Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Федеральное агентство по здравоохранению и социальному развитию
ГОУ ВПО Кировская государственная медицинская академия
Кафедра микробиологии с вирусологией и иммунологией
Методическая разработка для преподавателей
Практическое занятие № 9 по частной микробиологии
для студентов 3 курса лечебного и педиатрического факультетов
Тема: «Возбудители туберкулеза, лепры и сибирской язвы».
Цель: способствовать формированию знаний у студентов по этиологии, эпидемиологии, патогенеза, клиники, лабораторной диагностики, специфической профилактики и лечения заболеваний, вызванных туберкулезной, лепрозной и сибиреязвенной палочками.
Задачи:
Студент должен знать:
1) до изучения темы – исходные знания по общей микробиологии, гистологии, биологии, органической химии;
2) после изучения темы – свойства возбудителей, методы культивирования, эпидемиологию, патогенез и клинические проявления, специфическое лечение и профилактику вызываемых заболеваний.
Студент должен уметь: производить основные методы микроскопических и бактериологических исследований.
Контрольные вопросы:
Методические указания
|
1. |
План практического занятия |
(135 мин) |
|
1.1. |
Организационные вопросы |
5 мин |
|
1.2. |
Теоретическая часть |
40 мин |
|
1.3. |
Время на перерыв |
5 мин |
|
1.4. |
Теоретическая часть |
45 мин |
|
1.5. |
Время на перерыв |
5 мин |
|
1.6. |
Практическая работа |
15 мин |
|
1.7. |
Изучение демонстрационного материала |
10 мин |
|
1.8. |
Проверка протоколов |
5 мин |
|
1.9. |
Уборка рабочего места |
5 мин |
2. СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ:
2.1. Контроль исходного уровня знаний. Способ – программированный контроль.
2.2. Ориентировочные основы самостоятельной работы студентов:
- выполнение практической работы;
- оформление и защита протоколов.
3. Тезисы изучаемого материала
3.1. Туберкулез
Туберкулез – это инфекционное заболевание человека и животных, вызываемое микобактериями и характеризующееся образованием специфических воспалительных изменений, хроническим течением, многообразием клинических проявлений и поражением различных органов, главным образом дыхательной системы.
Общая характеристика микобактерий
Микобактерии относятся к семейству Mycobacteriaceae, склонны к ветвлению подобно грибам-актиномицетам. Содержат много липидов и миколовой кислоты, поэтому кислото-спирто-щелочеустойчивы и плохо окрашиваются, медленно растут на питательных средах.
Род Mycobacterium включает более 40 видов. Многие из них вызывают заболевания у людей, теплокровных и холоднокровных животных. Эти заболевания называют микобактериозы.
Различают 3 типа микобактериозов, зависящих от вида микобактерий и иммунного статуса организма:
Для ускоренной предварительной дифференциации учитывают 3 признака:
По скорости роста микобактерии подразделяют на 3 группы:
Особенностью является содержание M. tuberculosis - специальных условий культивирования, или M. lprae – не растут на питательных средах.
Разделение микобактерий по патогенности:
К патогенным относятся M. tuberculosis, M. bovis, M. avium, M. leprae, M. africanum.
История открытия
Заболевание известно с глубокой древности. Легочная форма описана Аретеем Каппадокийским, Гиппократом. Ибн-Сина считал ее наследственной болезнью. Первым указал на его инфекционную природу Фракасторо. В 18-19 веках туберкулез поражал различные слои населения. Моцарт, Шопен, Некрасов, Чехов страдали этим заболеванием. Инфекционная природа заболевания была впервые доказана Вильменом (1865). В 1882 г. Р. Кох открыл туберкулезную палочку. Пирке, Кальметт, Жерен – сыграли немаловажную роль в изучении туберкулеза, разрабатывали методы диагностики, профилактики и лечения этого заболевания.
Таксономия
Порядок – Actinomycetales
Семейство – Mycobacteriaceae
Род – Mycobacterium
Виды – M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum.
Морфология
Для микроорганизма характерен полиморфизм и склонность к ветвлению.
Из зерен, фильтрующихся форм и L – форм могут восстанавливаться обычные формы.
