Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Государственное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«Алтайский государственный медицинский университет»
Министерства здравоохранения и социального развития РФ
Кафедра фармацевтической химии
с курсами органической и токсикологической химии
Анализ алициклических и ароматических
лекарственных соединений
Методические рекомендации к лабораторному практикуму
по фармацевтической химии (6 семестр)
для студентов 3 курса фармацевтического факультет
Под редакцией доктора фарм. наук, проф. Федосеевой Л.М.
Барнаул – 2008
УДК
ББК
Печатается по решению ЦКМС ГОУ ВПО АГМУ
Рецензент: канд. биол. наук, доцент Т.Н. Пензина
Авторы: Чернобровина Т.А., канд. фарм. наук, доцент;
Аникина И.Н., канд. хим. наук, доцент;
Антипова Е.А., канд. фарм. наук, доцент;
Малолеткина Т.С., канд. фарм. наук, доцент
Анализ алициклических и ароматических лекарственных соединений : методические рекомендации к лабораторному практикуму по фармацевтической химии (6 семестр) для студентов 3 курса фармацевтического факультета / Чернобровина Т.А., Аникина И.Н., Антипова Е.А., Малолеткина Т.С. ; под ред. Л.М. Федосеевой. – Барнаул: Изд-во Алтайский государственный медицинский университет, 2008. – 68 с.
Методические рекомендации предназначены для самостоятельной подготовки студентов к лабораторным занятиям, сдаче практических навыков и экзамену по фармацевтической химии
© ГОУ ВПО «Алтайский государственный
медицинский университет», 2008
© Коллектив авторов, 2008
Общая схема изучения групп и отдельных лекарственных соединений в курсе фармацевтической химии
Предпосылки для применения в медицине в историческом аспекте исследования природных соединений, получение новых структур на основе синтеза и биосинтеза.
Алициклические соединения
Антибиотики как лекарственные средства, общее понятие, классификация, особенности стандартизации. Понятие об единице антибиотической активности. Биологические, химические, физико-химические методы оценки качества.
Пенициллины. Общая химическая структура, ее особенности. Связь между строением и биологическим действием. Бензилпенициллин и его натриевая, калиевая и новокаиновая соли, бензатин-бензилпенициллин, феноксиметилпенициллин, ампициллин, амоксициллин, карбенициллиеа динатриевая соль.
Цефалоспорины. Химические превращения бензилпенициллина и получение 7-амино-дезацетоксицефалоспорановой кислоты (7-АДЦК). Частичный направленный синтез на основе 7-АДЦК и 7-АЦК. Цефалексин, цефалотин.
Ингибиторы бета-лактамаз. Сульбактам и кислота клавулановая.
Моноциклические терпены: ментол, валидол, терпингидрат.
Бициклические терпены: камфора, бромкамфора, кислота сульфокамфорная и ее новокаиновая соль (сульфокамфокаин).
Дитерпены: ретинолы и их производные (витамины группы А) как лекарственные и профилактические средства.
3
Ароматические соединения
Лекарственные вещества группы фенолов: фенол, резорцин, тимол, тамоксифен.
Производные нафтахинонов (витамины группы К). Природные соединения – филлохинон (витамин К1), фарнохинон (витамин К2). Синтетический витамин К – фитоменадион. Синтетический водорастворимый аналог по действию – менадиона натрия бисульфит (Викасол).
2. Тетрациклины (частично гидрированные производные нафтацена). Тетрациклин, окситетрациклин. Их полусинтетические производные – метациклин, доксициклин (вибрамицин).
3. Производные пара-аминофенола. Парацетамол.
4. Производные мета-аминофенола. Неостигмина метилсульфат (прозерин).
5. Ароматические кислоты и их производные. Кислота бензойная, натрия бензоат. Кислота салициловая, натрия салицилат. Амиды салициловой кислоты – салициламид, осалмид (оксафенамид). Сложные эфиры салициловой кислоты – кислота ацетилсалициловая.
6. Производные фенилпропионовой кислоты. Ибупрофен.
7. Производные фенилуксусной кислоты. Диклофенак и его соль – диклофенак-натрий (ортофен).
8. Производные бутирофенона. Галоперидол.
9. Пара-, орто-, мета-аминобензойные кислоты и их производные.
Эфиры пара-аминобензойной кислоты: бензокаин (анестезин), прокаина гидрохлорид (новокаин), тетракаина гидрохлорид (дикаин).
Производные амида пара-аминобензойной кислоты: прокаинамида гидрохлорид (новокаинамид), метоклопрамида гидрохлорид.
Диаминоацетанилиды: тримекаина гидрохлорид, лидокаина гидрохлорид.
Близкие по структуре местные анестетики: бупивакаин, артикаина гидрохлорид (ультракаин).
Производные пара-аминосалициловой кислоты: противотуберкулезное средство – пара-аминосалицилат натрия.
Производные мета-аминобензойной кислоты: кислота амидотризоевая и ее натриевая и N-метилглюкаминовая соли (триомбраст для инъекций).
10. Арилалкиламины, гидроксифенилалкиламины и их производные.
Биохимические предпосылки получения лекарственных веществ в ряду фенилалкиламинов.
Допамин (дофамин). Эфедрина гидрохлорид. Эпинефрин (адреналин) и норэпинефрин (норадреналин), их соли. Изопреналина гидрохлорид (изадрин), фенотерол (беротек), сальбутамол, верапамил.
Производные замещенных гидроксипропаноламина (бета-адреноблокаторы): пропанолола гидрохлорид (анапролин). Атенолол, тимолол, флуоксетин (прозак).
Гидроксифенилалифатические аминокислоты: леводопа и метилдопа (метилдофа).
Нитрофенилалкидамины: хлорамфеникол (левомицетин) – антибиотик ароматического ряда и его эфиры (стеарат и сукцинат).
Аминодибромфенилалкиламины: бромгексина гидрохлорид, амброксола гидрохлорид.
11. Йодированные производные ароматических аминокислот.
Лиотиронин (трийодтиронин), левотироксин (тироксин). Комплексный препарат – тиреоидин.
Сульфаниламид (стрептоцид).
4
Сульфаниламиды, замещенные по амидной группе: производные алифатического и гетероциклического рядов – сульфацетамид-натрий (сульфацил-натрий), сульфаметоксазол с триметопримом (бисептол), сульфодиметоксин, сульфален.
Сульфаниламиды, замещенные по амидной и ароматической аминогруппе: фталилсульфаметизол (фталазол), салазопиридазин.
Производные амида бензолсульфоновой кислоты: фуросемид, гидрохлоротиазид (гипотиазид, дихлотиазид), буметанид (буфенокс).
Замещенные сульфонилмочевины – как противодиабетические лекарственные средства: карбутамид (букарбан), глибенкламид, глипизид (минидиап), гликвидон (глюренорм), гликлазид (предиан). Неароматические противодиабетические лекарственные средства – бигуаниды (метформин).
Производные бензолсульфохлорамида – хлорамин Б, галазон (пантоцид).
1. Государственная Фармакопея СССР. XI изд., ч. 1, 2. – М. : Медицина, 1987.
2. Государственная Фармакопея СССР. X изд. – М. : Медицина, 1968.
3. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. – Пятигорск, 2003.
4. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. – М. : Высшая школа, 1985.
5. Арзамасцев А.П. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии. – М.: Медицина, 1987.
6. Арзамазцев А.П. Фармацевтическая химия : Учебное пособие для вузов. – М.: ГЕОТАР – Медиа, 2005.
7. Лабораторные работы по фармацевтической химии. / под редакцией В.Г.Беликова. – М.: Высшая школа, 1989.
8. Чернобровин Н.И., Чернобровина Т.А., Аникина И.Н., Антипова Е.А. Анализ органических лекарственных веществ по функциональным группам : Методические рекомендации для студентов очного отделения фармацевтического факультета – 2007.
9. Машковский М.Д. Лекарственные средства. – М.: Медицина, 2003. – Ч. 1, 2.
10. Конспекты лекций.
3. Пономарев В.Л. Аналитическая химия. – М.: Высш. шк., 1982. – Т. 1, 2.
5
|
№ п/п |
Тема |
|
1. |
Анализ антибиотиков b-лактамидов и аминогликозидов: пенициллинов, цефалоспоринов. |
|
2. |
Анализ антибиотиков группы стрептомицинов и макролидов. |
|
3. |
Анализ препаратов моно- и бициклических терпенов. Витамины группы А. |
|
4. |
Контрольная работа № 1 по темам занятий № 1 – 3. |
|
5. |
Анализ препаратов фенолов, хинонов и их производных. |
|
6. |
Анализ производных мета- и пара-аминофенола. Анализ антибиотиков ряда тетрациклина. |
|
7. |
Контрольная работа № 2 по темам занятий № 5 – 6. |
|
8. |
Анализ препаратов ароматических кислот и их производных. |
|
9. |
Анализ препаратов пара-аминобензойной, фенилуксусной и фенилпропионовой кислот и их производных. |
|
10. |
Анализ препаратов производных пара-аминосалициловой кислоты. Диэтиламиноцетанилиды. |
|
11. |
Контрольная работа № 3 по темам занятий № 8 – 10. |
|
12. |
Арилалкиламины, оксифенилалкиламины, нитрофенилалкиламины и их производные. Йодированные производные ароматических и арилалифатических аминокислот. |
|
13-14. |
Анализ препаратов амидов бензолсульфокислоты. |
|
15. |
Контрольная работа № 4 по темам занятий № 12 – 14. |
|
16. |
Сдача практических навыков. |
|
17. |
Итоговое занятие. Зачет. |
6
ТЕМА I. Антибиотики бета-лактамиды, аминогликозиды, макролиды. Терпены
ЗАНЯТИЕ 1. Анализ антибиотиков группы пенициллина и цефалоспорина
Актуальность: Пенициллин является антимикробным веществом, продуцируемым различными видами плесневого гриба Penicillium. Пенициллины оказывают бактерицидное действие на микроорганизмы (стрептококки, стафилококки, пневмококки, спирохеты и др.), находящиеся в фазе роста, за счет подавления биосинтеза клеточной стенки. Натриевая и калиевая соли бензилпенициллина действуют непродолжительно, новокаиновая соль бензилпенициллина и бициллин медленнее всасываются (при внутримышечном введении), но действуют более продолжительное время. Феноксиметилпенициллин, оксациллин, ампициллин эфективны при пероральном применении.
