Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
«Как есть»
ЗАНЯТИЕ 24
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
«ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ НЕОРГАНИЧЕСКОГО ФОСФОРА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ»
Подготовка пациента
Кровь забирается утром, натощак (после 8-10 часов ночного голодания). Исключить физические нагрузки, прием алкоголя.
Проба: сыворотка крови
Подготовка пробы
Венозную кровь, забранную в пробирку без антикоагулянтов, выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин до образования сгустка, центрифугируют для отделения сыворотки. Сыворотка не должна быть содержать следов гемолиза.
Принцип метода
Неорганический фосфор при взаимодействии с молибдатом аммония в растворе серной кислоты образует фосфомолибдатный комплекс. Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации фосфатов в пробе.
Порядок выполнения
|
Реагенты |
Объем |
|
Рабочий реагент (раствор молибдата аммония и серной кислоты) |
2,0 мл |
|
Сыворотка крови |
0,02 мл (2 капли) |
Перемешать, инкубировать 5 мин, затем измерить оптическую плотность опытной пробы против дистиллированной воды при длине волны 340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм. Фотометр автоматически произведет расчет концентрации по оптической плотности.
Сделать заключение по результатам исследования.
Референтные пределы
0,87–1,45 ммоль/л
Термины, используемые при интерпретации результатов
Гиперфосфатемия - повышенная концентрация фосфора в сыворотке (плазме) крови.
Гипофосфатемия - сниженная концентрация фосфора в сыворотке (плазме) крови.
Клиническое использование исследования и
интерпретация результатов
Метаболические заболевания костной ткани. Оценка гомеостаза фосфатов и кальция при дисфункции паращитовидных желез, недостаточности витамина D.
Фосфатные анионы относятся к числу основных анионов организма. Около 85% фосфора присутствует в костной ткани виде солей кальция – гидроксиапатитов. В мягких тканях фосфаты содержатся преимущественно внутри клеток, где выполняют роль структурного компонента органических соединений (нуклеиновых кислот, фосфолипидов, коферментов и др.), участвуют в энергетическом обмене (обмене креатинфосфата, АТФ), поддержании кислотно-основного равновесия (в форме свободных фосфатных анионов). Фосфаты выводятся с мочой; часть гидрофосфатных анионов первичной мочи превращается в дигидрофосфаты в результате связывания секретируемых в мочу протонов. Экскреция фосфатов с мочой зависит от поступления их с пищей, возраста, мышечной массы, почечной функции, времени суток. Концентрация фосфатов в плазме крови важна для процесса минерализации костной ткани и зависит главным образом от их реабсорбции в канальцах почек, соотношения скорости образования и резорбции костной ткани, выхода из клеток мягких тканей. Обмен фосфатов и тесно связанный с ним обмен кальция регулируют биологически активная форма витамина Д – кальцитриол (гиперфосфатемический эффект), паратгормон (эффект зависит от уровня кальцитриола), кальцитонин (гипофосфатемический эффект).
Гиперфосфатемия наблюдается при гипопаратиреозе, интоксикации витамином D, хронической почечной недостаточности, злокачественных опухолях с поражением костей.
Гипофосфатемия наблюдается при гиперпаратиреодизме, остеомаляции, недостаточности витамина D.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
«ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ОБЩЕГО КАЛЬЦИЯ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ»
Подготовка пациента
Кровь забирается утром, натощак (после 8-10 часов ночного голодания). Исключить физические нагрузки, прием алкоголя.
Проба: сыворотка крови
Подготовка пробы
Венозную кровь, забранную в пробирку без антикоагулянтов, выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин до образования сгустка, центрифугируют для отделения сыворотки. Сыворотку необходимо быстро отделять от сгустка. Посуда, используемая для выполнения анализа, должна быть изготовлена из материала, не содержащего ионов кальция (во избежание их перехода в реакционную смесь).
Принцип метода
Кальций в щелочной среде образует окрашенный комплекс с о-крезолфталеином. Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации кальция в пробе.
Порядок выполнения
|
Реагенты |
Объем |
|
Сыворотка крови |
0,05 мл (4 капли) |
|
Реагент №1 (буфер) |
1,0 мл |
|
Реагент №2 (раствор о-крезолфталеинкомплексона) |
1,0 мл |
Перемешать и инкубировать 5 мин при комнатной температуре. Измерить оптическую плотность опытной пробы против дистиллированной воды при длине волны 570 нм в кювете с длиной оптического слоя 10 мм. Окраска стабильна не менее часа. Фотометр автоматически произведет расчет концентрации по оптической плотности.
Сделать заключение по результатам исследования.
Референтные пределы
2,02–2,60 ммоль/л
Термины, используемые при интерпретации результатов
Гиперкальциемия — повышенная концентрация кальция в сыворотке (плазме) крови.
Гипокальциемия — пониженная концентрация кальция в сыворотке (плазме) крови.