Жгутики отсутствуют, спор не образуют, имеют микрокапсулу (которая возможно состоит из кальцита). Кислото-спирто-щелочеустойчивы (46% составляют липиды в 3-х фракциях: фосфатидная, жировая и восковая); в составе липидов имеются кислотоустойчивые жирные кислоты: туберкулостеариновая, фтиоидная, миколовая и др. Структурный скелет клеточной стенки составляют два ковалентно связанных полимера – миколат арабиногалактазана и пептидогликан, к которому присоединены белки и полисахариды. Грамположительны, окрашиваются по методу Циля-Нильсена в красный цвет. Зернистые формы (Зерна Муха) и «осколки Шпленгера» окрашиваются в фиолетовый цвет. При окраске аурамином приобретают желтый цвет. При окраске люминесцентными красителями по Бою аурамином О – некислотоустойчивые бактерии обесцвечиваются.
Культуральные свойства
Культивируются только на сложных питательных средах: среда Левенштайна-Иенсена, среда Петраньяни, среда Сотона. Для подавления сопутствующей флоры в среды добавляют малахитовую зелень, пенициллин, налидиксовую кислоту, противогрибковые препараты и др. Аэроб (факультативный анаэроб), оптимальная температура 37оС, рН 6,4-7,2, видимый рост появляется через 10-15-30 дней (время продольного деления около 24 часов). Рост стимулируется 5-10% СО2 и 0,5% глицерина.
На питательной среде M. tuberculosis образует сухие, морщинистые, возвышающиеся, с неровными изрезанными краями, крошковидные колонии, трудно эмульгируются в физ. растворе (R-форма), S-форма встречается редко. В жидких средах растут с образованием тонкой нежной желтоватой пленки, которая постепенно утолщается, поднимается на стенки пробирки, становиться морщинистой, ломкой, раствор остается прозрачным.
Вирулентные туберкулезные палочки, имеющие корд-фактор, растут на агаре в цитратной лизированной крови в виде кос или плетеных веревок.
Биохимическая активность
Относительно активны. M. tberculosis обладает каталазной активностью, уреазой, никотинаминидазой, восстанавливает нитраты, накапливает в среде ниацин, так же не способны превращать его в ниацинрибонуклеотид.
M. bovis тоже может обладать уреазой, но не восстанавливает нитраты, не продуцирует никотинаминидазу и не накапливает в среде ниацин, так как превращает его в ниацинрибонуклеотид.
Антигенная структура
Сероваров не выявлено (вид однороден). Антигены туберкулезной палочки – это белковые, полисахаридные, липидные компоненты клетки, фосфатиды. Рибосомы являются полными антигенами и индуцируют образование полных антител. Клеточная стенка микобактерий вызывает слабое антителообразование. Антигены стимулируют образование антиполисахаридных, антифосфатидных, антипротеиновых и иных антител различной специфичности. Также антигены индуцируют развитие ГНТ и ГЗТ. Для внутривидовой дифференциации M. tuberculosis разработана схема фаготипирования штаммов с помощью набора из 10 микобактериофагов: 4-х основных и 6-ти вспомогательных.
Факторы патогенности
его свойства: оказывает токсическое действие на ткани; защищает от фагоцитоза, блокируя окислительное фосфорилирование в митохондриях; подавляет миграцию лейкоцитов; разрушает митохондрии, тем самым нарушая функцию дыхания.
В 1890 г. Р. Кох выделил вещество белковой природы (фильтрат культуральной жидкости старых (2,5 мес.) пленочных культур микобактерий туберкулеза) названный альт-туберкулином. Отрицательные качества – балластные вещества, пептон, глицерин и т.д.
В 1937 г. Ф. Зейберт получил очищенный препарат «очищенный протеиновый дериват» - Purified Protein Derivative (PPD). В СССР был получен М.А. Линниковой (ППД-Л). Применяется для проведения кожной аллергической пробы Манту.