В 50-е годы ХХ в. получен ряд антибиотиков – производных 7-аминоцефалоспорановой кислоты (цефалоспорины). Благодаря широкому спектру действия и высокой эффективности, цефалоспорины считаются антибиотиками нового поколения. Препараты этой группы различаются по фармакокинетическим параметрам, степени всасывания при различных путях введения, быстроте наступления эффекта и длительности действия. Цефалоспорины первого поколения – цефазолин и цефалотин – практически не всасываются при приеме внутрь, их назначают только парентерально. Внутривенно вводят также препараты четвертого поколения – цефпиром, цефметазон.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ ионов Na+ и К+ (аналитическая химия).
2. Сущность методов йодометрии, спектрофотометрии в УФ области, гравиметрии (аналитическая химия).
3. Активность антибиотиков в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Определение активности антибиотиков методом диффузии в aгаp (микробиология).
4. Особенности изготовления лекарственных форм, содержащих антибиотики (технология лекарственных форм).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Пенициллины. Природные – бензилпенициллина натриевая, калиевая и новокаиновая соли, феноксиметилпенициллин, бензатин – бензилпенициллин. Полусинтетические – ампициллин, карбенициллина динатриевая соль, амоксициллин, оксациллина натриевая соль.
Цефалоспорины. Цефалексин, цефалотин.
История открытия антибиотиков, роль отечественных и зарубежных ученых. Классификация антибиотиков. Основные методы получения антибиотиков: микробиологический, полусинтетический, синтетический. Общие физико-химические свойства. Химические и физико-химические методы качественного анализа антибиотиков, определение доброкачественности. Биологические, химические и физико-химические методы количественного анализа. Хранение, применение антибиотиков.
Ингибиторы бета-лактамаз. Сульбактам, кислота клавулановая. Строение, физико-химические свойства, методы анализа, хранение, применение.
Подробнее смотри МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии, с. 30–32.
7
Задание 1. Качественные реакции антибиотиков бета-лактамидов.
Задание 2. Спектрофотометрический анализ антибиотиков бета-лактамидов.
Задание 3. Испытание на доброкачественность антибиотиков бета-лактамидов.
Задание 4. Количественное определение суммы пенициллинов.
Задание 1. Качественные реакции на антибиотики группы пенициллинов и цефалоспоринов
1. Гидроксамовая реакция (общая реакция на β-лактамный цикл). На предметное стекло или в фарфоровую чашку, помещают 0,01 г препарата, прибавляют 1 каплю раствора, состоящего из 1 мл 1 н. раствора гидроксиламина гидрохлорида и 0,3 мл 1 н. раствора натрия гидроксида. Через 2-3 минуты к смеси добавляют 1 каплю раствора уксусной кислоты, тщательно перемешивают, затем добавляют 1 каплю раствора меди (II)
нитрата (сульфата). Выпадаёт осадок зеленого цвета.
Записывают уравнение реакций.
2. Реакция обнаружения серы. К 0,01 г препарата в пробирке прибавляют 1 мл концентрированной азотной кислоты и кипятят 2-3 минуты. После охлаждения добавляют 0,5 мл раствора бария хлорида. Выпадает белый осадок.
Записывают уравнение реакции.
3. Реакция на первичные ароматические амины. Около 0,01 г бензилпенициллина новокаиновой соли растворяют в 2 мл воды, прибавляют 0,5 мл разведенной кислоты хлористоводородной, 0,5 мл 0,1 М раствора натрия нитрита. Полученный раствор хорошо перемешивают и прибавляют к 1 мл щелочного раствора β-нафтола. Появляется вишнево-красное окрашивание.
Записывают уравнение реакции.
4. Ионы калия и натрия. Пирохимическая реакция. Сухой порошок (около 0,05 г) бензилпенициллина калиевой или натриевой соли вносят в бесцветное пламя горелки и отмечают окраску пламени.
5. Реакция комплексообразования цефалексина, цефалотина натриевой соли. К 0,02 г препарата прибавляют 5 капель 1% раствора уксусной кислоты, 2 капли 1% раствора меди (II) сульфата и 1 каплю раствора натрия гидроксида. Появляется оливково-зеленое или голубовато-зеленое окрашивание.
Записывают уравнение реакции.
6. Реакция на остаток аминокислоты в ампициллине.
а) 0,02 г ампициллина натриевой соли растворяют в 2 мл воды, прибавляют 1 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 минут. Появляется вишневое окрашивание.
Записывают уравнение реакции.
б) 0,02 г ампициллина растворяют в 2 мл воды и прибавляют несколько капель реактива Фелинга. Появляется фиолетовое окрашивание.
8
7. Реакция с реактивом Марки на феноксиметилпенициллин. К 0,01 г феноксиметилпенициллина добавляют 0,5 мл свежеприготовленного реактива Марки (2 капли раствора формальдегида в 0,5 мл концентрированной серной кислоты). Появляется красное окрашивание. При нагревании наблюдается углубление окраски.
Задание 2. Спектрофотометрический анализ
Готовят 0,18% раствор бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли в воде или 0,02% раствор феноксиметилпенициллина в 0,04% растворе натрия гидрокарбоната и снимают спектр поглощения в диапазоне длин волн 220-400 нм на спектрофотометре. На миллиметровой бумаге вычерчивают спектральную кривую в координатах оптическая плотность – длина волны и отмечают λmax.
2. Определение разности или отношения оптических плотностей растворов пенициллинов. Для бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли находят разность между оптической плотностью при длинах волн 263 и 280 нм (D263 –D280>>0,72). Для феноксиметилпенициллина находят отношение оптических плотностейпри 268 и 274 нм, которое должно быть равно 1,21-1,24.
Задание 3. Испытание на доброкачественность
1. Прозрачность и цветность раствора. Готовят 3% раствор бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли в воде для инъекций. Раствор должен быть прозрачным и бесцветным в течение 24 часов при температуре не выше 10 °С.
2. Кислотность и щелочность. Готовят 2% водный раствор бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли и измеряют рН полученного раствора при помощи рН-метра. Значение рН должно быть равно 5,5-7,5.
Задание 4. Количественное определение суммы пенициллинов на примере бензилпенициллина натриевой соли
Около 0,06-0,08 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5 мл раствора переносят (мерной пипеткой) в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 2 мл 1 н. раствора натрия гидроксида и оставляют на 20 мин. После этого к смеси прибавляют 2 мл 1 н. раствора кислоты хлористоводородной, 5 мл 0,3 М ацетатного буфера (рН 4,50 ± 0,05), 20 мл 0,01 н. раствора йода (берут мерной пипеткой) и оставляют на 20 минут в темном месте.
Титруют 0,01 н. раствором натрия тиосульфата до слабо-желтого цвета, затем прибавляют раствор крахмала (0,5-1,0 мл) и титруют до обесцвечивания.
В контрольной пробе в колбу вносят 5 мл раствора пенициллина (берут мерной пипеткой), прибавляют 5 мл 0,3 М ацетатного буферного раствора, 20 мл 0,01 н. раствора йода (берут мерной пипеткой) и оставляют на 20 минут в темном месте, после чего титруют 0,01 н. раствором натрия тиосульфата, как описано выше. Разность объемов, затраченных титрованных растворов, соответствует содержанию суммы пенициллинов в препарате.
Содержание (%) суммы пенициллинов в препарате вычисляют по формуле:
X = (V1 – V2) х K х T х 100 х 100 / m х 5
9
где V1 – объем 0,01 н. раствора натрия тиосульфата, израсходованный при контрольном титровании; V2 – объем 0,01 н. раствора натрия тиосульфата, израсходованный при опытном титровании; К – коэффициент поправки 0,01 н. раствора натрия тиосульфата; Т – коэффициент пересчета или масса стандартного образца натриевой соли бензилпенициллина или феноксиметилпенициллина с учетом температуры, прореагировавшая с 1 мл титранта (титр).
Зависимость коэффициента пересчета (Т)
стандартных образцов пенициллинов от температуры
|
Температура, 0С |
Коэффициент пересчета |
|
|
бензилпенициллин |
феноксиметилпенициллин |
|
|
10 |
0,0004753 |
0,0005118 |
|
11 |
0,0004673 |
0,0005015 |
|
12 13 |
0,0004587 0,0004521 |
0,0004912 0,0004831 |
|
14 |
0,0004445 |
0,0004726 |
|
14 15 |
0,0004374 0,0004310 |
0,0004630 0,0004533 |
|
16 |
0,0004241 |
0,0004445 |
|
17 18 |
0,0004177 0,0004119 |
0,0004367 0,0004281 |
|
19 |
0,0004055 |
0,0004209 |
|
20 21 |
0,0004000 0,0003965 |
0,0004146 0,0004100 |
|
22 |
0,0003934 |
0,0004052 |
|
23 25 |
0,0003906 0,0003876 |
0,0004010 0,0003962 |
ЗАНЯТИЕ 2. Антибиотики – аминогликозиды и макролиды
Актуальность. Антибиотики – аминогликозиды синтезируются в природе актиномицетами. Разные антибиотики этой группы различаются по активности, спектру и длительности действия. Для них характерен широкий спектр бактерицидного действия в отношении грамположительных и особенно грамотрицательных бактерий. Канамицина сульфат и стрептомицина сульфат эффективны в отношении микобактерий туберкулеза, гентамицина сульфат является одним из средств борьбы с тяжелой гнойной инфекцией. Амикацина сульфат – полусинтетический препарат группы антибиотиков аминогликозидов – является наиболее активным антибиотиком аминогликозидом. Все антибиотики – аминогликозиды обладают нефро- и ототоксичностью.
Антибиотики – макролиды также обладают широким спектром антимикробного действия. Эритромицин – природный антибиотик, эффективен в отношении грамположительных микроорганизмов и в терапевтических дозах действует бактериостатически. Азитромицин или сумамед – полусинтетический антибиотик действует более эффективно по сравнению с эритромицином в отношении грамотрицательных микроорганизмов.
10
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Строение гликозидов, составные части молекулы (органическая химия, фармакогнозия).
2. Сущность методов аргентометрии, спектрофотометрии в УФ области, фотоэлектроколориметрии, бариметрии (аналитическая химия)
3. Антимикробная активность антибиотиков-аминогликозидов. Ме ханизм их действия (фармакология).
4. Особенности приготовления лекарственных форм, содержащих антибиотики (технология лекарственных форм).
Антибиотики-аминогликозиды. Стрептомицина сульфат, канамицина сульфат, гентамицина сульфат, полусинтетический антибиотик – амикацин.
