглоащение точно через 1, 2 и 3 минуты. Рассчитайте среднее изменение поглощения в минуту (дельта А)

Расчеты:

Рассчитайте активность АСТ в пробе, используя

1. Калибратор

Дельта А образец

АСТ (Е/Л мккат/л) = С кал ____________________

Дельта А калибратор

С кал – концентрация калибратора

2 . Факторы

АCТ – Ф х дельта А/мин

Ф – фактор пересчета

Факторы	Старт пробой	Старт субстратом
	250 или 30 0С	37 0С	250 или 300С	370 С
Длина волны	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л
330 nm	971	16,2	1780	29,7	1173	19,55	2184	36,4
340 nm	952	15,9	1845	29,1	1151	19,2	2143	35,7
365 nm	1765	59,4	3235	53,9	2132	35,5	3971	66,2

Коэффициент переcчета

1 кат/л = 1 моль/л сек 1 мккат/л = 60 Е/л

Нормальные величины - АСТ сыворотка, плазма Е/Л

Ф. С добавлением П-5 - Ф	25 0С	300С	370С
	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л
Мужчины	-	-	7-34	0,12-0,60	10-51	0,17-0,85
Женщины	-	-	7-24	0,12-0,60	10-35	0,17-0,60
2. Без добавления П-5-Ф 250 С 30 0С	370С
	Е/л мккат/л		е/л	Мккат/л	е/л	Мккат/л
Мужчины	<18	<0,60	<25	<0,42	<37	<0,62
Женщины	<15	<0,25	<21	<0,35	<31	<0,52

Вопросы СРС.

Биохимические механизмы регуляции пищевариения: гормоны желудочно-кишечного тракта.

Методикалық нұсқау № 1

0биохимия пәнінен «Жалпы медицина» мамандығы бойынша 2 курс студенттері үшін.

04-09.02.2013 оқу жылы.

Келесі тақырып бойынша зертханалық сабақ «Асқазан сөлінің анализі . Қанда азотты алмасудың метаболиттері мен ферменттерді».

Тәжирібелік жұмыстар:

1. Асқазан сөлінің анализі:

лактатты анақтау ( Уффельман реакциясы); Верболович П.А. Практикум. 1973. № 268
қанды анықтау (бензидин тәсілі). Верболович П.А. Практикум.1973. № 218.
бос HCl анықтау ( парадиметиламиноазобензолмен реакция). Верболович П.А. Практикум.1973. №2 64.
асқазан сөлінің қышқылдығын бір сынамада анықтау . Верболович П.А. Практикум.1973.№ 266.

2.Қан сары суында трансаминазалардың (АСТ, АЛТ) белсенділігін анықтау. Жұмыстардың барыстары.

АЛТ анықтау

Тәсіл:

Қан сары суында АЛТ анықтауға арналған кинетикалық тәсіл.

Реакцияның принципі:

АЛТ

2 – оксоглутарат + L- аланин L- глутамат + пируват

ЛДГ

Пируват + НАДН + Н + L-лактат + НАДН+

Сынамадағы АЛТ белсенділігі 340, 334 немесе 365 нм жұтудың төмендеуіне пропорциональды.

Монореагентты тәсіл – сынама мен старт

	25 или 30 С	37 С
Сынама	0,200 мл	0, 100 мл
Жұмыс реагенті	1 ,0 00 мл	1,000 мл
Араластырып, 1 мин, инкуберлеп, жұтуды өлшеу қажет. 1 ,2 және 3 минутта кейін жұтуды нақты өлшеу қажет. Жұтудың орта өгересін есептеу қажет, мин., ( дельта А)

Есеп:

Сынамада АЛТ белсенділігін есептеу үшін :

1. Калибратор

дельта А сынама

АЛТ (Е/Л мккат/л) = С кал _________________

дельта А калибратор

С кал – калибратордың концентрациясы

2 . Факторлар:

АЛТ – Ф х дельта А/мин

Ф – қайтадан есептеудің факторы

Факторлар	Сынама мен старт	Субстрат пен старт
	250 немесе 30 0С	37 0С	250 немесе 300С	370 С
Толқының ұзындығы	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л
330 nm	971	16,2	1780	29,7	1173	19,55	2184	36,4
340 nm	952	15,9	1845	29,1	1151	19,2	2143	35,7
365 nm	1765	59,4	3235	53,9	2132	35,5	3971	66,2

