Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
1.Понятие об инфекционном процессе. Механизмы, пути и факторы передачи инфекции. Входные ворота инфекции.
Инфекционный процесс - совокупность физиологических и патологических адаптационных реакций, возникающих в восприимчивом организме в результате взаимодействия с патогенными и при определённых условиях условно- патогенными микроорганизмами, направленные на поддержание гомеостаза.
В основе инфекционного процесса лежит паразитизм. Выделяют 3 категории паразитов:
1) Облигатные – на всех стадиях жизненного цикла развития связаны только с хозяином. Они не попадают в окружающую среду.
2) Факультативные - в процессе циркуляции используют внешнюю среду, но паразитическая фаза имеет преобладающее значение.
3) Случайные - для них внешняя среда (почва, вода, растения)- нормальная среда обитания. Паразитическая фаза проявляется лишь эпизодически, случайно.
Участники инфекционного процесса.
Возникновение, течение и исход инфекционного процесса зависят от 3 групп факторов, их качественных и количественных характеристик:
От микроба возбудителя.
Состояния макроорганизма.
От действия факторов окружающей среды.
Первые 2 фактора – непосредственные участники инфекционного процесса, при этом микроорганизм определяет специфическое течение инфекционного процесса, а форму, проявления, длительность, тяжесть и исход определяет состояние организма. Третий фактор влияет опосредованно, он лишь может снижать или повышать восприимчивость, инфекционную дозу, вирулентность возбудителя.
Стадии и уровни инфекционного процесса.
I. Проникновение микроорганизма в макроорганизм, его адаптация в месте входных ворот инфекции, адгезия-т.е.прилипание или связывание с чувствительными клетками и их колонизация.
II. Образование ферментов, токсинов, и других продуктов в процессе жизнедеятельности микробов, которые оказывают как местное, так и генерализованное (общее) болезнетворное воздействие на ткани и органы.
III. Диссимиляция (распространение) микробов за пределы первичного очага, что приводит к генерализации очага.
IV. Формирование иммунной реакции в организме в ответ на патогенное воздействие микроба, направленное на нейтрализацию микроба и токсина, и восстановление гомеостаза.
V. Восстановление гомеостаза (выздоравливание), приобретение организмом иммунитета т.е.невосприимчивости к данному микроорганизму.
Пути заражения.
Заражение микроорганизмами может произойти через повреждённую кожу, слизистые оболочки (ткани глаза, дыхательных путей, мочеполовых путей). Заражение через неповреждённую кожу довольно сложно, так как кожа является мощным барьером. Но даже самые ничтожные повреждения (укус насекомого, укол иглой) могут стать причиной заражения. Если входными воротами для инфекции являются слизистые оболочки, то возможны 3 механизма патогенеза:
1. Размножение возбудителя на поверхности эпителия.
2.Проникновение возбудителя в клетки с последующим внутриклеточным перевариванием и размножением.
3.Проникновение возбудителя в кровеносное русло и распространение по всему организму.
Входные ворота инфекции –для возникновения инфекционного процесса возбудитель должен проникнуть в организм, что осуществляется через входные ворота – ткани и органы. Это могут быть кожа и слизистые.
2.Формы инфекционного процесса и стадии инфекционного заболевания.
Виды инфекционного процесса
• Сепсис — тяжёлая генерализованная форма инфекционного процесса, обусловленная размножением микроорганизмов в крови и нередко в других биологических жидкостях организма.
• Септикопиемия — инфекционный процесс, характеризующийся вторичным развитием гнойных очагов в различных тканях и органах у пациентов с сепсисом.
• Бактериемия, вирусемия — наличие в крови бактерий и/или вирусов без признаков их размножения. Является одним из этапов развития ряда инфП.
• Микстинфекция — инфекционный процесс, вызванный одновременно двумя возбудителями и более.
• Реинфекция — повторное (после выздоровления пациента) возникновение инфекционного процесса, вызванного тем же микроорганизмом.
• Суперинфекция — повторное инфицирование организма тем же возбудителем до периода выздоровления.
• Вторичная инфекция — инфекционный процесс, развивающийся на фоне уже имеющейся (первичной) инфекционой болезни, вызванной другим микроорганизмом.
Стадии инфекционных заболеваний:
Инкубационный период -Обычно между проникновением инфекционного агента в организм и проявлением клинических признаков существует определённый для каждой болезни промежуток времени — инкубационный период, характерный только для экзогенных инфекций. В этот период возбудитель размножается, происходит накопление как возбудителя, так и выделяемых им токсинов до определённой пороговой величины, за которой организм начинает отвечать клинически выраженными реакциями. Продолжительность инкубационного периода может варьировать от часов и суток до нескольких лет.
Продромальный период —Как правило, первоначальные клинические проявления не несут каких-либо патогномоничных для конкретной инфекции признаков. Обычны слабость, головная боль, чувство разбитости. Этот этап инфекционной болезни называется продромальный период, или «стадия предвестников». Его продолжительность не превышает 24-48 ч.
Период развития болезни — На этой фазе и проявляются черты индивидуальности болезни либо общие для многих инфекционных процессов признаки — лихорадка, воспалительные изменения и др. В клинически выраженной фазе можно выделить стадии нарастания симптомов,расцвета болезни и угасания проявлений.
Реконвалесценция — Период выздоровления, или реконвалесценции как конечный период инфекционной болезни может быть быстрым (кризис) или медленным (лизис), а также характеризоваться переходом в хроническое состояние. В благоприятных случаях клинические проявления обычно исчезают быстрее, чем наступает нормализация морфологических нарушений органов и тканей и полное удаление возбудителя из организма. Выздоровление может быть полным либо сопровождаться развитием осложнений (например, со стороны ЦНС, костно-мышечного аппарата или сердечно-сосудистой системы). Период окончательного удаления инфекционного агента может затягиваться и для некоторых инфекций (например, брюшного тифа) может исчисляться неделями.
3. Понятие о патогенности микробов. Вирулентность. Факторы патогенности. Адгезия, колонизация и инвазия. Определение ферментов патогенности (лецитиназы, плазмокоагулазы, гиалуронидазы и гемолизина).
Патогенность — видовой признак, передающийся по наследству, закрепленный в геноме микроорганизма, в процессе эволюции паразита, т. е. это генотипи-ческий признак, отражающий потенциальную возможность микроорганизма проникать в макроорганизм (инфективность) и размножаться в нем (инвазионность), вызывать комплекс патологических процессов, возникающих при заболевании.
Фенотипическим признаком патогенного микроорганизма является его вирулентность, т.е. свойство штамма, которое проявляется в определенных условиях (при изменчивости микроорганизмов, изменении восприимчивости макроорганизма и т.д.). Вирулентность можно повышать, понижать, измерять, т.е. она является мерой патогенности. Количественные показатели вирулентности могут быть выражены в DLM (минимальная летальная доза), DL« (доза, вызывающая гибель 50 % экспериментальных животных). При этом учитывают вид животных, пол, массу тела, способ заражения, срок гибели.
К факторам патогенности относят способность микроорганизмов прикрепляться к клеткам (адгезия), размещаться на их поверхности (колонизация), проникать в клетки (инвазия) и противостоять факторам защиты организма (агрессия).
Адгезия является пусковым механизмом инфекционного процесса. Под адгезией понимают способность микроорганизма адсорбироваться на чувствительных клетках с последующей колонизацией. Структуры, ответственные за связывание микроорганизма с клеткой называются адгезинами и располагаются они на его поверхности. Адгезины очень разнообразны по строению и обусловливают высокую специфичность - способность одних микроорганизмов прикрепляться к клеткам эпителия дыхательных путей, других - кишечного тракта или мочеполовой системы и т.д. На процесс адгезии могут влиять физико-химические механизмы, связанные с гидрофобностью микробных клеток, суммой энергии притяжения и отталкивания. У грамотрицательных бактерий адгезия происходит за счет пилей I и общего типов. У грамположительных бактерий адгезины представляют собой белки и тейхоевые кислоты клеточной стенки. У других микроорганизмов эту функцию выполняют различные структуры клеточной системы: поверхностные белки, липополисахариды, и др.
Инвазия. Под инвазивностью понимают способность микробов проникать через слизистые, кожу, соединительно-тканные барьеры во внутреннюю среду организма и распространятся по его тканям и органам. Проникновение микроорганизма в клетку связывается с продукцией ферментов, а также с факторами подавляющими клеточную защиту. Так фермент гиалуронидаза расщепляет гиалуроновую кислоту, входящую в состав межклеточного вещества, и, таким образом, повышает проницаемость слизистых оболочек и соединительной ткани. Нейраминидаза расщепляет нейраминовую кислоту, которая входит в состав поверхностных рецепторов клеток слизистых оболочек, что способствует проникновению возбудителя в ткани.
Агрессия. Под агрессивностью понимают способность возбудителя противостоять защитным факторам макроорганизма. К факторам агрессии относятся: протеазы - ферменты, разрушающие иммуноглобулины; коагулаза - фермент, свертывающий плазму крови; фибринолизин - растворяющий сгусток фибрина; лецитиназа - фермент, действующий на фосфолипиды мембран мышечных волокон, эритроцитов и других клеток. Патогенность может быть связана и с другими ферментами микроорганизмов, при этом они действуют как местно, так и генерализовано.
Важную роль в развитии инфекционного процесса играют токсины. По биологическим свойствам бактериальные токсины делятся на экзотоксины и эндотоксины.
Экзотоксины продуцируют как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии. По своей химической структуре это белки. По механизму действия экзотоксина на клетку различают несколько типов: цитотоксины, мембранотоксины, функциональные блокаторы, эксфолианты и эритрогемины. Механизм действия белковых токсинов сводится к повреждению жизненно важных процессов в клетке: повышение проницаемости мембран, блокады синтеза белка и других биохимических процессов в клетке или нарушении взаимодействия и взаимокоординации между клетками. Экзотоксины являются сильными антигенами, которые и продуцируют образование в организме антитоксинов.Экзотоксины обладают высокой токсичностью. Под воздействием формалина и температуры экзотоксины утрачивают свою токсичность, но сохраняют иммуногенное свойство. Такие токсины получили название анатоксины и применяются для профилактики заболевания столбняка, гангрены, ботулизма, дифтерии, а также используются в виде антигенов для иммунизации животных с целью получения анатоксическихсывороток.Эндотоксины по своей химической структуре являются липополисахаридами, которые содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий и выделяются в окружающую среду при лизисе бактерий. Эндотоксины не обладают специфичностью, термостабильны, менее токсичны, обладают слабой иммуногенностью. При поступлении в организм больших доз эндотоксины угнетают фагоцитоз, гранулоцитоз, моноцитоз, увеличивают проницаемость капилляров, оказывают разрушающее действие на клетки. Микробные липополисахариды разрушают лейкоциты крови, вызывают дегрануляцию тучных клеток с выделением вазодилататоров, активируют фактор Хагемана, что приводит к лейкопении, гипертермии, гипотонии, ацидозу, дессиминированной внутрисосудистой коагуляции (ДВК).
Эндотоксины стимулируют синтез интерферонов, активируют систему комплемента по классическому пути, обладают аллергическими свойствами.
При введении небольших доз эндотоксина повышается резистентность организма, усиливается фагоцитоз, стимулируются В-лимфоциты. Сыворотка животного иммунизированного эндотоксином обладает слабой антитоксической активностью и не нейтрализуетэндотоксин. Патогенность бактерий контролируется тремя типами генов: гены - собственной хромосомами, гены привнесенные плазмидами умеренными фагами.
4.Экзотоксины бактерий, их свойства, классификация, механизм действия, получение и применение.
Экзотоксины — секреторные белковые вещества, обычно проявляющие ферментативную активность. Нередко экзотоксины служат единственным фактором вирулентности микроорганизма, действуют дистанционно (далеко за пределами очага инфицирования) и ответственны за клинические проявления инфекции (например, энтеротоксины вызывают диарею, нейротоксины — параличи и другие неврологические симптомы). Наибольшую токсичность проявляет ботулотоксин — 6 кг токсина могли бы убить всё человечество.
Высокая токсичность экзотоксинов обусловлена особенностью структуры их фрагментов, имитирующей строение субъединиц гормонов, ферментов или нейромедиаторов хозяина. В результате экзотоксины проявляют свойства антиметаболитов, блокируя функциональную активность естественных аналогов. Экзотоксины проявляют высокую иммуногежостъ, в ответ на их введение образуются специфические нейтрализующие AT (антитоксины). По степени связи с бактериальной клеткой экзотоксины разделяют на три группы — А, В и С.
Группа А экзотоксинов — токсины, секретируемые во внешнюю среду (например, токсин дифтерийной палочки).
Группа В экзотоксинов — токсины, частично секретируемые во внешнюю среду и частично ассоциированные с бактериальной клеткой (например, тетаноспазмин столбнячной палочки).
Группа С экзотоксинов — токсины, связанные с бактериальной клеткой и высвобождающиеся после её гибели {например, экзотоксины энтеробактерий). Свойства экзотоксинов
5.Эндотоксины, химический состав, свойства, механизм действия. Отличия экзо- и эндотоксинов.
Эндотоксины. К ним относятся липополисахариды (ЛПС), которые содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий. Токсические свойства определяются всей молекулой ЛПС, а не отдельными ее частями: ПС или липидом А. Хорошо изучены эндотоксины энтеробактерий (эшерихии, шигеллы и сальмонеллы, бруцеллы, туляремийные бактерии).