Антибиотики – макролиды. Эритромицин и азитромицин (сумамед).
Получение антибиотиков-аминогликозидов и макролидов. Физико-химические свойства. Определение подлинности, доброкачественности, количественного содержания химическими и физико-химическими методами, хранение, применение (смотри МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии, с. 31).
Задание 1. Качественные реакции на антибиотики-аминогликозиды.
Задание 2. Экспресс-анализ лекарственной формы.
3. Оформление и защита протоколов, приведение в порядок рабочего места.
Задание 1. Качественные реакции на антибиотики-аминогликозиды: стрептомицина сульфат, канамицина сульфат, амикацин, гентамицина сульфат
Стрептомицина сульфат
Записывают уравнение реакции.
2. Реакции на альдегидную группу L-стрептозы.
а) К 2 мл 1% раствора стрептомицина сульфата добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 0,1 г резорцина и нагревают на кипящей водяной бане. Появляется вишнево-красное окрашивание.
Записывают уравнение реакции.
б) К 2 мл 1% раствора стрептомицина сульфата прибавляют 0,5 мл реактива Несслера. Выпадает черный осадок металлической ртути.
Записывают уравнение реакции.
11
в) К 2 мл 1% раствора стрептомицина сульфата прибавляют 1 мл аммиачного раствора серебра нитрата (0,5 мл раствора серебра нитрата и 0,5 мл 0,5 мл раствора аммиака) и нагревают на кипящей водяной бане в течение 3 мин. На стенках пробирки образуется металлическое зеркало.
Записывают уравнение реакции.
3. Реакция на остаток гуанидина (реакция Сакагучи). К 0,5 мл 0,5% раствора стрептомицина сульфата прибавляют 2 мл свежеприготовленного раствора альфа-нафтола в 10% растворе натрия гидроксида (0,05 г альфа-нафтола в 2 мл раствора натрия гидроксида) и 5 капель бромной воды. Появляется малиновое окрашивание.
Записывают уравнение реакции.
4. Реакция на сульфаты. К 2 мл 2% раствора стрептомицина сульфата прибавляют 0,5 мл раствора бария хлорида, выпадает белый осадок.
Записывают уравнение реакции.
Канамицина сульфат
1. Реакция с орцином (на сахара). 0,1 г лекарственного вещества растворяют в 2 мл воды. К раствору прибавляют 0,8 мл 20% спиртового раствора орцина (5-метилрезорцин), 2 мл концентрированной кислоты хлороводородной, 0,5 мл раствора железа (III) хлорида, и помещают на кипящую водяную баню на 20 минут, появляется зеленое окрашивание.
Записывают уравнение реакции.
Примечание: вместо раствора орцина можно использовать 20% спиртовый раствор α-нафтола (0,8-1,0 мл).
2. Реакция на сульфаты. К 2 мл 2% раствора канамицина сульфата прибавляют 0,5 мл раствора бария хлорида: выпадает белый осадок.
Записывают уравнение реакции.
Задание 2. Анализ лекарственной формы
Состав: Стрептомицина сульфата 100 000 ЕД или 0,125 г (ФС активность 800 ЕД/мг)
Натрия хлорида 0,8% - 10,0
ПОДЛИННОСТЬ
1. Натрия хлорид. К 5-6 каплям исследуемого раствора прибавляют 1-2 капли раствора серебра нитрата. Выпадает белый осадок, растворимый в растворе аммиака.
Записывают уравнение реакции.
2. Стрептомицина сульфат
а) К 5-6 каплям раствора прибавляют 2-3 капли раствора натрия гидроксида и нагревают на водяной бане в течение 3 мин. После охлаждения добавляют 5-6 капель разведенной серной кислоты и 2-3 капли раствора хлорида окисного железа. Появляется фиолетовое окрашивание.
б) К 5-6 каплям раствора прибавляют 0,5 мл раствора бария хлорида. Образуется белый осадок.
Записывают уравнения реакций.
12
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Натрия хлорид
К 1 мл раствора (берут пипеткой) прибавляют 2 мл воды и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата до оранжево-желтого окрашивания (индикатор – хромат калия). 1 мл 0,1 М раствора нитрата серебра соответствует 0,005844 г натрия хлорида.
Записывают уравнения реакций.
Стрептомицина сульфат (ФЭК метод)
2 мл раствора (берут мерной пипеткой) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и объем доводят до метки (раствор А). 10 мл раствора А (берут мерной пипеткой) помещают в химический стаканчик емкостью 50 мл, прибавляют 2 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида, нагревают на водяной бане в течение 10 мин и охлаждают под струей холодной воды 3 мин. Затем добавляют 8 мл 1% раствора железоаммониевых квасцов в 0,275 М растворе серной кислоты и перемешивают.
Через 3 мин измеряют оптическую плотность (D1) окрашенного раствора при длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – смесь 10 мл воды, 2 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и 8 мл 1% раствора железоаммониевых квасцов в 0,275 М растворе серной кислоты. Записывают уравнения реакций.
Параллельно проводят реакцию с 10 мл стандартного раствора стрептомицина сульфата, содержащего 0,004 г стрептомицина-основания, и измеряют оптическую плотность (D2). Содержание стрептомицина – основания (Х) вычисляют по формуле:
Приготовление стандартного раствора. Навеску стрептомицина сульфата (точную массу, содержащую 0,2 г стрептомицина-основания) растворяют в 20 мл воды в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем водой до метки.
В 1 мл стандартного раствора содержится 0,004 г стрептомицина-основания.
По окончании работы студенты оформляют протокол анализа лекарственной формы, делают заключение о качестве лекарственной формы согласно приказу № 305.
ЗАНЯТИЕ 3. Алифатические циклические соединения. Моно- и бициклические терпены. Дитерпены - витамины группы А (ретинолы)
Актуальность: В основе структуры алифатических циклических соединений лежит углеводород изопрен Н2С = С(СН3)-СН = СН2. Терпены широко используются в различных отраслях химической, парфюмерной промышленности и в медицине. Препараты терпенов оказывают успокаивающее, противовоспалительное, болеутоляющее, спазмолитическое, отхаркивающее действие. Витамины группы А (ретинолы) необходимы для роста и размножения клеток, способствуют нормальному обмену веществ, обеспечивают нормальную деятельность органа зрения.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Строение и физико-химические свойства производных моно- и бициклических терпенов, стереоизомерия (фармакогнозия, органическая химия).
2. Аргентометрия, гравиметрия, поляриметрия, кислотно-основное титрование (аналитическая химия).
13
3. Использование в медицинской практике препаратов, содержащих моно- и бициклические терпены, витамины группы А (биохимия, фармакология).
4. Приготовление лекарственных форм, содержащих терпены (фармацевтическая технология).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Моноциклические терпены. Ментол, валидол, терпингидрат.
Бициклические терпены. Камфора, бромкамфора, сульфокамфорная кислота и ее соль – сульфокамфокаин.
Дитерпены. Ретинола ацетат.
Терпены. Общая характеристика, источники получения, классификация. Работы русских и советских ученых по исследованию отечественных эфирных масел и растительных смол. Физико-химические свойства терпенов, химические и физико-химические методы определения подлинности, чистоты и количественного содержания. Хранение, применение (смотри МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии, с. 31 – 32).
План занятия
Задание 1. Качественные реакции на терпены.
Задание 2. Анализ таблеток с терпингидратом.
Задание 3. Количественное определение суммы каротиноидов в облепиховом масле.
3. Оформление и защита протокола, приведение в порядок рабочего места.
Задание 1. Реакции на подлинность ментола, камфоры, сульфокамфокаина
Записывают уравнения реакций.
2. Реакция образования гидразонов (кетогруппа камфоры, сульфокамфокаина). 0,1 г вещества растворяют в пробирке в l мл этанола, прибавляют 3 мл раствора 2,4-динитрофенилгидразина в кислоте хлороводородной и нагревают до кипения, через 5 мин образуется желто-оранжевый осадок или окрашивание раствора.
Записывают уравнения реакций.
3. Реакция на серу ковалентно связанную после минерализации. 0,25 г сульфокамфокаина помещают в тигель, прибавляют 0,05 г натрия нитрата и 2 г натрия карбоната. Смесь сжигают и затем прокаливают при красном калении. После охлаждения к смеси осторожно прибавляют концентрированную кислоту хлороводородную до прекращения вспенивания и испаряют досуха. Сухой остаток растворяют в 50 мл воды и фильтруют. К фильтрату прибавляют воды до 100 мл, подкисляют 6 мл концентрированной кислоты хлороводородной и нагревают до кипения. К кипящему раствору при перемешивании прибавляют 5 мл 5% раствора бария хлорида. Выпадает белый осадок. Записывают уравнения реакций.
14
4. Реакция с хлоридом сурьмы (ретинолы). 5-6 капель масляного раствора ретинола ацетата или облепихового масла смешивают с 3-5 каплями раствора сурьмы хлорида в хлороформе. Появляется быстро исчезающее синее окрашивание.
Записывают уравнения реакций.
Задание 2. Анализ лекарственной формы промышленного производства (таблетки терпингидрата и натрия гидрокарбоната поровну по 0,25 г)
Состав: Терпингидрата - 0,25 г
Натрия гидрокарбоната - 0,25 г
Вспомогательных веществ
до получения таблетки массой 0,6 г
ПОДЛИННОС'I'Ь
а). К 3 мл горячего фильтрата прибавляют несколько капель концентрированной серной кислоты, жидкость приобретает ароматный запах терпинеола и цинеола. Записывают уравнение реакции.
б). Оставшийся фильтрат помещают в фарфоровую чашку, прибавляют 5 капель 3% спиртового раствора железа (III) хлорида и осторожно выпаривают досуха, одновременно в различных местах чашки появляется карминно-красное, фиолетовое и зеленое окрашивание. При добавлении к охлажденному остатку бензола последний окрашивается в синий цвет.
2. Карбонат-ион. Остаток на фильтре растворяют в 1-2 мл воды очищенной. К 1 мл раствора прибавляют 0,5 мл разведенной кислоты хлороводородной. Выделяются пузырьки газа. Записывают уравнение реакции.
3. Натрий.
а). 1 мл раствора подкисляют разведенной уксусной кислотой и прибавляют 0,5 мл раствора цинкуранилацетата. Образуется желтый кристаллический осадок. Записывают уравнение реакции.
