Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНСТВО ПО РЫБОЛОВСТВУ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧЕРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «МУРМАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»
Вечерне-заочный факультет
Кафедра «Микробиологии и биохимии»
Отчет о практике
Выполнила:
Студентка 3курса 301ВЗФ
Слипченко Е.С.
Проверил:
Доцент кафедры
«Микробиологии и биохимии»
Т.А. Широкая
Дата сдачи ______________
Мурманск
2013
СОДЕРЖАНИЕ
Введение
3.1 Материалы исследования.
3.2. Методы исследования
Заключение
Список литературы
ВВЕДЕНИЕ
Плоды и овощи имеют большое значение в питании человека. Плодоовощ ная продукция является источником поступления в организм человека биологиче ски активных и минеральных веществ, ферментов, углеводов, органических кислот.
Учебная практика проходила на кафедре микробиологии и биохимии ФГБОУ ВПО «Мурманский Государственный Технический Университет». Практические занятия проходили в лаборатории биохимии кафедры микробиологии и биохимии.
Цель работы: провести биохимический анализ органических кислот в растительных тканях.
В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
1. Характеристика биохимической лаборатории.
1.1. Структура лаборатории.
На кафедре «Микробиология и биохимия» две лаборатории биохимии. В лабораториях находится оборудование, приборы, реактивы, химическая посуда и, необходимые для постановки и проведения экспериментов, инструкции, методические указания и пособия, инструкции и журнал по технике безопасности.
|
Помещение № |
Лаборатория |
Перечень оборудования |
Коли чество посад очных мест |
Площадь (м2) |
Примечания |
|
301Л |
Лаборатория |
Спектрофотометр (СФ-2000)(2)Термостат |
20 |
20 |
|
|
Сушильный шкаф |
|||||
|
Встроенный вытяжной шкаф |
|||||
|
Угловой шкаф |
|||||
|
Фотометр фотоэлектрический КФК-2-УХЛ 4.2., КФК-3-01 |
|||||
|
Шкаф сушильный СНОЛ 58/350 |
|||||
|
Колба-промывалка |
|||||
|
Стекло предметное |
|||||
|
Трубка соединительная |
|||||
|
Чашка с крышкой высокая (Коха) 4В |
|||||
|
Трубка стеклянная (комплект) |
|||||
|
Стаканчик для взвешивания (бюкс) СН |
|||||
|
Колба мерная 1 -50, 100, 200, 250 |
|||||
|
Мензурка 100 мл |
|||||
|
Весы электронные «МК-6, 2-А11» ,ВЛТК-500М, ВЛР-200 |
|||||
|
Весы лабораторные «ORAUS Adventurer rv 5120» |
|||||
|
Тонометр C.S. Healthearels 106 - 6 шт. |
|||||
|
Мензурка 250 мл |
|||||
|
Мензурка 500 мл |
|||||
|
Бюретка 1-1-2-25-01 (без крана) |
|||||
|
Пипетка измерительная (1, 2, 5 мл) |
|||||
|
Пипетка измерительная 10 мл |
|||||
|
Стакан лабораторный высокий ВН-300; ВН-500 |
|||||
|
Стакан лабораторный низкий НН-250 НН-400 |
|||||
|
Колба плоскодонная КП-250 |
|||||
|
Колба коническая (Эрленмейера) 100 |
|||||
|
Стол для мойки посуды |
|||||
|
Доска для сущки посуды 700х1550 мм |
|||||
|
Стол лабораторный 2000х700х915 мм |
|||||
|
Табурет лабораторный |
|||||
|
Шкаф вытяжной ШВ |
|||||
|
Шкаф для реактивов |
|||||
|
Шкаф для посуды |
|||||
|
Штатив для дистиллированной воды |
|||||
|
рH – метр-милливольтметр PH- 150М |
|||||
|
302Л |
Муфельная печь СНОЛ 8,2/1100 |
||||
|
Центрифуга ЦЛМН-Р10-02 "Элекон" |
|||||
|
Центрифуга ОПн-8-У4.2 |
|||||
|
Аквадистиллятор ДЭ-4-2М |
|||||
|
Весы лабораторные электронные ВЛТК-500М, ВЛР-200 |
|||||
|
Весы лабораторные МК6,2-А22, МК15,2-А22 |
|||||
|
Весы RV-214, RV-5120, ВЛТ-510П |
|||||
|
Рефрактометр ИРФ-454 |
|||||
|
Поляриметр СМ3 УХЛ 4.2. |
|||||
|
Микроскоп Биолам С-11 |
|||||
|
Стол демонстрационный для преподавателя |
|||||
|
Стол для мойки посуды |
|||||
|
Доска для сущки посуды 700х1550 мм |
|||||
|