ЛПС (эндотоксины) в отличие от экзотоксинов более устойчивы к повышенной t°С, менее ядовиты и малоспецифичны. При введении в Ò подопытных Ж!! вызывают примерно одинаковую реакцию, независимую от того, из каких гр– Б!! они выделены. При ВВЕДЕНИИ БОЛЬШИХ ДОЗ наблюдается угнетение фагоцитоза, явления токсикоза, слабость, одышка, расстройством кишечника (диарея), падением ♥ деятельности и ↓ t°С тела. При введении НЕБОЛЬШИХ ДОЗ – обратный эффект: стимуляция фагоцитоза, ↑ t°С тела.
У ЛЮДЕЙ поступление эндотоксинов в кровяное русло приводит к лихорадке в результате их действия на клетки крови (гранулоциты, моноциты), из которых выделяются эндогенные пирогены. Возникает ранняя лейкопения, которая сменяется вторичным лейкоцитозом. Усиливается гликолиз Þ может возникнуть гипогликемия. Также развивается гипотония (поступление в кровь ↑ количества серотонина и кининов), нарушается кровоснабжение органов и ацидоз.
ЛПС активирует фракцию С3 комплемента по АЛЬТЕРНАТИВНОМУ ПУТИ Þ ↓ его содержания в сыворотке и накопление биологически активных фракций (С3а, С3b, С5а и др.). Большие количества поступившего в кровь эндотоксина приводят к ТОКСИКО-СЕПТИЧЕСКОМУ ШОКУ.
ЛПС – сравнительно слабый иммуноген. Сыворотка крови животных, иммунизированных чистым эндотоксином, не обладает высокой антитоксической активностью Þ не способна полностью нейтрализовать его ядовитые свойства.
Некоторые бактерии одновременно образуют как белковые токсины, так и эндотоксины, например кишечная палочка и др.
7.Понятие о факторах неспецифической резистентности организма. Внешние и внутренние барьеры, клеточные и гуморальные факторы.
Под неспецифическим иммунитетом подразумевают систему предсуществующих защитных факторов организма, присущих данному виду как наследственно обусловленное свойство. Так, собаки никогда не болеют чумой человека, а куры - сибирской язвой. Иммунитет, создаваемый анатомическими, физиологическими, клеточными и молекулярными факторами, которые являются естественными составляющими элементами организма, иначе называют конституционным. Такие факторы защищают организм от разных экзогенных и эндогенных агрессий, они передаются наследственно, их защитные функции лишены избирательности и они не способны сохранять память от первичного контакта с чужеродностью.
Условно факторы неспецифической защиты можно разбить на четыре типа: физические(анатомические); физиологические; клеточные, осуществляющие эндоцитоз или прямой лизис чужеродных клеток; молекулярные (факторы воспаления).
Физические:Кожа. Неповрежденная кожа представляет собой обычно непроницаемый барьер для микроорганизмов. Лишь при некоторых инфекционных болезнях, например, лептоспирозах, прямое проникновение возбудителя через неповрежденную кожу, возможно, является первичным путем заражения. Здоровая неповрежденная кожа обладает отчетливой бактерицидной активностью в отношении тех микроорганизмов, которые не являются представителями ее нормальной микрофлоры.
Слизистые оболочки. На уровне слизистых оболочек существует множество разных механизмов защиты внутренней среды организма, в том числе от проникновения в нее микроорганизмов (слизь, реснички мерцательного эпителия, лизоцим, пероксидазы, секреторные антитела, фагоцитирующие клетки, лимфоциты).
Нормальная микрофлора организма. Микроорганизмы, которые населяют кожу и слизистые оболочки, сообщающиеся с внешней средой, составляют нормальную микрофлору организма. Эти микроорганизмы способны противостоять действию патогенных микроорганизмов и губительно действовать на них, тем самым участвуя в защите организма.Этот тип защиты включает температуру тела, рН и напряженность кислорода в районе колонизации микроорганизмами, а также различные растворимые факторы, воспаление. К клеточным факторам неспецифической защиты относятся фагоцитирующие клетки и натуральные киллеры.
Гуморальные (молекулярные) факторы неспецифической защиты
В неспецифическом иммунитете против микробов участвуют белки острой фазы воспаления: С-реактивный протеин (белок), сывороточный амилоид, альфа2-макроглобулин, фибриноген, b-лизины, интерфероны, система комплемента, лизоцим и др.
8. Фагоцитоз. Клетки, участвующие в фагоцитозе. Стадии и виды фагоцитоза. Кислород-зависимые и кислород-независимые механизмы бактерицидности. Опсонины. Методы изучения фагоцитарной активности клеток.
Фагоцитоз. Процесс активного поглощения клетками организма проникших в него чужеродных частиц, в том числе микробов, называют фагоцитозом, а клетки организма, участвующие в этом процессе, — фагоцитами. Впервые И. И. Мечников показал, что фагоцитоз широко распространен природе. У низших организмов, например амеб, он является способом питания. У высших организмов, имеющих специальные пищеварительные системы, процесс фагоцитоза является, по словам Бойда, «великим очищающим механизмом». Фагоциты освобождают организм от чужеродных агентов, в том числе микробов, проникших извне, уничтожают старые клетки собственного организма, переваривают старые эритроциты, обломки клеток, а также мутировавшие клетки. Следовательно, фагоцитоз можно определить как общебиологическую реакцию, действующую как при патологических, так и физиологических состояниях организма.
Фагоцитарной активностью обладают различные клетки. Они широко рассеяны по организму, но функционируют как единая система со специальной функцией. Ее называют ретикулоэндотелиальной системой (РЭС), Фагоциты могут быть подвижными и неподвижными (фиксированные). Фиксированные фагоциты — макрофаги или гистиоциты — находятся в особых участках сосудистого либо лимфатического эндотелия капилляров печени (купферовы клетки), в синусах селезенки и различных лимфатических узлах. Подвижные фагоциты— макрофаги, блуждающие в различных тканевых пространствах и крови, и микрофаги — лейкоциты, фагоцитирующие клетки крови. Наиболее активны нейтрофилы, менее — базофилы; роль эозинофилов изучена мало.
Механизм фагоцитоза. Фагоциты обладают способностью активно двигаться по направлению к микробам или другим частицам. Это явление называют хемотаксисом: положительным, если фагоцит двигается к микробу, и отрицательным при движении от микроба. Фагоцитоз в организме осуществляется в несколько стадий, или фаз:
1) движение фагоцита к объекту — положительный хемотаксис;
2) прилипание объекта к фагоциту— адсорбция;
3) поглощение объекта;
4) переваривание и уничтожение его ферментами фагоцита.
Различают фагоцитоз завершенный и незавершенный. В результате завершенного фагоцитоза происходит лизис бактерий в фагоцитах. При незавершенном фагоцитозе бактерии сохраняют жизнеспособность внутри фагоцита и могут даже размножаться в нем, вызывая его гибель. Незавершенный фагоцитоз наблюдается, например, при гонорее.
Факторы, влияющие на фагоцитарный процесс. Активность фагоцитов изменяется в зависимости от физиологического состояния организма. Она угнетается при авитаминозах. Гистамин, освобождающийся при воспалении из. клеток, стимулирует фагоцитоз. Биологические особенности микроорганизма оказывают существенное влияние на процесс фагоцитоза. Микробы вырабатывают различные вещества, которые препятствуют фагоцитозу: агрессины, антифагины, лейкоцидины. Не фагоцитируются также микробы, имеющие капсулу. Явления усиления фагоцитоза под влиянием антител описали Райт и И. Г. Савченко. Райт назвал их опсонинами (от греч. opsono — приготовлять пищу), а И. Г. Савченко — бактериотропинами. Помимо антител, в подготовке фагоцитоза участвуют комплемент и другие компоненты сыворотки.
Значение фагоцитоза огромно. Особенно велика его защитная роль в устойчивости организма к разным заболеваниям. В процессе развития инфекции фагоцитарная активность клеток повышается, а выздоровление обычно сопровождается увеличением числа лейкоцитов. Снижение или отсутствие защитной функции клеток может привести к смертельному исходу.
9. Гуморальные факторы резистентности. Лизоцим, нормальные антитела, белки острой фазы.
В неспецифическом иммунитете против микробов участвуют белки острой фазы воспаления: С-реактивный протеин (белок), сывороточный амилоид, альфа2-макроглобулин, фибриноген, b-лизины, интерфероны, система комплемента, лизоцим и др.
Лизоцим - термостабильный белок типа муколитического фермента. Он содержится в тканевых жидкостях животных и растений, у человека - в слезах, слюне, перитонеальной жидкости, плазме и сыворотке крови, в лейкоцитах, материнском молоке и др. Лизоцим продуцируется моноцитами крови и тканевыми макрофагами. Он вызывает лизис многих сапрофитных бактерий, оказывая менее выраженное литическое действие на ряд патогенных микроорганизмов и неактивен в отношении вирусов.
И другие гуморальные факторы.
10.Комплемент, понятие, роль в реакциях неспецифической резистентности, механизм действия. Классический и альтернативный пути активации комплемента.
Система комплемента это комплекс растворимых белков и белков клеточной поверхности, взаимодействие которых опосредует разные биологические эффекты:
разрушение (лизис) клеток,
привлечение лейкоцитов в очаг инфекции или воспаления (хемотаксис),
облегчение фагоцитоза (опсонизация),
стимуляция воспаления и реакций гиперчувствительности (анафилотоксины).
Большая часть компонентов комплемента синтезируются гепатоцитами и мононуклеарными фагоцитами. Компоненты комплемента циркулируют в крови в неактивной форме. При определенных условиях самопроизвольный каскад ферментативных реакций ведет к последовательной активации каждого из компонентов системы комплемента. Компоненты комплемента обозначают латинской буквой С и арабскими цифрами (С1, С2 .... С9).
Существуют два взаимосвязанных пути активации комплемента: классический и альтернативный. В результате формируется мембраноатакующий комплекс, который способен пенетрировать (формирование поры) клеточную мембрану и вызывать лизис микроорганизмов.
11. Интерфероны, природа, механизм действия, способы получения, применение. Понятие об интерфероногенах.
Интерферон представляет собой семейство белков-гликопротеидов, которые синтезируются клетками иммунной системы и соединительной ткани. В зависимости от того, какими клетками синтезируется интерферон, выделяют три типа: α, β и γ-интерфероны.
Альфа-интерферонвырабатывается лейкоцитами, и он получил название лейкоцитарного; бета-интерферон называют фибробластным, поскольку он синтезируется фибробластами — клетками соединительной ткани, а гамма-интерферон — иммунным, так как он вырабатывается активированными Т-лимфоцитами, макрофагами, естественными киллерами, т. е. иммунными клетками.
Интерферон синтезируется в организме постоянно, и его концентрация в крови держится на уровне примерно 2 МЕ/мл (1 международная единица — ME — это количество интерферона, защищающее культуру клеток от 1 ЦПД50 вируса). Выработка интерферона резко возрастает при инфицировании вирусами, а также при воздействии индукторов интерферона, например РНК, ДНК, сложных полимеров. Такие индукторы интерферона получили название интерфероногенов.
Помимо противовирусного действия интерферон обладает противоопухолевой защитой, так как задерживает пролиферацию (размножение) опухолевых клеток, а также иммуномодулирующей активностью, стимулируя фагоцитоз, естественные киллеры, регулируя антителообразование В-клетками, активируя экспрессию главного комплекса гистосовместимости.
Механизм действияинтерферона сложен. Интерферон непосредственно на вирус вне клетки не действует, а связывается со специальными рецепторами клеток и оказывает влияние на процесс репродукции вируса внутри клетки на стадии синтеза белков.
Применение интерферона. Действие интерферона тем эффективнее, чем раньше он начинает синтезироваться или поступать в организм извне. Поэтому его используют с профилактической целью при многих вирусных инфекциях, например гриппе, а также с лечебной целью при хронических вирусных инфекциях, таких как парентеральные гепатиты (В, С, D), герпес, рассеянный склероз и др. Интерферон дает положительные результаты при лечении злокачественных опухолей и заболеваний, связанных с иммунодефицитами.
Получают интерферон двумя способами: а) путем инфицирования лейкоцитов или лимфоцитов крови человека безопасным вирусом, в результате чего инфицированные клетки синтезируют интерферон, который затем выделяют и конструируют из него препараты интерферона; б) генно-инженерным способом — путем выращивания в производственных условиях рекомбинантных штаммов бактерий, способных продуцировать интерферон. Обычно используют рекомбинантные штаммы псевдомонад, кишечной палочки со встроенными в их ДНК генами интерферона. Интерферон, полученный генно-инженерным способом, носит название рекомбинантного. В нашей стране рекомбинантный интерферон получил официальное название «Реаферон». Производство этого препарата во многом эффективнее и дешевле, чем лейкоцитарного.
12. Нормограмма резистентности
Резисте́нтность (от лат. resistentia — сопротивление, противодействие) — сопротивляемость (устойчивость, невосприимчивость) организма к воздействию различных факторов — инфекций, ядов, загрязнений, паразитов.
Резистентность у микроорганизмов — полная или частичная невосприимчивость к противомикробным препаратам, в частности антибиотикам.
13. Понятие об иммунитете, его виды. Пути формирования естественного и искусственного иммунитета.
Иммунитет – это способ защиты организма от генетически чужеродных веществ, направленных на сохранение гомеостаза.
При дефектах и несостоятельности факторов резистентности в естественных условиях возникает инфекционный процесс, в ходе которого формируется вторая линия защиты организма- приобретенный иммунитет.
