Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Министерство образования и науки Российской Федерации
Негосударственное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«Самарский медицинский институт «РеаВиЗ»
Нормальная физиология с основами анатомии
для студентов фармацевтического факультета
Лабораторный практикум
Самара
Все лабораторные (практические) работы выполняются по единой схеме, позволяющие сделать правильные выводы по проводимому исследованию.
План проведения конкретного исследования всегда включает одни и те же разделы:
Организация и правила выполнения лабораторных (практических) занятий
Программа обучения студентов по курсу «Нормальная физиология с основами анатомии» требует от студентов выполнения определенных правил по технике безопасности при работе с животными, колюще-режущими инструментами, электрооборудования, химическими реактивами и биологическими жидкостями.
Чтобы проведение учебных занятий проходило безопасно необходимо выполнять следующие требования:
Работа с кровью или другими биологическими жидкостями
Для профилактики инфицирования студент должен соблюдать следующие правила:
Мероприятия при ранениях, контактах с кровью и другими биологическими материалами
Любое повреждение кожи, слизистых оболочек, загрязнение их биологическими жидкостями человека или животных должна квалифицироваться как возможный контакт с материалом, содержащим ВИЧ или другой инфекционный материал.
Если контакт с кровью или другими жидкостями произошел с нарушением целостности кожных покровов (укол, порез) пострадавший должен сделать следующее:
В случае загрязнения кожи кровью или другой биологической жидкостью без повреждения покровов экспериментатора необходимо:
При попадании биологического материала на слизистые оболочки:
При попадании биологического материала на халат, одежду:
Аптечка для экстренной медицинской помощи должна содержать:
После ознакомления с правилами и получения инструктажа по технике безопасности студенты расписываются в тетради протоколов опыта, а также в «Журнале контрольных листов инструктажа студентов по технике безопасности».
Исследования проводятся как на животных (в основном это острые опыты), так и на людях (хронические исследования).
Большая часть работ выполняются на человеке, т.е. студенты становятся и исследователями и испытуемыми. В этих исследованиях изучаются функциональные показатели деятельности органов и систем человека в условиях покоя, физической и эмоциональной нагрузки. В то время вопросы изучения регуляции организма, механизма возбуждения и торможения центральной нервной системы будут изучаться на экспериментальных животных.
Значительная часть исследований будут проводиться на компьютере, часть аудиторных работ составляет просмотр и обсуждение учебных фильмов.
Лабораторный практикум
Работа №1. Общая физиология возбудимых тканей. Нерв. Синапс. Мышца.
Приготовление физиологических препаратов
(на лягушке). Острый опыт.
Цель работы: научиться методике приготовления физиологических препаратов для проведения в дальнейшем острых физиологических исследований.
Материально-техническое обеспечение опыта: лягушка, набор хирургических инструментов, круглый зонд, вата, электростимулятор с электродами, стеклянные стаканчики, физиологический раствор Рингера, 2 препаровальных столика, 2 лотка для чистых и использованного материала.
Ход работы
1. Обездвижьте лягушку. Используйте один из способов обездвижения лягушки (наркотизация с помощью газового эфирного наркоза; путем введения в подкожный лимфатический мешок миорелаксантов, путем разрушения головного и спинного мозга ножницами и круглым зондом.
2. При помощи ножниц и хирургического пинцета вскрывайте грудо-брюшную полость.
3. Пересечь брыжейку кишечника и выделить спинной мозг.
4. Пересечь ножницами позвоночник на 1-1,5 см ниже места отхождения нервов от позвоночника.
5. Захватив одной салфеткой за кожу со стороны спины, а другой салфеткой за позвоночник снимите кожу с лапок при помощи. Получился препарат двух задних лапок.
6. Приготовьте препарат одной лапки. Для этого необходимо удалить копчиковую кость ножницами. Затем под контролем зрения перережьте на 2 части позвоночник, лонное сочленение и мягкие ткани на 2 части не повреждая нервы.
7. Приготовление реоскопической лапки и нервно-мышечного препарата. Острым и тупым способом выделить нерв на всем протяжении от позвоночника до коленного сустава. Пересечь в верхней трети бедренную кость. Отпрепарировать мягкие ткани до коленного сустава и отсечь. Получился препарат «реоскопическая лапка». Точно также из 2-й лапки сделайте 2-1 препарат реоскопической лапки.
8. Из реоскопической лапки приготовьте «нервно-мышечный препарат». Для этого необходимо ножницами перерезать ахиллово сухожилие. Отпрепарировать икроножную мышцу до коленного сустава. Пересечь ножницами голень и удалить ее. Получился нервно-мышечный препарат. Положите его в раствор Рингера.
9. Зарисовать оба препарата, обозначьте его части и укажите, для каких целей он используется.
10. Чтобы проверить сохранность возбудимости препаратов, нанесите раздражение электрическим током от электростимулятора на нерв и мышцу препаратов. Наблюдается сокращение мышцы.
11. Сделайте вывод по данной работе.
Работа № 2. Действие различных раздражителей
на нерв и мышцу
Цель работы: изучение особенности действия различных раздражителей.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, раствор Рингера, 10% раствор соляной кислоты, 10% раствор едкого натра, кристаллы поваренной соли, экспериментальный столик.
Ход работы
Приготовить реоскопическую лапку. Положить ее на препаровальный столик, действовать попеременно на нерв и мышцу следующими раздражителями: 1) укол иглой; 2) сдавливание пинцетом; 3) надрез; 4) нагретая на пламени спиртовки игла; 5) кристалл поваренной соли (обязательно промыть раствором Рингера); 6) раствор соляной кислоты (то же самое); 7) раствор едкого натра (то же самое).
Зарисовать схему опыта. Результаты оформить в виде таблицы:
|
Наименование раздражителей |
Место раздражения |
Наблюдаемый эффект |
Отметить особенности действия различных раздражителей на нерв и мышцу и проклассифицировать раздражители. Сделать результаты.
Цель работы: сравнить возбудимость нерва и мышцы
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, раствор Рингера, стимулятор, электроды.
Ход работы
Приготовив реоскопическую лапку и уложив ее на препаровальный столик, подвести под нерв электроды, соединенные со стимулятором. Подать на нерв одиночные импульсы, постепенно увеличивая амплитуду до появления первых признаков сокращения мышцы. По шкале амплитуды заметить величину порогового импульса. Повторить определение порога раздражения для мышцы. Провести не менее трех последовательных определений и вычислить средние значения. Зарисовать схему установки. Cравнить возбудимость нервной и мышечной ткани. Сделать результаты.
Работа № 4. Биологический метод регистрации биоэлектрических явлений в возбудимых тканях
Цель работы: биологическим методом обнаружить биоэлектрические явления в тканях.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, раствор Рингера, «вилка» Гальвани (спай двух металлов), стеклянный крючок, препаровальный столик, стимулятор, электроды.
Опыт № 1. Первый опыт Гальвани
Ход работы. Приготовить препарат задних лапок лягушки, подвести одну браншу вилки Гальвани под поясничное сплетение, а другой коснуться мышц бедра. Наблюдается сокращение их.
Опыт № 2. Второй опыт Гальвани
Ход работы. Продолжить препаровку и приготовить реоскопическую лапку. Срезать поверхность икроножной мышцы в средней трети ножницами и набросить стеклянным крючком нерв так, чтобы он попал и на поврежденный и на неповрежденный участки мышцы. Наблюдается сокращение мышц.
Опыт № 3. Опыт Маттеучи
Ход работы. Приготовить вторую реоскопическую лапку. На икроножную мышцу этого препарата положить нерв первого. Раздражать нерв второго препарата током. Наблюдается сокращение мышц обоих препаратов – вторичный тетанус.
Опыт № 4. Опыт Келликера
Ход работы. Выделенное сердце лягушки подсушить фильтровальной бумагой и по длинной оси его набросить нерв препарата. Сокращения мышц его происходят в ритме сокращении сердца. Зарисовать схемы всех опытов. Объяснить причины сокращений мышц препаратов во всех опытах.
Работа № 5. Закон крутизны раздражения
Цель работы: выяснить значение крутизны изменений силы раздражителя.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, раствор Рингера, треножник с сеткой, спиртовка, химический стакан, стимулятор, электроды.
Ход работы
Приготовить две реоскопические лапки, одну из них опустить в стакан с раствором Рингера. Медленно нагревать до 40. Затем быстро опустить туда же второй препарат, наблюдать сокращение мышц последнего. Повторить опыт с электрическим раздражителем. Подведя электрод под нерв препарата, медленно увеличивать амплитуду. Отметить пороговый результат. Затем снова изменять силу тока от 0 и выше, но очень быстро. Отметить результаты. Зарисовать схемы установок. Отметить зависимость ответной реакции от крутизны нарастания силы раздражителя.