Стол лабораторный 2000х700х915 мм |
|||||
|
Табурет лабораторный |
|||||
|
Шкаф вытяжной ШВ |
|||||
|
Шкаф для реактивов |
|||||
|
Шкаф для посуды |
|||||
|
Штатив для дистиллированной воды |
|||||
|
Шкаф сушильный №3 ШС-3 |
|||||
|
Аппарат для флюоресцентного анализа ви таминов в растворах |
|||||
|
Действующие модели, узлы, макеты, стенды и другое оборудование |
|||||
|
Баня водяная |
|||||
|
Баня песочная |
|||||
|
Фотометр фотоэлектрический |
|||||
|
Дистиллятор ДЭ-4-2М, ДЭ-10 |
|||||
|
Термометр фотоэлектрический |
|||||
|
Рефрактометр дисперсионный универсаль ный |
|||||
|
Инструменты, приборы, оборудование и препараты |
|||||
|
Холодильник Либиха П-580 |
|||||
|
Холодильник шаровой Шх-1 |
|||||
|
Спиртовка лабораторная СЛ |
|||||
|
Эксикатор |
|||||
|
Термометр лабораторный ТЛ (компл.) |
|||||
|
Ареометр для спирта АСП (компл. 10 шт.) |
|||||
|
Низкотемпературная лабораторная электропечь SNOL 58/350, электропечь лабораторная 8,2 – 1100 |
|||||
1.2. Охрана труда и техника безопасности.
ИНСТРУКЦИЯ
по технике безопасности в лабораториях
«Микробиологии и биохимии»
1. ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
1.1. К выполнению лабораторных работ допускаются студенты, прошедшие инструктаж по технике безопасности, о чем свидетельствует соответствующая запись в журнале установленного образца.
1.2. Выполнять только ту работу, которая поручена и разъяснена преподавателем.
1.3. Заметив нарушение инструкции по технике безопасности и правил поведения в лаборатории студентами, предупредить их о необходимости соблюдения требований, обеспечивающих безопасность работы.
1.4. При всех замеченных недостатках, неисправностях оборудования и приборов, прекратить работу и сообщить преподавателю или лаборанту.
1.5. Беспрекословно выполнять все замечания по технике безопасности, получаемые от персонала лаборатории.
1.6. Лаборатория должна быть обеспечена аптечкой для оказания первой медицинской помощи.
1.7. При работе в вытяжных шкафах избежать прикосновения к металлическим корпусам электрооборудования и заземленным коммуникациям.
2. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ПЕРЕД НАЧАЛОМ РАБОТЫ
2.1. Внимательно ознакомиться с методическими указаниями по данной лабораторной работе. Возникшие вопросы решить с преподавателем или лаборантом.
2.2. Надеть рабочий халат, застегнуть манжеты.
2.3. Внимательно подготовить рабочее место (посмотреть химическую посуду, реактивы, пробы натурных образцов).
3. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ВО ВРЕМЯ РАБОТЫ
3.1. Быть внимательными, не отвлекаться посторонними делами и разговорами, не отвлекать других.
3.2. Строго соблюдать правила техники безопасности, указанные в руководстве по выполнению работы.
3.3. Пользоваться только оборудованием и приборами, указанными в методическом указании.
3.4. Не допускать нагревания жидкостей в закрытых колбах или приборах, не имеющих сообщения с атмосферой, не использовать посуду, имеющую трещины или отбитые края. Осколки разбитой посуды убирать только с помощью щетки и совка.
3.5. Не загромождать рабочее место предметами, не относящимися к выполняемой работе.
3.6. Соблюдать чистоту в лаборатории и на рабочих местах.
3.7. Все работы с ядовитыми веществами и газообразными веществами необходимо проводить под тягой. В целях более эффективного действия вентиляции необходимо приподнять дверцу вытяжного шкафа на 1/3 - 1/4 ее подъема.
3.8. Запрещается нагревать огнеопасные вещества на открытом огне. Для нагревания этих веществ необходимо пользоваться предварительно нагретой водяной баней, не пользоваться электроплитой с открытой спиралью.
