Будь умным!

У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.net

Практикум по фармацевтической химии для студентов 5 курса фармацевтического факультета

Работа добавлена на сайт samzan.net:


ПРАКТИКУМ ПО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ХИМИИ ДЛЯ СТУДЕНТОВ 5 КУРСА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА.


ЗАНЯТИЕ I.

Стандартизация химических методов количественного определения лекарственных средств.

Цель занятия:

Освоение статистической обработки экспериментальных данных и закрепление навыков работы по выбору химического метода количественной оценки качества лекарств, навыков оформления протокола исследования, как части фармакопейной статьи.

Задачи занятия:

ответить на вопросы входного контроля;

провести количественный анализ лекарственных препаратов согласно методикам;

выполнить статистическую обработку полученных результатов;

В процессе самоподготовки и на занятии студент должен приобрести следующие знания и умения:

Знать:

ошибки анализа: систематические и случайные. Понятие воспроизводимости и правильности;

математическую обработку результатов эксперимента (метрологические термины, последовательность выполнения операций статистической обработки);

понятие значащих цифр;

методы количественного определения лекарственных веществ;

Уметь:

проводить оценку количественного содержания лекарственных веществ;

проводить математическую обработку результатов эксперимента;

оформлять пояснительную записку к проекту ФС по разделу «Количественное определение» и правильно формулировать текст ФС.

Задание на занятие:

провести количественное определение лекарственных веществ различными химическими методами;

выполнить математическую обработку результатов;

по результатам работы оформить отчетную документацию.

Самостоятельная работа студентов

Задание 1. Провести количественное определение лекарственного вещества.

По методу количественного определения написать: уравнение реакции, лежащее в основе метода, расчет фактора эквивалентности, расчет титра и процентного содержания лекарственного вещества, провести статистическую обработку результатов анализа по обоим методам и данные представить в виде таблицы по предлагаемой форме (табл. 1), охарактеризовать методы в плане требований (табл. 2)

Таблица 1

Название метода

Навеска вещества, а

Объем титранта, V(мл)

Содержание

х %

Статистические данные

S2

S

S

Δ

Еотн

а1-

а2-

а3-

а4-

а5-

V1 –

V2 –

V3 –

V4 –

V5 -

х1-

х2-

х3-

х4-

х5-

а1-

а2-

а3-

а4-

а5-

V1 –

V2 –

V3 –

V4 –

V5 -

х1-

х2-

х3-

х4-

х5-

Таблица 2

№

п/п

Требования к методам анализа

Методы

1-ый метод

2-ой метод

1

Специфичность

2

Селективность (избирательность)

3

Унификация

4

Воспроизводимость (точность). Характеризует S (стандартное отклонение).

5

Правильность (достоверность)

6

Безвредность, доступность, устойчивость реагента

7

Экономичность (дешевизна)

8

Простота методики выполнения

9

Экспрессность (быстрота)

Варианты лабораторной работы по количественному

определению лекарственных веществ химическими методами

№ варианта

Лекарственное вещество

Методы определения

1

Раствор кальция хлорида

Комплексонометрическое, Аргентометрическое

2

Кислота аскорбиновая

Йодатометрическое,

Алкалиметрическое

3

Йодатометрическое,

Йодометрическое

4

Алкалиметрическое,

Йодометрическое

5

Раствор пероксида водорода 3%

Перманганатометрическое, Йодометрическое

6

Магния оксид

Комплексонометрическое, Ацидиметрическое

7

Новокаин

Нитритометрическое,

Аргентометрическое

8

Аргентометрическое,

Алкалиметрическое

9

Нитритометрическое, Алкалиметрическое

Методики количественного определения

лекарственных веществ.

  1.  Раствор кальция хлорида 10%    (Мr    219, 08). 

10 мл препарата помещают в мерную колбу вместительностью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

  1.  Комплексонометрическое определение. (ГФ X, ст. 120).

10 мл полученного раствора переносят в колбу для титрования, добавляют 15 мл воды, 5 мл аммиачного буферного раствора, 0,12 г индикаторной смеси или 7 капель раствора кислотного хром темно-синего и титруют раствором трилона Б (0,05 моль/л) до появления сине- фиолетового окрашивания.

  1.  Аргентометрическое определение.

К 5 мл разведения прибавляют 1-2 капли калия хромата и титруют раствором серебра нитрата (0,05 моль/л) до появления красноватого осадка.

  1.  Раствор пероксида водорода 3% (Мr    34,01).

10 мл раствора пероксида водорода помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

  1.  Перманганатометрическое определение (ГФ X, ст. 621).

К 10 мл разведения прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и титруют раствором калия перманганата 0,1 моль/л, (УЧ 1/5 КМnО4) до появления слабо-розового окрашивания.

  1.  Йодометрическое определение. 10 мл разведения помещают в склянку с притертой пробкой, прибавляют 5 мл 10% раствора калия йодида, 5 мл кислоты серной разведенной и оставляют в темном месте на 10 минут. Титруют раствором натрия тиосульфата (0,1 моль/л) до обесцвечивания раствора (индикатор - крахмал).
  2.  Магния оксид (Мr    40,32)

Около 0,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 40 мл раствора кислоты хлороводородной (0,1 моль/л) в мерной колбе вместимостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки.