Работа № 6. Влияние отягощения на высоту сокраще ния мышцы и определение работы мышцы
Цель работы: выяснить характер влияний растяжения мышцы на величину работы, вычислить механическую работу мышцы при различных нагрузках, определить силу мышцы.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, раствор Рингера, костная клемма, влажная камера, ки мограф, стимулятор, провода, набор грузов, линейка, динамо метры.
Опыт № 1. Влияние отягощения на высоту сокращения мышцы
Ход работы. Приготовить нервно-мышечный препарат. Бедренную кость укрепить в клемме, а нерв уложить во влажную камеру на электроды, соединенные со стимулятором. Ахиллово сухожи лие мышцы соединить с миографом. Подобрать среднюю силу раздражения и не изменять ее во время всего опыта. Регистри ровать только высоту сокращения (барабан кимографа пере двигать рукой). Вызвать и записать одиночное сокращение ненагруженной мышцы. Передвинуть барабан на 2—3 мм, подве сить груз 5—10 г и снова произвести раздражение и запись. Повторять так с возрастающим грузом до тех пор, пока мышца не перестанет поднимать груз. Измерить высоту записанных сокращений и определить, при какой нагрузке высота была наибольшей. Вес груза, который мышца способна только при поднять, определяет абсолютную силу мышцы.
Опыт № 2. Определение механической работы мышц.
Ход работы. Вычислить механическую работу мышцы, выразив ее произ ведением веса на высоту укорочения мышцы. Высоту истинного укорочения мышцы определяют па основании правила подобия треугольников по формуле:
где Н – высота мышечных сокращений (на ленте кимографа).
z – длина рычажка миографа от оси вращения до конца пера.
I – длина рычажка миографа от оси вращения до места прикрепления мышцы.
Измерив все значения, составьте таблицу результатов:
|
Величина груза |
Высота сокращений мышцы |
Истинное укорочение мышцы |
Работа мышц |
Зарисовать полученные миограммы. Сделать результаты. Выводы.
Опыт № 3. Динамометрия
Ход работы. Силу мышц сгибателей кисти определяют ручным динамо метром. Испытуемого сажают на стул и просят кистью вытяну той вперед руки постепенно сжимать динамометр до максиму ма. На измерительной шкале прибора отмечается сила мышц в килограммах. Определение производят троекратно, выбирая наи большее значение. Для определения силы мышц разгибателей спины (становая сила) пользуются становым- динамометром. Испытуемый наступает на подставку прибора выпрямленными в коленных суставах ногами. Взявшись двумя руками за ручку динамометра, производит максимально возможное выпрямление туловища.
Работа № 7. Утомление и снятие утомления мышцы
Цель работы: изучить развитие процесса утомления и факторы, влияющие на него в изолированном нервно-мышечном препарате.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, раствор Рингера, костная клемма, влажная камера, сти мулятор, электроды, грузы, кимограф, миограф, растворы адре налина, хлористого кальция.
Ход работы. Приготовить нервно-мышечный препарат. Бедренную кость укрепить в клемме, а нерв уложить во влаж ную камеру на электроды, соединенные со стимулятором. Мыш цу соединить с миографом .и отяготить ее грузом в 5—10 г. По добрать силу тока, дающую хорошие сокращения. Нанося оди ночные раздражения с частотой 30—35 в мин., записать мио граммы. Наблюдать изменение миограмм (до полного утомле ния не доводить!). После 3—5 минутного отдыха снова записы вать миограммы до утомления. Не прерывая раздражений, об мыть мышцу раствором Рингера, снова утомить, подействовать раствором хлористого кальция, опять утомить, обмыть раство ром адреналина и после наступления утомления перенести элек троды с нерва на мышцу, Убедиться в способности мышцы хо рошо сокращаться. Записать результаты. Выводы.
Работа№8. Спинальный шок. Спинномозговые рефлексы.
Анализ рефлекторной дуги
Цель работы: изучить на лягушках спинальный шок, рефлекторную деятельность спиного мозга, проанализировать рефлекторную дугу.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, штатив с крючком, стимулятор, электроды, 0,5% и 1% растворы серной кислоты, фильтровальная бумага, стакан.
Опыт № 1. Спинальный шок
Ход работы. Произвести декапитацию лягушки, точно заметив время ее. Подвесить лягушку за нижнюю челюсть на крючок и через каждые 20-30 секунд наносить на одну из лапок механическое или электрическое раздражение. Наблюдать отсутствие рефлекторной деятельности (спинальный шок) и восстановление ее. Отметить время спинального шока. Зарисовать схему опыта. Дать определение спинального шока, описать причины возникновения его.
Опыт № 2. Рефлексы спинного мозга
Ход работы
Накладывая кусочек фильтровальной бумаги, смоченной в растворе серной кислоты, на кончики пальцев или голень лягушки, наблюдать защитный рефлекс сгибания. Раздражая тыльную поверхность стопы, наблюдать разведение пальцев или защитный рефлекс разгибания. Раздражая кожу спинки, бедра, брюшка, вокруг анального отверстия, наблюдать защитный потирательный рефлекс. После каждого раздражения следует обмыть лягушку в стакане воды. Зарисовать схему рецептивных полей изученных рефлексов. Дать определение рефлекса, рецептивного поля рефлекса, отметить характер спинномозговых рефлексов. Сделать результаты. Выводы.
Опыт № 3. Анализ рефлекторной дуги
Ход работы
Обратить внимание на одинаковую длину задних лапок висящей на крючке лягушки (нормальный тонус мышц). Провести круговой разрез кожи ниже коленного сустава и снять кожу с одной лапки. Приложить к ней кусочек фильтровальной бумаги, смоченной 0,5 % раствором серной кислоты. Рефлекс не возникает. Аналогичное раздражение другой лапки вызывает ее сокращение. На неповрежденной лапке обнажить и перерезать седалищный нерв. Обратить внимание на удлинение конечности после перерезки. Наблюдать отсутствие рефлекса в ответ на раздражение. Раздражать кожу между передними лапками. Наблюдать сгибание обеих передних и одной задней (с целым нервом) лапок. Разрушить зондом спинной мозг. Раздражать любые рецептивные поля. Наблюдать полное отсутствие рефлекторной деятельности. Зарисовать схему рефлекторной дуги. Дать определение рефлекторной дуги и ее звеньев. Отметить значение их для осуществления рефлекса. Описать зависимость тонуса мышц от связи с центральной нервной системой.
Цель работы: ознакомиться с клиническим методом исследования рефлекторной деятельности спинного мозга человека.
Для работы необходимы: испытуемый, неврологический молоточек.
Ход работы
Поза испытуемого должна быть удобной, без напряжения мышц. Его внимание должно быть отвлечено от процесса исследования. Раздражая молоточом рецептивное поле, вызывают соответствующий рефлекс. Результаты исследования занесите в таблицу:
|
Рецептивное поле |
Поза испытуемого |
Ответная реакция |
Афферентный нерв |
Сегмент спинного мозга |
Эфферентный нерв |
Рабочий орган |
|
Сухожилие 4-главой |
Сидя, положив ногу на ногу |
Разгибание голени |
||||
|
Ахиллово сухожилие |
Стоя на коленях, стопы отвисают |
Подошвенное сгибание |
||||
|
Сухожилие продольной мышцы стопы (провести рукояткой) |
То же |
Сгибание пальцев |
||||
|
Сухожилие 2-главой мышцы плеча |
Рука пассивно согнута в локте |
Сгибание в локтевом суставе |
||||
|
Сухожилие 3-главой мышцы плеча |
Рука в положении между пронацией и супинацией |
Разгибание руки в локтевом суставе |
||||
|
Головка луча |
Рука согнута в локтевом суставе и лучезапяст-ном суставах. Мышцы расслаблены. (держать за пальцы). |
Сгибание кисти |
||||
|
Кожа живота вдоль края ребер |
Лежа на спине |
Сокращение брюшных мышц |
||||
|
Кожа живота на уровне пупка |
То же |
Сокращение брюшных мышц |
||||
|
Кожа живота параллельно паховой складке |
То же |
Сокращение брюшных мышц |
Запишите названия и рефлекторные дуги исследованных рефлексов. Отметьте значимость их для клиники.