3.9. При работе с легковоспламеняющимися жидкостями (ЛВЖ) следует придерживаться 3-х основных принципов:
При нагревании жидкости с осадком надо быть осторожным, так как жидкость может быть выброшена из сосуда на руки и лицо. Пробирки с жидкостью следует держать в сторону от себя и соседей по столу.
3.10. Необходимо строго соблюдать правила при работе с электронагревательными приборами и спиртовками. Запрещается оставлять их без присмотра.
3.11. Все опыты с легковоспламеняющимися летучими веществами проводить подальше от огня и в вытяжном шкафу -
3.12. Недопустимо набирать ртом в пипетку ядовитые жидкости, в этом случае необходимо пользоваться грушей.
3.13. Категорически запрещается пробовать химические вещества на вкус! 3. 3.14. При работе с концентрированными кислотами и щелочами, а также при проведении работ, связанных с опасностью повреждения глаз, необходимо надевать очки и перчатки.
3.15. При ожогах горячей водой, паром и горячими предметами необходимо кожу смочить 10 %-ным раствором марганцовокислого калия или 90 %-ным спиртом.
3.16. При попадании концентрированных кислот или щелочей в глаза необходимо кожу смочить их большим количеством воды, затем слабым раствором питьевой соды при попадании кислоты или раствором борной кислоты при попадании щелочи.
3.17. При попадании на кожу концентрированной щелочи ее необходимо смыть водой, а затем 2 %-ным раствором питьевой соды.
3.18. При разбавлении крепких кислот, особенно серной, необходимо вливать кислоту в воду, а не наоборот.
3.19. При наливании реактивов никогда не наклоняться над сосудом во избежание брызг на лицо и платье.
3.20. При тушении загоревшегося бензина, спирта, эфира пользоваться песком, засыпая им пламя.
3.21. При тушении загоревшейся электропроводки необходимо пользоваться огнетушителем ОП-5, ОП-5-1Ш или песком.
1.3. Работа с оборудованием.
ПРАВИЛА ПОЛЬЗОВАНИЯ РЕАКТИВАМИ
4.1. Если нет указания о дозировке, брать их для работы в возможно меньшем количестве.
4.2. Излишек реактива не высыпать и не выливать обратно в сосуд, из которого он был взят, а вылить в сосуд для слива, которые имеются в каждой лаборатории.
4.3. После употребления реактива банку или склянку тотчас же закрыть пробкой и поставить на место.
4.4. Сухие реактивы брать при помощи роговых лопаточек, фарфоровых или металлических лопаточек, шпателей, которые должны быть чистыми и сухими. После употребления их следует тщательно протереть, лучше всего фильтровальной бумагой.
4.5. Если реактив отбирается пипеткой, то ни в коем случае нельзя пользоваться этой же пипеткой для отбора другой жидкости. Пипетку необходимо промыть дистиллированной водой.
ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
Во избежание несчастных случаев запрещается:
5.1. Выполнять опыты в грязной химической посуде.
5.2. Проводить на рабочих местах опыты, связанные с применением летучих веществ (аммиака, формальдегида, эфира, хлороформа, брома, крепких кислот и т.д.)
5.3. Переливать кислоты, щелочи и другие растворы из сосуда в сосуд.
5.4. Пить воду из химической посуды.
5.5. Пробовать на вкус (или запах) какие-либо вещества.
Требования безопасности по окончании работы:
1. Убрать за собой рабочее место (реактивы, посуду, образцы).
2. Отключить электроприборы, вытяжку.
3. Выключить свет в лаборатории.
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1 Основные источники органических кислот.
Практически все продукты растительного происхождения имеют в своем составе органические кислоты, но в овощах их меньше, чем во фруктах или ягодах. Для большинства овощей (капуста, лук репчатый, огурцы свежие, перец сладкий и др.) количество кислот составляет от 0,1 до 0,3 г на 100 съедобной части. Повышенным содержанием органических кислот отличаются щавель (0,7 г), томаты грунтовые (0,8 г), ревень (1,0 г).