Приобретенным иммунитетом называют совокупность специфических факторов, которая формируется в процессе индивидуального развития организма и направлена против повторного контакта с тем же микробом или его продуктами. При этом наследственно полученные (факторы резистентности) и индивидуально приобретенные организмом защитные механизмы (факторы иммунитета) действуют сочетанно.
Приобретенный естественный активный и приобретенный искусственный активный являются активно приобретенными формами иммунитета и создаются самим организмом человека. Приобретенный естественный активный иммунитет возникает после перенесенного заболевания. Приобретенный (постинфекционный) подразделяют на стерильный и нестерильный
Приобретенный искусственный активный иммунитет создается вакцинацией человека, то есть искусственным введением в его организм веществ антигенной природы. Такую форму иммунитета называют поствакцинальной.
Продолжительность активно приобретенных форм иммунитета значительна. Приобретенный естественный активный может сохраняться годами, десятилетиями и даже в течение всей жизни (брюшной тиф, дифтерия, корь). Максимальная продолжительность приобретенного искусственного активного иммунитета- Ю лет чаще 1-2 года.
Пассивно приобретенный иммунитет возникает естественно когда антитела матери передаются с кровью плоду (I1, I2, I3, I4) с молоком при грудном вскармливании (IgA секреторный)' Такой иммунитет (плацентарный, материнский) обеспечивает невосприимчивость новорожденного на протяжении 6-7 мес к возбудителям некоторых инфекционных заболеваний (корь, дифтерия, скарлатина)
Приобретенный искусственный пассивный иммунитет создается введением выработанных другим организмом (животным - гетеро логичных, человеком - гомологичных) специфических антител. Продолжительность невосприимчивости 2-3 нед.
Ни одна из форм приобретенного иммунитета не передается потомству.
Приобретенный противоинфекционный иммунитет объединяет два звена иммунного ответа макроорганизма: гуморальное и клеточное. Напряженность гуморального звена зависит от класса и уровня циркулирующих специфических антител, а клеточного - от функциональной активности макрофагов и различных субпопуляций Т-лимфоцитов. Как правило, в механизмах развития защиты против возбудителей инфекционных заболеваний принимают участие оба звена с преобладанием того или другого в разные фазы инфекционного заболевания.
В зависимости от объекта действия приобретенный противоинфекционный иммунитет подразделяют на антитоксический, антибактериальный, противовирусный, иммунитет к грибкам, простейшим. Однако деление это достаточно условное и имеет в настоящее время лишь дидактическое значение.
Наряду с приобретенным иммунитетом существует видовой иммунитет, который представляет собой генетически опосредованную невосприимчивость некоторых видов животных (и человека) к возбудителям болезней, поражающих другие виды. Так, люди не восприимчивы к вирусу чумы собак, чумы рогатого скота (клетки человека не имеют рецепторов к вирусу). Животные не восприимчивы к некоторым вирусам (ветряной оспы, гепатита А, гепатита В, кори), некоторым бактериям (гонококки, возбудители сифилиса). Крысы и мыши устойчивы к дифтерийному токсину, а кошки и собаки - к столбнячному.
Видовой иммунитет, как правило, обусловлен отсутствием на клетках рецепторов к патогену (вирус, токсины) или мембранных субстратов, соответствующих ферментам проникновения микроба (гонококк).
Существуют и внутривидовые (расовые, этнические) различия в восприимчивости к инфекционным болезням. У жителей некоторых районов Африки обнаружен ген, вызывающий в организме его носителей синтез аномального гемоглобина, так называемого серповид-ноклеточного гемоглобина, или гемоглобина S (Hb-S). Эритроциты, содержащие такой гемоглобин, принимают форму серпа. Люди, гетерозиготные по данному гену, устойчивы к малярии, вызываемой Plasmodium falciparum. Негры более восприимчивы к возбудителю туберкулеза, чем белые.
14. Функции иммунной системы. Центральные и периферические органы иммунной системы.
И. с. представляет собой сложный комплекс механизмов, осн. назначение к-рого — защищать организм от вторжения чужеродных веществ, способных вызвать заболевание; к тому же И. с., возможно, служит важнейшей защитой от клеток, измененных в процессе опухолевого роста. У млекопитающих сформировались две системы иммунитета — клеточный и гуморальный иммунитет; оба они связаны с деятельностью лимфоцитов.
Центральным органом иммунной системы является ККМ и тимус.
Периферические органы иммунной системы содержат зрелые лимфоциты. Здесь после антигенного воздействия происходит их дальнейшая пролиферация и дифференцировка, продуцируются антитела и эффекторньш лимфоциты. К периферическим органам относятся селезенка, лимфатические узлы, скопления лимфоидной ткани под слизистыми поверхностями желудочно-кишечного, дыхательного, мочеполового трактов (групповые лимфатические фолликулы, тонзиллы, пейеровы бляшки).
Кровь и лимфа обеспечивает рециркуляцию лимфоцитов между зонами лимфоидной ткани. Родоначальником всех клеток крови является единая стволовая клетка.
Лимфатические узлы - скопления лимфоидной ткани, расположенные по ходу лимфатических и кровеносных сосудов. Лимфатические узлы обеспечивают неспецифическую резистентность организма, выполняя функции барьеров и фильтров, удаляющих из лимфы и крови чужеродные частицы. Вместе с тем лимфатические узлы служат местом формирования антител и клеток, осуществляющих клеточные иммунные реакции. Кожа, эпителиальные и паренхиматозные органы содержат многочисленные лимфатические капилляры, собирающие тканевую жидкость, именуемую лимфой. Лимфа поступает далее в лимфатические сосуды, по ходу которых последовательно располагается множество лимфатических узлов, строма которых служит фильтром, удаляющим из лимфы практически все чужеродные частицы, в том числе и вирусы, и до 2% растворимых антигенных молекул. В лимфоузлах иммунного организма задерживаются практически все водорастворимые антигены.
Функции периферических органов иммунной системы выполняют также лимфоидные структуры глоточного кольца, кишечника, мочеполовых органов, кожи, бронхов и легких.
15. Генез иммунокомпетентных клеток (макрофаги, В-, Т-лимфоциты). Клеточная кооперация в иммунном ответе.
Популяция лимфоцитов неоднородна. Различают два основных вида лимфоцитов: Т-лимфоциты, В-лимфоциты.
• Т-лимфоциты (тимус-зависимые) занимают больше половины лимфоцитов периферической крови. Предшественники Т-лимфоцитов мигрируют в тимус из красного костного мозга. На территории ККМ образуются NK, дендритные клетки и др. Часть клеток, предшественников лимфоцитов переходит в тимус, где под влиянием гуморальных продуктов и клеток стромы тимуса превращается в Т0-лимфоциты. Т0 выходят из тимуса и дозревают в лимфоузлах, где они встречаются с АПК. Они представляют Т0-лимфоцитам Аг, они его распознают и делятся. Так образуется клональный иммунный эффект Т-лимфоцитов. Th1- клетки восполения.
На мембране Т-лимфоцитов имеются характерные антигенные маркеры, отличающие эту популяцию лимфоцитов от других лимфоидных клеток.
Функциональная популяция Т-лимфоцитов также неоднородна и состоит из нескольких субпопуляций, отличающихся как репертуаром поверхностных антигенов, так и функцией. Это Т-лимфоциты — хелперы (индукторы), Т-лимфоциты — супрессоры и цитотоксические Т-лимфоциты — киллеры. Для первых характерен поверхностный маркер. Они отличаются поверхностными маркерами. Т-киллеры — участвуют в клеточном иммунном ответе, а Т-хелперы и Т-супрессоры отвечают за регуляцию гуморального иммунитета.
У человека В-лимфоциты образуются из стволовой кроветворной клетки красного костного мозга, затем поступают в кровь и далее заселяют В-зоны периферических лимфоидных органов — селезенки, лимфатических узлов, лимфоидные фолликулы внутренних органов. Характерной особенностью В-лимфоцитов является наличие на его поверхности иммуноглобулиноьых рецепторов (IgM, IgD), рецепторов для комплемента (С,). В-лимфоциты могут сами распознать Аг. В0 имеет Аг клеточной дифференцировки – СД(19, 20,21). В-лимфоциты после встречи с Аг начинают делиться и превращаются в плазмоциты => Ат – гуморальный иммунный ответ.
Дифференцировка В0 и Т0 – наивные лимфициты, процесс распознания ими Аг называется иммуногенезом
Макрофаги
Моноциты являются циркулирующими в периферической крови предшественниками макрофагов. Функции макрофагов разнообразны и не исчерпываются потребностями иммунной защиты организма. Впервые на защитную функцию макрофагов указал И.И. Мечников, открывший явление фагоцитоза в 1883 г. Сегодня известна другая фундаментальная роль макрофагов — представление антигенов лимфоцитам. Без этой функции макрофагов невозможно специфическое распознавание чужеродного антигена. Кроме того, макрофаги являются продуцентами целого ряда медиаторов иммунных реакций (простагландины, интерлейкины), а также факторов комплемента.
Различают две группы макрофагов — свободные и фиксированные. К свободным макрофагам относятся макрофаги рыхлой соединительной ткани, или гистиоциты; Эти клетки способны перемещаться в организме. Группу фиксированных (резидентных) макрофагов составляют макрофаги красного костного мозга, костной ткани (остеокласты), селезенки, лимфатических узлов (дендритные макрофаги), внутриэпидермальные макрофаги (клетки Лангерганса), макрофаги ворсин плаценты (клетки Хофбауэра), ЦНС (микроглия), макрофаги печени (клетки Куифера).
Клеточная кооперация в иммунном ответе
На коротком плече С6 хромосомы человека расположено несколько генетических локусов, которые контролируют синтез некоторых белков, играющих важную роль в иммунном ответе и прежде всего в клеточных взаимодействиях. Совокупность этих локусов (генов) получила название главного комплекса гистосовместимости. Класс I содержит три наиболее изученных локуса А, В, С, каждый из которых может быть представлен вариантами одного и того же гена. А локус включает 41 вариант, В - 71, С - 27. Вероятно, вариантов много больше.
Функции продуктов Е, F, G, Н локусов, также относящихся к классу I, остаются неясными. Локусы (гены) класса I контролируют синтез гликопротеидов, выполняющих роль клеточных рецепторов.
Тяжелая цепь димера гликопротеида (45 кД) состоит из гидрофильного цитоплазматического домена (участка), гидрофобного трансмембранного, константного внеклеточного (а-3) и двух внеклеточных вариантных (а-2, а-1). Домен а-1 имеет короткую углеводную цепочку (УЦ). Легкая цепь димера представлена β2-микроглобулином (12 кД), который входит в состав ее константной части. Она не имеет вариантов, кодируется одним из генов 15-й хромосомы, не относящимся к ГКГС. Щель между α1-α2 и β2М является активным центром связывания и презентации антигена (антигенных детерминант) Т-цитотоксическим лимфоцитам. Рецепторы класса I имеются на поверхности любых ядросодержащих клеток организма, что лежит в основе его индивидуальной антигенной специфичности. Они обеспечивают «узнавание» собственных клеток макроорганизма, межклеточную кооперацию, презентацию антигена. Класс II локусов включает несколько генов: Три из них (DP, DQ, DR) изучены лучше, роль других (и контролируемых ими продуктов) неясна. Локусы (гены) DP, DQ, DR контролируют синтез а- и (3- цепей клеточных рецепторов и могут иметь аллели (альтернативные варианты генов), число которых представлено на схеме.
Рецептор ГКГС класса II представляет собой гликопротеид, состоящий из двух цепей. Цепь А представлена вариабельным внеклеточным доменом а-1(34 кД), константным внеклеточным доменом а-2 (34 кД), гидрофобным трансмембранным и гидрофильным цито-плазматическими доменами. Домены а-1и а-2 имеют по одной короткой углеводной цепочке. Цепь В также имеет четыре домена: вариабельный внеклеточный Р- 1 (28 кД) с одной углеводной цепочкой, константный внеклеточный Р-2 (28 кД), гидрофобный трансмембранный и гидрофильный цитоплазматический. Щель между а-1и р-1 представляет собой активный центр рецептора. Рецепторы ГКГС класса II имеются только на макрофагах, В-лимфоцитах и некоторых активированных Т-лимфоцитах.
Класс III локусов ГКГС содержит гены, контролирующие синтез некоторых компонентов, участвующих в активации С3 компонента комплемента. Контролируемые этими генами компоненты системы комплемента (С4, фактор В, С2) секретируются в кровь, циркулируют вместе с ней, но на мембранах клеток организма они не фиксируются.
16. Понятие об антигенах, их строение и свойства. Антигены бактерий и вирусов.
Антигенами называют чужеродные для организма вещества коллоидной структуры, которые при попадании в его внутреннюю среду способны вызывать ответную специфическую иммунологическую реакцию, проявляющуюся, в частности, в образовании специфических антител, сенсибилизированных лимфоцитов, или в возникновении состояния толерантности к этому веществу.
Вещества, являющиеся антигенами, должны быть чужеродны для организма, макромолекулярны, находиться в коллоидном состоянии, поступать в организм парентерально, то есть минуя желудочно-кишечный тракт, в котором обычно происходит расщепление вещества и потеря его чужеродности. Под чужеродностью антигенов следует понимать определенную степень химического различия между антигеном и макромолекулами организма, во внутреннюю среду которого он попадает.
Антигенные свойства связаны с величиной молекулярной массы макромолекулы- она должна быть не менее 10 тыс. Д. Чем выше молекулярная масса вещества, тем выше его антигенность.