б). Микрокристаллоскопическая реакция – 1 каплю раствора помещают на предметное стекло, прибавляют 1 каплю раствора кислоты пикриновой, оставляют на 1-2 минуты, по краям капли образуются кристаллы игольчатой формы, которые рассматривают под микроскопом. Записывают уравнение реакции.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Около 0,3 г порошка растертых таблеток (точная навеска) растворяют в конической колбе в 20 мл 95% этанола и фильтруют. 10 мл фильтрата переносят пипеткой в бюкс, этанол испаряют на водяной бане при температуре около 60 °С и остаток высушивают в эксикаторе до постоянной массы.
Содержание терпингидрата должно быть равно 0,237-0,262 г в расчете на среднюю массу одной таблетки. Расчет проводят по формуле:
X(г)=
15
где: a - масса определяемого компонента в навеске лекарственного средства (г);
b - навеска препарата (г);
Р - средняя масса таблетки (г) Определение смотри ОФС «Таблетки», ГФ Х, ч. 2.
Остаток в колбе и на фильтре растворяют в 25 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды и титруют 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной (индикатор метиловый оранжевый).
1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,008400 г натрия гидрокарбоната, которого должно быть 0,232-0,262 г в расчете на среднюю массу одной таблетки.
Делают вывод о качестве лекарственной формы.
Задание 3. Количественное определение суммы каротиноидов в облепиховом масле (ФЭК метод)
0,05 г (2 капли) облепихового масла (точная навеска, взвешивают в бюксе) переносят количественно в мерную колбу емкостью 50 мл растворителем гексаном, доводят объем до метки и измеряют оптическую плотность (Dх) при λ=450 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. Параллельно измеряют оптическую платность стандартного раствора.
Приготовление стандартного раствора. 0,36 г калия дихромата (точная навеска) растворяют в мерной колбе емкостью l литр, доводят объем до метки. Полученный раствор по окраске соответствует раствору, содержащему 0,00208 мг β-каротина в 1 мл.
Расчет проводят с использованием оптической плотности стандартного раствора по формуле:
X=(мг%)
где: Dх – оптическая плотность исследуемого раствора,
D – оптическая плотность стандартного раствора
или с учетом = 2500 по формуле (спектрофотометрия в видимой области):
X=
По окончании работы делают вывод о содержании суммы каротиноидов в исследуемом образце облепихового масла (ФС не менее 60 мг%).
ЗАНЯТИЕ 4. Контрольная работа по теме «Анализ антибиотиков β-лактамидов, аминогликозидов, макролидов, моно- и бициклических терпенов, дитерпенов (ретинолов)»
Вопросы для подготовки к контрольной работе смотри в методических указаниях для самостоятельной работы студентов 3 курса фармацевтического факультета по фармацевтической химии (с. 30-34). Контроль знаний студентов проводится в виде тестового контроля (компьютер) и собеседования по билетам.
16
ЗАНЯТИЕ 5. Анализ препаратов фенолов, хинонов и их производных
Актуальность. Фармацевтические препараты ароматической природы представляют обширную группу лекарственных средств широкого спектра фармакологического действия. Производные фенолов применяются в основном как антисептические средства, синестрол и его аналоги – как эстрогены нестероидной структуры. Нафтохиноны – фарнохинон и филлохинон обладают К-витаминным действием, их синтетические аналоги, например, викасол также проявляют антигеморагическое действие.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Препараты фенолов: фенол, тимол, резорцин.
Синтетические аналоги эстрогенов нестероидной структуры: синестрол, диэтилстильбэстрол и его эфир диэтилстильбэстрола пропионат. Тамоксифен как антиэстроген.
Производные нафтахинонов (витамины группы К). Природные соединения – филлохинон (витамин К1), фарнохинон (витамин К2). Синтетический витамин – фитоменадион. Синтетический водорастворимый аналог по действию – викасол (менадиона натрия бисульфит).
Общая характеристика, источники и способы получения, латинские названия препаратов, физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа, доброкачественность, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса, с. 34-35).
План занятия
Задание 1. Фармакопейный анализ фенола (ГФIХ, ст. 376).
Задание 2. Фармакопейный анализ резоцина (ГФХ, ст. 577).
Задание 3. Фармакопейный анализ тимола (ГФХ, ст. 681).
Задание 4. Фармакопейный анализ синэстрола (ГФХ, ст. 651).
Задание 5. Фармакопейный анализ диэтилстильбэстрола (ГФХ, ст. 206).
3. Оформление и защита протокола, приведение в порядок рабочего места.
17
Задание 1. Фармакопейный анализ препарата
PHENOLUM PURUM
Фенол чистый
С6 Н 5ОН М.в. 94,11
Описание. Бесцветные, тонкие, длинные игольчатые кристаллы или бесцветная кристаллическая масса своеобразного запаха. На воздухе постепенно розовеет.
Растворимость. Растворим в 20 частях воды, легко растворим в спирте, эфире, хлороформе, глицирине и жирных маслах, а также в растворах едких щелочей и растворе аммиака.
Подлинность. Раствор препарата (1:100) с 2 – 3 каплями раствора железа (III) хлорида дает фиолетовое окрашивание.
При добавлении бромной воды к водному раствору фенола выпадает белый осадок.
Температура кипения 178 – 182 °С.
Температура затвердевания расплавленного фенола должна быть не ниже 39,5 °С.
Испытание на чистоту. 5 г препарата нагревают на водяной бане на часовом стекле до полного улетучивания, остаток не должен превышать 0,02%.
При смешении расплавленного препарата с равным объемом хлороформа должна получиться прозрачная жидкость (вода).
Водный раствор препарата (1:20) должен быть прозрачным, без осадка (крезолы) и иметь нейтральную или лишь слабокислую реакцию.
Количественное определение. Около 0,5 г препарата (точная масса) растворяют в воде, раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл и доводят водой до метки. 25 мл этого раствора переносят в склянку для бромирования вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл 0,1 н. раствора калия бромата, 1 г калия бромида и 10 мл 50%-ного раствора серной кислоты, жидкость в склянке тщательно перемешивают и оставляют на 15 мин. После этого к смеси прибавляют 20 мл раствора калия иодида, сильно взбалтывают, оставляют на 10 минут в темном месте, после чего выделившийся иод титруют 0,1 н. раствором натрия тиосульфата (индикатор — крахмал).
Параллельно в тех же условиях проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 н. раствора калия бромата соответствует 0,001568 г фенола, которого в препарате должно быть не менее 98,0%.
Хранение. С п р е д о с т е р о ж н о с т ь ю (список Б), в хорошо закупоренных банках, в защищенном от света месте.
Высшая разовая доза 0,1 г.
Высшая суточая доза 0,3 г.
18
Задание 2. Фармакопейный анализ препарата
Resorcinum
Резорцин
m-Диоксибензол
С6Н6О2 М.в. 110,11
Описание. Белый или белый со слабым желтоватым оттенком кристаллический порошок со слабым характерным запахом. Под влиянием света и воздуха постепенно окрашивается в розовый цвет.
Растворимость. Очень легко растворим в воде и 95% спирте, легко растворим в эфире, очень мало растворим в хлороформе, растворим в глицерине и жирном масле.
Подлинность. При прибавлении к 10 мл раствора препарата (1:200) 3 капель раствора железа (III) хлорида появляется сине-фиолетовое окрашивание, переходящее от прибавления раствора аммиака в буровато-желтое.
При сплавлении в фарфоровой чашке нескольских кристаллов резорцина с избытком фталевого ангидрида образуется плав желто-красного цвета. При растворении плава в растворе натрия гидроксида появляется интенсивная зеленая флюоресценция.
Температура плавления 109-112 0С.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 1 г препарата в 20 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным и окраска его не должна быть интенсивнее эталона № 5 а или № 5 в.
Кислотность или щелочность. К 10 мл этого раствора прибавляют 1 каплю раствора бромфенолового синего. Окраска раствора должна изменяться от прибавления не более 0,1 мл 0,02 н. раствора натрия гидроксида или соляной кислоты.
Пирокатехин. При прибавлении к 10 мл того же раствора 0,5 мл раствора свинца ацетата в течение 2 мин не должно появляться ни осадка, ни опалесценции.
Фенол. При нагревании 1 г препарата с 2 мл воды на водяной бане (температура бани 40-50 °С) не должен ощущаться запах фенола.
Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна превышать 0,1%.
Количетвенноеопределение. Около 0,2 г препарата (точная масса) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл воды и доводят объем водой до метки. Переносят 20 мл этого раствора в склянку для бромирования вместимостью 250 мл, прибавляют 40 мл 0,1 н. раствора калия бромата, 10 мл раствора калия бромида, 10 мл 50%-ного раствора серной кислоты, перемешивают и оставляют на 15 мин. Затем к смеси прибавляют 20 мл раствора калия иодида, смесь сильно взбалтывают и оставляют на 10 мин. в темном месте. После этого добавляют 2-3 мл хлороформа и титруют выделившийся иод 0,1 н. раствором натрия тиосульфата. Параллельно проводят контрольный опыт. Химизм реакций аналогичен реакциям количественного определения фенола чистого.
1 мл 0,1 н. раствора калия бромата соответствует 0,001835 г резорцина, которого в препарате должно быть не менее 99,0%.
Хранение. В хорошо укупоренных банках оранжевого стекла.
Антисептическое средство.
19
Задание 3. Фармакопейный анализ препарата
Thymolum
Тимол2-Изопропил-5-метилфенол
С10Н14О М.в. 150,22
Описание. Крупные бесцветные кристаллы или кристаллический порошок с характерным запахом и пряно-жгучим вкусом, летуч с водяным паром.
Растворимость. Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте, хлороформе, эфире, жирных маслах и ледяной уксусной кислоте, растворим в растворе едкого натра.
Подлинность. В холодной воде тимол погружается вниз, при повышении температуры до 45 0С плавится и поднимается на поверхность.
3-5 мг препарата растворяют в 1 мл ледяной уксусной кислоты, прибавляют 6 капель концентрированной серной кислоты и 1 каплю концентрированной азотной кислоты, в отраженном свете наблюдается сине-зеленое окрашивание, в проходящем свете темно-красное.
0,2 г препарата нагревают на водяной бане с 1 мл раствора натрия гидроксида. Получается бесцветный прозрачный раствор, приобретающий при дальнейшем нагревании желтовато-розовое окрашивание. К подогретому раствору прибавляют 2-3 капли хлороформа и взбалтывают появляется красно-фиолетовое окрашивание.