  1.  Комплексонометрическое определение (ГФ X, ст. 380).

К 25 мл полученного разведения прибавляют 20 мл воды, 10 мл аммиачного буферного раствора и титруют при энергичном перемешивании раствором трилона Б (0,05 моль/л) до появления синего окрашивания (индикатор - кислотный хром черный специальный).

  1.  Ацидиметрическое определение.

К 20 мл разведения прибавляют 2-3 капли раствора метилового оранжевого и титруют раствором натрия гидроксида (0,1 моль/л) до появления желтого окрашивания.

Содержание магния оксида рассчитывают по формуле:

  1.  Кислота аскорбиновая (Мr    176,13.)

Около 0,5 препарата (т.н.) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 50 мл, доводят объем водой до метки и перемешивают.

  1.  Йодатометрическое определение (ГФ X, ст. 6).

К 10 мл разведения прибавляют 0,5 мл 1% раствора калия иодида, 2 мл раствора крахмала и 1 мл 2% раствора кислоты хлороводородной и титруют раствором калия йодата 0,1 моль/л (УЧ 1/6 КIO3,) до появления стойкого слабо-синего окрашивания.

  1.  Алкалиметрическое определение.

К 20 мл разведения прибавляют 5-7 капель раствора фенолфталеина и титруют раствором натрия гидроксида (0,1 моль/л) до появления розового окрашивания.

  1.  Йодометрическое определение.

К 10 мл разведения прибавляют 1-2 мл крахмала и титруют раствором йода 0,1 моль/л (УЧ 1/2 I2,) до появления синего окрашивания.

  1.  Новокаин (Мr.    272,8.)

5.1.  Нитритометрическое определение (ГФ X, ст. 467).

Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в смеси 10 мл воды и 10 мл разведенной кислоты хлороводородной. Добавляют воды до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида, 3 капли нейтрального красного и при постоянном перемешивании медленно титруют раствором натрия нитрита (0,1 моль/л) от малиновой окраски до голубой. Либо используют индикатор - 4 капли раствора тропеолина 00 и 2 капли метиленовой сини, титруют от красно-фиолетовой окраски до голубой.

5.2.  Аргентометрическое определение.

Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл воды, прибавляют 2-3 капли раствора бромфенолового синего и по каплям кислоту уксусную разведенную до перехода фиолетового окрашивания в зеленовато-желтое и титруют раствором серебра нитрата(0,05 моль/л) до появления фиолетового окрашивания.

  1.  Алкалиметрическое определение.

Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл воды, прибавляют 5 мл нейтрализованной по фенолфталеину смеси спирта этилового с хлороформом (1:2), 3-5 капель раствора фенолфталеина и титруют при перемешивании раствором натрия гидроксида (0,1 моль/л) до слабо-розового окрашивания водного слоя.

Задание 2  Оформить протокол исследования, как часть «пояснительной записки» к проекту ФСП.


ЗАНЯТИЕ II.

Анализ производных пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина

Цель занятия:

Изучить физико-химические свойства и изучить качественные и количественные реакции на производные пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина на примере тиамина хлорида, фолиевой кислоты и рибофлавина, приобрести практические навыки и умения по выполнению их фармакопейного анализа и анализа ЛФ на их основе.

Задачи занятия:

ответить на вопросы входного контроля;

изучить физические и химические свойства лекарственных веществ, производных пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина;

выполнить реакции их идентификации в соответствии с требованиями нормативной документации;

провести анализ лекарственных препаратов согласно методикам соответствующей НД.

В процессе самоподготовки и на занятии студент должен приобрести следующие знания и умения:

Знать:

формулы, латинские, международные, русские и химические названия лекарственных веществ, производных пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина применяемых в медицинской практике;

физико-химические свойства и реакции идентификации соединений;

методы испытания на чистоту лекарственных веществ (общие примеси, специфические примеси);

методы количественного определения лекарственных веществ;

условия хранения и применение в медицинской практике лекарственных веществ.

Уметь:

- проводить оценку доброкачественности лекарственных веществ, производных пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина;

- определять, идентичность производных пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина;

- проводить оценку количественного содержания производных пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина в субстанции и лекарственных формах.

Задание на занятие:

- провести общие реакции подлинности на лекарственные вещества производных пиримидилтиазола, птеридина и изоаллоксазина (тиамина хлорид, фолиевая кислота, рибофлавин);

- выполнить фармакопейный анализ лекарственной формы в соответствии с требованиями НД.

- по результатам проведенных испытаний оформить отчетную документацию.

Задание №1. Провести фармакопейные и нефармакопейные реакции подлинности.