В ягодах и фруктах содержание органических кислот варьируется в более широких пределах: в айве, алыче, ананасах, персиках, винограде — до 1,0 г; в вишне, гранате, рябине черноплодной, апельсинах, мандаринах, грейпфрутах, землянике — до 1,9 г. Повышенным содержанием органических кислот отличаются рябина садовая (2,2 г), смородина черная (2,3 г), смородина красная (2,5 г), клюква (3,1 г), лимон (5,7 г). Молоко и кисломолочные продукты также являются источниками органических кислот. Их количество зависит не только от вида продукта, способа его получения, но и от свежести продукта. При хранении накопление органических кислот приводит к очень высокой кислотности, особенно кисломолочных продуктов, что делает их непригодными для использования в диетическом питании.
К продуктам, содержащим повышенное количество органических кислот, относятся также пахта, кумыс, творожная и подсырная сыворотка, фруктовые соки, квас, некоторые фруктово-ягодные напитки, кислые сорта вин. Низшие карбоновые кислоты (щавелевая, малоновая(тартроновая)) содержатся в плодах и листьях спаржи, крапивы, чистотела, рябины, черники, а также в незрелых плодах крыжовника.
Яблочная, винная, лимонная, оксикарбоновая кислоты содержатся в плодах барабариса (до 3%) земляники, малины, а так же в овощных культурах.
Сорбиновая и парасорбиновая кислоты характерны для плодов рябины обыкновенной.
Муравьиная кислота обнаружена в малине.
Сложная смесь оксикоричных кислот характерна для боярышников, винограда амурского, рябины, смородины, лесных яблок. Для ягод семейства брусничных характерны фенолокислоты: п-оксибензойная, протокатеховая, о-пирокатеховая, галловая . Галловая кислота содержится также в листьях чая. Лимонной кислоты особенно много в цитрусовых и клюкве (до 3%).
В малине имеется много производных салициловой кислоты, в меньших количествах они присутствуют в землянике, смородине, вишне и винограде, тысячелистнике, цветках ромашки, клюкве, рябине. В сливах и клюкве обнаружена хинная кислота.
2.2. Органические кислоты.
Органические кислоты – широко распространенная в растительном и животном мире группа соединений. В растительных продуктах чаще всего встречаются органические кислоты (их ещё называют фруктовыми) – яблочная, лимонная, винная, щавелевая, пировиноградная, молочная, салициловая, муравьиная, уксусная кислоты и другие. В животных продуктах распространены молочная и другие кислоты.
Фруктовые кислоты содержатся во всех органах растений в свободном состоянии или в виде солей, эфиров и т.п. В плодах они находятся преимущественно в свободном состоянии, в то время как в других частях растений преобладают связанные формы. Наиболее распространены яблочная, лимонная, виннокаменная, щавелевая и другие. Эти кислоты формируют вкус растительной пищи.
В ряде случаев количество кислот в растениях достигает весьма высоких величин. Например, содержание щавелевой кислоты (в виде кальциевой соли) в щавеле и шпинате находится на уровне 16%, лимонной кислоты в лимонах — на уровне 9%, яблочной кислоты в яблоках — на уровне 6% и т.д.
Основная функция органических кислот, входящих в состав пищи, связана с участием в процессах пищеварения. Они снижают рН среды, способствуя созданию определенного состава микрофлоры, активно участвуют в энергетическом обмене веществ (цикл Кребса), стимулируют сокоотделение в желудочно-кишечном тракте, улучшают пищеварение, активизируют перистальтику кишечника, способствуя снижению риска развития многих желудочно-кишечных и других заболеваний, обеспечивая ежедневный стул нормальной структуры, тормозят развитие гнилостных процессов в толстом кишечнике. Важнейшей функцией органических кислот является ощелачивание организма.
Организм человека имеет определенное кислотно-щелочное соотношение. Оно зависит от количества положительно заряженных частиц(ионов) и отрицательно заряженных ионов. Положительно заряженные ионы создают кислую среду, отрицательно заряженные ионы создают щелочную среду. Организм человека постоянно сохраняет этот баланс, который колеблется в пределах рН 7,36 – 7,42. Нарушение этого равновесия приводит к различным заболеваниям. Овощи и фрукты способствуют ощелачиванию организма.
2.3. Недостаток органических кислот.
Недостаток свободных органических кислот и растительной клетчатки в пище современного человека во всем мире считают одной из причин болезней, которые раньше связывали только с возрастом. Обследование старших возрастных групп населения подтвердило этот вывод. Содержание пищевых волокон в их рационе составило в среднем 24 г, а свободных органических кислот — 2 г в сутки. Многие болезни, как и преждевременное старение, сопровождаются и усугубляются ацидозом жидких сред организма, когда в них анионы кислот преобладают над катионами оснований. Способность свободных органических кислот пищи поддерживать должное кислотно-щелочное равновесие (баланс pH) переоценить трудно.