Температура плавления. 49 – 51 0С.
Кислотность или щелочность. Раствор 0,4 г препарата в 10 мл 50% спирта должен иметь нейтральную реакцию.
Фенол. 0,4 препарата взбалтывают с 10 мл теплой воды и после охлаждения фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 1 каплю раствора хлорида окисного железа; не должно появляться фиолетовое окрашивание.
Нелетучий остаток. 0,5 г препарата нагревают на водяной бане до полного улетучивания и сушат при 100-105 0С. Остаток должен быть невесомым.
5.3. Количественное определение. Около 0,5 г препарата (точная масса) растворяют в 5 мл раствора натрия гидроксида в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. 10 мл полученного раствора переносят в колбу с притертой пробкой, прибавляют 0,5 г калия бромида, 40 мл разведенной соляной кислоты, 3 капли раствора метилового оранжевого и при сильном взбалтывании титруют 0,1 н. раствором калия бромата. К концу титрования прибавляют еще 2 капли раствора метилового оранжевого. Исчезновение розового окрашивания жидкости указывает на конец титрования:
1 мл 0,1 н. раствора калия бромата соответствует 0,003755 г тимола, которого в препарате должно быть не менее 99,0%.
Хранение. Список Б. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.
Высшая разовая доза внутрь 1,0 г.
Высшая суточная доза внутрь 4,0 г.
Антисептическое и противоглистное средство.
20
Задание 4. Фармакопейный анализ препарата
Synoestrolum
Синестрол
мезо-3,4-Ди-(n-оксифенил)-гексан
С18Н22О2 М.в. 270,37
Описание. Белый или белый со слегка желтоватым оттенком порошок без запаха.
Растворимость. Практически не растворим в воде, легко растворим в 95% спирте и эфире, мало растворим в хлороформе, трудно растворим в персиковом масле.
Подлинность. 1-2 мг препарата растворяют при нагревании в 4 мл хлороформа, прибавляют 2 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли формалина и взбалтывают; появляется вишнево-красное окрашивание нижнего слоя.
К 0,25 г препарата добавляют 1 мл уксусного ангидрида и 2 мл безводного пиридина. Кипятят с обратным холодильником в течение 15 минут, охлаждают, добавляют 50 мл воды и тщательно встряхивают. Осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат при 100-105 0С . Температура плавления выделенного диацетата синэстрола 137-139 0С .
Температура плавления 184-1870С.
Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата (точная навеска) сушат при 100-1050С до постоянного веса. Потеря в весе не должна превышать 1%.
Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна превышать 0,1%.
Количественное определение. Около 0,5 г препарата (точная навеска) помещают в колбу для ацетилирования емкостью 200-250 мл, прибавляют пипеткой 5 мл раствора уксусного ангидрида в пиридине, присоединяют колбу к обратному холодильнику и нагревают в течение 45 минут на кипящей водяной бане. Раствор охлаждают, прибавляют через холодильник 25 мл воды и через 10-15 минут титруют при энергичном перемешивании 0,5 н. раствором натрия гидроксида (индикатор – фенолфталеин).
Параллельно проводят контрольный опыт.
Разность между количеством миллилитров 0,5 н. раствора натрия гидроксида, израсходованного на титрование контрольного опыта и исследуемого раствора, пересчитывают на синэстрол.
1 мл 0,5 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,06759 г С18Н22О2 , которого в препарате должно быть не менее 98,5%.
Хранение. Список Б. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.
Высшая разовая доза внутрь 0,002 г.
Высшая суточная доза внутрь 0,004 г.
Высшая разовая доза внутримышечно 0,002 г.
Высшая суточная доза внутримышечно 0,003 г.
Высшая разовая доза внутримышечно при злокачественных новообразованиях 0,06 г.
Высшая суточная доза внутримышечно при злокачественных новообразованиях 0,1 г.
Эстрогенный препарат (синтетический аналог женского полового гормона).
21
Задание 5. Фармакопейный анализ препарата
Diaetylstilboestrolum
Диэтилстильбэстрол
транс-3,4-ди-(n-оксифенил)-гексен-3
С18Н20О2 М.в. 268,36
Описание. Белый кристаллический порошок без запаха.
Растворимость. Очень мало растворим в воде, растворим в 95% спирте и эфире, мало растворим в хлороформе.
Подлинность. 0,01 г препарата растворяют в 1 мл концентрированной серной кислоты; появляется ярко-оранжевое окрашивание. При добавлении 10 мл воды окраска через несколько минут исчезает.
0,05 г препарата растворяют в 1 мл 95% спирте и прибавляют 3 капли раствора хлорида окисного железа, появляется зеленая окраска, постепенно переходящая в желтую.
1 мг препарата растворяют в 5 мл ледяной уксусной кислоты и 0,2 мл 1% раствора брома в
ледяной уксусной кислоте. Затем добавляют 1 каплю жидкого фенола и нагревают на водяной бане в течение двух минут; появляется изумрудно-зеленое окрашивание. Добавляют несколько крупинок сахара и продолжают нагревание на водяной бане; окраска изменяется через темно-голубую до коричневато-вишневой.
Температура плавления 168-174 0С .
Кислотность или щелочность. К 10 мл 70% спирта прибавляют 3-4 капли смешанного индикатора и 0,01 н. раствора соляной кислоты до появления серой окраски. 0,1 г препарата растворяют в 5 мл нейтрализованного таким образом спирта при нагревании. После охлаждения окраска должна измениться от прибавления не более 0,05 мл 0,02 н. раствора едкого натра или соляной кислоты.
Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна превышать 0,1%.
Количественное определение. Около 0,5 г препарата (точная навеска) помещают в колбу для ацетилирования емкостью 200-250 мл, прибавляют пипеткой 5 мл раствора уксусного ангидрида в пиридине, присоединяют колбу к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 45 минут. Раствор охлаждают, прибавляют через холодильник 25 мл воды и через 10-15 минут титруют при энергичном перемешивании 0,5 н. раствором натрия гидроксида (индикатор – фенолфталеин).
Параллельно проводят контрольный опыт.
Разность между количеством миллилитров 0,5 н. раствора натрия гидроксида, израсходованного на титрование контрольного опыта и исследуемого раствора, пересчитывают на диэтилстильбэстрол.
1 мл 0,5 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,06709 г С18Н20О2 , которого в препарате должно быть не менее 99,0% и не более 101,5%.
Хранение. Список Б. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.
Высшая разовая доза внутрь и внутримышечно 0,001 г.
Высшая суточная доза внутрь и внутримышечно 0,003 г.
Высшая разовая доза внутримышечно при злокачественных новообразованиях 0,06 г.
22
Высшая суточная доза внутримышечно при злокачественных новообразованиях 0,06 г.
Эстрогенный препарат (синтетический аналог женского полового гормона).
ЗАНЯТИЕ № 6. Анализ препаратов антибиотиков тетрациклинового ряда и производных пара- и мета-аминофенола
Актуальность: Антибиотики тетрациклинового ряда обладают широким спектром нтибактериального действия, они эффективны при лечении заболеваний, вызванных грамположительными и грамотрицательными микроорганизмами, в том числе устойчивыми к пенициллину и стрептомицину, риккетсиями и некоторыми простейшими. Тетрациклины это полифункциональные соединения сложной химической структуры (производные нафтацена), что предполагает знание многих химических и физико-химических методов анализа. К производным пара-аминофенола относится парацетамол, который применяется как болеутоляющее и жаропонижающее средство индивидуально и в составе комбинированных лекарственных препаратов. Прозерин является производным мета-аминофенола и применяется как антихолинэстеразное средство при миастении, параличах, в глазной практике. Он интересен в анализе, как производное уретана и четвертичного аммониевого основания.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ по фенольному, спиртовому, енольному гидроксилам, третичному атому азота (органическая химия).
2.Сущность методов кислотно-основного титрования, броматометрии, спектрофотометрии в УФ и видимой области спектра, ФЭК (аналитическая химия).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Антибиотики тетрациклинового ряда, как производные нафтацена. Природные – тетрациклин, окситетрациклин. Полусинтетические – метациклин, доксициклин.
Производные пара-аминофенола: парацетамол.
Производные мета – аминофенола. Прозерин.
Общая характеристика, источники и способы получения, латинские названия препаратов, физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа, доброкачественность, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса, с. 36-37).
План занятия
Задание 1. Качественные реакции на антибиотики тетрациклинового ряда (тетрациклин, окситетрациклин, доксициклин, метациклин).
Задание 2. Количественный анализ тетрациклина (ФЭК-методом).
Задание 3. Фармакопейный анализ таблеток парацетамола.
23
Задание 1. Качественные реакции на антибиотики тетрациклинового ряда
а) р-в Фреде – раствор аммония молибдата (NH4)2MoO4 в конц. серной кислоте;
б) р-в Манделина – раствор аммония ваннадата NH4VO3 в конц. серной кислоте;
в) р-в Эрдмана (раствор азотной кислоты в конц. серной кислоте);
г) р-в Марки (раствор формальдегида в конц. серной кислоте);
д) концентрированная серная кислота.
Записать уравнения реакций, эффект реакции.
2. Реакция образования азокрасителя. К небольшому количеству порошка препаратов (около 0,05 г) добавляют 2 мл 10% раствора натрия гидроксида, встряхивают и фильтруют. К фильтрату добавляют 2 мл раствора диазореактива (0,1г стрептоцида растворяют в 5мл раствора кислоты хлороводородной при нагревании на кипящей водяной бане. Затем раствор охлаждают в холодной воде и добавляют 1 мл 0,1н. раствора натрия нитрита). Образуется красное окрашивание. Записать уравнения реакций.
3. Реакция комплексообразования с железа (Ш) хлоридом. К небольшому количеству порошка препаратов (около 0,05 г) прибавляют 2 капли 3% раствора железа (Ш) хлорида и 5 мл воды. Появляется буро-красное окрашивание. Записать уравнения реакций.
4. Реакция образования изотетрациклина (природные антибиотики – тетрациклин и окситетрациклин). 0,05г порошка препаратов растворяют в 2 мл 10% раствора натрия гидроксида, образуется коричнево-желтый раствор, затем нагревают на кипящей водяной бане в течение 1-2 минут, появляется синяя флюоресценция, наблюдаемая в УФ свете. Записать уравнение реакции.