Свойства Аг:
Различают:
Виды Аг:
Аг бактерий
Аг связаны со структурой бактериальной клетки. Если жгутиковые- Н Аг. Он представлен флагеллином, термолабилен, сохраняется при обработке фенолом (так получают Н-диагностикумы). Есть 0 Аг – соматические Аг, термостабилен, сохраняется при обработке этанолом и формалином. 0 специфическая цепь ЛПС.
К Аг – капсульные, включает и поверхностные белки. Есть термолабильные и термостабильные. L Аг – термолабильные, Vi Аг – у сальмонелл, определяют вирулентность.
Аг бактерий являются токсины. Выделяют протективные Аг, определяющие развитие иммунитета. Их используют при создании вакцин. Ими обладают возбудители Сибирской язвы, чумы, бруцеллеза.
Аг вирусов
Вирионные Аг:
Если у вируса нет суперкапсида, то поверхностными Аг будут капсидные.
17. Антитела (иммуноглобулины), структура, классы, функции. Понятие о моноклональных антителах. Гибридомы, получение, применение.
Антитела (гликопротеиды, Ig) – образуются в организме в ответ на введение Аг, могут специфически взаимодействовать с ним (для каждого Аг есть свое Ат).
Виды Ат:
Ат выделяют все организмы до рыб включительно. Благодаря Ат реализуется гуморальный иммунитет.
Структура Ig:
Мономер. Состоит из 2х идентичных цепей, легкие – L. Эти цепи могут быть λ или ϰ. Обе цепи должны быть одинаковы. L цепи с помощью S-S связей соединены 2мя Н цепями (тяжелые). L цепи – 220 аминокислот, Н – 440-450 аминокислот.
Н цепи могут быть 5 типов:
Структура Н цепи определяет класс Ig.
Каждая цепь имеет участки определенной структуры – домены.
Домены:
У L цепи есть 1V и 1Cдомены. У Н цепей 1V и 3-4C домена.
При обработке папаином (фермент) Ig распадается на 2 одинаковых Fab фрагмента (Аг-связанные фрагменты) и FC фрагмент (фрагмент кристаллизации)
FC фрагмент участвует в активации комплемента, фрагмент СН2. FC фрагмент участвует в прохождении Ig через плаценту. Fab фрагменты несут 2 домена V, 1V-H и 1V-L цепей. Вместе они образуют активный центр – эпитопсвязывающий участок. Он представляет собой щель, комплементарную Аг детерминанте. Внутри этой полости есть специфические гипервариабельные участки: 3 на L и 4 на Н. Эти участки определяют структуру активного центра. Участок между СН1 и СН2 доменами Н – цепей называется шарниром (талия Ат). Он содержит пролин, который обеспечивает подвижность Ат. => может лучше взаимодействовать с Аг.
Свойства Ат:
IgA секреторный. Димер, 4 активных центра.
Существуют полные и неполные Ат. 2х валентные Ат являются полными, неполные – если 1 активный центр, а 2ой заблокирован.
Высокой аффинностью обладает IgG
А) изотипы Ат – определяет принадлежность Ат к различным клеткам. Всего 9 вариантов (IgG1-4, IgM, IgA1,2, IgD, IgE).
Б) аллотипы Ат определяются аллелями гена, определяющего синтез Ig. Для каждого организма характерен свой аллотип.
В) идиотипы определяются различием структур гипервариабельных участков активного центра – идиотопы. 1 и тот же идиотип иммет моноклональные Ат, образованные 1 и тем же клоном плазмоцитов.
Классы Ат:
Составляет 10% Ат сыворотки крови, М=900кДа, единица седиментарности 19S, пентамер, 10 активных центров. Обладает высокой авидностью, период полураспада 5 дней. Первые Ат, которые появляются с 3-5 дня с начала болезни. Они обеспечивают первичный иммунный ответ. Участвуют к классическом пути активации комплемента. Следовательно обеспечивают комплемент зависимый цитолиз. IgM находится на поверхности В-лимфоцитов, образуют В-клеточные рецепторы. Наличие IgM в высоком титре у новорожденных говорит о внутриутробном заражении (врожденная краснуха, сифилис, токсоплазмоз)
IgM участвует в противовирусном иммунитете, в образовании циркулирующего иммунного комплекса (ЦИК), который выводится из организма с мочой, желчью. Они нейтрализуют токсины, участвуют в реакциях агглютинации бактерий.
80% Ат сыворотки крови. Подклассы: G1, G2, G3, G4.
М=150кДа, единицы седиментарности 7S, мономер, 2 эпитопсвязывающих участка. Обладает высокой специфичностью к Аг, высокой аффинностью. Период полураспада 7-28 дней. IgG появляется на 5-7 день болезни. Преобладает при ВИО, при рецидивах. Его FC фрагмент участвует в классическом пути активации комплемента, являясь абсолином (облегчает фагоцитоз, взаимодействует с FC рецепторами макрофагов, NK, нейтрофилов). Проходит через плаценту, обеспечивает материнский иммунитет у новорожденных в течение 6 месяцев. Ему принадлежит главная роль в гуморальном иммунном ответе.
9% Ат сыворотки крови. Подклассы: А1 и А2.
Период полураспада 5 дней, М=170кДа если мономер в сыворотке, 350 если димер на поверхности слизистых. Единицы седиментарности 7S и 11S соответственно.
Делятся на:
А) сывароточные – мономер
Б) секреторные – определяет местный иммунитет слизистых. Нейтрализует вирусы, препятствует адгезии микроорганизмов на слизистых оболочках, Не фиксирует комплемент.
4. IgE
0,002% от Ат сыворотки крови.
Мономер. 2 активных центра, М=200кДа, единицы седиментарности 8S, период полураспада 2 дня в сыворотке и 14 дней в коже. Активирует макрофаги, эозинофилы, следовательно обеспечивает проивопаразитарный иммунитет.
Обладает цитофинностью: FC фрагмент может связываться с тучными клетками и базофилами. Если при поступлении Аг происходит разрушение тучных клеток и базофилов, то происходит выход БАВ=> аллергия => гиперчувствительность немедленного типа с анафилактическим шоком.
0,2% Ат сыворотки крови
Мономер. 2 активных центра, период полураспада 3 дня, М=180кДа, единицы седиментарности 7S. Находятся на поверхности В-лимфоцитов – мембранный IgD. Контролирует активность В-лимфоцитов, участвует в развитии аутоиммунных процессов.
18. Антителообразование: первичный и вторичный иммунный ответ. Иммунологическая память.
Первичный иммунный ответ – когда организм впервые встречается с Аг. Вторичный же наступает при повторном попадании Аг.
Иммунный ответ складывается из 2х периодов:
19. Типы иммунного ответа при инфекционных заболеваниях.
при бактериальных инфекциях, возбудители которых продуцируют экзотоксин (дифтерия, столбняк, ботулизм, газовая гангрена и др.), ведущую роль в формировании иммунитета играют образующиеся в организме антитела (антитоксины). Взаимодействие молекулы антитоксина и молекулы токсина может приводить к разным результатам:
1) к блокаде рецепторного участка молекулы токсина и вследствие этого к ограничению фиксации токсина на рецепторах клеток-мишеней; 2)к прямой нейтрализации каталитического (энзиматического,
токсического) участка молекулы токсина; 3)к образованию иммунного комплекса с нейтрализацией токсического, рецепторного и (или) транслокационного участков (субъединиц) токсина. Такие комплексы фагоцитируются и утилизируются клетками макроорганизма. Однако антитоксические антитела не блокируют адгезию бактерий на поверхности клеток-мишеней и их колонизацию. Вследствие этого искусственный антитоксический иммунитет не создает полной защиты макроорганизма и не предотвращает фиксацию бактерий на поверхности клеток-мишеней, колонизацию клеток и ткани, размножение бактерий.
При другой группе бактериальных инфекций (менингококковая инфекция, коклюш, легионеллез и др.) решающая роль принадлежит иммунному лизису и фагоцитозу бактерий. Образующиеся при этих заболеваниях IgG инициируют целый ряд антителоопосредованных биологических реакций: а) при фиксации AT на поверхности бактерий происходит активация комплемента по классическому варианту с образованием мембраноатакующего комплекса и последующим лизисом обнаженных участков мембран бактерий; б) опсонизация бактерий антителами с последующим взаимодействием Fc - фрагментов антител с Fc-рецепторами макрофагов, что приводит к усилению поглотительной и периваривающей активности фагоцита; в) образующийся комплекс «бактериальный АГ - AT - С 1,4,2,3В» фиксируется на рецепторах макрофагов к СЗВ, что также ведет к усилению поглотительной активности таких комплексов фагоцитами; г) нейтрализация антителами антифагинов, выделяемых бактериями наружу (фактор, препятствующий образованию фагоцитами псевдоподий; фактор, препятствующий миграции макрофагов) или входящих в состав их анатомических структур (М-протеин стрептококков, капсульные вещества пневмококков и др.).
Таким образом, формирующийся при этих заболеваниях иммунитет зависит от уровня циркулирующих IgG, содержания и активности компонентов комплемента, а также от функционального состояния фагоцитов.
К следующей группе бактериальных инфекций, со своими особенностями формирования иммунитета, относятся такие, возбудители которых являются внутриклеточными паразитами, способными длительно существовать внутри фагоцитов и даже размножаться в них (туберкулез, туляремия, бруцеллез, листериоз и др.).
Основными механизмами, позволяющими бактериям осуществлять внутриклеточный паразитизм, являются:
Для заболеваний с длительным внутриклеточным пребыванием и размножением возбудителя (персистенция) характерно образование гранулем в пораженной ткани. Такие бактерии становятся недоступными для действия антител и гуморальных антибактериальных факторов. Механизм саногенеза и формирования иммунитета при таких заболеваниях связан прежде всего с образованием цитотоксических Т-лимфоцитов, оказывающих киллинг-эффект на клетки-мишени, содержание в них паразитирующих бактерий и маркированных рецепторами ГКГС-1, презентирующих АГ этих бактерий.
20. Схема Th1 ответа. Эффекторы клеточного ответа.
Пусковым звеном в формировании клеточного типа иммунного ответа является продукция макрофагом, на территории которого идет процессинг антигена, интерлейкина ИЛ-12.
ГКГС-I макрофага презентирует пептид (антиген) Т-хелперу (CD4). Под влиянием ИЛ-12, продуцируемого этим же макрофагом, Th трансформируется в Тh1. у- IFN является важнейшим из цитоки нов, выделяемых Тh1. Он активирует контакт Т CD8 с рецептором ГКГС-I макрофага, на котором представлен тот же антиген. Выде ляемый Тh1 ИЛ-2 стимулирует пролиферацию таких уже антигенспецифических Т-цитолитических лимфоцитов. Главной функцией Тс в противоинфекционнои защите является уничтожение соматических клеток организма, внутри которых находится возбудитель, а ил поверхности- метка, комплекс ГКГС-I- антиген патогена. При прямом контакте с такой клеткой Тс выделяет гранулы, содержащие' белки- перфорин, гранзим. Перфорин встраивается в мембрану со матической клетки, образует в ней каналы «поры» и может действовать как мембраноатакующий белок. Гранзим (сериновые протеиназы) индуцирует один из вариантов апоптоза и гибель соматическом клетки вместе с находящимися в ней микробами.
21. Схема Th2 ответа. Эффекторы гуморального ответа.
При развитии гуморального ответа В-лимфоцит может получить микробный пептид разными путями. 1(а). Получение растворимого антигена из окружающей микросферы. Пептид не требует дополнительной обработки, так как это уже сделано другой клеткой. Происходит селекция антигеном В-лимфоцита (В-лимфоцитов), имеющего предсуществующие -глобулиновые рецепторы на своей поверхности, наиболее специфические к данному антигену. 2(б). Получение растворимого антигена с помощью γ-глобулинового рецептора, его дальнейший процессинг на территории В-лимфоцита и представления на мембране В-лимфоцита в комплексе с ГКГС– II В-лимфоцита. 3(в). Получение антигена с поверхности макрофага. Селекция В-лимфоцитов по -рецепторам. Процессинг антигена в В-лимфоцитах и его представление Т-лимфоцитам. На рис 40 представлена схема этого процесса.
ГКГС– II макрофага презентирует антиген Т-хелперу (CD4). Под влиянием Ил-4, продуцируемого нейтрофилами, тучными клетками, базофилами, эозинофилами Тh трансформируется в Тh2 индуцирующих гуморальный тип иммунного ответа. Важнейшими из интерлейкинов, продуцируемых этими лимфоцитами, являются ИЛ-4,5,6,10, резко стимулирующие пролиферацию избранных в результате селекции В-лимфоцитов. Синтезируемые трансформированными В-лимфоцитами (плазмоцитами) антитела специфичны к данному антигену. Гуморальный тип ответа наиболее важен в отношении внеклеточно расположенных микробов. Антитела усиливают их поглощение и переваривание фагоцитами.
22. Антитоксический иммунитет, его особенности.
При бактериальных инфекциях, возбудители которых продуцируют экзотоксин (дифтерия, столбняк ботулизм, газовая гангрена и др.) ведущую роль в формировании иммунитета играют образующиеся в организме антитела (антитоксины). Взаимодействие молекулы антитоксина и молекулы токсина может приводить к разным результатам:
а). Блокаде рецепторного участка молекулы токсина и, вследствие этого, ограничению фиксации токсина на рецепторах клеток-мишеней;
б). Прямой нейтрализации каталитического (энзиматического, токсического) участка молекулы токсина;
в). образованию иммунного комплекса с нейтрализацией токсического, рецепторного и (или) транслокационного участков (субъединиц) токсина. Такие комплексы фагоцитируются и утилизируются клетками макроорганизма. Однако антитоксические антитела не блокируют адгезию бактерий на поверхности клеток-мишеней и их колонизацию. Вследствие этого, искусственный антитоксический иммунитет не создает полной защиты макроорганизма и не предотвращает фиксацию бактерий на поверхности клеток-мишеней, колонизацию клеток и ткани, размножение бактерий.