Резистентность
Устойчивы к кислотам, щелочам, спиртам, высушиванию (в высохшей мокроте до 2 мес); рассеянный солнечный свет инактивирует в течение 8-10 сут; прямой солнечный свет – 5 мин; на белье, книгах – свыше 3 мес; в воде более 1 года; в почве, навозе до 6 мес; в желудочном соке – 6 мес; в масле – 10 мес; выдерживают температуру жидкого азота (-190оС); при кипячении погибает через 5-7 мин; 50 оС – 12 часов; в молоке при 90-95 оС – 5 мин; 5% раствор фенола – 6 часов; 5% карболовая кислота – 1 сут; 10% формалин – 12 часов; 1:1000 сулема – 1 сут; 0,05% бензилхлорфенол – 15 мин; губительно действуют стрептомицин, рифампицин, тубазид, фтивазид, ПАСК.
Эпидемиология
Болеют 54 вида млекопитающих, антропозооноз.
Источник – больной человек или животное.
Механизмы передачи:
Патогенез
В 85-95% случаях заболевание начинается в легких и во внутригрудных лимфатических узлах. Остальные случаи поражения – это туберкулез костей, суставов, кишечника, мочеполовой системы и т.д. Считается, что достаточно 1-2 микробных клеток, чтобы вызвать процесс, однако клиническая симптоматика появляется, когда число микобактерий достигает 100000 (период развития 14 дней).
При попадании в альвеолы M. tuberculosis вызывают образование первичного аффекта – специфической гранулемы (бугорка). В центре его расположена зона казеозного некроза, окруженная зоной эпителиоидных клеток; далее расположен вал лимфоцитов, среди которых, обнаруживаются гигантские многоядерные клетки Пирогова – Лангханса. В них находятся микобактерии.
Из гранулемы туберкулезная палочка по лимфатическим сосудам (лимфангоит) проникает в регионарные лимфоузлы (лимфаденит). Таким образом формируется первичный туберкулезный комплекс:
В 80% случаев, при высокой естественной резистентности первичный очаг окружается соединительнотканной капсулой и обызвествляется. Формируется очаг Гона. Так как микобактерии сохраняют жизнеспособность в первичном очаге многие годы приобретенный иммунитет носит нестерильный характер.
При снижении невосприимчивости развивается прогрессия, которая может осуществляться 4 путями:
В ряде случаев первичный туберкулез может принимать хроническое течение в виде туберкулезной интоксикации, лихорадки и т.д.
При алиментарном пути заражения M. tuberculosis попадают в кишечник, захватываются фагоцитами и заносятся по лимфогенным путям в регионарные лимфоузлы. Дальнейшее течение подобно легочному туберкулезу.
Вторичный туберкулез развивается при повторном массивном инфицировании микобактериями, либо эндогенным путем из очага Гона, и других локализаций первичного туберкулеза.
Формы – фазы вторичного туберкулеза.
Иммунитет
Сенсибилизация и последующие ГЗТ и ГНТ опосредуется Т и В - лимфоцитами. Т - лимфоциты про помощи своих рецепторов и при участии белков МНС класса распознают клетки, инфицированные микобактериями, атакуют их и разрушают. Специфические антимикробные антитела связывают антиген, образуя циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК).
Антитела к корд - фактору оказывают токсическое действие на микобактерии. Антитела к полисахаридным антигенам усиливают фагоцитоз, активируют систему комплемента.
Микробиологическая диагностика.
Исследуемый материал – мокрота, гной, моча, спиномозговая жидкость, промывные воды желудка, плевральная жидкость, кусочки органов.
Профилактика
Специфическая – плановая вакцинация в соответствии с национальным календарем прививок. Вакцинация в 3-7 дней; ревакцинация первая в 7 лет туберкулиноотрицательным детям; ревакцинация вторая в 14 лет, туберкулиноотрицательным детям, не получившим прививку в 7 лет. Используют живую туберкулезную вакцину БЦЖ (BCG – Bacille Calmette Geren) авирулентный штамм туберкулезной палочки бычьего типа (штамм Лейт – Нокар –Альфор ).
Неспецифическая – изоляция больных, флюорографическое обследование, учет и диспансеризация контактных, сан – просвет работа, ежегодная постановка пробы Манту.
Лечение
Специфическое – не разработано.
Неспецифическое – антибиотики, химиотерапевтические препараты, иммунокоррекция, лазеро - и ультразвукотерапия.
3.2. Лепра
Лепра (проказа, болезнь Хансена) – хроническое генерализованное заболевание, характеризующееся специфическим поражением производных эктодермы (кожи, слизистых оболочек, периферической нервной системы) и патологическими изменениями во внутренних органах.