5. Реакция образования ангидротетрациклина (природные антибиотики – тетрациклин и окситетрациклин). 0,05г порошка препаратов растворяют в 2 мл концентрированной кислоты хлороводородной и нагревают на кипящей водяной бане в течение 2-3 мин. Наблюдают окраску и флюоресценцию в УФ свете (тетрациклин дает желтую окраску и желто-зеленую флюоресценцию, окситетрациклин – оранжево-красную окраску и желто-зеленую флюоресценцию). Записать уравнение реакции.
Задание 2. Количественное определение тетрациклина ФЭК – методом
Около 0,05 г (точная навеска) препарата (субстанция тетрациклина) растворяют в 10 мл 0,01н. раствора кислоты хлороводородной в мерной колбе на 100 мл, добавляют 75 мл воды и 5 мл 5 н. раствора натрия гидроксида, доводят объем раствора до метки водой и перемешивают. Измеряют оптическую плотность приготовленного раствора при 380 нм в кювете с толщиной слоя 1см точно через 6 минут после добавления раствора натрия гидроксида. Раствор сравнения – вода очищенная. При определении таблеток тетрациклина приготовленный раствор перед измерением оптической плотности фильтруют через складчатый фильтр, первые 5-10 мл фильтрата отбрасывают.
Стандартный раствор готовят по вышеуказанной методике, используя 0,05 г (точная навеска) стандартного тетрациклина. Расчет содержания тетрациклина в г в 1 таблетке проводят по формуле:
С = Dx * Cст * V * P
Dст * a
где Dх – оптическая плотность раствора определяемого препарата;
Dст – оптическая плотность стандартного раствора;
24
Сст – концентрация стандартного раствора тетрациклина г/мл (равная 0,0005 г/мл);
Р – средняя масса таблетки тетрациклина (смотри ОФС «Таблетки», ГФ ХI, ч.2);
V – объем мерной колбы для разведения (мл);
а – навеска анализируемого препарата (г).
Задание 3. Фармакопейный анализ таблеток парацетамола по 0,2 или 0,5 г (ФС)
Состав на одну таблетку:
Парацетамола 0,2 г или 0,5 г
Вспомогательных веществ достаточное количество.
Описание. Таблетки белого цвета или белого с кремовым оттенком.
Подлинность.
0,1 г порошка растертых таблеток взбалтывают с 10 мл воды и прибавляют несколько капель раствора железа (Ш) хлорида. Появляется сине-фиолетовое окрашивание.
К 0,1 г препарата добавляют 2 мл разведенной соляной кислоты и кипятят 1 мин, прибавляют 10 мл воды, охлаждают и прибавляют каплю калия дихромата, появляется фиолетовое окрашивание, не переходящее в красное (отличие от фенацетина).
К 0,1 препарата добавляют 2 мл разведенной серной кислоты и кипятят в течение 2 минут, появляется запах уксусной кислоты.
Количественное определение парацетамола.
Около 0,2 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в колбу емкостью 50 мл, добавляют 10 мл разведенной соляной кислоты, кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. После охлаждения раствор с помощью 30 мл воды количественно переносят в колбу для титрования, прибавляют 1 г калия бромида, 1 или 2 капли раствора метиленового синего, 2 или 3 капли тропеолина 00. Титруют 0,1 М раствором натрия нитрита (титруют медленно, со скоростью 0,5 мл/мин). Окончание титрования определяют по переходу красно-фиолетовой окраски раствора в зеленовато-серую. Параллельно ставят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,01512 г парацетамола, содержание которого должно быть 0,190-0,210 г или 0,475-0,525 г, считая на среднюю массу одной таблетки.
Среднюю массу таблетки (Рт.) определяют в соответствии с ОФС «Таблетки» (ГФ XI, ч.2, с.154-157), взвешиванием на аналитических весах массы 20 таблеток (одновременно) и делением этой массы на 20. Расчет средней массы одной таблетки проводится с точностью до 0,001 г.
Расчет содержания парацетамола г в одной таблетке проводят по формуле:
Г = Т * (Vз.-Vк.о.) * Кп * РТ. / а ;
где: Г – грамм вещества в одной таблетке;
Vз. – объем титрованного раствора, пошедшего на титрование навески порошка
растертых таблеток (мл);
Vк.о. – объем титрованного раствора, пошедшего на титрование в контрольном опыте (мл);
Кп. – коэффициент поправки титрованного раствора;
Рт. – средняя масса таблетки (г);
а – навеска порошка растертых таблеток (г).
Для проведения титрования в соответствии с требованиями ОФС «Нитритометрия» делают предварительный расчет теоретического объема титрованного 0,1 М раствора натрия нитрита, который должен израсходоваться на точную навеску порошка растертых
25
таблеток, взятую для анализа. Для этого использют формулу расчета содержания вещества в таблетке и теоретическое содержание вещества по прописи (например, для парацетамола – 0,2 или 0,5 г соответственно).
ОФС «НИТРИТОМЕТРИЯ» (ГФ XI, ч. 1)
Нитритометрия – метод объемного анализа, при котором в качестве реактива для титрования используется раствор нитрита натрия.
Применяется, главным образом, для количественного определения препаратов, содержащих первичную или вторичную ароматическую аминогруппу, а также нитрогруппу, которую предварительно переводят в аминогруппу путем восстановления. Этот метод может быть также использован для определения гидразидов и других соединений.
Методика определения. Точную массу препарата (около 0,001 г/моль) растворяют в смеси 10 мл воды и 10 мл разведенной хлористоводородной кислоты. Добавляют воды до общего объема 80 мл, 1 г бромида калия и при постоянном перемешивании титруют раствором нитрита натрия (0,1 моль/л), добавляя его в начале со скоростью 2 мл в минуту, а в конце титрования (за 0,5 мл до эквивалентного количества) по 0,05 мл через 1 минуту.
Титрование проводят, поддерживая температуру раствора 15 – 20 °С, однако в некоторых случаях требуется охлаждение до 0–5 °С.
Точку эквивалентности определяют с помощью внутренних индикаторов, внешних индикаторов (йодкрахмальная бумага) или электрометрическими методами (потенциометрическое титрование, титрование «до полного прекращения тока»).
При потенциометрическом титровании в качестве индикаторного электрода применяют платиновый электрод, электродом сравнения служит хлорсеребряный или насыщенный каломельный электрод.
Титрование методом «до полного прекращения тока» проводят в соответствии с общей статьей «Электрометрические методы титрования». При использовании модифицированной схемы на электроды накладывают разность потенциалов 0,3 – 0,4 В.
В качестве внутренних индикаторов используют тропеолин 00 (4 капли раствора), тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим (4 капли раствора тропеолина 00 и 2 капли раствора метиленового синего), нейтральный красный (2 капли 0,5% раствора в начале и 2 капли в конце титрования). Титрование с тропеолином 00 ведут до перехода окраски от красной к желтой, со смесью тропеолина 00 с метиленовым синим – от красно-фиолетовой к голубой, с нейтральным красным – от малиновой к синей. Выдержку в конце титрования с нейтральным красным увеличивают до 2 минут.
Титрование с йодкрахмальной бумагой ведут до тех пор, пока капля титруемого раствора, взятая через 1 минуту после прибавления раствора нитрита натрия, не будет немедленно вызывать синее окрашивание на бумаге.
Параллельно проводят контрольный опыт.
В некоторых случаях выдержка может быть увеличена, о чем должно быть указано в частной статье.
ОФС «ТАБЛЕТКИ» (ГФ XI, ч. 2)
Таблетки – дозированная лекарственная форма, получаемая прессованием лекарственных или смеси лекарственных и вспомогательных веществ, предназначенная для внутреннего, наружного, сублингвального, имплантационного или парантерального применения.
Таблетки, покрытые оболочкой, получают наращиванием или прессованием.
26
Таблетки должны иметь круглую или иную форму, с плоскими или двояковыпуклыми поверхностями, цельными краями. Если в частных статьях нет других указаний, поверхность должна быть гладкой, однородной, на поверхности могут быть надписи и обозначения; таблетки диаметром 9 мм и более должны иметь риску (насечку).
Таблетки для парантерального применения должны полностью растворяться и отвечать требованиям стерильности.
В зависимости от физико-химических свойств лекарственных веществ, их дозировки и метода получения применяют связующие вещества, разбавители, разрыхлители, скользящие и смазывающие вещества, красители, корригенты и другие группы вспомогательных веществ, разрешённые к медицинскому применению.
Связывающие вещества применяют грануляции и обеспечении необходимой прочности таблеток при прессовании.
Для обеспечения необходимой массы таблеток, если в их состав входят малые количества лекарственных веществ, применяют разбавители. С целью биодоступности труднорастворимых и гидрофобных лекарственных веществ, применяют в основном водорастворимые разбавители.
Разрыхлители применяют для обеспечения необходимой распадаемости таблеток или растворения лекарственных веществ.
Скользящие и смазывающие вещества применяют для улучшения текучести таблетируемых смесей и уменьшения прилипания таблеток к прессующим поверхностям.
Красители и корригенты применяют для придания таблеткам необходимого цвета и вкуса.
В качестве вспомогательных веществ используют альгиновую кислоту и её натриевую соль, ацетилцеллюлозу, ацетилфталилцеллюлозу и её натриевую соль, аэросил, воду, воск, глюколь, гюкозу, декстрин, желатин, индиго кармин, какао, кальция карбонат, кальция фосфат двузамещенный, каолин, карбоксиметилцеллюлозу и её натриевую соль, кислотный красный 2 оС, кислоту винную, кислоту лимонную, кислоту стеариновую и её кальциевую и магниевую соли, крахмал, магния карбонат, магния окись, маннит, масло вазелиновое, масло растительное, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, муку пшеничную, натрия гидрокарбонат, натрия хлорид, оксипропилцеллюлозу, оксиметилцеллюлозу, полтвинилпирролидон, полиэтиленгликоль, природные камеди, руберозум, сахар, сахар молочный, сорбит, твин-80, титана двуокись, тропеолин 0 ,флаворозум, церулёзум, этиловый спирт, этилцеллюлозу, шеллак и другие вещества.
В частных статьях должен быть приведён перечень применяемых вспомогательных веществ и средняя масса таблетки.
Количество твина-80, стеариновой кислоты, кальция или магния стеарата не должно превышать 1%, талька 3%, аэросила 10% от массы таблетки, за исключением отдельных случаев, указанных в частных статьях.
Определение талька и эросила проводят согласно приложению 1.