Работа № 10
Нервный центр и его свойства
Цель работы: определить время рефлекса и влияние силы раздражителя на него. Исследовать явления суммации и иррадиации возбуждения в спинном мозге.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, штатив с крючком, метроном или секундомер, химический стаканчик, большой стакан с водой, 0,1; 0,3; 0,5; 1% растворы серной кислоты, стимулятор, электроды, 0,1 % раствор стрихнина, шприц, колокол.
Опыт № 1. Определение времени рефлекса по Тюрку
Ход работы. Спинальную лягушку подвесить на штативе, опустить заднюю лапку в стаканчик с 0,1% раствором серной кислоты. Отметить время погружения и время появления рефлекса (одергивание лапки). Повторить опыт три раза, обмывая после каждого эффекта лапку водой. Взять средний результат. Проделать то же самое с 0,3; 0,5; 1% растворами серной кислоты. Дайте определение времени рефлекса. Отметьте причины, изменяющие его.
Опыт № 2. Последовательная суммация возбуждения
Ход работы. Опустить в стакан с водой электроды от стимулятора. Погрузить туда же заднюю лапку лягушки. Посылать слабые одиночные раздражения. Сгибания нет. Увеличить частоту, не меняя силы. Возникает рефлекс сгибания. Дайте определение явления суммации. Сделать результаты. Выводы.
Опыт № 3. Иррадиация возбуждения
Ход работы. Слабо сдавливать пинцетом кожу в рецептивном поле рефлекса сгибания задней лапки. Наблюдать сгибание ее. Увеличить силу раздражения. Наблюдать последовательное вовлечение в реакцию второй задней и передних лапок.
Опыт № 4. Иррадиация возбуждения при повышении возбудимости центральной нервной системы
Ход работы. Ввести под кожу спины лягушки 0,3-0,5 мл 0,1% раствора стрихнина, посадить лягушку под колокол. Наблюдать изменения в поведении лягушки: передвижение на широко расставленных лапах, учащение и углубление дыхания, появление ответной реакции на любые раздражения, сначала в виде вздрагивания, а потом судорог. Судороги носят клоникотонический характер. В результате снятия внутрицентрального торможения, улучшается проведение возбуждения по центральной нервной системе. Дайте определение явления иррадиации возбуждения в центральной нервной системе.
Работа № 11
Торможение в центральной нервной системе
Цель работы: исследовать некоторые виды торможения в центральной нервной системе.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, глазной пинцет, ножницы со скальпелем, марлевая салфетка, ватные тампоны, фильтровальная бумага, кристаллы поваренной соли, маленький и большой стаканы, 0,3 и 0,5% растворы серной кислоты, раствор Рингера, стимулятор, электроды.
Опыт № 1. Сеченовское торможение
Ход работы. Для постановки опыта И. М. Сеченова следует приготовить таламическую лягушку. Завернуть интактную лягушку в марлевую салфетку, оставив открытой голову и взять ее в левую руку. Указательный палец левой руки под подбородочную область (создание упора). Скальпелем сделать поперечный разрез кожи позади ноздрей. От концов его ножницами продольно разрезать кожу от глаз до бугров черепа и снять лоскут. В той же последовательности разрезать кости черепа. Подсушить обнажившийся мозг. Сделать глазным скальпелем поперечный разрез по передней границе зрительных бугров. Переднюю часть мозга удалить и подвесить таламическую лягушку на штатив. Определив время рефлекса по Тюрку, подсушить срез мозга и наложить на него кристаллик поваренной соли. Снова определить время рефлекса. Снять кристаллик, обмыть мозг раствором Рингера, подсушить его и опять определить время рефлекса.
Опыт № 2. Спинномозговое торможение
Ход работы. Из таламической лягушки приготовить спинальную. После прохождения спинального шока опустить заднюю лапку в серную кислоту, одновременно сильно сдавливая пинцетом другую. Рефлекс сгибания не возникает. Прекратить сдавливание. Рефлекс появляется. Определить время рефлекса по Тюрку. Туго перевязать ту же лапку под коленом и снова определить время рефлекса на ней. Снять перевязку и повторить определение. Электроды от стимулятора приложить к рецепторному полю рефлекса сгибания задней конечности. Подобрать силу тока, вызывающую сгибание во всех трех суставах. Во время сгибания быстро перенести электроды на вторую лапку (то же поле). Лапка сгибается, а первая в это время разгибается. Перекрестный рефлекс разгибания. Пассивно согнуть одну заднюю лапку в трех суставах. Нанести электрическое раздражение стопе. Лапка разгибается, а вторая – сгибается. Обращенный рефлекс. Сформулируйте определение торможения, опишите виды его в центральной нервной системе. Отметьте значение торможения в координации движений.
Работа № 12
Рефлексы положения
Цель работы: изучить статические и статокинетические рефлексы. Проанализировать их рефлекторные дуги.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор, глазные ножницы, пинцет, скальпель, марлевая салфетка, ватные тампончики, вращающийся столик, таз с водой, нитки.
Опыт № 1. Рефлексы позы и выпрямления
Ход работы. Посадить лягушку на препаровальный столик, зафиксировав при помощи нитки (20-30 см). Обратить внимание на ее позу: голова теменем вверх, передние лапы выпрямлены, задние согнуты – рефлекс позы.
Наклонять столик вперед, назад, в стороны. Обратить внимание на положение головы (теменем вверх). Наклонять столик сильнее, чтобы лягушка переползла через его край. Голова лягушки сохраняет положение теменем вверх – рефлекс переползания. Положить лягушку на спинку и отметить, что она переворачивается одинаково легко как через правый, так и через левый бок – рефлекс переворачивания. Поместить лягушку в таз с водой и наблюдать одинаковость движений в обе стороны.
Опыт № 2. Статокинетические рефлексы
Ход работы. Поместить лягушку на вращающийся столик, головой к периферии круга. Вращая столик, отметить направление отклонения головы и перераспределения тонуса мышц конечностей в начале и в конце движения – рефлекс противовращения, или «компасный». Быстро поднять столик вверх. Наблюдать за изменением тонуса мышц конечностей и головы лягушки в начале и в конце движения. Повторить наблюдение при быстром опускании столика – «лифтный» рефлекс. Держа лягушку за задние конечности, направить ее вперед, не выпуская из рук. Передние конечности выпрямляются – рефлекс готовности к прыжку.
Опыт № 3. Изучение рефлексов положения после одно- и двустороннего разрушения лабиринтов
Ход работы. Операция разрушения лабиринтов осуществляется через полость рта. Лягушку обернуть марлевой салфеткой и взять в левую руку спиной к ладони. Пинцетом открыть рот, оттянуть нижнюю челюсть и зафиксировать при помощи марлевой салфетки. Найти светлый участок на полуосновной кости, под которым находятся полукружные каналы и оттолитов аппарат. Скальпелем, зондом с тампоном (тупфер) или остроконечной браншей ножниц разрушить его. Остановить кровотечение, прижимая плотные ватные тампончики к ране. Через несколько минут после операции повторить все наблюдения опытов № 1, 2. Затем разрушить лабиринт с другой стороны и снова повторить наблюдения. Все результаты занести в таблицу:
|
Состояние лягушки. Рефлексы положения |
Здоровая |
После одностороннего удаления лабиринтов |
После двустороннего удаления лабиринтов |
Рефлекторные дуги рефлексов |
|
Рефлекс позы |
||||
|
Рефлекс выпрямления |
||||
|
Рефлекс переползания |
||||
|
Рефлекс переворачивания |
||||
|
Рефлексы в воде |
||||
|
«Лифтный» рефлекс |
||||
|
Рефлекс готовности к прыжку |
Работа № 13. Физиология крови
Опыт №1. Методика взятия крови
Цель работы: ознакомиться с методикой взятия крови у человека.
Для работы необходимы: скарификатор, спирт, эфир, йод, вата, капиллярные пипетки или другие принадлежности в зависимости от целей взятия крови.
Ход работы. Обычно кровь берут из четвертого пальца левой руки. Палец тщательно обрабатывают спиртом и эфиром. Затем, при помощи скарификатора, предварительно обработанного спиртом, делают прокол кожи мякоти пальца глубиной 2-3 мм. Необходимо, чтобы кровь вытекала свободно и в достаточном количестве. Первую каплю крови удаляют ватным тампоном, а из второй капли производят забор крови. Для этого кончик капиллярной пипетки или смесителя погружают в каплю крови и насасывают при помощи резиновой груши нужное количество крови до соответствующих меток, следя за тем, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. После забора крови на ранку накладывают ватный тампон, смоченный йодом, и прижимают его большим пальцем. Набранную кровь исследуют.
