Будь умным!


У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.net

Гинса Цель применения Для отличия одних видов бактерий от других грамположите

Работа добавлена на сайт samzan.net:

Поможем написать учебную работу

Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.

Предоплата всего

от 25%

Подписываем

договор

Выберите тип работы:

Скидка 25% при заказе до 6.11.2024

Метод Грама

Метод Бурри-Гинса

Цель применения

Для отличия одних видов бактерий от других (грамположительных от грамотрицательных), что является важным таксономическим признаком

Для выявления капсул у чистых культур капсульных бактерий

Реактивы:

Красящие растворы

  1.  Карболовый генцианвиолет или пропитанная им фильтровальная бумажка
  2.  Водный раствор фуксина или пропитанная им фильтровальная бумажка
  1.  Тушь
  2.  Разведённый (1:3) карболовый фуксин Циля

Протрава

Раствор Люголя – на 300 мл дист воды 1,0 г йода и 2,0 г KI

Дифференцирующее вещество

Этиловый спирт

Способ фиксации, состав фиксатора

В пламени горелки

В пламени горелки

Этапы окраски

  1.  На фиксированный мазок поместить фильтр.бумажку, пропитанную генцианвиолетом, смочить её водой, выдержать 3 минуты
  2.  Снять бумажку, слить с препарата оставшуюся краску и налить р-р Люголя на 1 минуту.
  3.  Слить р-р Люголя, провести дифференциацию, погрузив препарат несколько раз в стаканчик со спиртом (пока не перестанут отходить фиолетовые струйки)
  4.  Тщательно промыть препарат водой
  5.  Дополнительно подкрасить препарат с помощью красящей бумажки, пропитанной р-ром карболового фуксина, в течение 3 минут.
  6.  Промыть водой, высушить.
  1.  На предметное стекло нанести рядом каплю туши и каплю воды, в которой суспензировать внесённую петлёй капсульную культуру
  2.  Обе капли соединить в одну и размазать её тонким слоем с помощью второго предметного стекла
  3.  Высохший на воздухе мазок осторожно фиксировать в пламени горелки
  4.  Докрасить препарат разведённым карболовым фуксином Циля в течение 2-3 мин, после чего промыть водой и высушить.

Сущность метода

При окраске генцианвиолетом и последующем воздействии раствором Люголя образуется комплексное соединение краски с йодом, которое при дифференциации спиртом удерживается в клетках грамположительных (они остаются фиолетовыми) и удаляются из грамотрицательных (при дополнительной окраске фуксином приобретают красный цвет). Способность бактерий удерживать комплекс генцианвиолета с йодом зависит, главным образом, от строения клеточной стенки, имеющей существенные различия у грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Фуксин окрашивает тела бактерий в красный цвет, капсулы остаются неокрашенными.

Результат: описание микроскопической картины

В поле зрения видны стафилококки сине-фиолетового цвета – грамположительные – и расположенные между ними кишечные палочки, имеющие красный цвет, т.е. грамотрицательные.

В поле зрения видны бациллы красного цвета, окруженные белыми ореолами капсул, которые хорошо видны на серовато-коричневом тушевом фоне.

Рисунок

Метод Циля-Нельсона

Метод Пешкова

Цель применения

Для дифференцирования кислотоустойчивых бактерий от некислотоустойчивых, к которым относятся подавляющее число микроорганизмов.

Для выявления клеточной стенки

Реактивы:

Красящие растворы

1. Карболовый фуксон

2. Метиленовый синий

1. водный фуксин

Протрава

Подогревание препарата с краской

10% водный раствор танина

Дифференцирующее вещество

5% H2SO4

Способ фиксации, состав фиксатора

В пламени горелки

Жидкость Карнуа (смесь этилового спирта, хлороформа и ледяной уксусной кислоты в соотношении 6:3:1)

Этапы окраски

  1.  Окрасить мазок карболовым фуксином при подогревании (три раза до появления паров – примерно 3 минуты)
  2.  Промыть водой
  3.  Обесцветить препарат 5% H2SO4 
  4.  Промыть водой
  5.  Докрасить мазок контрастной краской – метиленовым синим (5 минут)
  6.  Промыть водой. Высушить.
  1.  Приготовленный и высушенный препарат из бактериальнйо культуры зафиксировать в жидкости Карнуа в течение 15 минут
  2.  Промыть водой
  3.  Держать в 10% водном растворе танина 6-8 мин
  4.  Промыть и окрасить водным фуксином 30-60 сек
  5.  Промыть водой, высушить с помощью фильтровальной бумаги.