История
Проказа - одна из древнейших болезней, известная человечеству задолго до нашей эры, подробные описания встречаются в египетских папирусах, индийских писаниях, относящихся к периоду 1500 до нашей эры. Известно, что она была распространена в Китае, Японии, Персии. В Европе максимальное распространение относится к 11-13 столетиям (войны, крестовые походы, стихийные бедствия, эпидемии других заболеваний). Распространению заболевания способствовали развитие мореплавания и торговли, а так же завоевательнве походы; в античном море это были финикияне (morbus phoenicicus) и греки (elephantiasis graecorum); в Европу проказу принесли легионы Рима, где заболеваемость достигла пика в 11-13 вв., откуда заболевание проникло в Новый Свет (15-16 вв.), Австралию и Океанию (начало 19 в.). В большинстве стран заболевание приравнивалось к гражданской смерти с исключением из общества и лишением наследства; больных либо убивали, либо изгоняли в пустынные места. Само библейское zaraath (проказа) было собирательным термином, обозначающим моральную и физическую нечистоту. Для изоляции больных еще в Византии были организованы ксенодохии, в средневековье их заменили лепрозории, порядки которых напоминали тюрьмы, а побег всегда карался смертью. Однако драконовские методы дали свои плоды. Начиная с 14 в. заболеваемость в Европе резко снизилась, и сейчас проказа встречается в виде отдельных очагов. В настоящее время в мире насчитывается около 10 млн. больных, преимущественно в странах Третьего мира. Наибольшее количество больных находится в Азии (Индия, Китай, Бирма), Африке, Южной и Центральной Америке. На территории бывшего СССР районами эпидемии по лепре были Прибалтика, устья Волги, Дуная, Кавказ и Закавказье, Средняя Азия. На этих территориях располагаются лепрозории.
Возбудитель открыт норвежским врачом Хансеном (1873г.) и Нейссером (1874 г.) в соскобе с поверхности лепромы. Позже его обнаружили в носовой слизи больного лепроматозной формой.
Морфология
Mycobacterium leprae – имеет форму палочек, прямых или слегка изогнутых с закругленными концами, размер 0,2-0,4*1-8 мкм. В мазках из пораженных тканей располагаются внутриклеточно, реже внеклеточно, в виде «пачек сигарет», окруженные полупрозрачной неокрашиваемой капсулой. Скопления этих групп образуют, так называемые «лепрозные шары». Иногда в теле бактерий отмечается мелкая зернистость. Описаны ветвящиеся, сегментированные, кокковидные, нитевидные и булавовидные формы. Делящиеся особи имеют поперечную, не окрашивающуюся по методу Циля - Нильсена полосу. Жгутиков не имеют, спор и капсул не образуют. По химическому составу сходны с M. tuberculosis. Клеточная стенка 3-х слойная, содержит много жироподобных веществ, миколовую и лепрозиновую кислоты. Кислото- и спиртоустойчивы. Грамположительные. По методу Циля - Нильсена окрашиваются в красный цвет. Является строгим внутриклеточным паразитом тканевых макрофагов (гистиоцитов), мононуклеарных фагоцитов.
Культуральные свойства
Возбудитель проказы не растет на искусственных питательных средах, однако по некоторым литературным данным, Mycobacterium leprae выращивают на глицериново-картофельном и кровяном агарах, яичных средах, среде Вассермана. Рост наблюдается через 6-8 недель в виде сухого морщинистого налета.
В 1960 году удалось получить экспериментальную модель лепры, заразив белых мышей в подушечки лап с последующим развитием гранулем. В 1967 году заразили тимусэктомированных мышей. В 1971 году воспроизвели заболевание у броненосцев, у которых в месте введения образовались типичные гранулемы (лепромы), а при внутривенном заражении – типичный генерализованный процесс. К настоящему времени установлена возможность естественного инфицирования броненосцев и обезьян мангобеев.