опыт № 2
Подсчет форменных элементов крови
Цель работы: ознакомится с устройством принадлежностей и принципами их использования для подсчета форменных элементов.
Для работы необходимы: микроскоп, счетная камера с сеткой Горяева, смесители для эритроцитов и лейкоцитов, покровные стекла для разбавляющих растворов, фильтровальная бумага, 3% раствор поваренной соли, 3% раствор уксусной кислоты, подкрашенной метилвиолетом, спирт, эфир, йод, вата.
Ход работы. Для подсчета форменных элементов крови необходимо ознакомиться с применяемыми принадлежностями и особенностями методики. Подсчет форменных элементов производится с применением счетной камеры и сетки Горяева. Счетная камера представляет собой утолщенное предметное стекло, на поверхности которого четырьмя желобками образованы три узкие площадки. Средняя площадка ниже боковых на 0,1 мм, и при притертом покровном стекле («до колец Ньютона») к двум крайним площадкам образуется просвет высотой 0,1мм. Средняя площадка разделена пополам бороздкой, по обеим сторонам от которой нанесена сетка Горяева, состоящая из 225 больших квадратов, из которых 25 квадратов разделены еще линиями на 16 малых квадратов площадью 1/400 мм. Объем пространства под покровным стеклом над каждым малым квадратом равен 1/4000 мм, который заполняется раствором крови. При подсчете форменных элементов крови пользуются правилом Егорова, согласно которому эритроциты в малых, а лейкоциты в больших квадратах причисляются к данному квадрату только те, которые находятся внутри квадрата и на его верхней и левой разграничительных линиях. Перед использованием необходимо счетную камеру поставить под микроскоп и при малом и большом увеличении разобраться в устройстве сетки, найти большие и малые квадраты, научиться перемещать камеру под микроскопом в нужном направлении для подсчета. До заправки камеры разведенной кровью нужно тщательно протереть камеру салфеткой и аккуратно притереть покровное стекло. С целью подсчета форменных элементов забор и разведение крови производят соответствующими смесителями для эритроцитов и лейкоцитов. Смесители должны быть чистыми и сухими. Смеситель представляет собой капиллярную трубку с ампулообразным расширением, внутри которого имеется бусинка для размешивания крови с разводящей жидкостью. На длинной части капилляра у смесителя для эритроцитов есть метки 0,5 и 1,0, а над ампулообразным расширением – метка 101. У смесителя для лейкоцитов имеются соответственно метки 0,5; 1,0 и11. Кровь набирают до меток 0,5 или 1,0, а разбавляют в смесители для эритроцитов – до метки 101, в смесителе для лейкоцитов – до метки 11. Таким образом, смеситель для эритроцитов позволяет получить разведение в 200 и 100 раз, а смеситель для лейкоцитов – в 20 и 10 раз. Сделать результаты. Выводы.
Опыт № 3
Подсчет эритроцитов
Цель работы: определить количество эритроцитов в 1 мм цельной крови.
Для работы необходимы: все то же, что указано в работе по подсчету форменных элементов крови.
Ход работы. Подготовив счетную камеру и 3% раствор поваренной соли в часовом стекле, обычным способом набирают кровь из пальца в смеситель для эритроцитов до метки 0,5 (или 1,0) путем насасывания ртом через наконечник, надетый на верхнюю часть смесителя. Затем, обтерев кончик смесителя фильтровальной бумагой, быстро, чтобы не свернулась кровь, переносят смеситель на часовое стекло и, не вынимая наконечник изо рта, насасывают 3% раствора поваренной соли до метки 101, т.е. разводят кровь в 200 раз. Переводя смеситель в горизонтальное положение и зажав его концы между пальцами, круговыми движениями равномерно перемешивают содержимое смесителя. Выпускают из смесителя 2-3 капли крови на вату, а следующую каплю вносят в желобки или к краю покровного стекла счетной камеры и следят за тем, чтобы не появились пузырьки воздуха. Заполнив камеру кровью, помещают счетную камеру под микроскоп и под малым и большим увеличением находят сетку и расположенные над ней эритроциты, которые под действием гипертонического раствора слегка сморщиваются и становятся лучше видимыми. Подсчет эритроцитов производят в 5 больших квадратах, разделенных еще на 16 малых квадратов и расположенных в разных участках сетки (часто берут по диагонали). Предварительно на бумаги рисуют пять больших квадратов, разделенных каждый на 16 малых квадратов. Считают по правилу Егорова эритроциты в каждом малом квадрате и полученные результаты заносят в нарисованные квадраты.
Вычислив общее количество эритроцитов в 80 малых квадратах (Э), определяют среднее арифметическое количество эритроцитов в каждом малом квадрате (Э/80). Зная объем одного малого квадрата (1/4000 мм3), степень разведения (в 200 раз), находят общее число эритроцитов (Х) в 1 мм3 цельной крови по формуле: Х= Э·4000·200/80 эритроцитов. Нарисовать большой квадрат, разделенные на малые квадраты, и находящиеся там эритроциты, записать полученное количество эритроцитов, сравнить с нормой и сделать выводы.
Опыт № 4
Цель работы: определить количество лейкоцитов в 1 мм3 цельной крови.
Для работы необходимы: все то же, что указано в работе, но подсчету форменных элементов крови.
Ход работы. Подготовив счетную камеру и 3% раствор уксусной -кислоты, подкрашенный метилвиолетом на часовом стекле, обычным способом набирают кровь из пальца в смеси тель для лейкоцитов до метки 1,0. Обтерев кончик смесителя фильтровальной бумагой, быстро, чтобы не свернулась кровь, с часового стекла набирают разбавитель в смеситель до метки 11, т. е. получают разведение в 10 раз. Содержимое смесителя тщательно перемешивают, делая круговые движения смесите лем, концы которого зажаты между пальцами. Под влиянием уксусной кислоты эритроциты гемолизируются, а метилвиолет окрашивает ядра лейкоцитов, что облегчает их подсчет. Поря док подготовки, заправки счетной камеры и правила подсчета лейкоцитов те же, что и при подсчете эритроцитов. Подсчет лейкоцитов производится в 25 больших, не разделенных на ма лые квадраты (в 400 малых квадратах), под малым увеличени ем. Подсчитав количество лейкоцитов в 25 больших или в 400 малых квадратах (Л), определяют среднее арифметическое ко личество лейкоцитов в одном малом квадрате (Л/400). Зная объем одного малого квадрата (1/4000 мм3), степень разведения (в 10 раз), находят общее количество лейкоцитов (X) в 1 мм3 цельной крови по формуле Х= (Л·4000·10)/400 лейкоцитов. Зарисовать один большой квадрат с видимыми в нем лейко цитами, отметить найденное количество лейкоцитов и сравнить с нормой, сделать выводы.
Опыт № 5
Цель работы: определить относительное и абсолютное содержание гемоглобина в крови.
Для работы необходимы: гемометр Сали, скарифи катор, спирт, эфир, йод, 0,1 Н раствор соляной кислоты, дис тиллированная вода, вата, фильтровальная бумага.
Ход работы. Определение гемоглобина в крови произ водится колориметрическим методом с помощью гемометра Сали. В штативе гемометра три пробирки: две крайние запаяны и содержат раствор солянокислого гематина (16,7 гемоглоби на), а одна средняя градуированная пробирка служит для исследования крови. В эту пробирку наливают 0,1 Н раствор соля ной кислоты до нижней метки 10. Затем, обычным способом из пальца в градуированную пипетку набирают кровь до метки 20 и, обтерев кончик пипетки фильтровальной бумагой, выдувают кровь на дно пробирки. Не вынимая пипетки, промывают ее со ляной кислотой из верхнего слоя, после этого содержимое про бирки перемешивают и оставляют стоять 5—10 минут для прев ращения гемоглобина в солянокислый гематин, окрашивающий раствор в коричневый цвет. К этому раствору прибавляют по каплям дистиллированную воду до тех пор, пока цвет полученного раствора будет совершенно одинаков с цветом стандарт ного раствора (добавляя воду, раствор перемешивают стеклян ной палочкой).
Цифры, стоящие на уровне нижнего мениска, полученного раствора показывают абсолютное (в граммах) и относительное (в процентах, единицах) содержание гемоглобина в исследуе мой крови. Запишите полученные данные содержания гемоглобина в ис следуемой крови и сравните их с нормой. Сделать выводы.
Опыт № 7.
Определение цветного показателя крови
Цель работы: ознакомиться с методикой определения цветного показателя крови.