Қайтадан есептеудің коэффициенттері

1 кат/л = 1 моль/л сек

1 мккат/л = 60 Е/л

Қалыпты мөлшерлері - АЛТ, қан сары суы 37 С

Ф. П-5 – Ф қосу мен	25 0С	300С	370С
	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л
Ерлер	-	-	7-34	0,12-0,60	10-51	0,17-0,85
Әйелер	-	-	7-24	0,12-0,60	10-35	0,17-0,60
2. П-5-Ф қосылмайды 250 С 30 0С	370С
	Е/л мккат/л		е/л	Мккат/л	е/л	Мккат/л
Ерлер	<18	<0,60	<25	<0,42	<37	<0,62
Әйелер	<15	<0,25	<21	<0,35	<31	<0,52

АСТ анықтау

Метод:

Қан сары суында АСТ анықтауға арналған кинетикалық тәсіл.

Реакцияның принципі:

АСТ

2 – оксоглутарат +L - аспарагин L глутамат + оксалоацетат

МДГ

Оксалоацетат + НАДН + Н+ + L- малат+ НАД+

Сынамадағы АСТ белсенділігі 340, 334 немесе 365 нм жұтудың төмендеуіне пропорциональды.

Монореагентты тәсіл – сынама мен старт

	25 или 30 С	37 С
Сынама	0,200 мл	0, 100 мл
Жұмыс реагенті	1 ,0 00 мл	1,000 мл
Араластырып, 1 мин, инкуберлеп, жұтуды өлшеу қажет. 1 ,2 және 3 минутта кейін жұтуды нақты өлшеу қажет. Жұтудың орта өгересін есептеу қажет, мин., ( дельта А)

Есеп:

Сынамада АСТ белсенділігін есептеу үшін :

1. Калибратор

Дельта А сынама

АСТ (Е/Л мккат/л) = С кал ____________________

Дельта А калибратор

С кал – калибратордың концентрациясы

2 . Факторлар

АCТ – Ф х дельта А/мин

Ф – қайта есептеудің факторлары

Факторлар	Сынама мен старт	Субстрат пен старт
	250 немесе 30 0С	37 0С	250 немесе 300С	370 С
Толқының ұзындығы	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л	Е /л	Мккат/л
330 nm	971	16,2	1780	29,7	1173	19,55	2184	36,4
340 nm	952	15,9	1845	29,1	1151	19,2	2143	35,7
365 nm	1765	59,4	3235	53,9	2132	35,5	3971	66,2

Қайтадан есептеудің коэффициенттері

1 кат/л = 1 моль/л сек

1 мккат/л = 60 Е/л

Қалыпты мөлшерлері - АСТ, қан сары суы 37 С

СӨЖ- дің сұрақтары.

Асқорыту реттелуінің биохимиялық механизмдері. Асқазан ішек жолдың гормондары.

1. 1 Электроемкость уединенного проводника
2. Беладонна
3. ~~рпын салтд~ст~рін тыныстіршілігін т
4. тема на яку покладено- підтримку державного обвинувачення в суді; представництво інтересів громадянина або
5. Начало в своих снах практически неотличимых от реальности видит погибшую жену
6. докладе мы будем говорить преимущественно о
7. Только чтение. Средствами операционной системы найти файлы-папки с заданными свойствами дата создания
8. Робочий зошит для лекційних занять з дисципліни Основи психології та міжособове спілкування 2013 рік
9. графическая модель иллюстрирующая проблему выбора
10. і 3 Історія розвитку астрономії
11. пояснительная записка к курсовой работе по дисциплине- ldquo;электрические машины и электрический приводrdquo
12. чертежей программного обеспечения
13. историческими событиями
14. видержка 1-125 з діафрагма f-8
15. Философия как наука. История зарубежной и отечественной философии
16. 2001 3 ~С105125 Геополітика досліджує суттєві напрямки історії України складання й обєднання етнічни
17. Иллюминатус Часть 1
18. Тюменский государственный университет Филиал в г1
19. РЕФЕРАТ дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата педагогічних наук Луганськ
20. вопрос жизненной важности для Ирака Ирина РАЗИНА Уже девять лет Ирак живет в условиях экономической б

Материалы собраны группой SamZan и находятся в свободном доступе