Антигены
Известно 2 антигена возбудителя:
Факторы патогенности
Экология и эпидемиология
Заболевание мало контагиозно. Источником инфекции является – больной человек. От больного бактерии выделяются через кожу, при кашле, чихании, даже при разговоре. Есть сообщения о выделении возбудителя с семенной жидкостью, фекалиями, мочой, слезами. Существует предположение, что в распространении лепры могут играть роль кровососущие насекомые (блохи, вши, клопы, комары). Заражение происходит при непосредственных длительных и тесных бытовых контактах, а так же воздушно-капельным путем. Старые авторы называют проказу болезнью домашнего сожительства. Доказана возможность внутриутробного заражения, но дети, отделенные от больных родителей после рождения, не заболевают.
Механизм и пути передачи инфекции до конца не выяснены из-за трудности их изучения. Инкубационный период так велик, что из памяти больного исчезают события, с которыми они могли бы связать заражение. Полагают, что возбудитель попадает в организм человека через нарушенные кожные и слизистые покровы.
Ведущая роль в распространении принадлежит социально-экономическим факторам – неблагоприятным бытовым и жилищным условиям: скученность, низкая санитарная культура, низкий жизненный уровень.
Лица, контактирующие с больными, не опасны для окружающих. Вне организма человека возбудитель быстро утрачивает жизнеспособность, но в трупах людей может сохраняться долгое время.
Патогенез и клинические проявления
Особенности болезни определяются следующими свойствами возбудителя:
Mycobacterium leprae проникает в нервные окончания, а оттуда в лимфатические и кровеносные капилляры, не вызывая видимых поражений в месте внедрения. В большинстве случаев возбудитель погибает и элиминируется, или болезнь протекает латентно, не проявляясь в течение всей жизни. Проявление заболевания прямо зависит от состояния факторов резистентности. При небольших отклонениях развивается абортивная инфекция в виде ограниченных гранулематозных высыпаний (иногда могут самопроизвольно исчезать).
У лиц с хорошим иммунитетом развивается относительно доброкачественная туберкулоидная форма. Она характеризуется образованием гранулем, образованных эпителиоидными и гигантскими клетками, окруженными лимфоцитарным валом – на коже и слизистых оболочках, а также поражением периферических нервов, реже поражаются внутренние органы. Кожные элементы сыпи (одиночные слегка пигментированные пятна, папулезные высыпания, бляшки расположенные ассиметрично) постепенно рассасываются, оставляя местную анестезию, атрофию (не растут волосы, не функционируют потовые железы). Поражение периферических нервов приводит к нарушению чувствительности, а поражение крупных стволов к парезам, параличам, контрактуре пальцев, трофическим язвам.
Неблагоприятной и тяжелой считается лепроматозная форма с образованием гранулем, содержащих «лепрозные клетки» (клетки Вирхова), плазмоциты, лимфоциты, фибробласты. Основным клеточным элементом гранулемы является макрофаг. Характерен незавершенный фагоцитоз – в таких клетках Mycobacterium leprae размножаются и накапливаются в больших количествах. Эта форма наиболее опасная для окружающих (бугорковая проказа), так как у больных возбудитель содержится в лепромах, органах и тканях, на слизистой носа. Начинается болезнь с появления красных пятен на коже плеч, бедер, ягодиц. Пятна сначала без резких границ, позже они приобретают «ржавый цвет». В течение длительного времени пятна остаются без изменений, но чаще превращаются в инфильтраты или лепромы. Размер их от просяного зерна до лесного ореха. Цвет сине-коричневый. При диффузной инфильтрации формируется «львиная морда» (facies leonina) - морщины и складки углубляются, нос утолщается, щеки, губы и подбородок приобретают дольчатый вид. Также характерны поражения глаз, приводящие к ослаблению зрения и слепоте. На поздних стадиях лепры у больного формируются множественные лепромы, выпадают брови и ресницы, уродуются пальцы, возникают парезы и параличи. Лепромы могут изъязвляться с образованием язвы с плотными крутыми краями сукровичным отделяемым. Нередки лепромы носовой перегородки, которые вызывают перфорации и деформации. Если лепромы формируются в гортани появляется осиплость голоса, афония, может наступить удушение. Инфильтраты могут сливаться и тогда кисти и стопы приобретают подушкообразный вид. Течение болезни медленное длительное с периодическими обострениями при любом стрессе (простуда, беременность, операция).
Промежуточное положение занимает недифференцированная форма, встречаемая у людей с неустойчивым иммунитетом. Протекает с поражением периферических нервов и слабо выраженными кожными проявлениями. Со временем (3-5лет) этот тип трансформируется в туберкулоидный или лепроматозный.