Ход работы. Для расчета цветного показателя необхо димо определить количества гемоглобина и число эритроцитов. При вычислении цветного показателя (ЦП) берут соотношение выраженных в процентах к норме гемоглобина и эритроцитов в крови:
ЦП = (найденная концентрация гемоглобина·100)/16,7 : (количество эритороцитов·100)/5000000 ,
где 16,7 - нормальная концентрация гемоглобина;
5000000 – нормальное содержание эритроцитов в 1мм³.
Записать полученные результаты, сравнить их с нормой и сделать выводы.
Опыт № 8.
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
Цель работы: определить скорость оседания эритроци тов.
Для работы необходимы: скарификатор, спирт, эфир, йод, вата, 5% раствор лимоннокислого натрия, часовое стекло, аппарат Панченкова.
Ход работы. Для определения скорости оседания эрит роцитов пользуются прибором Панченкова, состоящим из шта тива с гнездами для градуированных пипеток. На каждой пипетке 100 делений, каждое деление соответствует 1 мм, у деле ния 50 стоит буква Р (реактив), у самого верхнего деления -буква К (кровь).
Градуированную пипетку промывают свежеприготовленным раствором лимоннокислого натрия и набирают этот раствор в пипетку до деления 500 (метка Р) и выпускают его на часовое стекло. Производят прокол кожи пальца, топ же пипеткой дваж ды набирают кровь до метки К и оба раза выпускают ее на ча совое стекло в раствор лимоннокислого натрия и тщательно пе ремешивают. Соотношение крови и лимоннокислого натрия на часовом стекле равно 4 : 1. В пипетку до верхнего деления набирают эту цитратную кровь, зажав ее верхний конец паль цем, ставят нижний конец в подушечку гнезда и придают пи петке строго вертикальное положение в штативе. Через час от мечают высоту стояния эритроцитов и записывают скорость осе дания эритроцитов. Зарисовать прибор Панченкова, записать полученные резуль таты и сравнить их с нормой, сделать выводы.
Опыт № 9
Гемолиз крови
Цель работы: ознакомится с различными видами гемолиза и механизмами, вызывающими его.
Для работы необходимы: штативы с пробирками, набор градуированных пипеток на 1-3 мл; растворы: 0,9% хлористого натрия, 0,9 % хлористого калия, 0,35 и 0,1% хлористого натрия, 10% соляной кислоты; аммиак, хлороформ, эфир, дистиллированная вода, цитратная кровь.
№1. Осмотический гемолиз.
Ход работы. Приготовить 5 чистых пробирок и в каждую из них налить 2-3 мл одного из следующих растворов: 0,1, 0,35, 0,9 % хлористого натрия, 0,9% хлористого калия, дистиллированной воды. В каждую пробирку добавить по 2-3 капли крови, хорошо перемешать. Отметить полученные результаты. Выводы.
№ 2. Действие кислот и щелочей.
Ход работы. Приготовить 3 пробирки, в каждую из них налить 3 мл 0,9% раствора поваренной соли и прибавить по 2-3 капли крови. После этого в одну из пробирок добавить 1 мл разведенной соляной кислоты, во вторую – 1 мл раствора аммиака, а третья – остается контрольной. Сравнить состояние крови в пробирках. Сделать результаты. Выводы.
№ 3. Действие эфира и хлороформа.
Ход работы. Приготовить 3 пробирки, в каждую из них налить по 5 мл 0,9% раствора поваренной соли и прибавить по 2-3 капли крови. Затем в одну пробирку долить 1 мл хлороформа, в другую – 1 мл серного эфира, третья – остается контрольной. Растворы в пробирках хорошо перемешать. Отметить результаты. Выводы.
Опыт № 10
Определение осмотической устойчивости эритроцитов
Цель работы: определить максимальную и минимальную осмотическую устойчивость эритроцитов.
Для работы необходимы: штатив с пробирками, 1% раствор поваренной соли, дистиллированная вода, цитратная кровь, мерные градуированные пипетки или бюретки.
Ход работы. Применяется метод Лимберкка. В 17 пронумерованных пробирках приготовляют в убывающей концентрациях растворы поваренной соли по таблице:
|
№ |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
16 |
17 |
|
Кол-во 1% р-ра пов.сол. |
10 |
9 |
8 |
7 |
6 |
5,5 |
5,2 |
4,8 |
4,5 |
4,2 |
4,0 |
3,8 |
3,5 |
3,2 |
2,8 |
2,0 |
0 |
|
Кол-во дис. вод. в мл |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
4,5 |
4,8 |
5,2 |
5,5 |
5,8 |
6,0 |
6,2 |
6,5 |
6,8 |
7,2 |
8,0 |
10 |
|
Получ. р-р пов. сол. в % |
1 |
0,9 |
0,8 |
0,7 |
0,6 |
0,56 |
0,52 |
0,48 |
0,45 |
0,42 |
0,4 |
0,38 |
0,35 |
0,32 |
0,28 |
0,2 |
0 |
В каждую пробирку пипеткой вводится по 2-3 капли исследуемой крови, содержимое пробирок тщательно осторожным встряхиванием перемешивается и через 1-2 часа при комнатной температуре в проходящем свете отмечаются первоначальное просветление раствора и полное просветление раствора. Сделать выводы.
Опыт № 11
Определение времени свертывания крови и продолжительности кровотечения
Цель работы: определить время свертывания крови по способу Мас-Магро и продолжительность кровотечения.
Для работы необходимы: скарификаторы, полоски фильтровальной бумаги, спирт, йод, вата, капиллярные трубки, вазелиновое масло, парафинированные часовые стекла.
№ 1. Определение времени свертывания крови
Ход работы. С помощью капиллярной трубки поместить каплю вазелинового масла на парафинированное часовое стекло, затем этим же капилляром из прокола пальца набрать каплю крови и поместить ее в каплю вазелинового масла на стекле. Каждые 2 минуты всасывать и выдувать ее обратно на часовое стекло. Отметить время от момента взятия крови до мо мента, когда кровь насосать невозможно. Это и есть время свертывания крови. При температуре воздуха 15—25°С оно рав но 8—12 минут. Сделать выводы.
№ 2. Определение времени продолжительности кровотечения
Ход работы. С помощью скарификатора обычным способом делают глубокий (3 мм) прокол кожи мякоти пальца и замечают время. Затем через каждые 30 секунд прикасаются к поверхности капли крови полоской фильтровальной бумаги и снимают ее. Отпечатки крови на бумаге становятся все меньше. Наблюдения проводят до тех пор, пока приложенная бумага перестанет окрашиваться. Продолжительность кровотечения отмечают от начала появления первой капли до прекращения окрашивания бумаги. В норме она равна 2-3 минутам. Сделать выводы.
Опыт № 13
Определение групп крови
Цель работы: определить группу крови.
Для работы необходимы: предметные стекла, стеклянные палочки, скарификатор, эфир, спирт, вата, йод, физиологический раствор, стандартные сыворотки I, II, III, IV групп.
Ход работы. Предметное стекло помещают на белую бумагу и на нем делают пометки о расположении сывороток. В соответствии с пометками на предметное стекло пипеткой (или палочкой), отдельной для каждой сыворотки, наносят по 1 капле стандартных сывороток I, II, III, IV группы. Затем обычным способом берут кровь из пальца и отдельными для каждой группы сывороток стеклянными палочками переносят небольшое количество крови в каждую сыворотку (соотношение 1:5 или 1:10). При внесении крови в сыворотки необходимо их тщательно перемешать до получения равномерного окрашивания. Если недостаточно крови, то ее добавляют чистой стеклянной палочкой. Результаты оценивают через 5-10 минут. При наличии агглютинации капля становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в виде комочков. Группа крови устанавливается в зависимости от наличия или отсутствия агглютинации. Отсутствие агглютинации во всех трех каплях говорит о принадлежности данной крови к первой группе. Наличие агглютинации с сыворотками I и III группы свидетельствует о принадлежности крови ко
II группе. Если агглютинация произошла с сыворотками I и II,то кровь принадлежит к III группе.
Агглютинация во всех трех сыворотках говорит о том, что кровь относится к IVгруппе. Это можно подтвердить тем, что внесение крови в сыворотку IV группы не сопровождается агглютинацией. В сомнительных случаях результаты взаимодействия крови и сыворотки рассматриваются под микроскопом или производят повторное исследование. В таблице отметить совместимость групп крови при переливании.
|
I (0) |
II (A) |
III (B) |
IV (AB) |
|
II (A) |
|||
|
III (B) |
|||
|
IV (AB) |
Опыт № 14
Определение резус-фактора крови
Цель работы: определить резус- фактор крови.
