процесс борьбы между организмом человека и микроорганизмами болезнетворными микробами
Работа добавлена на сайт samzan.net:
Поможем написать учебную работу
Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
от 25%
Подписываем
договор
4. Инфекция (инфекционный процесс) в биологическом смысле - процесс борьбы между организмом человека и микроорганизмами, болезнетворными микробами.
Анамнез заболевания
При распознавании инфекционных болезней большое значение приобретает подробный расспрос больного. Какого бы совершенства не достигли клинико-лабораторные и инструментальные методы исследования, остается неизменным значение анамнеза. Осуществляя сложный диагностический поиск, врачу надо уметь слушать своего пациента, достигнуть психологической совместимости с ним. В этом плане трудно переоценить значение деонтологии.
Уже в самом начале диагностического процесса необходимы критический анализ, рациональная переработка фактов, отграничение основного, существенного от второстепенного и случайного. Приступая к осмотру, надо внимательно проследить все этапы болезни — от начальных проявлений до момента госпитализации, составить представление о характере исходных клинических проявлений.
Эпидемиологический анамнез
Большое значение приобретает экологическая сторона анамнеза, т. е. изучение условий, в которых человек живет, работает и заболевает. Внимательно изучая историю болезни пациента, нередко удается выявить источники инфекции, установить факторы ее передачи, механизм заражения. Переливания крови и ее препаратов, множественные парентеральные манипуляции, стоматологические процедуры в период, предшествующий желтухе, позволяют заподозрить вирусный гепатит В. При расспросе больных гепатитом А обычно удается установить, что незадолго до заболевания имело место общение с больными гепатитом.
Объективное исследование.
Обследование больного проводится по известной системе, которой врач придерживается в своей практической деятельности. Чтобы не пропустить на первый взгляд даже незначительные диагностически важные признаки, лучше всего руководствоваться общепринятой схемой, дающей представление о внешнем виде больного, лихорадочной реакции, характере кожных высыпаний, состоянии органов дыхания и кровообращения, пищеварительной и нервной систем. Диагноз устанавливается по совокупности данных, полученных с помощью всех методов.
Положение больного, внешний вид.
Лихорадка — одно из наиболее частых проявлений инфекционного процесса. Ее можно рассматривать как приспособительную реакцию, повышающую естественную резистентность организма.
Сыпь. При многих инфекционных болезнях наблюдаются разнообразные по характеру и происхождению изменения кожи и слизистых оболочек. Большое диагностическое значение имеет сыпь — очаговая реакция кожи на действие возбудителей или продуктов их жизнедеятельности (токсинов, аллергенов, антигенов).
Органы дыхания и кровообращения. При инфекционных заболеваниях нередко поражаются различные отделы дыхательных путей в виде ринита (риновирусные заболевания), ринофарингита (аденовирусные заболевания), ларингита (парагрипп), трахеита (грипп), бронхита (заболевания, вызываемые респираторно-синцитиальным вирусом).
Пищеварительная система. При многих инфекциях в патологический процесс вовлекается пищеварительная система.
Оценка клинических симптомов.
Собрав тщательный анамнез и окончив объективное исследование, врач выделяет ряд симптомов, на основании которых он и должен поставить диагноз. Многие признаки и симптомы являются общими для начальных периодов большой группы инфекционных заболеваний: головная боль, познабливание, повышение температуры, отсутствие аппетита, кашель, обложенный язык, вздутый живот.
5. Питательная среда — вещество или смесь веществ, применяемая для культивирования макро- и микроорганизмов.
Агар-агар — полисахарид, получаемый из определенных сортов морских водорослей. Он не является для микроорганизмов питательным веществом и служит только для уплотнения среды.
В воде агар плавится при 80— 100°С, застывает при 40—45°С.
Желатин — белок животного происхождения. При 25— 30°С желатиновые среды плавятся, поэтому культуры на них обычно выращивают при комнатной температуре. Плотность этих сред при рН ниже 6,0 и выше 7,0 уменьшается, и они плохо застывают. Некоторые микроорганизмы используют желатин как питательное вещество — при их росте среда разжижается. : а) основные (общеупотребительные) среды служат для культивирования большинства патогенных микробов. Это МП А, МПБ, бульон и агар Хоттингера, пептонная вода; б) специальные среды служат для выделения и выращивания микроорганизмов, не растущих на простых средах. Например, для культивирования стрептококка к средам прибавляют сахар, для пневмо- и менингококков — сыворотку крови, для возбудителя коклюша — кровь; в) элективные (избирательные) среды служат для выделения определенного вида микробов, росту которых они благоприятствуют, задерживая или подавляя рост сопутствующих микроорганизмов. Так, соли желчных кислот, подавляя рост кишечной палочки, делают среду элективной для возбудителя брюшного тифа. Среды становятся элективными при добавлении к ним определенных антибиотиков, солей, изменении рН.
6. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР або PCR) — експериментальний метод молекулярної біології, спосіб значного збільшення малих концентрацій бажаних фрагментів ДНК в біологічному матеріалі
Крім простого збільшення числа копій ДНК (цей процес називається ампліфікацією), ПЛР дозволяє проводити безліч інших маніпуляцій з генетичним матеріалом (введення мутацій, зрощення фрагментів ДНК), і широко використовується в біологічній і медичній практиці, наприклад для клонування генів, введення мутацій, виділення нових генів, секвенування, для створення і визначення генетично модіфікованих організмів, діагностики захворювань (спадкових, інфекційних), ідентифікації малих кількостей ДНК, встановлення батьківства.
Хід реакції
Зазвичай при проведенні ПЛР виконується 20—35 циклів, кожен з яких складається з трьох стадій
- Дволанцюгову ДНК-матрицю нагрівають до 94—96 °C (або до 98 °C, якщо використовується особливо термостабільна полімераза) на 0,5—10 хв., щоб ланцюги ДНК розділилися. Ця стадія називається денатурацією — руйнуються водневі зв'язки між двома ланцюгами. Іноді перед першим циклом проводять попереднє прогрівання реакційної суміші протягом 2—5 хв. для повної денатурації матриці і праймерів.
- Коли ланцюги розійшлися, температуру знижують, щоби праймери могли зв'язатися з одноланцюговою матрицею. Ця стадія називається відпалом (англ. annealing). Температура відпалу залежить від праймерів і зазвичай вибирається на 4—5°С нижче за їх температуру плавлення. Час стадії — 0,5—2 хв.
- ДНК-полімераза реплікує матричний ланцюжок, використовуючи праймер як затравку. Це так звана стадія елонгації. Температура елонгації залежить від полімерази. Полімерази Taq і Pfu, що найчастіше використовуються, найактивніші за 72 °C. Час елонгації залежить як від типу ДНК-полімерази, так і від довжини фрагмента, який ампліфікують. Середня швидкість елонгації — 1000 пар основ за 1 хв. Після закінчення всіх циклів часто проводять додаткову стадію фінальної елонгації, щоб добудувати всі одноланцюжкові фрагменти. Ця стадія триває 10—15 хв.