23. Антивирусный иммунитет и его особенности.
Особенности противовирусного иммунитета обусловлены своеобразием анатомического строения вирусов, сравнительно небольшим набором антигенов их оболочек, возможностью дрейфа поверхностных антигенов (белков), абсолютным паразитизмом вирусов, особенностью их взаимодействия с чувствительными клетками.
В макроорганизме вирус может находиться в различных состояниях:
a) внеклеточно (вирион);
b) внутриклеточно, на разных стадиях быстрого или медленного продуктивного взаимодействия с чувствительной клеткой (вирус);
c) быть интегрированным в геном клетки-мишени (непродуктивное взаимодействие, провирус).
Соответственно этим основным состояниям вируса формирующийся противовирусный иммунитет направлен на нейтрализацию и удаление вируса и его антигенов из организма, что достигается с помощью антител, а также на уничтожение собственных инфицированных вирусом клеток-мишеней цитотоксическими Т-лимфоцитами (Тс).
Образующиеся при вирусных инфекциях антитела IgG могут участвовать в разных биологических реакциях.
1. Нейтрализация инвазивных свойств вирионов.
2. Антителоопосредованный комплемент-зависимый цитолиз зараженных вирусом клеток-мишеней
3. Антителоопосредованный цитолиз клеток-мишеней макрофагами и гранулоцитами при выделении ими в момент контакта с пораженной клеткой гранзимов и цитолизинов
24. Механизмы ускользания бактерий от иммунных реакций организма.s
Чтобы закрепиться и размножиться в той или иной среде организма, бактерии должны выстоять против биоцидных и биостатических факторов, которые в разных количествах и сочетаниях представлены в секретах мукоидного тракта. Фактически, патогенные микробы патогенны именно благодаря своей способности обходить в известной мере механизмы защиты организма от инфекции.
Среди паразитов слизистых оболочек распространена способность к продукции IgA-протеаз, которые расщепляют IgA-антитела, лишая их антиадгезивного эффекта. Многие бактерии нейтрализуют лизоцим, инактивируют оксиданты и другие потенциально вредные начала, продуцируют сидерофоры, конкурируют с лактоферрином за ионы железа. Удивительной стойкостью обладает Helicobacter pylori: он активно персистирует в желудке, нейтрализуя вокруг себя кислую среду благодаря высокой уреазной активности.
Размножаясь в организме, микробы должны противостоять фагоцитозу. Бактерии оказывают сопротивление на всех этапах фагоцитоза. Находясь внутри клеток, микробы не подвергаются действию антител, лизоцима, комплемента и других факторов защиты. В то же время клетки, фагоцитирующие микробы, могут мигрировать, способствуя распространению микробов по организму. Выживание фагоцитированных микроорганизмов могут обеспечить различные механизмы. Одни патогенные агенты способны препятствовать слиянию лизосом с фагосомами (токсоплазмы, микобактерии туберкулеза). Другие обладают устойчивостью к действию лизосомных ферментов (гонококки, стафилококки, стрептококки группы А и др.), третьи после эндоцитоза покидают фагосому, избегая действие микробицидных факторов (риккетсии и др.). К веществам с антифагоцитарной активностью относятся капсульные полисахариды и полипептиды микробов, К- и Vi-антигены, входящие в состав микрокапсул энтеробактерий; кордфактор, возбудителей туберкулеза; слизистое вещество Pseudomonas aerugenosa, М-протеин β-гемолитических стрептококков группы А, А-протеин стафилококков и другие структуры микробных клеток. Все они так или иначе создают механический барьер, экранирующий области связывания микробов с рецепторами фагоцитирующих клеток, т.е. препятствующий фагоцитозу. Антифагоцитарные свойства микробов обусловлены также образованием ими веществ, подавляющих хемотаксис фагоцитов; способных вызывать лизис фагоцитирующих клеток (лейкоцидины); образовывать каталазу и супероксиддисмутазу, которые препятствуют действию перекисных радикалов фагоцитирующих клеток и т.д. Все это препятствует фагоцитозу или делает его незавершенным.
Ряд микроорганизмов могут противодействовать эффектам комплемента. Так, грамотрицательные бактерии в наружном слое клеточной стенки имеют ЛПС с длинными О-специфическими боковыми полисахаридными цепями, выступающими из мембраны наружу. Они эффективно активируют комплемент, но локализуют МАК на таком удалении от ЦПМ, что опсонизация и лизис невозможны.
Ряд микроорганизмов устойчивы к действию комплемента за счет присутствия на их поверхности молекул, препятствующих альтернативной активации комплемента. Микроорганизмы могут экспрессировать молекулы, подавляющие активацию комплемента (белок А стафилококка).
В развитии инфекционного процесса определенную роль может играть антигенная мимикрия (от англ. mimicry – подобный), т.е. сходство антигенных детерминант у микроба и организма хозяина, в результате чего микроб не распознается иммунной системой как чужеродный, что способствует его сохранению (персистенции) в организме. Другим механизмом, позволяющим микробам «уходить» от действия специфических факторов иммунной системы, является их способность в процессе размножения в организме изменять свою антигенную структуру (возбудители малярии, трипаносомы, боррелии и др.).
Вирусы также обладают разнообразными свойствами защиты от иммунной системы. Наиболее эффективно этому служит антигенная изменчивость, характерная для многих вирусов (гриппа, ВИЧ, ящура и др.). Гуморальный иммунитет к этим вирусным инфекциям сохраняется лишь до появления нового сероварианта возбудителя, что не позволяет рассчитывать на долговременный эффект вакцинации. Некоторые вирусы используют связанные с клеточными мембранами компоненты комплемента в качестве рецепторов для усиления проникновения в клетку. Такие вирусы как ВЭБ и аденовирусы способны противодействовать эффекту интерферона, другие обладаю генами, кодирующими синтез белков – аналогов цитокинов или цитокиновых рецепторов.
25. Иммунокомпетентный и иммунокомпрометированный организм.
Пациентов с нарушениями функций иммунной системы, которые приводят к частым вирусным и бактериальным инфекциям, принято называть иммунокомпрометированными.
Термин «иммунокомпрометированный пациент» применим к различным контингентам населения:
• лицам, проживающим или работающим в экологически неблагоприятных условиях и подвергающихся постоянному воздействию радиационного, химического и других факторов;
• лицам определенных возрастных групп (в частности, пожилого и старческого возраста);
• лицам определенных профессий (например, подвергающихся постоянному стрессу (летчики, подводники и др.), сверхвысоким физическим нагрузкам, высоким и низким температурам и др.);
• больным, перенесшим тяжелые инфекции или травмы, и др.
Человек из группы «иммунокомпрометированные пациенты» при определенных неблагоприятных условиях может стать больным с признаками ВИН (вторичной иммунной недостаточности), для которого всегда характерно присутствие клиниqческих проявлений — повышенная инфекционная заболеваемость и необходимость включения в комплексную терапию иммуномодулирующих средств. При этом изменения в иммунной системе обнаруживается не всегда — примерно в 30% случаев. Иммунокомпрометированный пациент может иметь изменения в иммунном статусе, но при этом оставаться «здоровым» человеком, с высокой трудоспособностью и, конечно, не требующим назначения иммуностимуляторов.
26. Реакция агглютинации, ее разновидности, механизм и техника постановки.
Реакция агглютинации применяется в лабораторной практике для идентификации выделенных микроорганизмов или для обнаружения специфических антител в сыворотке крови.
Механизм реакции основан на взаимодействии детерминантных групп антигена с активными центрами иммуноглобулина в электролитной среде. Реакции протекают в две фазы – соединение антигена с антителом, вторая фаза – выделение в осадок образовавшегося комплекса АГ+АТ. Характер осадка зависит от природы антигена: жгутиковые бактерии дают крупнохлопьевый осадок, безжгутиковые и бескапсулярные – мелкозернистый, капсульные – тяжистый (рис. 41).
Существуют два способа постановки реакции агглютинации: 1) пластинчатый и 2) пробирочный. Пластинчатый метод является качественной реакцией и служит для предварительного определения вида микроба. Пробирочный метод используется для определения количественного содержания антител, при этом в пробирках ставится развернутая реакция агглютинации.
При положительной реакции на дне пробирки образуется осадок (агглютинат). За титр антител принимают последнее разведение, в котором наблюдается четкая агглютинация. Интенсивность оценивается по 4-х крестной системе. Постановка РА должна сопровождаться контролем сыворотки и антигена. Учет реакции агглютинации на стекле производится через 5 – 10 мин, пробирочной – через 18 – 20 часов.
27. Реакции пассивной агглютинации. Реакции ко-агглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Механизм и применение.
Реакция непрямой, или пассивной, гемагглютинации (РНГА, РПГА) — одна из наиболее чувствительных серологических реакций. Основана на способности AT взаимодействовать с Аг, фиксированными на различных эритроцитах, которые при этом агглютинируют. Для большей стабильности диагностикумов эритроциты формалинизируют.
Реакция коагглютинации, латексагглютинации.
Диагностикум содержит стафилококки для коагглютинации и частицы латекса для латексреакции, на поверхности которых находятся АТ-ла
В случае с фиксированными клетками стафилококка связывание АТ происходит за счет взаимодействия Рс-участками 1дС с молекулами протеина А. При получении латексных диаг-ностикумов используют химическое связывание АТ или АГ с полимерной основой частиц или взаимодействие, основанное на гидрофобных силах.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)
РНГА применяют в двух вариантах: с известными антигеном для обнаружения антител или с известными антителами для выявления антигена. Эта реакция специфична и применяют ее для диагностики заболеваний вызванных бактериями и риккетсиями. Для постановки РНГА используют эритроцитарные диагностикумы, приготовленные путем адсорбции на эритроцитах антигенов или антител в зависимости от цели исследования
положительных случаях степень агглютинации эритроцитов отмечают плюсами. Четырьмя плюсами оценивают реакцию, имеющую вид тонкой пленки из склеивающихся эритроцитов (зонтик), покрывающей дно пробирки, наличие пленки с фестончатыми кружевными краями обозначают двумя плюсами. За титр принимают предельное разведение исследуемого материала, вызывавшее агглютинацию эритроцитов на два полюса.
28. Реакция преципитации, ее разновидности, механизм и применение.
Феномен преципитации заключается во взаимодействии мелкодисперсных антигенов (преципитиногенов) с соответствующими антителами (преципитинами) и образованием преципитата (рис. 42). Постановку РП осуществляют двумя методами: в жидкой среде – по типу реакции флокуляции, кольцепреципитации или в плотной среде в агаре (геле). РП применяют в двух целях: выявление антигенов по известной иммунной преципитирующей сыворотке или антител с использованием известных антигенов. Существует много вариантов постановок реакции, но чаще всего используют следующие методики: реакция преципитации в геле по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия по Манчини, реакция иммуноэлектрофореза, реакция флокуляции, кольцепреципитации.
Реакция преципитации в геле по Оухтерлони. Для постановки реакции используют 1% агар Дифко, который разливают расплавленным на предметные стекла или чашки Петри слоем толщиной 0,5 см. В застывшем агаре вырезают лунки диаметром 5 мм специальным приспособлением. В одну лунку помещают взвесь, содержащую исследуемый антиген, в другую – иммунную сыворотку. Антиген и антитела диффундируют в питательную среду, вступают в иммунную реакцию и образуют полосы преципитации. Учет реакции проводят предварительно через 4 часа, окончательно – через 24–48 часов. Реакцию Оухтерлони можно использовать для определения токсичности бактерий, титра антител, активности стандартных диагностикумов или иммунных специфических сывороток
29. Феномен вирусной гемагглютинации, применение и механизм реакции гемагглютинации (РГА). Реакция торможения гемагглютинации (РТГА), применение и механизм
В основе РГА лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных антигенов. В качестве исследуемого материала при гемагглютинации используют аллантоисную, амниотическую жидкость, суспензию хорионаллантоисных оболочек куринных эмбрионов, взвеси и экстракты из культур или органов животных, зараженных вирусами, нативный инфекционный материал. РГА не является серологической, поскольку происходит без участия иммунной сыворотки .В реакции используются эритроциты животных, птиц, человека I (0) группы крови.
Для постановки ориентировочной РГА на предметное стекло наносят каплю 5% взвеси эритроцитов и каплю испытуемого материала, тщательно смешивают. При положительном результате через 1-2 минуты макроскопически наблюдают появление хлопьевидной агглютинации эритроцитов.
Для постановки РГА в развернутом ряду в лунках полистероловых планшетов готовят двукратно возрастающие разведения исследуемого материала на физиологическом растворе в объёме 0,5 мл. Во все пробирки вносят по 0,5 мл 0,25 - 1% взвеси эритроцитов. Результаты учитывают после полного оседания эритроцитов в контроле (эритроциты + физиологический раствор). Реакцию учитывают по характеру осадка эритроцитов. В положительных случаях степень агглютинации отмечают плюсами. Четырьмя плюсами оценивают реакцию, имеющую вид тонкой пленки из склеившихся эритроцитов, покрывающей дно пробирки (зонтик), реакцию с просветами в пленке отмечают тремя плюсами, наличие пленки с фестончатыми кружевными краями из склеившихся эритроцитов обозначают двумя плюсами, хлопьевидный осадок эритроцитов, окруженный зоной комочков агглютинированных эритроцитов соответствует одному плюсу. Резко очерченный осадок эритроцитов, неотличимый от контроля показывает отсутствие агглютинации. За титр принимают предельное разведение исследуемого материала, вызвавшее агглютинацию эритроцитов на два плюса.