Для работы необходимы: предметные стекла, стеклянные палочки, скарификатор, эфир, спирт, вата, йод, физиологический раствор, стандартные сыворотки для определения резус-фактора,микроскоп.
Ход работы. Такой же, как при определении группы крови.
Работа № 14. Физиология кровообращения
Наблюдения и графическая регистрация сокращении
сердца лягушки
Цель работы: наблюдение фаз сердечной деятельности лягушки и овладение методикой графической регистрации сокращений сердца.
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор инструментов и столик, штатив, рычажок Энгельмана, серфин, кимограф, раствор Рингера для холоднокровных, нитки, вата.
Опыт № 1. Наблюдение сокращения сердца лягушки
Ход работы. Обездвиживают лягушку, удаляя голову и разрушая зондом спинной мозг. Лягушку кладут на препаровальный столик брюшком вверх. Захватывают пинцетом кожу в области мечевидного отростка, приподнимают слегка ее и делают небольшой разрез. Продолжая разрез в стороны, выкраивают треугольный лоскут кожи, который отбрасывают к голове. Затем пинцетом захватывают нижний конец грудины, вскрывают грудную клетку, выкраивая аналогичный мышечный лоскут, рассекая мышцы и пояс передних конечностей. После этого хорошо видно сокращающееся, покрытое перикардом сердце. Перикард рассекают в направлении продольной оси сердца и удаляют. После освобождения сердца от перикарда хорошо видны предсердия, желудочек, луковица аорты и ее разветвления. Для того чтобы рассмотреть венозный синус и впадающие в него сосуды, перевязывают уздечку сердца и перерезают ее ниже лигатуры. Откинув сердце к голове, рассматривают его заднюю поверхность. Кроме желудочка и предсердий теперь виден и венозный синус. Внимательно изучают цикл работы сердца. Убеждаются, что сокращения сердца протекают в определенной последовательности: синус, предсердия, желудочек, общая пауза, после которой начинается новый цикл.
Опыт № 2
Автоматия сердца. Лигатуры Станиуса
Цель работы: изучить степень автоматии различных отделов сердца
Для работы необходимы: лягушка, препаровальный набор и столик, серфин, рычажок Энгельмана, пипетка, раствор Рингера, нитки, вата, секундомер.
Ход работы. Обездвиженную лягушку помещают брюшком вверх на препаровальный столик. Обнажают сердце. Перерезают уздечку. Подсчитывают число сокращений сердца за минуту. Записывают исходную кардиограмму. Затем подводят лигатуру под аорту и продвигая ее максимально, чтобы она ока залась на границе между синусом и предсердиями, делают пе ревязку. Записывают кардиограмму и подсчитывают число со кращений венозного синуса и отмечают состояние предсердий и желудочка сердца. Ритм сокращений венозного синуса при этом обычно не изменяется, а предсердия и желудочек останав ливаются.
На остановленное сердце накладывается вторая лигатура по атриовентрикулярной борозде. Теперь будет сокращаться толь ко желудочек или только предсердие, или и предсердие и же лудочек в зависимости от того, как шла лигатура по отношению к атриовентрикулярному узлу. Также записывают, кардиограм му и подсчитывают частоту сокращений работающих отделов сердца.
Третью лигатуру накладывают на нижнюю треть желудоч ка, наблюдают сокращение основания желудочка и остановку работы верхушки сердца. Наносят одиночное раздражение иг лой верхушки сердца и получают одиночное сокращение. Нарисуйте схему наложения лигатур на сердце лягушки, кар диограммы; составьте таблицу изменения частоты сокращения венозного синуса, предсердий и желудочка сердца после нало жения каждой лигатуры. Дайте объяснение полученным резуль татам. Сделать выводы.
Опыт № 3
Особенности возбудимости сердечной мышцы. Экстрасистола
Цель работы: исследовать возбудимость желудочка сердца в различные фазы его деятельности.
Для работы необходимы: то же, что и в работе № 2, стимулятор и электроды.
Ход работы. Обездвиженную лягушку помещают на препаровальный столик и обнажают сердце. Подводят электроды к основанию желудочка сердца. Записывают исходную кардиограмму. Подбирают силу тока, достаточную для того, чтобы сердце отвечало на раздражение сокращением. После этого наносят одиночными электрическими импульсами в разные фазы сердечного цикла. При этом получаются разные результаты: если раздражение падает в фазу расслабления, то наблюдается внеочередное сокращение сердца (экстрасистола), оно наступает раньше очередного сокращения. Вслед за экстрасистолой в этих условиях возникает более продолжительное расслабление (компенсаторная пауза). Экстрасистолу можно вызвать и механическим раздражением, нанося укол препаровальной иглой в разные фазы сердечного цикла.
Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте полученную кардиограмму, отметьте на ней экстрасистолу и компенсаторную паузу. Объясните механизм возникновения экстрасистолы и компенсаторной паузы.
Опыт № 4
Рефлекторная регуляция сердечной деятельности
Цель работы: изучить принципы рефлекторной регуля ции сердечной деятельности.
Для работы необходимы: испытуемые, секундомер, препаровальный набор н столик, установка для кардиографии, электроды, стимулятор, пипетки, нитки, бинт, вата, растворы: адреналина 0,1%, пилокарпина 1%; атропина 0,1%, Рингера.
№ 1. Рефлекс с рецепторов каротидного синуса
Ход работы. Рефлекс изучается на человеке. Подсчиты вают исходную частоту сокращений сердца за 1 минуту. После этого экспериментатор указательными пальцами обеих рук медленно надавливает в течение 10 секунд в области сонных тре угольников на уровне верхнего края щитовидного хряща (про екция бифуркации общей сонной артерии). Снова подсчитывают частоту пульса и сравнивают с исходной. Отмечают рефлектор ную дугу (каротидный синус - каротидный нерв - продолгова тый мозг - блуждающий нерв - сердечная мышца). Сделать выводы.
№ 2. Глазосердечный рефлекс (Данини — Ашнера)
Ход работы. Исследование проводится на человеке. Под считывают число сокращений сердца за 1 минуту по пульсу. Тотчас экспериментатор обе руки прикладывает к боковой по верхности головы испытуемого, а большими пальцами одновре менно медленно надавливает в течение 5—10 секунд на оба глазных яблока (не сильно!). После прекращения надавливания снова подсчитывают частоту пульса и сравнивают с исходной. При этом чаще отмечается замедление сокращений. Отметить рефлекторную дугу тормозного эффекта (глазное яблоко - 1 ветвь тройничного нерва - продолговатый мозг - блуждаю щий нерв - сердечная мышца).
№ 3. Рефлекс с рецепторов брюшины
(рефлекс Гольца)
Ход работы. Опыт проводится на интактной или бульбоспинальной лягушке. С помощью бинта фиксируют лягушку за лапки к препаровальному столику. Над областью сердца вы резают окошко в грудной стенке лягушки. Записывают кардио грамму и подсчитывают число сокращений сердца за 1 минуту. Ручкой скальпеля или пинцета производят несколько быстрых, следующих один за другим ударов по брюшной стенке лягуш ки и наблюдают за деятельностью сердца, продолжая при этом запись. Сокращения сердца при этом резко замедляются или отмечается остановка сердца. Отметить рефлекторную дугу: рецепторы брюшины - чувствительные волокна чревного спле тения — продолговатый мозг — блуждающий нерв — сердце. Если разрушить продолговатый или спинной мозг, рефлекс 'Гольца не воспроизводится. Сделать результаты. Выводы.
№ 4. Влияние температуры на сокращения сердца лягушки
Ход работы. Поочередно испытывают действие теплого (30—40°) и холодного (2—5°) физиологических растворов. За писывают исходную кардиограмму при комнатной температуре и подсчитывают число сокращений сердца за минуту. При про должающейся записи заменить раствор в канюле подогретым до 40° или охлажденным до 2—5° раствором Рингера. После 1—2 минут действия таких раздражителей частота и характер сокращений изменится. Вновь подсчитать число сокращений за 1 минуту. Сравните деятельность сердца до, во время и пос ле действия растворов различной температуры.
№ 5. Влияние солей калия и кальция на деятельность сердца
Ход работы. Исследование проводится на том же препа рате. После записи исходной кардиограммы прибавьте в каню лю 1—2 капли 1% хлористого калия и запишите кардиограмму. Отметьте при этом замедление и уменьшение амплитуды сер дечных сокращений. Отставить кимограф от рычажка, промыть сердце раствором Рингера и провести аналогичное исследование с 1% раствором хлористого кальция. Запись сокращений серд ца показывает учащение и усиление сердечных сокращений при этом.