Тиамина хлорид

  1.  0,01 г препарата растворяют в 0,5 мл воды, добавляют 1 мл раствора калия феррицианида, 1 мл раствора гидроксида натрия, 5 мл н-бутилового или изоамилового спирта. Смесь хорошо встряхивают и дают отстояться. В верхнем (органическом слое) возникает наблюдаемая в УФ-свете синяя флюоресценция, исчезающая при подкислении и вновь возникающая при подщелачивании раствора (реакция образования тиохрома).
  2.  0,03 г препарата растворяют в  3 мл воды. Раствор делят на две части. К одной из них прибавляют по 5 капель разведенной азотной кислоты и раствора серебра нитрата, образуется желтоватый творожистый осадок. К другой – 5 капель разведенной хлороводородной кислоты, 10 капель раствора хлорамина и 1 мл хлороформа, взбалтывают; хлороформный слой не должен иметь желтого окрашивания. 5 мл этого же раствора должны давать характерную реакцию на хлориды;
  3.  На два часовых или предметных стекла помещают по 5 мг препарата, 1-2 капли реактива Драгендорфа и раствора кислоты фосфорномолибденовой. Должно наблюдаться появление окрашенного осадка соответственно оранжевого и желтого цвета.

Фолиевая кислота.

  1.  0,01 г препарата растворяют в 5 мл 0,1 моль/л раствора гидроксида натрия, приливают 5 мл 0,1 моль/л раствора хлористоводородной кислоты и 1 мл раствора калия перманганат, реакционную смесь помещают на 3 минуты на водяную баню с температурой 80 - 850С. После охлаждения приливают по каплям 0,2 мл раствора пероксида водорода и фильтруют. Фильтрат имеет голубую флюоресценцию в УФ-свете. (реакция образования 6-птеридилкарбоновой кислоты)
  2.  0,01 г препарата взбалтывают в течение 2-3 минут с 1-1,5 мл 0,1 моль/л раствора гидроксида натрия и фильтруют; 1-2 капли фильтрата помещают на часовое стекло, прибавляют по 2 капли раствора солей металлов. Образуются осадки:

со свинца ацетатом – лимонно-желтый;

с кобальта нитратом – темно-желтый;

с серебра нитратом – желто-оранжевого;

с меди (II) сульфатом – зеленый;

с железа (III) хлоридом – красно-желтый.

  1.  К 0,005-0,01г препарата прибавляют 2-3 мл разведенной хлористоводородной кислоты и 0,1-0,2 г цинковой пыли. Через 2-3 минуты раствор фильтруют. К фильтрату добавляют 2-3 капли раствора натрия нитрита и 0,2-0,3 мл полученной смеси вливают в 1-2 мл щелочного раствора β-нафтола; появляется оранжево-красное окрашивание.

Рибофлавин.

  1.  0,001 г препарата растворяют в 100 мл воды, раствор имеет яркую зеленовато-желтую окраску. При просматривании в УФ-свете обнаруживается интенсивная зеленая флюоресценция, исчезающая при добавлении разведенной хлористоводородной кислоты или раствора натрия гидроксида; при добавлении к раствору натрия гидросульфита исчезает и флуоресценция и окраска.
  2.  При добавлении к крупинке препарата 2-3 капель концентрированной серной кислоты появляется красное окрашивание, от прибавления нескольких капель воды окраска переходит в желтую.
  3.  При добавлении к крупинке препарата 3-4 капель раствора серебра нитрата образуется комплексное соединение оранжево-красного цвета.
  4.  К нескольким каплям 0,02% раствора рибофлавина прибавляют 1 каплю 0,1 моль/л раствора гидроксида натрия, 3-4 капли 0,25% раствора нингидрина и нагревают смесь до кипения; появляется зеленое окрашивание.
  5.  К 2-3 мл 0,02% раствора рибофлавина добавляют 0,1 г цинковой пыли и по каплям кислоту хлористоводородную до выделения пузырьков газа. Для ускорения реакции пробирку подогревают на кипящей водяной бане. Наблюдается обесцвечивание раствора препарата (реакция образования лейкофлавина).

Задание II. Провести анализ лекарственных форм.

Задание 2.1. Провести анализ лекарственной формы состава:

Тиамина хлорида – 0,005

Кислоты аскорбиновой – 0,1

Глюкозы – 0,2

Определение подлинности.

  1.  0,2 г лекарственной формы растворяют в 0,5 мл воды, добавляют 1 мл раствора калия феррицианида, 1 мл раствора натра едкого, 0,5 мл хлороформа. Смесь хорошо встряхивают и дают отстояться. В верхнем (органическом слое) возникает наблюдаемая в УФ-свете синяя флюоресценция (рибофлавин)
  2.  0,05 г лекарственной формы растворяют в 3 мл воды. К раствору прибавляют 1-2 капли раствора феррицианида и железа (III) хлорида; появляется синее окрашивание (аскорбиновая кислота)
  3.  К 0,01 г лекарственной формы прибавляют 0,01 г тимола, 5-6 капель концентрированной серной кислоты, 1-2 капли воды; появляется фиолетово-красное окрашивание (глюкоза).

Количественное определение.