Сущность метода

Кислотоустойчивость зависит от наличия в клеточной стенке липидов, воска и особенно миколовой кислоты. Кислотоустойчивые бактерии требуют интенсивной окраски (конц. фуксином Циля при нагревании), они прочно удерживают краситель, не обесцвечиваются серной кислотой и остаются рубиново-красными. Некислотоустойчивые при дифференцировке серной кислотой обесцвечиваются и докрашиваются метиленовым синим.

Результат: описание микроскопической картины

В поле зрения видны небольшие палочки рубиново-красного цвета (Mycobacterium tuberculosis) и окрасившиеся в дополнительный синий цвет некислотоустойчивые стафилококки.

В поле зрения видны крупные стрептобактерии светло-розового цвета, они окаймлены клеточной стенкой красного цвета.

Рисунок

Метод Романовского-Гимзы

Метод Нейссера

Метод Ожешке

Цель применения

Для выявления нуклеоида бактерий.

Для выявления цитоплазматических включений валютина

Для окраски спор бактерий

Реактивы:

Красящие растворы

1. краска Романовского-Гимзы (азур, эозин, метиленовый синий)

1. уксуснокислая синька

2. везувин

 1. Карболовый фуксон

2. Метиленовый синий

Протрава

Кислотный гидролиз в р-ре соляной к-ты при нагревании

Р-р Люголя

0,5% р-р HCl при нагревании

Дифференцирующее вещество

Способ фиксации, состав фиксатора

Жидкость Карнуа

В пламени горелки

Не фиксируют

Этапы окраски

  1.  Готовят мазок из чистой культуры бактерий
  2.  Фиксируют в жидкости Карнуа
  3.  Проводят кислотный гидролиз в р-ре соляной к-ты при нагревании
  4.  Мазок окрашивают краской Романовского-Гимзы в течение 40-60 мин
  5.  После каждого этапа мазок промывают дист. водой
  1.  Мазок окрашивают уксусной синькой (1мин)
  2.  Промывают водой
  3.  Докрашивают везувином 20-30 сек
  4.  Промывают водой

На нефиксированный мазок 0,5% раствор HCl и подогревают 2 мин.

Промывают, высушивают и фиксируют

Докрашивают по методу Циля – Нильсена

Сущность метода

Краситель окрашивает ацидофильные компоненты клетки в различные оттенки красного, а базофильные -  в цвета от пурпурного до фиолетового.

Основан на кислотоустойсивости бактерий.

Результат: описание микроскопической картины

В поле зрения видны бактерии с розовой цитоплазмой, в которой видны один или несколько компактных нуклеоидов красновато-фиолетового цвета, имеющих разную форму (округлую, овальную, палочковидную)

В поле зрения видны бактерии, тела которогых светло-коричневого цвета, зёрна валютина, расположенные на обоих концах бактерий, окрашены в сине-чёрный цвет.

В поле зрения видны рубиново-красные споры, вегетативные клетки голубого цвета

Рисунок




1. Захопленість і спрямованість.html
2. Системокванты жизнедеятельности
3. Линейный дифференциальный оператор второго порядка Пусть задано дифференциальное выражение дифферен
4. ТЕМА І МАГНІТНИЙ МЕТОД ДЛЯ ВИЯВЛЕННЯ ФЕРОМАГНІТНИХ ТІЛ У НЕМАГНІТНИХ СЕРЕДОВИЩАХ Спец
5. doses drugs injections pins deths Give the synonym ldquo;to compose ofrdquo; to connect to perform to consist of to deliver to crry out
6. Тепловой двигатель
7. на тему Персонал как основной объект управления в организации
8. Повесть временных лет Нестора весьма противоречивый источник
9. Реферат- Информационное общество
10. Notethe lexicogrmmticl clsses of words correlting with ech other in the generl system of lnguge on the bsis of their grmmticlly relevnt properties.
11. Технология получения монокристаллического Si
12. Лекция 12 Генная инженерия ~ совокупность методов позволяющих путем операций в пробирке переносить гене
13. Тема- База 1 1 К методам экономической теории не относится- формальной логики; B метод индукции; C мет
14. по теме Базовые технологии преобразования информации
15. Сели Поели Понедельник- Салат Сяки 100гр
16. Как влияет толщина свариваемых встык пластин на провар H при дуговой сварке Б С увеличением толщины прова
17. СОШ 8 Сценарий проведения конкурса детского творчества Подари улыбку миру Со
18. Тематика дипломных работ определяется соответствующими кафедрами.html
19. Триумф представляют- Турнир по спортивным танцам Кубок Дов
20. Реферат на тему - Вітаміни Підготував Студент педагогічного факультету Групи Ф21.