Таблетки должны обладать достаточной прочностью при механических воздействиях в процессе упаковки, транспортировки и хранения. Прочность на истирание должна быть не менее 97% при испытании, согласно приложению 2. Для таблеток покрытых оболочкой, прочность на истирание не проверяется.
Таблетки, предназначенные для внутреннего применения, должны распадаться или растворяться в желудочно-кишечном тракте.
Распадаемость определяют согласно приложению 3. Время распадаемости должно быть указано в частных статьях. При отсутствии этих указаний таблетки должны распадаться в течение не более 15 мин., таблетки, покрытые оболочкой, – не более 30 мин.
Кишечно-растворимые таблетки не должны распадаться в течение 1 часа в растворе кислоты хлористоводородной (0,1 моль/л) и после промывания водой должны распадаться
27
в растворе натрия гидрокарбоната (рН от 7,5 до 8,0) в течение не более 1 часа, если нет других указаний в частной статье.
Растворение. Определяют согласно приложению 4. Количество растворенного за 45 мин. в воде лекарственного вещества должно быть не менее 75%, если нет других указаний в частных статьях.
Средняя масса таблеток. Определяют взвешиванием 20 таблеток с точностью до 0,001 г. Массу отдельных таблеток определяют взвешиванием порознь 20 таблеток с точностью до 0,001 г. Отклонение в массе отдельных таблеток (за исключением таблеток, покрытых оболочкой методом наращивания) допускается в следующих пределах:
- для таблеток массой 0,1 г и менее +-10%;
- массой долее 0,1г и менее 0,3 г +- 7,5%;
- массой 0,3 г и более +- 5 % от средней массы таблеток;
- масса отдельных покрытых таблеток, полученных методом наращивания, не должна отличаться от средней массы более чем на +- 15%.
Только две таблетки могут иметь отклонения от средней массы, превышающей указанные пределы, но не более чем вдвое.
Определение содержания лекарственных веществ в таблетках. Берут навеску растёртых таблеток (не менее 20 штук); для таблеток, покрытых оболочкой, испытание проводят из определенного числа таблеток, указанного в частных статьях. Отклонения в содержании лекарственных веществ должны составлять при дозировке лекарственных веществ до 0,001 г +- 15%; от 0,001 до 0,01 г +-10%; от 0,01% до 0,1 +- 7,5% и от 0,1 и более +- 5 %; если нет других указаний в частных статьях.
Испытание однородности дозирования. Проводят для таблеток без оболочки с содержанием 0,05 г и менее лекарственного вещества и для таблеток, покрытых оболочкой, с содержанием лекарственного вещества 0,01 г и менее. От серии, подлежащей испытанию, отбирают пробу таблеток в количестве 30 штук. В каждой из 10 таблеток определяют содержание лекарственного вещества. Содержание лекарственного вещества в одной таблетке может отклоняться не более чем на +- 15% от среднего содержания и ни в одной таблетке не должно превышать+-25%. Если из 10 испытанных таблеток 2 таблетки имеют отклонения содержания лекарственного вещества более чем на +-15% от среднего, определяют содержание лекарственного вещества в каждой из оставшихся 20 таблеток. Отклонение в содержании лекарственного вещества ни в одной из 20 таблеток не должно превышать более чем +-15% от среднего.
Упаковка. Таблетки должны выпускаться в упаковке, предохраняющей от внешних воздействий и обеспечивающей стабильность в течение установленного срока годности.
Хранение. В сухом и если необходимо, прохладном, защищенном от света месте.
ЗАНЯТИЕ 7. Контрольная работа по теме «Фенолы, хиноны, тетрациклины, производные пара-аминофенола, мета-аминофенола»
Контроль знаний студентов проводится в виде тестового контроля (компьютер) и коллоквиума (собеседования) по билетам.
Литературу, лекарственные вещества и контрольные вопросы по изучаемой теме смотри в занятиях № 5, 6 (МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса фармацевтического факультета по фармацевтической химии, с. 34–39).
28
ЗАНЯТИЕ 8. Анализ препаратов ароматических кислот и их производных
Актуальность темы: Ароматические кислоты и их производные оказывают разнообразное фармакологическое действие – антисептическое (кислота бензойная и кислота салициловая), отхаркивающее (натрия бензоат), противовоспалительное, противоревматическое, болеутоляющее и жаропонижающее (натрия салицилат, кислота ацетилсалициловая).
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ по карбоксильной группе, фенольному гидроксилу, амидной и сложноэфирной группам (органическая химия).
2. Сущность методов кислотно-основного титрования, броматометрии, йодометрии и йодхлорметрии, спектрофотометрии в УФ области спектра (аналитическая химия).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Производные кислоты салициловой – кислота салициловая, натрия салицилат, эфиры – ацетилсалициловая кислота, метилсалицилат, амиды – оксафенамид, салициламид.
Производные кислоты бензойной – кислота бензойная, натрия бензоат.
Общая характеристика, источники и способы получения, латинские названия препаратов, физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа, доброкачественность, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацнвтической химии, с. 39-40).
План занятия
1.Теоретический контроль знаний студентов.
2.Самостоятельная работа студентов:
Задание 1. Фармакопейный анализ кислоты ацетилсалициловой (ГФХ, ст. 3).
Задание 2. Фармакопейный анализ кислоты бензойной (ГФХ, ст 9).
Задание 3. Фармакопейный анализ кислоты салициловой (ГФХ, ст. 21).
Задание 4. Фармакопейный анализ натрия бензоата (ГФХ, ст. 424).
Задание 5. Фармакопейный анализ натрия салицилата (ГФХ, ст. 437).
3. Оформление и защита протокола, приведение в порядок рабочего места.
Задание 1. Фармакопейный анализ препарата
Acidum acetylsalicylicum
Кислота ацетилсалициловая
Aspirinum
Аспирин
29
Салициловый эфир уксусной кислоты
С9Н8О4 М. в. 180,16
Описание. Белые кристаллы или белый кристаллический порошок со слабым запахом, слабокислого вкуса. Препарат устойчив в сухом воздухе, во влажном постепенно гидролизуется с образованием уксусной и салициловой кислот.
Растворимость. Мало растворим в воде, легко растворим в спирте, мало растворим в хлороформе, эфире, в растворах едких и углекислых щелочей.
Подлинность. 0,5 г препарата кипятят в течение 3 мин с 5 мл раствора натрия гидроксида, затем охлаждают и подкисляют разведенной серной кислотой, выделяется белый кристаллический осадок. Раствор сливают в другую пробирку и добавляют к нему 2 мл этанола и 2 мл концентрированной серной кислоты, раствор имеет запах уксусноэтилового эфира. К осадку добавляют 1-2 капли раствора железа (III) хлорида; появляется фиолетовое окрашивание:
0,2 г препарата помещают в фарфоровую чашку, добавляют 0,5 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают и добавляют 1-2 капли воды, ощущается запах уксусной кислоты. Затем добавляют 1-2 капли формалина, появляется розовое окрашивание. Температура плавления 133-138 °С (скорость подъема температуры 4-6 °С в минуту).
Хлориды. 1,5 г препарата взбалтывают с 30 мл воды и фильтруют 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,004% в препарате.)
Сульфаты. 10 мл того же фильтрата должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате).
Органические примеси. 0,5 г препарата растворяют в 5 мл концентрированной серной кислоты. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5 а.
Свободная салициловая кислота. 0,3 г препарата растворяют в 5 мл этанола и прибавляют 25 мл воды (испытуемый раствор). В один цилиндр помещают 15 мл этого раствора, в другой – 5 мл того же раствора, 0,5 мл 0,01%-ного водного раствора салициловой кислоты, 2 мл этанола и доводят водой до 15 мл (эталонный раствор). Затем в оба цилиндра добавляют по 1 мл кислого 0,2%-ного раствора железоаммониевых квасцов. Окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее эталонного раствора (не более 0,05% в препарате).
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).
Количественное определение кислоты ацетилсалициловой. Около 0,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину (5-6 капель) и охлажденного до 8-10°С этанола. Раствор титруют с тем же индикатором 0,1 н. раствором натрия гидроксида до розового окрашивания.
1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01802 г С9Н8О4, которой в препарате должно быть не менее 99,5%.
Хранение. В хорошо укупоренной таре.
Противоревматическое, противовоспалительное, болеутоляющее и жаропонижающее средство.
30
Задание 2. Фармакопейный анализ препарата
Acidum benzoicum
Кислота бензойная
С7Н6О2 М.в. 122,12
Описание. Белые игольчатые кристаллы или белый мелкокристаллический порошок. При нагревании возгоняется.
Растворимость. Мало растворим в воде, растворим в кипящей воде, легко растворим в спирте, хлороформе, эфире и бензоле, растворим в жирных маслах. Подлинность. Раствор 0,02 г препарата в 1,5 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида дает характерную реакцию на бензоаты. К 2 мл нейтрального раствора (0,01-0,02 г иона-бензоата) прибавляют 0,2 мл раствора железа (III) хлорида, образуется осадок розовато-желтого цвета.
Температура плавления 122-124,5 °С.
Прозрачность и цветность раствора. 1,0 г препарата растворяют в 10 мл раствора карбоната натрия. Раствор должен быть прозрачным и бесцветным.
Хлориды. 1,0 г препарата растворяют при кипячении в 20 мл воды, охлаждают и фильтруют через промытый горячей водой беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 25 мл. Осадок промывают водой, фильтрат доводят водой до метки и перемешивают. Отмеренные 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,005% в препарате).
Сульфаты. 1,5 г препарата встряхивают с 15 мл воды в течение 1 минуты и фильтруют. Полученные 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,01% в препарате).
Фталевая кислота. 0,5 г препарата должны полностью раствориться в 10 мл бензола при помешивании в течение 5 10 мин.
Восстанавливающие вещества. 100 мл воды доводят до кипения, прибавляют 1,5 мл разведенной серной кислоты и по каплям 0,1 н. раствор калия перманганата до розового окрашивания, сохраняющегося в течение 30 секунд. В полученном горячем растворе растворяют 1 г бензойной кислоты и титруют 0,1 н. раствором калия перманганата до розового окрашивания, устойчивого в течение 15 секунд.
На титрование должно расходоваться не более 0,5 мл 0,1 н. раствора калия перманганата.
Легко обугливающиеся примеси. 0,5 г препарата растворяют в 5 мл концентрированной серной кислоты и оставляют на 15 минут. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталонов № 5 а.
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата должна быть невесомой и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).