2.4. Органические кислоты алифатического ряда.
Содержащиеся в растениях органические кислоты алифатического ряда
подразделяются на две большие группы – летучие (перегоняющиеся с водяным паром) и нелетучие. Органические кислоты растений содержатся в них как в свободном виде, как и в виде солей или эфиров. Из летучих кислот наиболее важными являются муравьиная, уксусная и масляная кислоты.
Муравьиная кислота НСООН представляет собой подвижную жидкость с резким запахом. Найдена в крапиве, малине; в виде сложных эфиров содержится в яблоках.
Уксусная кислота СН3-СООН встречается в различных плодах и растительных соках. В особенно больших количествах образуется при уксуснокислом брожении как продукт жизнедеятельности уксуснокислых бактерий. Уксусная кислота, по данным С. В. Солдатенкова, составляет до 85% всех органических кислот в зерне пшеницы и кукурузы. Содержится в свободном виде и в виде различных сложных эфиров в яблоках.
Масляная кислота СН3-СН2-СН2-СООН встречается в небольших количествах в растениях как в свободном виде, так и в виде сложных эфиров. Свободная масляная кислота обладает сильным и весьма неприятным запахом (запах несвежего сливочного масла). Масляная кислота образуется при маслянокислом брожении. В растениях найдены также:
-окси—кетомасляная кислота СН3-СН(ОН)-СО-СООН и
-окси—кетомасляная кислота НОСН2-СН2-СО-СООН. У ряда бактерий (Bacillus megaterium, водородные бактерии, фотосинтезирующая бактерия Rhodospirllum rubrum, Azobacter, Rhizobium и др.) в качестве важного запасного вещества накапливается -оксимасляная кислота СН3-СН(ОН)-СН2-СООН и ее полимеры. Масляная кислота применяется в парфюмерной и кондитерской промышленностях в виде сложных эфиров, являющихся ценными ароматическими веществами. Например, метиловый эфир масляной кислоты обладает запахом яблок, этиловый — ананасов и т. д.
Молочная кислота (-оксипропионовая) СН3-СН(ОН)-СООН обнаружена во многих растениях. Довольно заметное количество ее содержат листья малины. Молочная кислота часто образуется при анаэробном дыхании растений; особенно в больших количествах – при молочнокислом брожении, вызываемом молочнокислыми бактериями.
Пировиноградная кислота СН3-СО-СООН – простейшая кетокислота – важнейший промежуточный продукт при диссимиляции углеводов в растении, а также при спиртовом и молочнокислом брожении. Найдена во многих растениях. В ряде растений обнаружена оксипировиноградная кислота НОСН2-СО-СООН.
Щавелевая кислота НООС-СООН – простейшая дикарбоновая кислота. Для нее характерна кальциевая соль, нерастворимая в воде и даже в уксусной кислоте. Чрезвычайно широко распространена в растениях, как в свободном виде, так и в виде солей. Особенно часто содержится в растениях в виде щавелевокислого кальция, который иногда накапливается в очень больших количествах в форме сросшихся между собой кристаллов. Большие количества щавелевой кислоты содержат некоторые мясистые растения – суккуленты (молодило и др.). В плодах и ягодах она содержится в незначительном количестве – от 0,005 до 0,06%. Щавелевая кислота может накапливаться в результате развития на сахарных растворах некоторых плесневых грибов.
Щавелевоуксусная кислота НООС-СО-СН2-СООН – важный промежуточный продукт цикла Кребса, связывающий между собой превращения углеводов и аминокислот. Играет важную роль в биосинтезе аспарагиновой кислоты, аланина и аспарагина. Найдена во многих растениях.
Яблочная (оксиянтарная) кислота НООС-СН2-СН(ОН)-СООН чрезвычайно широко распространена в растениях; преобладает в рябине, барбарисе (до 6%), кизиле, яблоках (вообще в семечковых и косточковых плодах). Она содержится в плодах томатов, семенах злаков и бобовых, а также в листьях. В растениях табака и махорки — до 6,5%. Большие количества яблочной кислоты накапливаются в вегетативных органах сочных растений — суккулентов — молодила, агавы, кактусов. Например, у агавы и молодила эта кислота составляет до 8—10% сухого вещества. Отсутствует в плодах цитрусовых и в клюкве. Яблочная кислота имеет приятный вкус и безвредна для организма человека. Она применяется при изготовлении фруктовых вод я некоторых кондитерских изделий. Образуется в цикле Кребса.