Кроме того, различают погранично-туберкулоидную, пограничную и погранично-лепроматозную формы.
Иммунитет
Естественная резистентность высокая. В результате контактов с больными заболевают далеко не все (не более 1-2 из каждых 100 контактных). Однако все факторы, способствующие ослаблению иммунитета, повышают риск заболеваемости. Известно много случаев, когда члены семьи больного, жившие с ними с самого начала заболевания, оставались долгое время здоровыми, что может свидетельствовать о формировании иммунитета у контактирующих с больными. Это подтверждается также в очень редких случаях заболевания лепрой врачей, обслуживающего персонала лепрозориев – в редких случаях, когда нарушались, установленные там правила, и контакт с больными выходили за пределы официальных отношений.
Более частая заболеваемость детей, по всей вероятности, связана с несовершенством их иммунной системы.
В процессе заболевания возникают изменения иммунокомпетентных клеток: снижается количество Т-лимфоцитов, падает их активность – в результате теряется способность реагировать на антигены возбудителя. Гуморальный иммунитет не нарушается – в сыворотке крови больных обнаруживаются антитела к микобактериям лепры в высоких титрах, но они не играют защитной роли.
Для определения активности иммунитета больных, с диагностической целью, а также для определения эффективности лечения применяется реакция Мицуды – кожная проба с лепромином. Лепромин – автоклавированная или прокипяченная взвесь лепроматозной ткани. Вводится внутрикожно по 0,1 мл. Стандартный препарат лепромина содержит в 1,0 мл 100 млн микобактерий лепры. Реакция положительна у здоровых людей и у больных туберкулоидной формой. Отрицательна – при лепроматозной форме, что свидетельствует о резком снижении иммунитета. Различают раннюю реакцию (48 ч) – гиперемия, небольшая папула и позднюю реакцию, которая появляется через 2-4 недели в виде бугорка, узелка, иногда с некрозом.
Микробиологическая диагностика.
Исследуемый материал – соскоб слизистой оболочки носа, тканевой сок, пунктат лимфатического узла, кусочки органов.
Профилактика и лечение
Специфической профилактики и лечения нет.
Основные мероприятия неспецифической профилактики:
Для лечения проказы испробовано огромное количество различных способов, включая и препараты золота (золото в разных соединениях убивает кислотоустойчивые бактерии) – кризолган, сольганол, санакризин; подсадки растительных и животных тканей с целью стимуляции иммунитета (йодистый калий).
Издавна применяется чаульмугровое (хаульмугровое) масло, добываемое из тропических бобовых растений. Масло содержит ненасыщенные жирные кислоты, которые влияют на содержание в крови липазы, разрушающей клеточную оболочку бактерий.
В настоящее время основными средствами лечения проказы являются:
Лечение проводится комплексное, длительными курсами.
3.3. Сибирская язва.
Сибирская язва – это инфекционное заболевание, вызываемое Bacillus anthracis, типичный зооноз.
История
Сибирская язва как инфекционная болезнь животных была известна с давних времен. Еще в Библии описана болезнь, симптомы которой напоминают сибирскую язву. Со времен Гомера, Галена, Цельса и Виргилия, болезнь фигурирует под названием «священный огонь» (ignis sacer) или «персидский огонь» (ignis persicus).
Первые сообщения о сибирской язве в России можно найти в Никоновской летописи (979 г.). в связи с сильными эпизоотиями в 1640 г. вышел царский указ, запрещавший снимать шкуры с павших животных, а трупы закапывать глубоко в землю. С. С. Андриевский, изучавший заболевание во время эпидемии на Урале (1786-1788 гг.), дал ему название «сибирская язва», а в 1788 г. путем самозаражения доказал единство этиологии сибирской язвы у людей и животных. Возбудитель впервые описали Поллендер, Брауэлл (1849 г.) и Давэн (1850 г.). Чистую культуру возбудителя получил Кох (1876 г.), а в 1881 г. Пастер предложил живую вакцину для иммунопрофилактики заболевания. В связи с монополизацией ее производства Пастеровким обществом, Л. С. Ценковский независимо создал отечественную живую вакцину. В России первым чистую культуру микробов получил в 1882 г. Б. К. Высокович. В 1902 г. Асколи разработал диагностическую реакцию преципитации, широко используемую на практике.