Тиамина хлорид. 0,2 г лекарственной формы растворяют в 2 мл воды, прибавляют раствор железоаммониевых квасцов до полного исчезновения появляющегося синего окрашивания (около 3,5 мл), 0,2 мл (точно пипеткой) раствора аммония роданида (0,02 моль/л) и титруют раствором нитрата серебра (0,02 моль/л) до обесцвечивания. Из объема раствора нитрата серебра, пошедшего на титрование вычитают 0,2 мл раствора аммония роданида.

Аскорбиновая кислота. 0,1 г лекарственной формы растворяют в 3-5 мл воды и тируют раствором йода (0,1 моль/л) до синего окрашивания (индикатор крахмал)

Глюкоза. 0,1 г лекарственной формы растворяют в 2 мл воды (точно пипеткой) и определяют показатель преломления раствора. Содержание глюкозы вычисляют по формуле:

Задание 2.2. Провести анализ таблеток фолиевой кислоты 0,001 г:

Фолиевой кислоты 0,001 г

Вспомогательных веществ   до получения таблетки

  массой 0,1 г

Определение подлинности.

  1.  УФ-спектры испытуемого раствора препарата и РСО фолиевой кислоты, приготовленных для количественного определения, в области от 240 до 300 нм имеют максимум поглощения при одних и  тех же длинах волн.
  2.  0,4 г порошка растертых таблеток растворяют в 5 мл 0,1 моль/л раствора гидроксида натрия, приливают 5 мл 0,1 моль/л раствора хлористоводородной кислоты и 1 мл раствора калия перманганат, реакционную смесь помещают на 3 минуты на водяную баню с температурой 80 - 850С. После охлаждения приливают по каплям 0,2 мл раствора пероксида водорода и фильтруют. Фильтрат имеет голубую флюоресценцию в УФ-свете.

Средняя масса таблеток. В соответствии с требованиями ГФ XI, вып. 2, с. 154

Количественное определение.

Около 0,5 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают а мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл воды, 1 мл концентрированного раствора аммиака, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. 10 мл полученного фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем до метки раствором однозамещенного фосфата калия и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 277 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора РСО фолиевой кислоты.

Содержание фолиевой кислоты в 1 таблетке рассчитывают по формуле.

,

где А1 – оптическая плотность испытуемого раствора; А0 – оптическая плотность раствора РСО фолиевой кислоты; а0 – масса РСО фолиевой кислоты, г; а1 – навеска порошка растертых таблеток,г; Р – средняя масса таблетки, г.

Содержание фолиевой кислоты в одной таблетке должно быть от 0,0009 до 0,0011 г

Приготовление РСО фолиевой кислоты. Около 0,01 г (точная навеска) фолиевой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл воды, 2 мл концентрированного раствора аммиака, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора до метки раствором однозамещенного фосфата калия и перемешивают.

Приготовление раствора сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 2 мл концентрированного раствора аммиака, доводят объем раствора до метки и перемешивают. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора до метки раствором однозамещенного фосфата калия и перемешивают.

Задание №2.3. Провести анализ лекарственной формы состава:

Рибофлавина – 0,002

Кислоты аскорбиновой – 0,1

Глюкозы – 0,25

Определение подлинности.

  1.  К 0,01 г лекарственной формы прибавляют 2-3 капли концентрированной серной кислоты; появляется красное окрашивание, переходящее в желтое при добавлении 1 капли воды (рибофлавин).
  2.  0,01 г лекарственной формы растворяют в 3 мл воды. К раствору прибавляют 1-2 капли раствора феррицианида и железа (III) хлорида; появляется синее окрашивание (аскорбиновая кислота)
  3.  К 0,01 г лекарственной формы прибавляют 0,01 г тимола, 5-6 капель концентрированной серной кислоты, 1-2 капли воды; появляется фиолетово-красное окрашивание (глюкоза).

Количественное определение.

Рибофлавин.0,05 г лекарственной формы растворяют в воде в мерной колбе емкостью 25 мл при нагревании на водяной бане. После охлаждения доводят объем раствора водой до метки и измеряют оптическую плотность полученного раствора  при длине волны 445 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Раствор сравнения – вода. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора, содержащего 2,5 мл 0,004% раствора рибофлавина и 7,5 мл воды. Содержание рибофлавина в граммах (Х) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Приготовление стандартного раствора рибофлавина

0,0100 г рибофлавина (точная навеска) растворяют в 150 мл воды в мерной колбе на 250 мл при нагревании на водяной бане. После охлаждения объем раствора доводят водой до метки. В 1 мл стандартного раствора содержиться 0,00004 г  рибофлавина (0,004%). Раствор устойчив в течение месяца при хранении в защищенном от света месте.

Аскорбиновая кислота. 0,1 г лекарственной формы растворяют в 2 мл воды и тируют раствором йода (0,1 моль/л) до буро-синего окрашивания (индикатор крахмал).

Глюкоза. 0,3 г лекарственной формы растворяют в 2 мл воды (точно пипеткой) и определяют показатель преломления раствора. Содержание глюкозы вычисляют по формуле:

Контрольные вопросы и задачи.