Винная(диоксиянтарная)кислотаНООС-ОН(ОН)-СН(ОН)-СООН встречается в растениях в виде оптически активной D-винной кислоты, а также в виде рацемической DL-винной, или виноградной, кислоты. Встречается преимущественно в растениях южных широт. В значительном количестве D-винная кислота содержится в винограде вместе с L-яблочной и виноградной кислотами. В других плодах и ягодах D-винная кислота либо содержится в весьма незначительном количестве, либо отсутствует. При изготовлении и выдержке виноградных вин получаются значительные количества отходов в виде винного камня (кремортартара), который представляет собой кислую калиевую соль винной кислоты НООС-СН(ОН)-СН(ОН)-СООК.
Винная кислота и винный камень широко применяются при производстве фруктовых вод, для изготовления химических разрыхлителей теста, в текстильной промышленности при изготовлении протравы и красок, в медицине. В радиопромышленности и при количественном определении сахара применяется сегнетова соль – двойная калий-натриевая соль винной кислоты
КООС-СН(ОН)-СН(ОН)-СООNа.
Лимонная кислота очень широко распространена в растениях. В растениях
южных широт ее содержание выше, чем в северных. В ягодах – смородине, малине, землянике – лимонная кислота преобладает над яблочной. В плодах цитрусовых содержится главным образом лимонная кислота (в лимонах до 9% сухой массы). Значительное количество лимонной кислоты содержится в листьях и стеблях махорки – до 7-8% от сухой массы (А. А. Шмук). Кроме упомянутых органических кислот в растениях содержатся также многие другие кислоты – продукты окисления сахаров (например, глюконовая, глюкуроновая и аскорбиновая кислоты). Содержатся в растениях также циклические органические кислоты, которые будут рассмотрены в разделе, посвященном гидроароматическим и фенольным соединениям. Рассмотрение химизма процесса дыхания ясно показало, что органические кислоты образуются в процессе дыхания растений и представляют собой продукты неполного окисления сахара. Вместе с тем органические кислоты – исходный строительный материал для синтеза самых различных соединений – углеводов,
аминокислот и жиров.
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Материалы исследования.
Материалом исследования были навески свежего растительного материала массой 20 г (проба №1 – огурец, проба №2 – томат).
3.2 Методы исследования
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕЙ КИСЛОТНОСТИ
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЯБЛОЧНОЙ КИСЛОТЫ
В плодах и овощах, а также в листьях многих растений часто накапливается значительное количество свободных кислот. Определение общего содержания кислот имеет большое значение при использовании плодов и овощей в пищу, при их консервировании, а также при изучении накопления и распада кислот в растениях. Величину общей кислотности можно определить алкалиметрическим, а также ацидиметрическим титрованием с использованием соответствующих индикаторов или потенциометрически.
Принцип метода. Кислоты извлекаются из измельченного растительного материала в результате нагревания с водой при температуре 80—90° С в течение 30 минут. Извлеченные кислоты оттитровывают раствором щелочи. Общее количество кислот обычно пересчитывают на яблочную кислоту, так как она преобладает во многих плодах и овощах.
Оборудование и реактивы. 1) Водяные бани. 2) Колбы мерные емкостью 200 мл. 3) Колбы конические емкостью 100—200 мл. 4) Воронки. 5) Пипетки. 6) Фильтры. 7) Микробюретки. 8) NaOH, 0,1 н. 9) Фенолфталеин или тимолфталеин. 10) Лакмусовая бумага.
Ход определения.
Свежие плоды, овощи или листья растений тщательно измельчают на терке, или в ступке. Растительную массу перемешивают, берут навеску 20 г и переносят ее без потерь в широкогорлую колбу объемом 200 мл. В колбу приливают около 150 мл дистиллированной воды и выдерживают в течение 30 минут в водяной бане при температуре 80—90° С.
Затем колбу охлаждают водопроводной водой, доводят до метки и фильтруют в сухой стакан или колбу. Полученный фильтрат служит для определения общей кислотности. 50 мл фильтрата, содержащего кислоты, переносят в коническую колбу емкостью 100 мл. В колбу добавляют несколько капель спиртового раствора фенолфталеина и титруют из микробюретки 0,1 н. раствором NaOH до розового окрашивания. Вместо фенолфталеина в качестве индикатора можно использовать спиртовой раствор тимолфталеина. В этом случае титруют до появления синего окрашивания.