Опишите характер и механизм сер дечной деятельности под влиянием тепла, холода, солей калия и кальция. Сделать выводы.
Опыт № 5
Перкуссия сердца
Цель работы: овладеть пальце-пальцевой методикой перкуссии, определить границы сердца.
Ход работы. Исследование проводится на студентах. Сначала определяют правую границу сердца. Для этого проводят перкуссию по правой среднеключичной линии сверху вниз по межреберьям до определения «печеночной тупости». Затем, отступив от верхней границы печени кверху на 2,5—3 см, про должают перкуссию справа налево но межреберьям до измене ния перкуторного звука. В норме правая граница сердца нахо дится на 0,5—1,5 см вправо от правого края грудины. Верхняя граница определяется путем перкуссии по левой парастериальной линии сверху вниз. В норме верхняя граница проходит по верхнему краю 3-го ребра. Левую границу сердца определяют путем перкуссии в 5-м межреберье от левой среднеподмышечной линии по направлению к сердцу. В норме левая граница прохо дит на 0.5—3,5 см кнутри от левой среднеключичной линии и совпадает с верхушечным толчком, который можно определить визуально или пальпаторно. Выстукивание, как и выслушива ние, следует проводить в полной тишине. Записать полученные результаты и сравнить их с нормой и сделать выводы.
Опыт № 6
Аускультация сердца
Цель работы: овладеть методикой аускультации серд ца.
Для работы необходимы: фонендоскоп или сте тоскоп.
Ход работы. Тоны сердца слышны неодинаково на всей поверхности грудной клетки. Так, 1-й тон наиболее ясно выслушивается в области сердечного толчка, т.е; в 5-м меж реберье кнутри от левой срединноключичной линии, а 2-й тон - во 2-м межреберье слева и справа от грудины. В области сердечного толчка мы различаем громкий 1-й тон и слабый 2-й тон; у основания сердца 1-й тон слышен слабо, а 2-й - более ясно. Этим обстоятельством пользуются для раздельного выслушивания тонов сердца. 2-й тон на аорте лучше определяется во 2-м межреберье справа от грудины, а 2-й тон па легочной ар терии - во 2-м межреберье слева от грудины. Выслушивание звуков двухстворчатого клапана лучше производить в области сердечного толчка или в зоне Боткина (в 3-м межреберье сле ва от грудины), а трехстворчатого клапана - в области мечевидного отростка грудины.
Опыт № 7
Электрокардиография
Цель работы: ознакомиться с методикой регистрации электрокардиограммы.
Для работы необходимы: электрокардиограф, образцы электрокардиограмм, циркуль, линейка, карандаш.
Ход работы: провести анализ ЭКГ в 3 стандартных по прилагаемой схеме. Для этого необходимо измерить амплитуду в мильвольтах, продолжительность в секундах, направление зубцов и интервалов ЭКГ (1 см = 1мВ).
Полученные при расшифровке результаты занести в прилагаемую таблицу, сравнить с нормальными величинами и сделать выводы.
|
Показатели ЭКГ |
Отведения |
||
|
1 |
2 |
3 |
|
|
Зубец P Зубец Q Зубец R Зубец S Зубец T Интервал PQ (от конца P до начала Q) Комплекс QRS (начало Q-конец S) Интервал S-T (степень отклонения от изолинии) Интервал T-P (конец Т-начало Р) Интервал Q-T (начало Q-конец T) |
опыт № 8
Определение артериального давления
Цель работы: ознакомиться с методами бескровного определения артериального давления.
Для работы необходимы: сфигмоманометр или тонометр, фонендоскоп.
Ход работы. Аппарат устанавливается так, чтобы нуле вое деление манометра находилось на уровне плечевой арте рии. Рука должна располагаться на столе па уровне сердца в полусогнутом положении без напряжения мышц. Определяется артериальное давление двумя способами.
1. Пальпаторный метод определения артериального давле ния или метод Рива - Роччи.
Манжетку плотно (но не туго) накладывают на среднюю треть плеча. Завинчивают выпускной клапан. Левой рукой на щупывают пульс лучевой артерии, правой нагнетают воздух в манжетку до исчезновения пульса. Затем постепенно приоткры вают выпускной клапан и следят за падением уровня ртути в манометре. Отмечают высоту давления (по высоте столба рту ти) в тот момент, когда появляются первые пульсовые удары. Эта величина соответствует - максимальному или систолическому давлению. Продолжают понижать давление в манжетке до тех пор, пока наполнение пульса не становится постоянным, что соответствует минимальному или диастолическому давлению. Отмечают величину давления в манометре. Определения прово дят 2—3 раза. Полученные данные записывают дробью, напри мер 120/65 мм рт. ст. Здесь числитель соответствует максималь ному (систолическому) давлению, а знаменатель - минималь ному (диастолическому) давлению.
2. Аускультативный метод, или метод Короткова. Устанавливают фонендоскоп в области локтевого сгиба в месте проекции локтевой артерии. Нагнетают воздух в манжет ку до исчезновения пульса. После этого открывают выпускной клапан и медленно снижают давление в манжетке и выслуши вают звуки, возникающие ниже места сдавления. Момент по явления звуков соответствует максимальному артериальному давлению, что отмечают по показанию манометра. Момент ис чезновения звуков отмечают по показанию манометра и это со ответствует минимальному (диастолическому) давлению. Опре деления провести 2—3 раза и взять средние цифры. Сравните данные, полученные двумя методами определения артериального давления; укажите преимущества и недостатки методов.
опыт № 9
Влияние физических упражнений на деятельность
сердечно-сосудистой системы
Цель работы: изучить влияние физической нагрузки на силу и частоту сердечных сокращений.
Для работы необходимы: сфигмоманометр, фонен доскоп.
Ход работы. Измеряют у испытуемого максимальное (систолическое) и минимальное (диастолическое) давление, оп ределяют частоту пульса в следующих состояниях: в состоянии относительного покоя; после 30 приседаний в течение минуты; через каждую минуту до восстановления исходных данных.
Занесите результаты в прилагаемую таблицу. Выводы.
|
Состояние испытуемого |
Артериальное давление |
Пульс |
|||||
|
Макс. |
Мин. |
Пуль-совое |
Сред. |
Частота |
Наполение |
||
|
Относительный покой |
|||||||
|
Тотчас после нагрузки |
|||||||
|
После нагрузки |
30 мин |
||||||
|
1 мин |
|||||||
|
3 мин |
|||||||
|
И т.д. |
Работа № 15 ФИЗИОЛОГИЯ ДЫХАНИЯ
Спирометрия
Цель работы: методом спирометрии определить жизнен ную емкость легких и объемы, ее составляющие.
Для работы необходимы: спирометр, зажим для носа, спирт, вата.
Опыт № 1. Определение величины жизненной емкости легких (ЖЕЛ) в положении стоя.
Ход работы. Подготовив к работе спирометр, сделать максимально воз можный вдох и наложить зажим на нос. Взяв в рот предвари тельно обработанный спиртом мундштук спирометра, произвести в него максимальный выдох. Пользуясь шкалой спирометра, оп ределить величину ЖЕЛ. Опыт повторить трижды, записав максимальное значение ЖЕЛ. У мужчин ДЕЛ в среднем колеблет ся от 3500-5000 мл, у женщин 2500-4000 мл (на 15% меньше). Сделать результаты. Выводы.
Опыт № 2. Определение составных частей ЖЕЛ: дыха тельного объема, резервного объема вдоха, резервного объема выдоха.
а) Для определения дыхательного объема после обычного спокойного вдоха делают спокойный выдох в спирометр. Отме чают показания прибора. Величина ДО у взрослых 400 — 500 мл.
б) Для определения резервного объема вдоха спирометр максимально наполняют воздухом. После обычного вдоха, за держав дыхание и зажав нос, делают максимально возможный вдох через мундштук из спирометра. По разнице показаний спи рометра между исходным объемом и оставшимся определяют резервный объем вдоха (средние величины 1500 — 2000 мл).
в) Для определения резервного объема выдоха после обыч ного выдоха в атмосферу делают максимально возможный вы дох, в спирометр (средняя величина — 1500 — 2000 мл). Все исследования повторяют трижды.
Зарисуйте схему спи рометра, запишите результаты, сравните с нормой, сделайте вы воды по полученным результатам.
