У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.net

Гинса Цель применения Для отличия одних видов бактерий от других грамположите

Работа добавлена на сайт samzan.net: 2015-07-05

Поможем написать учебную работу

Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.

Предоплата всего

от 25%

Подписываем

договор

Выберите тип работы:

Скидка 25% при заказе до 28.4.2025

Метод Грама

Метод Бурри-Гинса

Цель применения

Для отличия одних видов бактерий от других (грамположительных от грамотрицательных), что является важным таксономическим признаком

Для выявления капсул у чистых культур капсульных бактерий

Реактивы:

Красящие растворы

  1.  Карболовый генцианвиолет или пропитанная им фильтровальная бумажка
  2.  Водный раствор фуксина или пропитанная им фильтровальная бумажка
  1.  Тушь
  2.  Разведённый (1:3) карболовый фуксин Циля

Протрава

Раствор Люголя – на 300 мл дист воды 1,0 г йода и 2,0 г KI

Дифференцирующее вещество

Этиловый спирт

Способ фиксации, состав фиксатора

В пламени горелки

В пламени горелки

Этапы окраски

  1.  На фиксированный мазок поместить фильтр.бумажку, пропитанную генцианвиолетом, смочить её водой, выдержать 3 минуты
  2.  Снять бумажку, слить с препарата оставшуюся краску и налить р-р Люголя на 1 минуту.
  3.  Слить р-р Люголя, провести дифференциацию, погрузив препарат несколько раз в стаканчик со спиртом (пока не перестанут отходить фиолетовые струйки)
  4.  Тщательно промыть препарат водой
  5.  Дополнительно подкрасить препарат с помощью красящей бумажки, пропитанной р-ром карболового фуксина, в течение 3 минут.
  6.  Промыть водой, высушить.
  1.  На предметное стекло нанести рядом каплю туши и каплю воды, в которой суспензировать внесённую петлёй капсульную культуру
  2.  Обе капли соединить в одну и размазать её тонким слоем с помощью второго предметного стекла
  3.  Высохший на воздухе мазок осторожно фиксировать в пламени горелки
  4.  Докрасить препарат разведённым карболовым фуксином Циля в течение 2-3 мин, после чего промыть водой и высушить.

Сущность метода

При окраске генцианвиолетом и последующем воздействии раствором Люголя образуется комплексное соединение краски с йодом, которое при дифференциации спиртом удерживается в клетках грамположительных (они остаются фиолетовыми) и удаляются из грамотрицательных (при дополнительной окраске фуксином приобретают красный цвет). Способность бактерий удерживать комплекс генцианвиолета с йодом зависит, главным образом, от строения клеточной стенки, имеющей существенные различия у грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Фуксин окрашивает тела бактерий в красный цвет, капсулы остаются неокрашенными.

Результат: описание микроскопической картины

В поле зрения видны стафилококки сине-фиолетового цвета – грамположительные – и расположенные между ними кишечные палочки, имеющие красный цвет, т.е. грамотрицательные.

В поле зрения видны бациллы красного цвета, окруженные белыми ореолами капсул, которые хорошо видны на серовато-коричневом тушевом фоне.

Рисунок

Метод Циля-Нельсона

Метод Пешкова

Цель применения

Для дифференцирования кислотоустойчивых бактерий от некислотоустойчивых, к которым относятся подавляющее число микроорганизмов.

Для выявления клеточной стенки

Реактивы:

Красящие растворы

1. Карболовый фуксон

2. Метиленовый синий

1. водный фуксин

Протрава

Подогревание препарата с краской

10% водный раствор танина

Дифференцирующее вещество

5% H2SO4

Способ фиксации, состав фиксатора

В пламени горелки

Жидкость Карнуа (смесь этилового спирта, хлороформа и ледяной уксусной кислоты в соотношении 6:3:1)

Этапы окраски

  1.  Окрасить мазок карболовым фуксином при подогревании (три раза до появления паров – примерно 3 минуты)
  2.  Промыть водой
  3.  Обесцветить препарат 5% H2SO4 
  4.  Промыть водой
  5.  Докрасить мазок контрастной краской – метиленовым синим (5 минут)
  6.  Промыть водой. Высушить.
  1.  Приготовленный и высушенный препарат из бактериальнйо культуры зафиксировать в жидкости Карнуа в течение 15 минут
  2.  Промыть водой
  3.  Держать в 10% водном растворе танина 6-8 мин
  4.  Промыть и окрасить водным фуксином 30-60 сек
  5.  Промыть водой, высушить с помощью фильтровальной бумаги.