У слабо окрашенных растворов переход окраски легче уловить, если сравнивать окраску с рядом стоящей колбой с таким же количеством вытяжки из растений с добавлением такого же количества капель фенолфталеина или тимолфталеина. В том случае, когда раствор сильно окрашен и переход окраски раствора при добавлении щелочи определить трудно, то при титровании можно использовать лакмусовую бумажку. Капли жидкости из колбы при титровании переносят на кусочек фильтровальной бумаги и наблюдают изменение окраски.
Вычисление результатов. При расчете необходимо учитывать количество миллилитров щелочи, израсходованное на титрование, и поправку к ее титру.
Для расчета используют следующую формулу:
где х — количество кислот в растительном образце, мэкв;
а — количество 0,1 н. раствора NaOH, пошедшее на титрование, мл;
Т — поправка к титру щелочи;
200 — общий объем вытяжки, мл;
50 — объем вытяжки, взятый для титрования, мл;
н — навеска материала, г;
10 — перевод в миллиэквиваленты кислоты (1 мл 0,1 н. NaOH соответствует 0,1 мэкв кислоты).
Часто содержание кислот выражают не в миллиэквивалентах на 1 г, а в процентах.
Для этого число миллиэквивалентов умножают на массу 1 мэкв, кислоты (в граммах): 1 мкэв яблочной кислоты равен 67 мг (0,067 г).
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
В пробах (№1 и №2) количественно определили общее содержание органических кислот (общую кислотность) и содержание яблочной кислоты. Величину общей кислотности анализировали методом алкалиметрического титрования с использованием индикатора фенололфталеина. Расчет проводили с использованием соответствующей формулы.
Полученные данные представлены в таблице 1.
Огурец: х== 1,4 мэкв
Помидор: х== 10,4 мэкв
Таблица 1
|
№ |
Показатель |
№1 огурец |
№2 томат |
|
1. |
Общая кислотность, мэкв |
1,4 |
10,4 |
Из представленных данных следует, что в томатах общее содержание кислот значительно выше, чем в огурцах. Томаты отличаются более разнообразным качественным составом органических кислот.
Выводы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В процессе прохождения практики в лаборатории биохимии кафедры «Микробиология и биохимия» мною был проведен биохимический анализ органических кислот в растительных тканях, освоен метод определения общей кислотности в образцах ткани огурца и томата. Была изучена специализированная литература по биохимии органических кислот, нормативные документы, используемые в работе лаборатории.
Лимонная, молочная, винная, салициловая, тартроновая и ряд других органических кислот, не связанных с какими-либо компонентами пищевых продуктов, не только сообщают плодам, овощам, кислому молоку специфически приятный вкус, но вместе с пищевыми волокнами создают своеобразный «здоровый» пейзаж микрофлоры кишечника, т. е. органические кислоты сдерживают в кишечнике гнилостные, бродильные процессы и способствуют регулярному его опорожнению. Весь этот сложный процесс называют еще оздоровлением, санацией кишечника, без чего невозможно здоровое долголетие.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ДНЕВНИК-ОТЧЕТ О ВЫПОЛНЕНИИ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ЗАДАНИЯ
(заполняется бакалавром самостоятельно с отметкой о выполнении работ
руководителя практики)
|
Период Выполнения |
Краткое содержание выполняемых работ |
Отметка руководителя о выполнении |
|
2.07.13-5.07.13 |
Организация практики |
|
|
6.07.13 |
Инструктаж по технике безопасности |
|
|
8.07.13-10.07.13 |
Обзор литературы по теме исследования |
|
|
11.07.13-13.07.13 |
Освоение методик исследования |
|
|
15.07.13-16.07.13 |
Проведение научно-исследовательского эксперимента |
|
|
17.07.13-19.07.13 |
Обработка и анализ полученных данных |
|
|
22.07.13-25.07.13 |
Подготовка отчета по практике, оформление |
|
|
29.07.13 |
Защита отчета по практике |
|
ВЫВОД: программу учебной практики_________________________________________
(выполнил, невыполнил)
Руководитель практики
_________________________________
(подпись, инициалы имени, фамилия)
«____» ______________20___ г.