При положительном результате РГА исследование продолжают, определяя тип выделенного вируса с помощью реакции торможения гемагглютинации типоспецифическими сыворотками.
РТГА основана на свойстве антисыворотки подавлять вирусную гемагглютинацию, так как нейтрализованный специфичными антителами вирус утрачивает способность агглютинировать эритроциты. При ориентировочном типировании вирусов используют капельный метод на стекле. Для окончательного установления типовой принадлежности выделенного вируса и титрования антител в сыворотках ставят развернутую РТГА в пробирках или в лунках. С этой целью готовят двухкратные разведения сывороток на физиологическом растворе и разливают по 0,25 мл. К разведениям сыворотки прибавляют по одной капле материала, содержащего вирус и по одной капле 1% взвеси эритроцитов.
При использовании РТГА для определения типа вируса, используют типоспецифические сыворотки, которые добавляют к равному объему рабочего разведения антигена. Типовую принадлежность выделенного вируса устанавливают по специфической иммунной сыворотке, показавшей наивысший титр антител к этому вирусу.
РГА и РТГА широко применяется для диагностики вирусных инфекций (клещевой энцефалит, грипп и др.) с целью обнаружения специфических антител и для идентификации многих вирусов по их антигенам.
30. Реакция нейтрализации (РН) с использованием лабораторных животных (РБН) и культуры ткани (метод цветной пробы). Механизм и применение.
Реакция нейтрализации вируса (РН) является одной из основных серологических реакций, широко используется для диагностики различных вирусных болезней, она наиболее специфична и высоко чувствительна, служит эталоном при оценке других реакций в вирусологии.
Сущность РН заключается в том, что при вирусных болезнях в крови появляются вирусонейтрализующие антитела, которые при взаимодействии с вирусом (при смешивании вируса со специфической сывороткой), как в организме так и вне его (in vitro), способны обезвреживать его инфекционные свойства и способность вызывать заболевание у чувствительных лабораторных животных, куриных эмбрионов или вызывать цитопатогенные действия (ЦПД) в культурах ткани. Ставят РН на лабораторных животных, куриных эмбрионах или культурах ткани в зависимости от того, какая из этих живых моделей является чувствительной для данного вируса. Обычно используют ту модель, на которой выделяли вирус и к которой вирус уже адаптировался и проявляет четко выраженный инфекционный эффект. Механизм реакции до сих пор окончательно не выяснен. Некоторые авторы его рассматривают как явление, аналогичное воздействию антитоксина на токсин, другие же - как блокаду рецепторов вируса и восприимчивых клеток антителами сыворотки.
31)Серологические реакции с использованием метки. Реакция иммунофлюоресценции (прямая и непрямая РИФ), иммуноферментный анализ (ИФА), радиоиммунный анализ (РИА). Механизм реакций.
Применяют в двух направлениях:
1)выявление антител в сыворотке крови обследуемого с диагностической целью при наличии набора известных антигенов.
2)Определение видовой, родовой, типовой принадлежности микроорганизма (иди его антигенов) к известным иммунным сывороткам. Иммунные сыворотки должны быть строго специфичными.
РИФ
Это метод экспресс-диагностики для определения возбудителя
• Прямая
Стекло с Антигеном+Сыворотка (антитела, меченные флюорохромом), промывание, получаем комплекс АГ+АТ. Смотрим стекло под микроскопом, при положительной реакции видим свечение.
• Непрямая
Стекло с АГ + немеченая сыворотка с АТ, промывание, затем добавляем меченную сыворотку (антиантисыворотка), опять промываем, получаем комплекс АГ + АТ + антиантисыворотка, смотрим под микроскопом, при положительной реакции также видим свечение.
ИФА
Точность до 70%, твердофазный метод, определяет либо АГ, либо АТ.
Для опред-я АГ
АТ + АГ, промывание, + ферменты АТ, промывание, + субстрат для фермента = окрашивание. (при положительном рез-те изменяется цвет окрашивания хромогена)
Для опред-я АТ
АГ + АТ, промывание, + антиантисыворотка, промывание, + субстрат для фермента = окрашивание
РИА
Один из самых чувствительных методов. Наличие иммунного комплекса опред-ся с помощью +радиоактивной метки, введённой в состав одного из его компонентов – АГ или АТ. Необходимые компоненты: высокоочищенные АГ или АТ, конъюганты меченных радиоактивными изотопами антигенов и антител (обычно метят радиоактивным йодом). При конкурентном РИА на поверхности полистероловых лунок сорбируются АТ, потом к ним добавляется исследуемый материал, содержащий специфический к ним АГ. После образования комплекса добавляют меченный АГ. Он будет реагировать с той частью активных центров иммобилизированных антител, которые остались незаблокированными антигенов исследуемого материала. По сравнению с контролем расход меченного АГ будет тем меньше, чем больше заблокированы иммобилизированные АТ, на что укажет радиоактивность жидкой части реагируемой смеси.
Варианты твердофазного РИА
1. Прямая адсорбция АГ, выявление специфических АТ
2. Прямая адсорбция АТ, выявление специфических АГ
3. Конкурентный вариант для выявления АГ
32) Иммуноблотинг. Механизм и применение.
Иммуноблотинг— метод идентификации АГ (или AT) с помощью соответствующих известных сывороток (или АГ). Первоначально электрофорезом в полиакриловом геле выделяют АГ вируса. Затем на полосы преципитата накладывают носитель (нитроцеллюлозную плёнку или активированную бумагу) и продолжают электрофорез. После чего на плёнку наносят сыворотку пациента и инкубируют.
После отмывания несвязавшихся AT (при их наличии) проводят ИФА — на плёнку наносят антисыворотку к Ig человека, меченную ферментом, и хромогенный субстрат, изменяющий окраску при взаимодействии с ферментом. При наличии комплексов Аг-АТ-антисыворотка к lg на носителе появляются окрашенные пятн а
33) Типы вакцин. Получение живых, убитых, субъединичных и рекомбинантных вакцин. Проверка их безвредности, реактогенности и иммуногенности.
1. Живые вакцины содержат ослабленный живой микроорганизм. Примером могут служить вакцины против полиомиелита, кори, свинки, краснухи или туберкулеза. Они способны размножаться в организме и вызывать выработку защитных факторов, которые обеспечивают невосприимчивость человека к патогену. Утрата вирулентности у таких штаммов закреплена генетически, однако у лиц с иммунодефицитами могут возникнуть серьезные проблемы.
2. Инактивированные (убитые) вакцины (например цельноклеточная вакцина против коклюша, инактивированная вакцина против бешенства), представляют собой патогенные микроорганизмы, инактивированные (убитые) высокой температурой, радиацией, ультрафиолетовым излучением, спиртом, формальдегидом и т.д. Такие вакцины реактогенны и в настоящее время применяются редко (коклюшная, против гепатита А).
3. Химические вакцины содержат компоненты клеточной стенки или других частей возбудителя.
4. Анатоксины - это вакцины, состоящие из инактивированного токсина продуцируемого бактериями. В результате специальной обработки токсические свойства его утрачиваются, но остаются иммуногенные. Примером анатоксинов могут служить вакцины против дифтерии и столбняка.
5. Рекомбинантные вакцины получают методами генной инженерии. Суть метода: гены болезнетворного микроорганизма, отвечающие за синтез определенных белков, встраивают в геном какого - либо безвредного микроорганизма (например кишечная палочка). При их культивировании продуцируется и накапливается белок, который затем выделяется, очищается и используется в каяестве вакцина. Примером таких вакцин могут служить рекомбинантная вакцина против вирусного гепатита B, вакцина против ротавирусной инфекции.
6. Синтетические вакцины представляют собой искусственно созданные антигенные детерминанты (белки) микроорганизмов.
7. Ассоциированные вакцины. Вакцины различных типов, содержащие несколько компонентов (напимер АКДС).
34) Анатоксины. Получение анатоксинов. Адъюванты, механизм их действия
Анатоксины – обезвреженные токсины. Токсин обезвреживают формальдегидом (0,4 %) при 37—40 ОС в течение 4 нед. При таком режиме полностью утрачивается токсичность, но сохраняются антигенность и иммуногенность токсинов.
Получение анатоксина: культивирование токсигенного штамма (микроорганизм выделяет в среду экзотоксин); фильтрование через бактериальные фильтры; обезвреживание формалином; очистка и стандартизация; добавление адъюванта.
Анатоксины контролируют по основным показателям: остаточной токсичности, концентрации, стерильности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др. В практике применяются анатоксины против столбняка, дифтерии, ботулизма, газовой гангрены, стафилококковых инфекций.
Адъюванты - группа веществ, обладающих свойством повышать иммуногенность при добавлении их к АГ и вакцинам. Адъювантами могут быть: минеральные соединения; микробные структуры (белки, нуклеиновые кислоты, липополисахариды); синтетические вещества (полинуклеотиды, гликопептиды, полиоксидоний); цитокины и пептиды;
Соединения алюминия сорбируют АГ, длительно удерживают его вблизи от места инъекции, что обеспечивает лучшее взаимодействие с представляющими АГ клетками. Иммуногенность сорбированных препаратов повышается в сотни раз.
Механизмы действия адъювантов: создание «депо» АГ в месте введения вакцин; воспалительная реакция, активирующая иммунокомпетентные клетки; активация процесса захвата АГ и его переработки фагоцитами.
35) Получение лечебных иммуноглобулинов и антитоксических сывороток. Проверка их реактогенности и иммуногенности.
Иммуноглобулины – глобулины человека и животных, которые выполняют функции АТ. Главные компоненты препарата – IgG и небольшие концентрации IgA и IgM. Основное сырьё для изготовления – иммунная сыворотка животных, иммунизированная АГ, а также кровь иммунизированного человека. Выделяют Ig из сыворотки крови с помощью фракционирования сывороточных белков.
Антитоксические сыворотки – применяются для профилактики и лечения таких вирусных инфекций, в основе которых лежит отравляющее действие на организм продуктов жизнедеятельности микроорганизмов, те токсинов. В состав таких сывороток входят специфические АТ – анатоксины.
Реактогенность, т.е. побочные местные и общие реакции на введение сыворотки, оценивают на животных и при прививках людей. Иммуногенность проверяют на лабораторных животных и выражают в иммунизирующих единицах, т.е. в дозах антигена, защищающих 50% иммунизированных животных, зараженных определенным числом инфицирующих доз патогенного микроба или токсина.
36) Диагностические препараты. Антигенные препараты (диагностикумы, эритроцитарные диагностикумы, антигены).
Диагностические препараты относятся к иммунобиологическим препаратам, поскольку их действие основано на иммунологических принципах и реакциях. Диагностические препараты, системы и наборы широко используют для диагностики инфекционных и неинфекционных болезней, индикации и идентификации бактерий, вирусов, грибов и простейших, для определения иммунного статуса, аллергических и иммунопатологических расстройств, иммунологической совместимости тканей, иммунных взаимоотношений матери и плода и т.д.
Диагностикумы применяют для выявления специфических антигенов и антител, аллергенов, сенсибилизированных иммунокомпетентных клеток, факторов естественной резистентности, иммунорегуляторов. В соответствии с целевым назначением диагностических препаратов они содержат те или иные специфические иммунореагенты (антигены, антитела, аллергены, иммуномодуляторы, факторы естественного иммунитета и др.), которые используют для выявления объекта исследования в определенных реакциях или тест-системах. Эффект реакции в соответствии с характером иммунореагентов и механизма реакции регистрируют по физическим (например, мутность), химическим (например, изменение цветности) или клиническим (симптомы и проявления) показателям.
На основе перечисленных иммунологических реакций созданы сотни современных диагностических систем, с помощью которых диагностируют инфекционные (ВИЧ-инфекции, грипп, брюшной тиф, чума, холера, хламидиоз, вирусные гепатиты и др.) и неинфекционные (онкологические, аллергические, иммунопатологические и др.) болезни. Иммунологические методы диагностики специфичны, высокочувствительны и достоверны, поэтому находят широкое применение в медицине и экологии.
37)Диагностические сыворотки. Получение и применение. Способ получения адсорбированных агглютинирующих сывороток по Кастеллани
Диагностические сыворотки (диагностикумы) представляют собой взвесь убитых бактерий определенного вида. Например, брюшнотифозный диагностикум – это взвесь убитых бактерий
брюшного тифа. Диагностикумы предназначены для качественного и количественного определения соответствующих иммуноглобулинов в сыворотке крови с диагностической целью.
В настоящее время расширяются возможности получения эффективных и безопасных иммунобиологических препаратов с помощью генной инженерии. Она позволяет использовать в качестве источников необходимых веществ не организмы людей и животных, а новые искусственно созданные системы – специально культивированные клетки многоклеточных организмов.
Антитела синтезируются в лимфоцитах. Если «скрестить» лимфоциты с быстро делящейся раковой клеткой, то образуются клетки_гибридомы, имеющие свойства обоих «родителей». Из
них можно получать целые популяции генетически одинаковых клеток, которые быстро делятся (как раковые) и вырабатывают определенный вид антител (как лимфоцит). Такой клон позволяет получать любые количества антител определенного вида.
Методы приготовления и применения агглютинирую¬щих, адсорбированных сывороток.