  1.  История открытия витамина В1. Распространение в природе. Биологическая роль в организме, биотрансформация, связь строения с действием.
  2.  Химические свойства тиамина.
  3.  Строение, латинские и химические названия препаратов (тиамина бромид, тиамина хлорид, фосфотиамин, кокарбоксилаза).
  4.  Источники и способы получения.
  5.  Методы идентификации.
  6.  Химическая структура и номенклатура фолиевой кислоты, составные части молекулы.
  7.  Биологическая роль, связь структуры с биологическим действием.
  8.  Физико-химические свойства. Определение подлинности фолиевой кислоты.
  9.  Количественное определение фолиевой кислоты и ее лекарственных форм.
  10.  Химическая структура и номенклатура рибофлавина, рибофлавина мононуклеотид, флавината, бензафлавина.
  11.  Биологическая роль рибофлавина в биохимических процессах организма человека. Биотрансформация при этих процессах.
  12.  Методы получения рибофлавина и рибофлавина мононуклеотида.
  13.  Физико-химические свойства рибофлавина и рибофлавина мононуклеотида. Определение подлинности на основе химических свойств.
  14.  Определение чистоты и методы количественного определения рибофлавина и рибофлавина мононуклеотида.
  15.  Обоснуйте методики ГФ X:

1. Реакции подлинности рибофлавина, с. 597.

2. Определение примеси люмифлавина, количественное определение рибофлавина, с. 597-598.

3. Первая реакция подлинности и количественное определение фолиевой кислоты, с.49-51.

  1.  Решите задачи:

1. Какой объем 0,1 моль/л раствора хлористоводородной кислоты израсходуется при количественном определении рибофлавина по методу Кьельдаля, если навеска для определения 0, 1205 г. М.м. рибофлавина = 376, 37 г/моль.

2. Какую навеску 1% раствора рибофлавина мононуклеотида следует взять, чтобы на титрование ее израсходовалось 5 мл 0,1 моль/л раствора хлористоводородной кислоты . М.м. рибофлавина мононуклеотида (безводн.) = 487,3 г/моль.

3. Рассчитайте удельное вращение рибофлавина, если для определения взят 0,5% раствор, длина поляриметрической трубки 20 см, угол вращения -1,2°

4. Рассчитайте потерю в массе при высушивании рибофлавина, если взята навеска 0, 5002 г, навеска после высушивания - 0, 4952 г.

5. Рассчитайте содержание рибофлавина в препарате, если при определении по методике ГФ X, с. 597-598 оптическая плотность раствора составила 0,51. Сделайте заключение о качестве препарата.


ЗАНЯТИЕ III.

СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ В АНАЛИЗЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ.

Цель занятия:

Изучить общие теоретические положения спектроскопии в ультрафиолетовой и видимой областях;

получить навыки использования спектроскопии в ультрафиолетовой и видимой областях в качественнм и количественном анализе лекарственных средств.

Задачи занятия:

ответить на вопросы входного контроля;

провести анализ лекарственных препаратов согласно методикам соответствующей НД.

В процессе самоподготовки и на занятии студент должен приобрести следующие знания и умения:

Задание на занятие:

  1.  Получить задание у преподавателя.
    1.  Подготовить анализируемый образец (взятие навески, растворение, разведение до оптимальной концентрации порядка 10-4-10-5 моль/л). Запись спектра поглощения исследуемого раствора на спектрофотометре относительно раствора сравнения.
    2.  Найти λmax и λmin, вычислить  или ε выбранной полосы поглощения в соответствии с законом Бугера-Ламберта-Бера.
    3.  Подготовить серию растворов стандартного образца для построения калибровочной прямой. Измерить оптическую плотность стандартных растворов и анализируемого образца при определенной длине волны.
    4.  Проанализировать полученные данные, сделать соответствующие расчеты и дать заключение о качестве анализируемого образца в соответствии с НД.

Составить отчет и сдать его преподавателю.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ

Задание I. Провести фотометрическое исследование лекарственного вещества.

Приготовить стандартный раствор ГСО лекарственного вещества и провести его спектрофотометрическое исследование при различных длинах волн. Данные эксперимента оформить в виде таблицы 1.

Таблица 1. Спектральные данные исследования лекарственного вещества.

Длина волны λ, нм

Оптическая плотность А, отн.ед.

Построить график зависимости оптической плотности А от длины волны λ стандартного раствора ГСО лекарственного вещества в указанном диапазоне длин волн с шагом 5 - 10 нм. Определить характеристики спектра: λmax и λmin, соотношений Аmax1/Аmax2 и Аmax/Аmin (Аmin определяется при длине волны λmin, предшествующей λmax),  или ε в максимуме поглощения.

Варианты лекарственных веществ для фотометрических исследований.