Опыт № 3
Расчёт должной жизненной ёмкости лёгких (ДЖЕЛ) и жизненного показателя
Цель работы: рассчитать ДЖЕЛ и жизненный показа тель.
Для работы необходимы: таблицы, цифровые дан ные о весе тела и ЖЕЛ испытуемого.
Ход работы: Расчет ДЖЕЛ проводится по формуле Антони ДЖЕЛ = ДОО • 2,6 (у мужчин) и ДЖЕЛ — ДОО • 2,2 (у женщин), где ДОО — должный основной обмен, а 2,6 и 2,2 - эмпирический коэффициент. В норме ЖЕЛ не должна отличать ся от ДЖЕЛ менее чем на 30% (±15%). Для определения жиз ненного показателя необходимо величину жизненной емкости легких разделить на вес тела испытуемого. В норме он долженбыть не менее 60. Жизненный показатель = ЖЕЛ/ вес тела. В выводах отметить соответствие полученных данных нормам.
Опыт № 4
Перкуссия и аускультация лёгких
Цель работы: овладеть методикой перкуссии и аускультации легких и с их помощью исследовать состояние легких.
Для работы необходимо: стетоскоп или фонендоскоп.
Ход работы: исследование выполняется на студентах.
1. Перкуссия. Под перкуссией подразумевают определение состояния и границ внутренних органов, в том числе и легких, при помощи выстукивания. Перкуссию проводят постукивани ем указательным или средним пальцем правой руки по одному: из пальцев (чаще среднему) левой руки, расположенному в межреберье параллельно ребрам. Выстукивать следует в сим метричных местах, сравнивая звук. Качество его зависит от на личия под перкутируемым местом воздуха. Над легкими звук должен быть ясным и тупой над органами, не содержащими воздуха. Пользуясь описанной методикой, студенты должны научиться отличать «легочные» звуки от звуков других органов («ясный» от «тупого»); определять верхнюю и нижнюю границы легких, подвижность легочного края. Верхняя граница— спереди на 3—4 см выше ключицы, сзади —на уровне 6—7 шейного позвонка. Нижняя граница справа: по окологрудинной линии - верхний край 6-го ребра, по среднеключичной линии - нижний край 6-го ребра, по передней подмышечной линии - 7-е ребро, по средней подмышечной линии — 8-е ребро, по задней подмы шечной линии — 9 ребро, по лопаточной линии - нижний край 10-го ребра, по околопозвоночной линии - 11-е ребро. Нижняя граница слева сзади та же, что и справа, а спереди по около грудинной линии - 4-е ребро.
Записать границы легких, отметить изменение их при вдохе и выдохе, описать ха рактер и места выслушивания бронхиального и везикулярного дыхания.
Работа № 16
ФИЗИОЛОГИЯ ПИЩЕВАРЕНИЯ
Пищеварение в ротовой полости
Цель работы: определить вкусовую чувствительность разных участков языка у человека; проверить наличие способ ности, к восприятию запаха у человека; провести анализ неко торых физиологических функций слюны человека.
Для работы необходимы: сухарный порошок, хлеб, сахарный порошок, ломтик лука, вода с примесью уксуса; рас творы: а) солянокислого хинина 1%; б) хлористого натрия 0,001%, 0,01%, 0,1%, 1%; в) раствор сахара 1%; г) 1% лимонная кислота; стерильная вата, деревянные палочки, чистая глазная пипетка, набор веществ с различным запахом.
Опыт № 1. Определить локализацию вкусовой чувстви тельности языка.
Ход работы. Прикасаться к разным зонам языка: на спинке, корне, краях языка, кончиком ватного тампона, смоченного в одном из следующих растворов: а) 1% солянокислого хинина б) 1% раствора сахара, в) 1% хлористого натрия, г) 1% ли монной кислоты. Описать, зарисовать схему распределения на поверхности языка точек, воспринимающих те или другие вкусовые раздражения. Записать результаты наблюдения.
Опыт № 2. Определить порог чувствительности для раствора хлористого натрия.
Ход работы. С этой целью испытуемому на кончик языка (но не прикасаясь к языку) наносят из пипетки каплю раствора и предлагают сделать глоток. Испытуемый должен оп ределить вкус раствора. Опыт начинают с минимальной концен трации и продолжают увеличивать концентрацию до тех пор, пока испытуемый точно не определит вкус наносимого раствора. Найденную концентрацию принимают за порог данной вкусовой чувствительности. Вывод.
Опыт № 3. Нюхать при закрытых глазах различные паху чие вещества и определить их характер по запаху. Отметить роль нюхательных движений. Вывод.
Опыт № 4. Значение слюны для апробации пищи.
Ход работы. Осушить поверхность языка марлевым тампоном; на сухую поверхность его положить поочередно сахар-порошок, соль-по рошок. После действия каждого из указанных раздражителей прополоскать ротовую полость водой. Отметить возможность возникновения вкусовых ощущений. Вывод.
Опыт № 5. Связь вкусовых и обонятельных ощущений для апробации пищи.
Ход работы. 1. При закрытом носе прополоскать рот водой с примесью уксуса, затем открыть нос и сравнить ощущения.
2. При закрытом носе жевать кусочек лука, затем открыть нос и сравнить ощущения. Написать результаты наблюдений.
Определение вкусовой топографии языка на основные первичные вкусовые вещества (сладкое, соленое, горькое, кислое).
Цель работы: оценить вкусовую гетерогенность различных участков языка.
Для работы необходимо: испытуемый, стеклянные палочки, вата, спирт, растворы сладкого(глюкоза), соленого (р-р NaCl 10%), горького (раствор полыни) и кислого (раствор уксуса 3%), дисцилированная вода.
Ход работы: кончик стеклянной палочки обмотать ватой и погрузить в раствор различных веществ (р-ры NaCl, сахара 10%, уксуса, полыни). Смачиваем палочку раствором глюкозы. Затем этой палочкой дотрагиваемся до кончика языка. Испытуемый отвечает на вопрос о наличии ощущения сладкого в этой области. Затем таким же образом дотрагиваемся до боковой и задней поверхности Удаляем вату, промываем физиологическим раствором. На кончик палочки наматываем вату смоченную соленым веществом (р-р NaCl 10%), дотрагиваемся до языка. Также проводим исследование с кислыми и горькими растворами.
Отмечаем результаты наличия и степени ощущений в различных областях языка при воздействии различных веществ.
Зарисовать схему языка. Обозначить на ней зоны языка чувствитльные к сладкому, соленому, кислому, горькому. Сделать выводы.
Значение воды в ощущении вкуса
Цель работы: выявить роль воды в ощущении вкуса.
Для работы необходимо: соль, сахар, вода, чайная ложка (или плоская стеклянная палочка), вата, марлевые салфетки.
Ход работы: высушить поверхность языка марлевой салфеткой. Насыпать на участок соль или сахар. Ощущения сладкого (или соленого) не возникает. Смочить язык водой (слюной). Возникает ощущение сладкого (соленого). Сделать вывод.
Определение порога вкусовой чувствительности.
Цель работы:Определить порог вкусового ощущения для соленого и сладкого.
Для работы необходимо: пипетки, р-ры NaCl – 0,1%, 0,3%, 0,5%, 1%, 10%; растворы глюкозы, дисц.Н2О.
Ход работы: на поверхность языка последовательно капать р-рами NaCl от 0% до 10%. Испытуемым отметить ощущение соленого на самую низкую концентрацию NaCl. Таким же образом перовести изучение ощущения на сладкое (возрастающие концентрации р-ров глюкозы). Сделать выводы.
Роль обязательного анализатора в ощущении вкуса
Цель работы: оценить роль обонятельной сенсорной системы для формирования вкуса.
Для работы необходимо: лук, р-р уксуса 3%, лоток, вода.
Ход работы: закрыть нос пальцами (носовым зажимом). В рот положить ломтик лука и прожевать. Оценить вкус лука в этих условиях. Затем открыть нос и вновь оценить качество вкуса лука. Промыть рот водой. Закрыть нос. Взять в рот 3% р-р уксуса и оценить вкус. Затем открыть нос и вновь оценить вкус уксуса. Промыть рот водой. Сделать выводы.
Изучение функционального состояния обонятельного анализатора
Цель работы: оценить функцию обонятельной сенсорной системы.
Для работы необходимо: испытуемому предложить определить пахучее вещество, находящееся в пробирках в водном р-ре.
При определении запаха пробирку с жидкостью предварительно встряхнуть и сделать несколько нюхательных движений.
Записать данные в протоколе и сравнить с эталоном. Сделать выводы.