В диагностике инфекционных болезней широко применя¬ются иммунные реакции при идентификации возбудителя: при установлении родовой, видовой и типовой принадлежности микроба (вируса). Для постановки таких реакций необходимы специфические диагностические сыворотки, которые в зависи¬мости от содержания соответствующих антител называются агглютинирующие, преципитирующие, гемо¬литические, противовирусные.
Агглютинирующие сыворотки. Агглютинирующую сыворотку получают иммунизацией кроликов (внутривенно, подкожно или внутрибрюшинно) взвесью убитых бактерий, начиная с дозы 200 млн., затем 500 млн., 1 млрд., 2 млрд., микробных тел в 1 мл, с интервалами 5 дней. Через 7—8 дней после последней иммунизации берут кровь и определяют титр антител. Титром агглютинирующей сыворотки называется то макси¬мальное разведение сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствую¬щим микроорганизмом.
Агглютинирующие сыворотки применяются при идентифи¬кации микроба в развернутой реакции агглютинации. Если изучаемый микроорганизм агглютинируется сывороткой до титра или до половины значения титра, его можно считать принадлежащим к тому виду, название которого указано на этикетке ампулы.
Неадсорбированные агглютинирующие сыворотки облада¬ют высоким титром — до 1 : 12 800 — 1 : 25 600.
Недостатком таких сывороток является то, что они способ¬ны давать групповые реакции агглютинации, так как они содержат антитела к бактериям, имеющим общие антигены в пределах семейства, группы и рода.
Поэтому в настоящее время большинство агглютинирую¬щих сывороток выпускаются адсорбированными, монорецепторными и адсорбированными поливалентными, содер¬жащими только типовые или видовые антитела и соответст¬вующими или определенному типу или виду микроорганизма. Эти сыворотки не подлежат разведению.
Для получения таких сывороток применяют метод Кастелляни — метод адсорбции, который состоит в том, что при насыщении агглютинирующей сыворотки родственны¬ми гетерогенными бактериями происходит адсорбция групповых антител, а специфические антитела остаются в сыворот¬ке. В зависимости от полноты истощения групповых агглюти¬нинов можно получить монорецепторные сыворотки — сыво¬ротки, имеющие антитела только к одному рецептору-антигену или адсорбированные, поливалентные, дающие реакции агглю¬тинации с двумя — тремя родственными бактериями, имею¬щими общий антиген, в отношении которого проводилась ад-сорбция.
Адсорбированные сыворотки применяют при идентифика¬ции выделенных возбудителей в реакции агглютинации на стекле (пластинчатый метод).
Агглютинирующие сыворотки наиболее широко применя¬ются при диагностике заболеваний, вызываемых бактериями семейства Enterobacteriaceae. Так, при идентификации эшерихий используются поливалентные и типовые ОК-сыворотки; при дифференциации сальмонелл — набор сывороток: агглю¬тинирующая адсорбированная поливалентная сальмонеллезная О-сыворотка (групп А, В, С, Д, Е) — для определения принадлежности к роду Salmonella, при положительном ре¬зультате — определяют отдельно с каждой сывороткой (входя¬щей в смесь) серологическую группу и в заключение опреде¬ляется серологический тип выделенного возбудителя с моно-рецепторными Н-сыворотками сальмонелл, входящих в данную группу.
38) Аллергия. Классификация гиперчувствительности по Джеллу и Кумбсу.
Классификация аллергических реакций по Джеллу и Кумбсу основана на их разделение по типу патогенетических иммунных механизмов развития. Выделяют 4 типа аллергических реакций (см. табл.).
Тип Название типа аллергической реакции Чем опосредована аллергическая реакция
I Анафилактические (реагиновые) реакции Иммуноглобулины Е, реже G4
II Цитолитические (цитотоксические) реакции Иммуноглобулины M, G
III Иммунокомплексные реакции Иммуноглобулины M, G
IV Клеточно-опосредованные реакции Сенсибилизированные Т-лимфоциты
Аллергические реакции I типа (Анафилактические, атопические или реагиновые реакции).
Анафилактические (реагиновые) реакции. Этот тип аллергических реакций связан со взаимодействием иммуноглобулинов Е (реже G4) с рецепторами тучных клеток и базофилов.
При активации клеток этого типа выделяется биологические амины и другие биологически активные субстанции. Под влиянием фармакологически активных веществ, выделяемых тучными клетками и базофилами, реализуется сложный ответ (анафилаксия). Этот тип аллергических реакций развивается в течение нескольких минут после поступления аллергена в организм и относится к реакциям немедленного типа. При этом типе реакций в сыворотке крови отмечается повышение уровня общего и специфических Ig-E.
Регуляция выработки иммуноглобулинов E зависит от равновесия между количеством цитокинов, регулирующих IgE-ответ. При нарушениях механизмов регуляции синтеза иммуноглобулинов E, сопровождающихся образованием их в чрезмерном количестве, развивается сенсибилизация организма.
Посредством такого механизма наиболее часто реализуются пищевая аллергия (особенно у детей раннего возраста), анафилактический шок, поллинозы, крапивница, атопическая бронхиальная астма, атопический дерматит, отек Квинке, аллергический ринит.
Аллергические реакции II типа (Цитолитические (цитотоксические) реакции).
Цитолитические (цитотоксические) реакции. Этот тип аллергических реакций развивается при взаимодействии IgM или IgG с антигеном, находящемся на поверхности мембраны клеток. При этом происходит активация комплемента по классическому пути. Комплемент повреждает мембраны совершенно нормальных клеток, приводя к их лизису (разрушению).
По типу цитотоксических реакций развивается лекарственная аллергия в виде лейкоцитопении, тромбоцитопении, гемолитической анемии и др. По этому механизму развивается гемолитическая болезнь новорожденных, аллергические гемотрансфузионные реакции.
Аллергические реакции III типа (Иммунокомплексные реакции).
Иммунокомплексные реакции. Развитие реакций этого типа происходит при накоплении в крови или тканях комплексов антигена и антител классов М и G. Иммуноглобулины этих классов способны активировать комплемент по классическому пути. Образование иммунных комплексов происходит и при нормальном иммунном ответе.
Патологической реактивности иммунной системы с формированием аллергических реакций по иммунокомплексному типу способствует поступление в кровь большого количества антигена, нарушение элиминации иммунных комплексов, повышенная проницаемость сосудов. Повреждающее воздействие на ткани при иммунокомплексных реакциях происходит путем активации комплемента, высвобождении лизосомальных ферментов, образовании супероксидных радикалов, активации калликреин-кининовой системы.
Иммунокомплексные аллергические реакции лежат в основе формирования таких заболеваний, как ревматоидный артрит, аллергический альвеолит, геморрагический васкулит, сывороточная болезнь, системная красная волчанка.
Аллергические реакции IV типа (клеточно-опосредованные реакции).
Клеточно-опосредованные реакции (реакции замедленного типа).Аллергические реакции этого типа проходят с участием Т-лимфоцитов. После представления антигена макрофагом Т-лимфоциту и признания Т-лимфоцитом антигена «не своим», происходит активация Т-лимфоцита, его размножение и дифференцировка. При этом образуется антигенспецифический клон Т-клеток.
Сенсибилизированные лимфоциты выделяют особые регуляторные вещества – лимфокины. Под воздействием лимфокинов развиваются острые воспалительные реакции, активируется фагоцитоз, хемотаксис макрофагов и моноцитов, тормозится миграция макрофагов из очага воспаления, происходит накопление лейкоцитов в очаге, формируется гранулематозное воспаление.
К реакциям этого типа относится контактный дерматит, инфекционно-аллергические бронхиальная астма и ринит, аллергические конъюнктивиты и др. Еще одним примером аллергической реакции 4 типа является туберкулиновая реакция.
39) IV тип гиперчувствительности (клеточноопосредованный), его роль в инфекционном процессе. Реализация механизмов клеточного типа аллергии в нестерильном иммунитете.
Аллергические реакции IV типа (клеточно-опосредованные реакции).
Клеточно-опосредованные реакции (реакции замедленного типа).Аллергические реакции этого типа проходят с участием Т-лимфоцитов. После представления антигена макрофагом Т-лимфоциту и признания Т-лимфоцитом антигена «не своим», происходит активация Т-лимфоцита, его размножение и дифференцировка. При этом образуется антигенспецифический клон Т-клеток.
Сенсибилизированные лимфоциты выделяют особые регуляторные вещества – лимфокины. Под воздействием лимфокинов развиваются острые воспалительные реакции, активируется фагоцитоз, хемотаксис макрофагов и моноцитов, тормозится миграция макрофагов из очага воспаления, происходит накопление лейкоцитов в очаге, формируется гранулематозное воспаление.
К реакциям этого типа относится контактный дерматит, инфекционно-аллергические бронхиальная астма и ринит, аллергические конъюнктивиты и др. Еще одним примером аллергической реакции 4 типа является туберкулиновая реакция.
40) Механизм кожно-аллергических реакций. Инфекционные аллергены как диагностические препараты
кзема и атопический дерматит. Атопический дерматит является обобщающим понятием, включающим многие формы кожных аллергических проявлений, которые могут иметь место у любого генетически предрасположенного к этому заболеванию человека. Атопия может проявляться в виде атопической бронхиальной астмы, аллергического риноконъюнктивита или атопического дерматита, который в зависимости от возраста больного имеет различные особенности. Как правило, начало заболевания в виде детской (атопической) экземы приходится на трехмесячный возраст. В 8 случаях из 10, появившись до 1 года, она сохраняется до нескольких лет. В 2 - х случаях из 3 - х ее проявления исчезают до 6 лет. Очень редко атопическая экзема детского возраста сохраняется на всю жизнь. Симптомы: Возможно формирование эритемы (покраснения кожи) и появление сыпи, состоящей из волдырей. Кожа может становиться сухой шершавой и шелушиться. Вначале эти изменения локализуются на лбу и щеках ребенка, а в дальнейшем распространяются на кожу волосистой части головы и подбородок. В возрасте 3 месяцев - 2 лет экзема способна приводить к нарушениям сна и повышению возбудимости, однако общее состояние ребенка не нарушается. Дети, страдающие экземой, обычно крупнее и тяжелее сверстников. До достижения ребенком двухлетнего возраста экзема ведет себя непредсказуемо, поражая то один, то другой участок тела. Картина окончательно складывается к 2 годам. Следующая фаза течения экземы охватывает возраст 4 - 10 лет, когда она приобретает характер почесухи(пруриго) - зудящей папулезной сыпи. Часто поверхность папул слущивается, оставляя чешуйки и обнажая подлежащие слои кожи. Иногда наблюдается слияние элементов сыпи. Сыпь располагается преимущественно на разгибательных поверхностях (под локтями и коленями, ниже шеи). Встречается также форма экземы, характерная для подростков и взрослых (пруриго Безнира). Зуд изменяется по интенсивности, иногда становится нестерпимым. Из - за расчесов на коже образуются скарификации и небольшие ранки, которые могут инфицироваться. Контактный дерматит Контактный дерматит возникает на тех участках тела, которые подвергались воздействию некоторых веществ. Таким образом, причиной этого вида дерматита является фактор внешней среды (в отличие от атопической экземы). Контактный дерматит вызывается различными веществами, которые можно объединить в четыре группы: лекарственные средства, косметические средства, одежда, профессиональные вредности. Примеры контактных факторов - Лекарственные факторы: антибиотики в виде мазей (пенициллин, левомицитин и т. д.); -Косметические факторы: моющие средства (мыла, шампуни и т. д.), ароматические составы (духи, дезодоранты), лосьоны для волос, лак для ногтей, декоративная косметика (грим) и т. д.; - Факторы одежды: стиральный порошок, умягчители, красители, синька, пуговицы, крючки, застежки, кожа, резина и полимеры, ювелирные украшения и бижутерия; - Профессиональные факторы: цемент, продукты, содержащие хром (красители, чернила, краски), клеи, пластинки, дерево экзотических пород и т. д.
Аллергические диагностические пробы
методы диагностики аллергии. Проводятся после того, как путем тщательного сбора анамнеза выявлен круг подозреваемых аллергенов. Пробы выполняют вне фазы обострения заболевания и не раньше чем через 2—3 нед. после перенесенной острой аллергической реакции, т.к. чувствительность организма к аллергену в течение этого времени снижается.
Различают кожные и провокационные А. д. п. Кожные пробы основаны на выявлении специфической сенсибилизации организма путем введения аллергена через кожу. При этом оценивают величину и характер развивающейся воспалительной реакции. Различают качественные и количественные кожные пробы. С помощью качественных кожных проб определяют наличие или отсутствие сенсибилизации к данному аллергену. Эти пробы используют при диагностике аллергических, а также некоторых инфекционно-аллергических (туберкулеза, бруцеллеза и др.) и паразитарных (гельминтозов) болезней. Количественные кожные пробы позволяют получить представление о степени сенсибилизации организма. С их помощью определяют минимальную концентрацию специфического аллергена, при которой он вызывает в сенсибилизированном организме видимую аллергическую реакцию. Этот метод называется аллергометрическим титрованием. С его помощью устанавливают дозу аллергена, с которой можно начинать специфическую гипосенсибилизацию (снижение уровня сенсибилизации) путем введения в организм аллергена.