Сущность метода

Кислотоустойчивость зависит от наличия в клеточной стенке липидов, воска и особенно миколовой кислоты. Кислотоустойчивые бактерии требуют интенсивной окраски (конц. фуксином Циля при нагревании), они прочно удерживают краситель, не обесцвечиваются серной кислотой и остаются рубиново-красными. Некислотоустойчивые при дифференцировке серной кислотой обесцвечиваются и докрашиваются метиленовым синим.

Результат: описание микроскопической картины

В поле зрения видны небольшие палочки рубиново-красного цвета (Mycobacterium tuberculosis) и окрасившиеся в дополнительный синий цвет некислотоустойчивые стафилококки.

В поле зрения видны крупные стрептобактерии светло-розового цвета, они окаймлены клеточной стенкой красного цвета.

Рисунок

Метод Романовского-Гимзы

Метод Нейссера

Метод Ожешке

Цель применения

Для выявления нуклеоида бактерий.

Для выявления цитоплазматических включений валютина

Для окраски спор бактерий

Реактивы:

Красящие растворы

1. краска Романовского-Гимзы (азур, эозин, метиленовый синий)

1. уксуснокислая синька

2. везувин

 1. Карболовый фуксон

2. Метиленовый синий

Протрава

Кислотный гидролиз в р-ре соляной к-ты при нагревании

Р-р Люголя

0,5% р-р HCl при нагревании

Дифференцирующее вещество

Способ фиксации, состав фиксатора

Жидкость Карнуа

В пламени горелки

Не фиксируют

Этапы окраски

  1.  Готовят мазок из чистой культуры бактерий
  2.  Фиксируют в жидкости Карнуа
  3.  Проводят кислотный гидролиз в р-ре соляной к-ты при нагревании
  4.  Мазок окрашивают краской Романовского-Гимзы в течение 40-60 мин
  5.  После каждого этапа мазок промывают дист. водой
  1.  Мазок окрашивают уксусной синькой (1мин)
  2.  Промывают водой
  3.  Докрашивают везувином 20-30 сек
  4.  Промывают водой

На нефиксированный мазок 0,5% раствор HCl и подогревают 2 мин.

Промывают, высушивают и фиксируют

Докрашивают по методу Циля – Нильсена

Сущность метода

Краситель окрашивает ацидофильные компоненты клетки в различные оттенки красного, а базофильные -  в цвета от пурпурного до фиолетового.

Основан на кислотоустойсивости бактерий.

Результат: описание микроскопической картины

В поле зрения видны бактерии с розовой цитоплазмой, в которой видны один или несколько компактных нуклеоидов красновато-фиолетового цвета, имеющих разную форму (округлую, овальную, палочковидную)

В поле зрения видны бактерии, тела которогых светло-коричневого цвета, зёрна валютина, расположенные на обоих концах бактерий, окрашены в сине-чёрный цвет.

В поле зрения видны рубиново-красные споры, вегетативные клетки голубого цвета

Рисунок




1. Статья 313. Гарантии и компенсации лицам работающим в районах Крайнего Севера и приравненных к ним местностях.html
2. В рамках этой структуры протекает весь управленческий процесс движение потоков информации и принятие упра.html
3. Однако насколько правильно вообще понимается эта сила Чтобы говорить о жезле и горшке сначала нам необход
4. ЖБК 99 [8] 3
5.  стадия онтогенетического развития между подростковым возрастом и взрослостью
6. .Подходы к управлению и школы менеджмента
7. Шпора
8. на тему- Роль Всемирной таможенной организации в развитии таможенного дела в России
9. ТЕХНІЧНЕ УЧИЛИЩЕ 71rdquo; смт
10. ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 2 ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ ФОРМЫ ПОЛИРОВАННЫХ ПОВЕРХНОСТЕЙ Цель работы изучение