№ варианта

Лекарственное вещество

Концентрация ГСО ЛВ в стандартном растворе, %

Растворитель (раствор сравнения)

Диапазон длин волн, нм

1

Папаверина гидрохлорид

0,002

0,1 моль/л HCl

(0,1 моль/л HCl)

260-350

2

Кордиамин

(диэтиламид кислоты никотиновой)

0,001

0,01 моль/л HCl

(0,01 моль/л HCl)

220-350

3

Метилурацил

0,002

1% раствор CaCl2 + вода

(вода)

220-300

4

Изониазид

0,002

Вода

(вода)

200-300

5

Левомицетин (хлорамфеникол)

0,002

вода

220-350

Приготовление стандартных растворов

ГСО лекарственных веществ.

Папаверина гидрохлорид: Около 0,05 г (точная навеска) ГСО папаверина гидрохлорида растворяют в 0,1 моль/л растворе кислоты хлористоводородной в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. 2 мл раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора той же кислотой до метки.

Кордиамин: Около 0,05 г (точная масса) ГСО диэтиламида кислоты никотиновой помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл 0,01М раствора кислоты хлористоводородной, перемешивают и доводят объем до метки тем же растворителем. 1мл полученного раствора разводят тем же растворителем в мерной колбе вместимостью 200 мл.

Метилурацил: Около 0,025 г (точная навеска) ГСО метилурацила растворяют в 1% растворе кальция хлорида в мерной колбе вместимостью 25 мл и доводят объем раствора водой до метки. 2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Изониазид: Около 0,100 г (точная масса) ГСО изониазида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем до метки водой и перемешивают. 2 мл полученного раствора разводят тем же растворителем в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Левомицетин: Около 0,05 г (точная масса) ГСО левомицетина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем до метки водой и перемешивают. 1 мл полученного раствора разводят тем же растворителем в мерной колбе вместимостью 50 мл.

Задание II. Провести качественный и количественный анализ лекарственных форм фотометрическими методами.

На основании полученных в задании I данных по качественной характеристике спектров лекарственных веществ провести их качественный и количественный анализ в лекарственных формах.

Испытания на подлинность проводят сравнением общего вида спектра раствора анализируемого вещества со спектром раствора стандартного образца. Заключение о идентичности веществ делают по совпадению в спектрах λmax и λmin, соотношений Аmax1/Аmax2 и Аmax/Аmin (Аmin определяется при длине волны λmin, предшествующей λmax),  или ε в максимуме поглощения.

При испытании на чистоту используются те же характеристики, что и при испытании на подлинность. При наличии примесей могут изменяться λmax, λmin,  Dmax, Dmin, появляются дополнительные максимумы.

Количественное определение проводят следующими способами:

  •  По калибровочному графику. Приготовить серию растворов стандартного образца исследуемого вещества с постепенно возрастающей концентрацией (5 - 7 растворов). Измерить оптическую плотность каждого раствора при заданной длине волны. Полученные данные занести в таблицу 2.

Таблица 2. Зависимость оптической плотности от концентрации ГСО лекарственного вещества в стандартном растворе при длине волны ХХХ (указать длину волны, при которой проводились измерения):

Концентрация, %

Оптическая плотность

Построить график зависимости оптической плотности от концентрации. Измерить оптическую плотность исследуемого раствора и по калибровочному графику (графически или алгебраически) найти искомую концентрацию.

  •  По светопоглощению стандартного раствора. Приготовить раствор стандартного образца известной концентрации. Определить оптическую плотность анализируемого и стандартного раствора.
  •  По известному значению  или ε. Значения  или  ε могут быть взяты из литературных источников или определены экспериментально.

Варианты лекарственных форм для фотометрических исследований.

№ варианта

Лекарственное вещество

Лекарственная форма

Интервал концентраций ГСО в стандартном растворе, %

1

Папаверина гидрохлорид

Раствор для инъекций 2%

0,01-0,0001

2

Суппозитории ректальные по 0,02 г

0,01-0,0001

3

Кордиамин

(диэтиламид кислоты никотиновой)

Раствор для инъекций 250 мг/мл

0,01-0,0001

4

Метилурацил

Суппозитории ректальные по 0,5 г

0,01-0,0001

5

Мазь 10%

0,01-0,0001

6

Изониазид

Раствор для инъекций 10%

0,01-0,0001

7

Левомицетин (хлорамфеникол)

Таблетки 0,1; 0,25 или 0,5

0,01-0,0001

Приготовление исследуемых растворов лекарственных веществ.

Свечи с папаверина гидрохлоридом 0,02 г (ФС 42-1984-97): Одну свечу помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 25 мл 0,1 моль/л раствора кислоты хлористоводородной, нагревают на водяной бане до расплавления основы, взбалтывают в течение 3 минут при периодическом подогревании, затем охлаждают на льду и фильтруют через плотный бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. Таким же образом извлечение повторяют еще раз. Колбу с оставшейся массой промывают 25 мл 0,1 моль/л раствора хлористоводородной кислоты, присоединяя промывные воды к основному фильтрату. Объем раствора в колбе доводят до метки 0,1 моль/л раствором кислоты хлористоводородной. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора той же кислотой до метки.