Таксономия
Семейство – Bacillaceae
Род – Bacillus
Вид – Bacillus anthracis
Морфология
Крупная толстая палочка с закругленными концами (при образовании цепочек – с обрезанными под прямым углом концами), размер 5-10*1-2 мкм, жгутики отсутствуют, грамположительная, споры окрашиваются по методу Ожешко в красный цвет, капсула выявляется по методу Бурри-Гинса. В клиническом материале располагается парами или в виде коротких цепочек, окруженных общей капсулой; на питательной среде образует более длинные цепочки, морфология палочки меняется – они слегка утолщены на концах и образуют сочленения («бамбуковая трость»). Обработка культур пенициллином приводит к разрушению клеточной стенки и образованию цепочек, состоящих из протопластов («жемчужное ожерелье»). Образуют капсулу, состоящую из полипептида, соединенного с молекулами Д - глутаминовой кислоты. Формируют центрально расположенные эндоспоры, для чего необходимы кислород и температура (12-42оС), в живом организме и невскрытых трупах спор не образует.
Возбудитель встречается в 4 формах:
Культуральные свойства
Факультативный анаэроб или аэроб. Хорошо растет на обычных питательных средах, температура 35-37оС, рН 7,2-7,6. Через 17-24 часа образует R- форму колоний – беловато-сероватые крупные зернистые колонии, типичными считают характерные волокнистые колонии «голова Медузы» или «львиная грива». На сывороточном и кровяном агарах, а также на свернутой лошадиной сыворотке растет в виде гладких прозрачных колоний (S-форма), тянущихся за петлей. При культивировании в микроаэрофильных условиях образует гладкие (S), слизистые (M) или смешанные колонии (SM). На бульоне при 32-33оС растет в виде ватных хлопьев, взвешенных комком, не вызывая помутнения среды, при встряхивании бульон не мутнеет, осадок разбивается на мелкие хлопья. В молоке растет быстро, свертывая его с последующей пептонизацией за 3-5 сут. Дает характерный рост при посеве уколом в желатин («перевернутая елочка»), позднее верхний слой желатина разжижается, образуя воронку. Bacillus anthracis хорошо размножается в 8-12 суточных куриных эмбрионах, вызывая их гибль через 2-4 дня. На кровяном агаре гемолиза не дает или дает слабый гемолиз в поздние сроки.
Биохимическая активность
Ферментирует глюкозу, мальтозу, сахарозу, трегалозу, фруктозу до кислоты без газа; гидролизует крахмал, свертывает и пептонизирует молоко, образует ацетилметилкарбинол (положительная реакция Фогеса-Проскауэра) и лецитиназу; образует сероводород и аммиак; восстанавливает нитраты в нитриты; разжижает желатин. В отличие от сапрофитов лишены фосфатазы. В связи с окислением тирозина накапливают бурый пигмент.
Антигенная структура
Факторы патогенности
Эти компоненты по отдельности токсическое действие не проявляют. Синтез компонентов контролируется плазмидой рХ01 – которая состоит из 3-х генов:
Синтез капсулы контролируется плазмидой рХ02.
Резистентность
Вегетативные формы малоустойчивы – при 60оС – 15 мин., 100оС – насколько секунд, споры - очень устойчивы во внешней среде: при 100оС – более 1 часа, сухой жар при 140оС – 2-3 часа; 10% раствор формалина и 5% раствор карболовой кислоты – 6-8 часов. Чувствительны к стрептомицину, левомицетину и другим антибиотикам. Споры десятилетиями сохраняются в почве, в шкурах зараженных животных 4 и более месяцев.
Эпидемиология
Типичный зооноз; среди животных наиболее восприимчивы травоядные, но отмечены случаи заболевания среди зайцев, кошек и собак; у человека носит выраженный профессиональный характер (с/х работники, работники боен, шерстобиты и щеточники). Животные заражаются при заглатывании спор во время выпаса или при поедании загрязненных кормов. У животных преобладают кишечная и септические формы. Больные животные выделяют сибиреязвенные палочки с мочой и испражнениями. Человек заражается при контакте с инфицированным материалом (непрямой контактный путь), при употреблении в пищу мяса больных животных (алиментарный путь), при вдыхании возбудителя (пути – воздушно-капельный и воздушно-пылевой), возможен трансмиссивный путь передачи возбудителя через слепней и мух-жигалок.