Клиническое использование исследования и
интерпретация результатов
Метаболические заболевания костной ткани. Оценка гомеостаза фосфатов и кальция при дисфункции паращитовидных желез, недостаточности витамина D.
Кальций - один из микроэлементов организма человека, выполняющий множество функций. Концентрация кальция в цитоплазме примерно в 1000 раз выше его концентрации во внеклеточной жидкости, включая плазму крови. Такое распределение кальция поддерживается Са-АТФазой клеточной мембраны и мембраны саркоплазматического ретикулума в миоцитах, что необходимо для выполнения этим ионом ряда регуляторных функций: процессов секреции гормонов, внутриклеточной реализации эффектов множества биологически активных соединений, инициации мышечного сокращения. Ионы кальция, связываясь с натриевыми каналами нервной и мышечной ткани, определяют порог их возбуждения. В связи с этим, уровень кальция в сыворотке крови - один из наиболее жестко контролируемых параметров гомеостаза, который зависит от метаболизма костной ткани, поступления кальция с пищей и выведения с мочой. Около 99% кальция организма вместе с фосфатами образует гидроксиапатиты минеральной фазы костной ткани костей скелета и зубов. Основными регуляторами обмена кальция являются гиперкальциемические гормоны - кальцитриол (активная форма витамина Д3) и паратиреоидный гормон (повышают уровень кальция плазмы крови, усиливая его всасывание в тонком кишечнике, реабсорбцию в почках, резорбцию костной ткани), а также гипокальциемический гормон - кальцитонин (снижает уровень кальция плазмы крови, в основном через усиление минерализации костной ткани). В норме эффекты паратгормона и кальцитриола на почки и кишечник имеют определяющее значение для обеспечения содержания кальция в организме, необходимого для формирования и обновления костной ткани.
В плазме крови кальций содержится в трех формах, которые находятся в динамическом равновесии: ионы кальция (свободный кальций) - около 50%; кальций, связанный с белками (преимущественно с альбумином) - около 40%; комплексированный с низкомолекулярными анионами кальций (бикарбонатами, фосфатами, лактатом, цитратом) - около 10%. Общим кальцием плазмы крови называют суммарную концентрацию всех этих форм кальция. Соответствующие регуляторные функции, также как модуляция продукции гормонов, поддерживающих кальциевый гомеостаз, осуществляется ионизированным кальцием. Отклонения от референтных пределов плазменного уровня ионизированного кальция проявляются нарушением нервной и мышечной возбудимости, а также сократительной способности миокарда и гладких мышц, включая гладкие мышцы кровеносных сосудов. Дефицит кальция в организме ведет к нарушению минерализации костной ткани.
Гиперкальциемия наблюдается при гиперпаратиреодизме, злокачественных опухолях с поражением костей, интоксикации витамином D, дегидратации. Опасную для жизни гиперкальциемию отмечают на уровне кальция в сыворотке крови выше 3,75 ммоль/л.
Гипокальциемия наблюдается при гипопаратиреозе, недостаточности витамина D, повреждении проксимальных и дистальных почечных канальцев.
Вопросы
Кальцитонин
Паратгормон и кальцитриол
Я не уверен, но по идее если паратгормон будет заменять кальцитриол, то кальция в крови будет много, а в костях мало, то кальцитонин должен повыситься в ответ на такое безобразие.
Увеличится
Кальцитонина упадёт, паратгормона и кальцитриола повысится.
Подавляет остеокласты, оставляя кальций в костях.
Увеличивает экскрецию кальция с мочой
Увеличивает всасывание кальция в кишечнике
Активирует остеокласты, что мобилизует кальция из кости.(только при низкой концентрации ионов кальция)
Увеличивает реабсорбцию кальция и фосфатов в почках, кишечнике, активирует остеокласты, мобилизуя кальций из костей.
Стимулирует реабсорбцию кальция и ингибирует её для фосфатов в почках, Стимулирует остеокласты, мобилизуя кальций и фосфаты из кости. Увеличивает реабсорбцию кальция и фосфатов в кишечнике
Уменьшает реабсорбцию кальция и фосфатов в почках, ингибирует остеокласты, оставляя кальций в костях.
Активирует резорбцию костной ткани через активацию остеокластов
Активирует резорбцию костной ткани через активацию остеокластов
Ингибирует резорбцию костной ткани через активацию остеокластов
Гиперфосфатемия наблюдается при гипопаратиреозе, интоксикации витамином D, хронической почечной недостаточности, злокачественных опухолях с поражением костей.
Гипофосфатемия наблюдается при гиперпаратиреодизме, остеомаляции, недостаточности витамина D.
Много паратгормона, мало кальцитонина (гипотериоз, гиперпаратиреоз), гиподинамия, лечение глюкокортикоидами, недостаток кальция и витамина C.
Тоже что и при рахите
Недостаток витамина D в пище, нарушение его всасывания, нарушение синтеза предшественников кальцитриола в коже из-за малого времени пребывания на солнце, дефект рецепторов на кальцитриол.