2% раствор для инъекций папаверина гидрохлорида (ФС 42-0152-1850-01): 2 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 0,1 моль/л раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора до метки 0,1 моль/л раствором кислоты хлористоводородной и перемешивают.

Раствор Кордиамина 250 мг/мл для инъекций (ФСП 42-0048-5364-04): 1 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 60 мл 0,01 моль/л раствора кислоты хлористоводородной, перемешивают и доводят объем до метки тем же растворителем. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят до метки 0,01 моль/л раствором кислоты хлористоводородной, перемешивают.

Суппозитории ректальные с Метилурацилом 0,5г  (ФСП 42-0048-6718-05): Один суппозиторий помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют точно 100 мл 1% раствора кальция хлорида  и нагревают на водяной бане до расплавления основы. Колбу закрывают пробкой, содержимое взбалтывают в течение 5 минут, периодически нагревая, затем охлаждают на льду до застывания основы и фильтруют через бумажный сухой фильтр в сухую колбу, отбрасывая первые 15 мл фильтрата. 2 мл фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора до метки водой. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора до метки водой.

Мазь метилурациловая 10%: 1 г мази (точная навеска) помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют точно 100 мл 1% раствора кальция хлорида и нагревают на водяной бане до расплавления основы. Колбу закрывают пробкой, содержимое взбалтывают в течение 5 минут, периодически нагревая, затем охлаждают на льду до застывания основы и фильтруют через комок ваты в сухую колбу, отбрасывая первые 15 мл фильтрата. 2 мл фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора до метки водой. 25 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора до метки водой.

Раствор изониазида 10% для инъекций (ВФС 42-3418-97): 1 мл  препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают, 2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Таблетки левомицетина по 0,1; 0,25 или 0,5:  Около 0,12 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют при перемешивании 500 мл воды, слегка нагревают, доводят объем раствора водой до метки, хорошо перемешивают и дают раствору отстояться. 10 мл прозрачного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят раствор водой до метки и перемешивают.

Все рисунки спектров исследуемых растворов и калибровочная прямая, изображенные на миллиметровой бумаге прилагаются к отчету.

Контрольные вопросы и задачи.

  1.  Классификация электронных спектров. Типы взаимодействия на молекулу.
  2.  Дайте определение спектрофотометрическим методам анализа.
  3.  Что понимают под оптической плотностью? Зависит ли она от концентрации анализируемого вещества?
  4.  Сформулируйте закон Бугера-Ламберта-Бера. Приведите его выражение в различных формах и графическое изображение.
  5.  Назовите причины отклонения от закона Бугера-Ламберта-Бера.
  6.  Что понимают под УФ-спектром вещества?
  7.  Что такое удельный и молярный показатели поглощения. Как они связаны между собой? От каких факторов зависят?
  8.  Перечислите варианты количественного определения спектрофотометрическим методом. Дайте краткую характеристику каждому их них.
  9.  В чем основные отличия спектрофотометрии от фотоколориметрии?
  10.  Перечислите типы реакций, применяемые в фотометрии. Приведите примеры.
  11.  Назовите основные блоки спектрофотометра и их принцип действия.
  12.  Как качественно интерпретируют спектры лекарственных веществ?
  13.  Назовите основные характеристики спектров ультрафиолетовой и видимой областей.
  14.  В чем заключается концепция хромофорных групп?
  15.  Назовите факторы, вызывающие изменения в электронных спектрах лекарственных веществ.
  16.  Смещение длин волн и изменение интенсивности.
  17.  Где применяется УФ- и видимая спектроскопии в фармакопейном анализе.
  18.  Укажите основные операции анализа лекарственных веществ спектрофотометрическим методом.
  19.  В чем заключается принцип анализа сложных лекарственных средств спектрофотометрическим методом?
  20.  Решить задачи.
    1.  Дайте заключение о качестве лекарственной формы состава:

Раствора рибофлавина 0,02%—10 мл

Кислоты аскорбиновой 0,02

Тиамина бромида 0,02

Калия йодида 0,3

по количественному содержанию рибофлавина, если оптическая плотность раствора, полученного разведением 0,5 мл лекарственной формы до 10 мл водой, измеренная при λ = 445 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм, равна 0,340. Удельный показатель рибофлавина при 445 нм равен 328.

  1.  Рассчитайте содержание левомицетина в лекарственной форме состава:

Раствора левомицетина 0,015% 10 мл

Натрия хлорида 0,09

если оптическая плотность 10 мл раствора, полученного из 1,5 мл разведения лекарственной формы 1:5, измеренная при длине волны 364 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм равна 0,430. Оптическая плотность 10 мл стандартного раствора левомицетина, полученного из 1,5 мл 0,02% раствора левомицетина, измеренного в тех же условиях, равна 0,285.