Сезонные подъемы заболеваемости связаны с пастбищным содержанием животным.
Значительную эпидемическую опасность носит представляют скотомогильники, особенно если трупы животных, павших от сибирской язвы были зарыты без надлежащих предосторожностей.
Инкубационный период составляет 2-6 сут. При всех формах болезни возможно развитие диссеминированной инфекции с бактериемией и менингитом, приводящей к смерти.
Частые осложнения всех форм заболевания – бактериемии и вторичные инфекции (менингит).
Иммунитет
Основная роль в формировании иммунитета принадлежит фагоцитарной функции макрофагов, антитоксическим антителам и протективному антигену – антимикробный и антитоксический напряженный. Возможны повторные заболевания. Развивается состояние ГЗТ.
Микробиологическая диагностика.
Исследуемый материал – содержимое везикул, пустул, отделяемое карбункулов, язв, тканевой выпот, мокрота, кал.
Профилактика и лечение
Специфическая профилактика – живая сухая вакцина СТИ (высушенная взвесь живых бескапсульных микроорганизмов). Вводится накожно. Вакцинация по эпидпоказаниям (в феврале - марте). Ревакцинация через год. Комбинированная вакцина (СТИ и протективный антиген, преципитированный гидроокисью алюминия) дает лучший защитный эффект.
Неспецифическая профилактика:
Специфическое лечение – противосибиреязвенная сыворотка, сибиреязвенный иммуноглобулин.
Неспецифическое лечение – пенициллин, тетрациклин, стрептомицин.
Практическое задания для студентов
5. Литература.
5.1. Основная:
1. Борисов Л.Б., Козмин-Соколов Б.Н., Фрейндлин И.С., Федо рова З.Ф. Руководство к лабораторным занятиям по микро биологии / Под ред. Л.Б. Борисова, -2-е изд. перераб. и доп.-М.: Медицина.- 1984.-256с.
2. Борисов Л.Б., Козмин-Соколов Б.Н., Фрейндлин И.С. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. Учебное пособие.-М.: Медицина.-1993.-240с.
3. Борисов Л.Б., с соавт. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: Учебник М.: Медицина.- 1994.- 528 с.
5. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник. М.: ООО «Мед. Информ. Агентство».-2002-736 с.
6. Зыков М.П. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, иммунологии и вирусологии.- М.: Медицина.- 1977.-288с.
7. Букринская А.Г. Вирусология. М.: Медицина.- 1986.-336с.
8. Тимаков В.Д., Левашов В.С., Борисов Л.Б. Микробиология: учебник. 2-е изд., перераб.и доп. –М.:Медицина.- 1983.-512с.
9. Поздеев О.К. Медицинская микробиология/Под редак. Акад. РАМН В.И.Покровского.- М.: ГЕОТАР – МЕД. – 2001.-786С.
10. Петров Р.В. Иммунология.- М.: Медицина.- 1983.-386с.
5.2. Дополнительная:
1. Медицинская микробиология/Гл. ред. В.И.Покровский, О.К.Поздеев.- М.: ГЕОТАР - Медицина.- 1998.- 1200 с.
2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Мед. микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов.- 3 – е изд., испр. и доп.- Спб. «Спец. литература». – 2002.- 591 с.
3. Руководство к практическим занятиям по мед. микробиологии, иммунологии и вирусологии / Под. Ред. В.В.Теца.- изд. 2- е., перереб. и доп.- М.: Медицина.- 2002.- 352 с.
4. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. -4-е изд., перераб. и доп.- М.: Медицина.- 1978.-394с.
5. Воробьёв А.А., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбаков А.М. Микробиология: Учебник.- М.: Медицина.- 1994.- 288 с.
6. Методические разработки и рекомендации по изучаемой теме.
Методические рекомендации рассмотрены и утверждены на кафедральном совещании
№___от «____»___________2007г.
Зав. кафедрой микробиологии
с вирусологией и иммунологией_________________________Колеватых Е.П.
PAGE 24