В зависимости от методики проведения кожные пробы могут быть прямыми и непрямыми. При прямых кожных пробах аллерген вводят внутрикожно или повреждая эпидермис путем укола, царапины. При капельных и аппликационных прямых кожных пробах аллерген (обычно лекарственный препарат или вещество) наносят на неповрежденную кожу в виде капли или аппликации. Ответная кожная реакция считается положительной при появлении гиперемии, инфильтрации или волдыря. Она может возникнуть в течение 20 мин (немедленная реакция), через 6—12 ч (реакция переходного типа), через 24—48 ч (замедленная реакция). Тип ответной кожной реакции зависит от характера иммунологического механизма аллергической реакции (см. Аллергия). Среди прямых кожных проб различных видов наиболее чувствительной является внутрикожная, затем следуют скарификационная, укол, аппликационная, капельная.
К непрямым кожным пробам относится реакция Прауснитца — Кюстнера, при которой сыворотку крови больного вводят внутрикожно здоровому человеку и после фиксации антител на коже реципиента (через 24 ч) в то же место вводят аллерген. По развитию местной кожной реакции судят о наличии антител-реагинов в исследуемой сыворотке. Данная реакция не исключает возможности переноса с сывороткой крови возбудителя при наличии скрытой инфекции у донора, поэтому применение ее ограничено. Наиболее целесообразно выявлять антитела-реагины с помощью различных реакций иммунитета — иммуноферментного метода и др. (см. Иммунологические методы исследования).Выбор вида кожной пробы зависит от заболевания, предполагаемой степени чувствительности, характера аллергена, а также от реактивности кожи. Прием некоторых лекарственных препаратов (антигистаминных, седативных средств) резко уменьшает реактивность кожи, поэтому перед аллергологическим обследованием необходимо в течение 5—7 дней воздержаться от приема этих лекарственных средств.
В диагностике аллергических болезней нельзя полностью полагаться на кожные пробы и переоценивать их результаты. Постановку кожных проб и оценку их результатов проводит только специально обученный медперсонал.
При несоответствии данных аллергологического анамнеза и результатов кожных проб в период ремиссии показаны провокационные пробы. Эти пробы основаны на воспроизведении аллергических реакций введением аллергена в орган или ткань, поражение которых является ведущим в картине заболевания. Различают конъюнктивальные, назальные и ингаляционные провокационные пробы. Конъюнктивальная провокационная проба проводится путем закапывания аллергена в нижний конъюнктивальный мешок. Реакция считается положительной при появлении гиперемии конъюнктивы, слезотечения и зуда век. Назальную провокационную пробу осуществляют при аллергических ринитах и поллинозах: в одну половину носа закапывают аллерген, а в другую — контрольную жидкость. Реакция считается положительной при возникновении на стороне закапывания аллергена затрудненного носового дыхания и зуда. Ингаляционный провокационный тест применяют с целью этиологической диагностики бронхиальной астмы: с помощью аэрозольного распылителя больной вдыхает через рот раствор аллергена. Реакция считается положительной в случае снижения более чем на 15% жизненной емкости легких.
К провокационным пробам относятся также холодовая и тепловая пробы, используемые при холодовой и тепловой крапивнице (Крапивница).При отсутствии четких признаков заболевания проводят экспозиционную провокационную пробу. Она основана на непосредственном контакте больного с подозреваемым аллергеном в той среде, в которой больной обычно находится. Противоположной этой пробе является элиминационная проба — исключение из пищевого рациона предполагаемого аллергена, перевод больного, страдающего бытовой аллергией, в так называемую безаллергенную палату и др. Лейкоцитопеническую и тромбоцитопеническую провокационные пробы применяют в диагностике пищевой аллергии (Пищевая аллергия) и лекарственной аллергии (Лекарственная аллергия). В основе этих проб лежит снижение числа лейкоцитов и тромбоцитов в крови после введения больному испытуемого аллергена.
41) Роль I типа (анафилактического) и III типа (иммунокомплексного) аллергических реакций в развитии побочных эффектов серотерапии. Правила введения гетерологических сывороток и иммуноглобулинов.
Тип I (реагиновый) возникает при повторном введении в организм бензилпенициллина, стрептомицина, новокаина, витамина В1, различных вакцин и сывороток и характеризуется развитием аллергической реакции немедленного типа (анафилактический шок, приступ бронхиальной астмы или крапивница). Независимо от лекарственных средств этот тип реакции реализуется с участием IgE, фиксирующегося на рецепторах тучных клеток и базофилов и вызывающего их дегрануляцию, сопровождающуюся высвобождением большого количества медиаторов: гистамина, брадикинина, серотонина, медленно реагирующей субстанции анафилаксии и др. Тип III (иммунокомплексный) опосредуется через образование токсических иммунных комплексов, включающих иммуноглобулины (IgM, IgG), связывающие комплемент. Наиболее часто их обнаруживают в базальных мембранах сосудов и окружающих тканях. Активность иммунных комплексов и физиологическое состояние тканей определяют характер воспалительной реакции. Образование комплекса способно вызвать высвобождение гистамина, активацию кининовой системы, высвобождение вазоактивных аминов и агрегацию тромбоцитов с образованием микротромбов. В зависимости от локализации аллергического поражения могут развиться васкулиты, дерматиты, нефриты, альвеолиты. К лекарственных средств, вызывающим этот тип реакции, относят парацетамол, аймалин, ретинол, НПВС, изониазид, метотрексат, инсулин, пенициллины, сульфаниламиды, хинидин. При значительной активации комплемента возможно развитие даже анафилактического шока. III тип аллергической реакции является ведущим в развитии сывороточной болезни.
ля получения этих препаратов применяется сыворотка крови животных, иммунизированных тем или иным антигеном. Данная сыворотка содержит антитела, нейтрализующие токсины и размножение соответствующих микробов.Сывороточная болезнь характеризуется появлением следующих симптомов: - повышение температуры; - уртикарная сыпь; - пятнисто-папулезная сыпь; - зуд; - артрит, артралгия; - лимфаденопатия. Обычно они появляются на 7-10-й день после введения сыворотки. Антитела являются чужеродным белком для человека и способствуют более быстрому выведению специфических антител. В связи с этим для предупреждения сывороточной болезни лицам, получавшим препараты лошадиной сыворотки и имевшим в анамнезе аллергические реакции, назначаются специфические иммуноглобулины человека, а не препараты, сделанные 13 сыворотки крови животных. Для выявления сенсибилизации перед введением сыворотки производится проба с сывороткой в соотношении 1 : 100. Обычно проба прилагается и маркирована красным цветом. Разведенная сыворотка вводится строго внутрикожно в дозе 0,1 мл на сгибательной поверхности предплечья. Проба считается отрицательной при отсутствии реакции в месте введения через 20 минут или появлении гиперемии и отека меньше 1 см. Положительной считается реакция при наличии отека и гиперемии диаметром более 1 см. В случае отрицательной реакции пробы вводят 0,1 мл неразведенной сыворотки, а через 45 минут, в течение которых за больным наблюдают, при отсутствии реакции вводится оставшаяся часть необходимой доза сыворотки. В случае положительной кожной пробы сыворотку применяет по жизненным показаниям. Для предупреждения реакции на сыворотку в подобных случаях ее вводят в разведении 1 : 100 через 15-20 минут в дозировке 0,5, 2,0 и 5,0 мл, затем с теми же интервалами вводят подкожно неразведенную сыворотку в дозировке 0,1 и 1,0 мл. Если реакция отсутствует, вводится необходимая доза сыворотки на фоне средств противошоковой терапии. Сыворотка противодифтерийная концентрированная жидкая (лошадиная) Противодифтерийная сыворотка вводится по общепринятым правилам введения гетерологических препаратов в адекватных дозах в соответствии со сроками и формой болезни. Наиболее выраженный эффект регистрируется при ее введении с первых часов заболевания. При гипертоксических и геморрагических формах в случае несвоевременного введения (позднее 3 суток) сыворотка является неэффективной. При гипертоксических формах ее вводят внутривенно на фоне глюкокортикоидной и дезинтоксикационной терапии. При локализованных и распространенных формах дифтерии противодифтерийная сыворотка вводится 1 раз в сутки, при субтоксической — 2 раза в сутки. Продолжительность лечения противодифтерийной сывороткой составляет от 1 до 5 суток в зависимости от формы заболевания. При комбинированных формах дозы противодифтерийной сыворотки суммируются. Сыворотка противостолбнячная лошадиная Сыворотка применяется для экстренной профилактики столбняка. Нейтрализация токсина проводится введением антитоксической противостолбнячной сыворотки. С целью ограничения поступления токсина при ранах производят «обкалывание» ее противостолбнячной сывороткой в количестве 1000 — 3000 ME. Сыворотку необходимо вводить как можно раньше, так как токсин может фиксироваться клетками спинного и продолговатого мозга. Сыворотка вводится: - взрослым - 100 000 — 150 000 ME; - новорожденным — 20 000 - 40 000 ME; - детям - 80 000 - 100 000 ME. Антитоксическое действие длится в течение 3 недель и более. За больными обеспечивается наблюдение не менее 1 часа. Для экстренной профилактики столбняка проводят введение 0,5 мл столбнячного анатоксина. Непривитым проводится активно-пассивная иммунизация, при которой инъекцию столбнячного анатоксина в дозе 1 мл сочетают с введением 3000 ME противостолбнячной сыворотки по установленной схеме в другую часть тела. В дальнейшем вводится только анатоксин. Сыворотки противоботулинические типов А, В, Е лошадиные очищенные концентрированные Сыворотки применяются для нейтрализации свободно циркулирующего в крови ботулотоксина на 1—3-е сутки болезни, В случае, когда тип токсина не установлен, вводятся сыворотки 3 типов по установленной схеме после специфической гипосенсибилизации. Дозы и частота введения лечебных сывороток определяются тяжестью заболевания и динамикой клинических симптомов, 1 лечебная доза составляет: тип А — 10 ООО ME, тип В — ME, тип Е - 10 000 ME. С лечебной целью сыворотку предпочтительно вводить внутривенно капельно, предварительно разводить в 200 мл стерильного изотопического раствора. Сыворотка противогангренозная лошадиная очищенная концентрированная Применяется для лечения и экстренной профилактики газовой гангрены. Содержит по 10 000 ME антитоксина CI. Perbringes, С1. Ocdematiens и CI. Septicus. С лечебной целью вводится внутривенно капельно вместе с изотопическим раствором хлорида натрия в общей дозе до 150 000 МЕ/сутки. Сыворотка вводится после десенсибилизации по Безредко, Согласно прилагаемой инструкции сыворотку необходимо вводить вместе с глюкокортикоидами и антигистаминными препаратами для предупреждения анафилактического шока. Иммуноглобулин противолептоспирозный из сыворотки крови волов Используется для лечения больных с 8-летнего возраста. Содержит антитела к лептоспирам 6 серогрупп. Гамма-глобулин вводится внутримышечно: в первые сутки 10-15 мл, в последующие 2 суток — по 5-10 мл. Введение гамма-глобулина в ранние сроки снижает частоту и степень выраженности органных поражений. Иммуноглобулин противосибиреязвенный лошадиный Применяется наряду с антибиотикотерапией для лечения сибирской язвы. Назначается при легкой форме в дозе 20 мл, при среднетяжелых и тяжелых формах доза может достигать 400 мл. Иммуноглобулин против клещевого энцефалита лошадиный Применяется при отсутствии человеческого иммуноглобулина для экстренной профилактики клещевого энцефалита у взрослых. Гамма-глобулин антирабический лошадиный Препарат предназначен для экстренной терапии бешенства. Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови лошади, полученной риванол-спиртовым методом Представляет собой слабоопалесцирующую бесцветную жидкость или слабо-желтого цвета. Применяют вместе с антирабиской вакциной для предупреждения заболевания людей бешенством. Препарат вводят в первые 3 суток после укуса животного, зараженного бешенством. Дозировка антирабического иммуноглобулина составляет 40 МE/кг массы тела взрослого человека. Пример расчета. Мacca тела пострадавшего — 60 кг, активность иммуноглобулина — 200 мл в минуту. Доза введения = (масса тела пострадавшего х 40 ЕД) / 200 =2400 / 200 = 12 мл. Перед основным введением определяется чувствительность к чужеродному белку (лошади) путем пробы, разведенной в соотношении 1 : 100 с иммуноглобулином. Ампулы пробы маркированы красным цветом, остальные ампулы для последующего введения неразведенного иммуноглобулина маркированы синим цветом. Для постановки кожной пробы иммуноглобулин вводят в дозе 0,1 мл (разведен 1 : 100) внутрикожно в сгибательную поверхность предплечья. Проба считается отрицательной, если через 20 минут отек или покраснение в месте введения меньше 1 см. Положительной проба считается в том случае, если отек и покраснение достигают 1 см и более. Если реакция отрицательная, подкожно вводят 0,7 мм разведенного 1 : 100 иммуноглобулина. Если реакция отсутствует, приема вводят рассчитанную дозу с интервалом 10-15 минут иммуноглобулина из не вскрытых ранее ампул (препарат предварительно подогревают до 37° С). Наиболее эффективно введение иммуноглобулина в первые сутки после укуса. При положительной пробе или появлении аллергической реакции производят десенсибилизацию путем введения разведенного 1 : 100 препарата в дозе 0,5, 2,0, 5,0 мл с интервалом 15—20 минут внутримышечно, затем 0,1 неразведенного иммуноглобулина и спустя 30-60 минут всю дозу дробно в 3 приема с интервалом 10—15 минут. Перед первой инъекцией в подобных случаях вводятся антигистаминные препараты. После введения назначают пероральные препараты (димедрол и т. д.). Противопоказания отсутствуют. Пострадавшему, получившему противостолбнячную сыворотку, иммуноглобулин вводят без постановки внутрикожной пробы.