  1.  При количественном определении рутина в таблетках «Аскорутин» (состав: Кислоты аскорбиновой 0,05, рутина 0,05) оптическая плотность раствора,  полученного из 0,0305 г порошка растертых таблеток, разведенных в 250 раз, при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм равна 0,380. Оптическая плотность 0,02% раствора РСО рутина, измеренная в тех же условиях равна 0,395. Средняя масса одной таблетки 0,327 г. Сделайте заключение о качестве препарата по содержанию рутина, которого в одной таблетке должно быть 0,04625-0,05375 г.
    1.  При определении примеси свободной салициловой кислоты в таблетках кислоты ацетилсалициловой по 0,5 г навеску порошка растертых таблеток равную 0,5015 г поместили в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавили 2 мл 0,2% раствора железо-аммонийных квасцов, довели спиртом до метки, профильтровали. Оптическая плотность фильтрата, измеренная при 540 нм в кювете с толщиной слоя 50 мм, равна 0,105. Оптическая плотность раствора РСО кислоты салициловой, полученного из 2 мл 0,01% раствора в тех же условиях равна 0,262. Средняя масса таблетки 0,605 г. Сделайте заключение о качестве препарата по содержанию свободной салициловой кислоты, которой должно быть не более 0,000125 г, считая на среднюю массу одной таблетки.
    2.  Рассчитайте удельный показатель поглощения рибофлавина в максимуме при длине волны 444 нм, если оптическая плотность, раствора, содержащего 10-5 г препарата в 1 мл равна 0,328 при толщине поглощающего слоя 10 мм.
    3.  Рассчитайте содержание фурацилина в г в 200 мл раствора, если оптическая плотность стандартного раствора 0,356, оптическая плотность испытуемого раствора 0,368, концентрация стандартного раствора 0,02%. Для анализа взято по 1 мл исследуемого и стандартного растворов.
    4.  Рассчитайте содержание левомицетина в водном растворе, если при измерении на спектрофотометре (кювета 10 мм) А=0,59 и =295.
    5.  При количественном определении фуразолидона оптическая плотность раствора, полученного путем растворения навески массой 0,1092 в 50 мл растворителя с последующим разведением 1:200 оказалась равна 0,465 (=750). Соответствует ли содержание фуразолидона (%) требованиям ФС?
    6.  Рассчитайте удельный показатель поглощения витамина В12 при 278 нм, если массу 0,0500 г растворили в 100 мл воды очищенной. 4 мл этого раствора поместили в мерную колбу вместимостью 100 мл, довели до метки тем же растворителем. Оптическая плотность оказалась равной 0,31.
    7.  Рассчитайте содержание цианокобаламина (%) в растворе по следующим данным: Аx=0,460, Аст=0,462, Сст =0,00002 г/мл, l=1 см.
    8.  Рассчитайте содержание бутадиона в одной таблетке, если оптическая плотность испытуемого раствора равна 0,321, а стандартного раствора 0,338, масса препарата 0,0802 г, масса РСО бутадиона 0,0506 г, средняя масса таблетки равна 0,2521. Для анализа массу препарата растворяли в 200 мл 0,1М раствора гидроксида натрия и далее использовали разведение 1:50.
    9.  Рассчитайте молярный показатель поглощения вещества, если оптическая плотность раствора составляет 0,424, концентрация раствора 0,002%, толщина кюветы 0,5 см, молекулярная масса вещества 200,00.




1. Определение скалярного произведения и Гильбертова пространства
2. Современные тенденции развития международной журналистики Средства массовой информации находятся в ц
3. Что тормозит российскую экономику
4. Тема- Обобщение знаний по теме Воды суши 6 класс Тип урока- Урок обобщающего повторения и систематизации з
5. Матеріалістичний світогляд означає просто розуміння природи такою яка вона є без усяких сторонніх додат
6. Морфология английского языка
7. Europen trde in certin items [slt wood tr etc] ws lredy INTERntionl by the 10th century D
8. Цель партизанской войны Цель партизанской войны это оказание народом страны сопротивления противнику
9. Вариант I 1 Напишите следующие существительные во множественном числе
10. то уже преуспел применив эту идею- у меня в запасе достаточно оригинальных идей;b проанализирую почему меня
11. Сформулировать и доказать следствия из аксиом
12. модуль для доступа к базе данных через Internet
13. ПРОДУКТИВНІСТЬ ПРАЦІ Задача 1 Робота двох цехів що виробляють однакову продукцію характеризується д
14. ТЕМАТИКИ Нестеренко Олексій Никифорович
15. ТЕМА 8 ПРАВОВОЕ РЕГУЛИРОВАНИЕ РАЗГОСУДАРСТВЛЕНИЯ И ПРИВАТИЗАЦИИ В РЕСПУБЛИКЕ БЕЛАРУСЬ ВОПРОСЫ- 1
16. ~аза~станда~ы ~~рылыс ~нерк~сібі туралы не білеміз Норман Фастер ~ с~улетші ~лы ~ытай ~ор~аны
17. Хозяйственные экономические отношения складываются при осуществлении хозяйственной экономической дея.html
18. Где хранятся земные сокровища
19. ТЕМАСИСТЕМНИЙ ПІДХІД АСУАРМ 1
20. РЕФЕРАТ дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата економічних наук Київ ~1

Материалы собраны группой SamZan и находятся в свободном доступе