Количественое определение. Около 0,2 г препарата (точная масса) растворяют в 20 мл нейтрализован ного по фенолфталеину этанола и титруют с тем же индикатором 0,1 н. раствором натрия гидроксида до розового окрашивания:
1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01221 г кислоты бензойной, которой в препарате должно быть не менее 99,5%.
Хранение. В хорошо укупоренной таре.
Антисептическое средство.
31
Задание 3. Фармакопейный анализ препарата
Acidum salicylicum
Кислота салициловая
о-оксибензойная кислота
С7Н6О3 М.в. 138,12
Описание. Белые мелкие игольчатые кристаллы или легкий кристаллический порошок без запаха. Летуч с водяным паром. При осторожном нагревании возгоняется.
Растворимость. Мало растворим в воде, растворим в кипящей воде, легко растворим в спирте, эфире, трудно растворим в хлороформе.
Подлинность. 0,01 г препарата растворяют в 10 мл воды. К полученному раствору прибавляют 1 каплю раствора железа (III) хлорида, появляется сине-фиолетовое окрашивание, исчезающее от прибавления нескольких капель разведенной соляной кислоты и неизменяющееся от прибавления нескольких капель разведенной уксусной кислоты.
0,1 г препарата нагревают с 0,3 г натрия цитрата, ощущается запах фенола.
1,0 г препарата нагревают с 2 мл концентрированной серной кислоты и выделяющийся газ пропускают через известковую воду, появляется муть.
Температура плавления 158-161 0С.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 0,5 г препарата в 10 мл этанола должен быть прозрачным и бесцветным.
Хлориды. 1,5 г препарата взбалтывают с 30 мл воды в течение 1-2 минут и фильтруют. 10мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,004% в препарате).
Сульфаты. 10мл того же фильтрата должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате).
Органические примеси. 0,5 г растворяют в 5 мл концентрированной серной кислоты. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5 а.
Красящие вещества и фенол. 0,5 г препарата растворяют в 3-5 мл 95% этанола. Этанол испаряют при комнатной темлературе. Остаток должен быть белого цвета.
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата должна быть невесомой и выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).
Железо. Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна давать реакцию на железо.
Количественое определение. Около 0,25 г препарата (точная навеска) растворяют в 15 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта и титруют с тем же индикатором 0,1 н.
раствором гидроксида натрия до розового окрашивания.
1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01381 г С7Н6О3, которой в препарате должно быть не менее 99,5%.
Хранение. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.
Антисептическое, кератолитическое средство.
32
Задание 4. Фармакопейный анализ препарата
Natrii benzoas
Натрия бензоат
С7Н5NaО2 М.в. 144,11
Описание. Белый кристаллический порошок без запаха или с оччень слабым запахом, сладковато-соленого вкуса.
Растворимость. Легко растворим в воде, трудно растворим в спирте.
Подлинность. К 2 мл нейтрального раствора (0,01 - 0,02 г иона-бензоата) прибавляют 0,2 мл раствора железа (III) хлорида, образуется осадок розовато-желтого цвета.
Соль натрия, внесенная в бесцветное пламя, окрашивает его в желтый цвет.
0,25 г растворяют препарата в 5 мл воды, прибавляют 1 мл азотной кислоты, выделившиеся белые кристаллы отфильтровывают, промывают водой и высушивают в эксикаторе над концентрированной серной кислотой до постоянной массы. Температура плавления образовавшейся бензойной кислоты должна быть 120-124,5 °С.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 1,0 г препарата в 10 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным и бесцветным.
Щелочность и кислотность. К полученному раствору прибавляют несколько капель фенолфталеина; раствор должен оставаться бесцветным. Розовая окраска должна появиться от прибавления не более 0,75 мл 0,05 н. раствора натрия гидроксида.
Хлориды. 0,15 г препарата растворяют в 14 мл воды, прибавляют 1 мл разведенной азотной кислоты и фильтруют. Отмеренные 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,02% в препарате).
Сульфаты. 1,5 г препарата растворяют в 25 мл воды, прибавляют 5 мл разведенной соляной кислоты и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате).
Тяжелые металлы. 10 мл того же фильтрата должны выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).
Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата (точная масса) сушат при 100-105 °С до постоянного веса. Потеря в весе не должна превышать 3%.
Количественное определение. Около 1,5 г препарата (точная масса) растворяют в 20 мл воды в колбе с притертой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 45 мл эфира, 3-4 капли смешанного индикатора (0,3 мл раствора метилового оранжевого и 0,3 мл раствора метиленового синего) и титруют 0,5 н. раствором соляной кислоты до появления сиреневой окраски в водном слое (в конце титрования содержимое колбы хорошо встряхивают).
1 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты соответствует 0,07205 г натрия бензоата, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 99,0%.
Хранение. В хорошо укупоренной таре.
П р и м е ч а н и е. Бензоат натрия для приготовления инъекционных растворов дополнительно должен выдерживать следующее испытание.
Железо. Раствор 0,4 г препарата в 10 мл воды должен выдерживать испытание на железо (не более 0,0075% в препарате).
Отхаркивающее средство.
33
Задание 5. Фармакопейный анализ препарата
Natrii salicylas
Натрия салицилат
С7Н5NaО3 М.в. 160,11
Описание. Белые кристаллический порошок или мелкие чешуйки, без запаха, сладковато-соленого вкуса.
Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в глицирине, растворим в спирте, прктически не растворим в эфире.
Подлинность. 0,05 г препарата растворяют в 40 мл воды; к 2 мл полученного раствора (0,002-0,01 г салицилат-иона) прибавляют 1-2 капли раствора железа (III) хлорида, появляется сине-фиолетовое или красно-фиолетовое окрашивание, которое сохраняется при добавлении небольшого объема уксусной кислоты, но исчезает при добавлении разведенной соляной кислоты. При этом выделяется белый кристаллический осадок салициловой кислоты.
0,5 г препарата растворяют в 10 мл воды, прибавляют 2 мл разведенной азотной кислоты. Выделившийся белый кристаллический осадок отфильтровывают, промывают 3-4 раза водой по 3 мл и высушивают в эксикаторе над концентрированной серной кислотой в течение 4 ч. Температура плавления выделенной салициловой кислоты должна быть 156-161°С.
Соль натрия, внесенная в бесцветное пламя, окрашивает его в желтый цвет.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 2,0 г препарата в 50 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным и бесцветным.
Щелочность или кислотность. К полученному раствору прибавляют несколько капель фенолфталеина. Раствор должен оставаться бесцветным. Розовая окраска должна появ ляться от прибавления не более 0,4 мл 0,05 н. раствора натрия гидроксида.
Хлориды. 1 г препарата растворяют в 16 мл воды, прибавляют 4 мл разведенной азотной кислоты и фильтруют. Полученные 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,004% в препарате).
Сульфаты. 1,5 г препарата растворяют в 28 мл воды, прибавляют 2 мл соляной кислоты и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате).
Тяжелые металлы. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в препарате).
Органические примеси. 0,25 г препарата растворяют в 2 мл концентрированной серной кислоты. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5
Количественное определение. Около 1,5 г препарата (точная навеска) помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 200-250 мл, растворяют в 20 мл воды, прибавляют 45 мл эфира, 3-4 капли смешанного индикатора (0,3 мл раствора метилового оранжевого и 0,3 мл раствора метиленового синего) и титруют 0,5 н. раствором соляной кислоты до появления сиреневой окраски в водном слое (в конце титрования содержимое колбы хорошо встряхивают)
1 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты соответствует 0,08005 г натрия салицилата, которого в препарате должно быть не менее 99,5%.
Хранение. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света, в сухом месте.
Противоревматическое, противовоспалительное, болеутоляющее средство.
34
ЗАНЯТИЕ 9. Анализ препаратов пара-аминобензойной кислоты и ее производных
Актуальность темы/ В медицинской практике нашли широкое применение производные п-аминобензойной кислоты – эфиры и амиды.
Сложные эфиры п-аминобензойной кислоты применяют в качестве местноанестезирующих средств. Предпосылкой создания этой группы синтетических лекарственных веществ явилась попытка найти аналоги алколоида кокаина, обладающего местноанестезирующим эффектом, но вызывающего пристрастие (кокаинизм). В результате исследования химической структуры производных кокаина и их фармакологического действия было установлено, что местноанестезирующий эффект обусловлен не всей молекулой кокаина, а отдельными ее структурными элементами, названными анестезиофорной группой.
Амиды, несмотря на сходство в химической структуре, по фармакологическому действию различаются между собой. Метоклопрамида гидрохлорид успокаивает рвоту и икоту, а прокаинамида гидрохлорид применяется как антиаритмическое средство.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ по третичной аминогруппе, первичной ароматической аминогруппе, амидной и сложноэфирной группам (органическая химия).
2. Сущность методов нитритометрии, кислотно-основного титрования, броматометрии, йодометрии и йодхлорметрии, спектрофотометрии в УФ и видимой области спектра, ФЭК, ТСХ, ВЭЖХ (аналитическая химия).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Производные п-аминобензойной кислоты: сложные эфиры – анестезин (бензокаин), новокаин (прокаина гидрохлорид), дикаин (тетракаина гидрохлорид); амиды – новкаиноамид (прокаинамида гидрохлорид), метоклопрамида гидрохлорид (церукал).
Общая характеристика, источники и способы получения, латинские названия препаратов, физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа, доброкачественность, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацнвтической химии, с.40-41).
План занятия
1.Теоретический контроль знаний студентов.
2.Самостоятельная работа студентов:
Задание 1. Фармакопейный анализ анестезина (ГФХ, ст.55).
Задание 2. Фармакопейный анализ новокаина (ГФХ, ст.467).
Задание 3.Фармакопейный анализ дикаина (ГФХ, ст.214).
Задание 4. Фармакопейный анализ новокаинамида (ГФХ, ст.464).
Задание 1. Фармакопейный анализ препарата
Anaesthesinum
Анестезин
35
Этиловый эфир п-аминобензойной кислоты
С9Н11NО2 М.в. 165,19
Описание. Белый кристаллический порошок без запаха, слабо горького вкуса. Вызывает на языке чувство онемения. Растворимость. Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте, эфире, хлороформе, трудно растворим в жирных маслах и разведенной соляной кислоте.
Подлинность. Растворяют 0,05 г препарата в 2 мл воды, подкисленной 5 каплями разведенной соляной кислоты, прибавляют 3 капли 0,1 М раствора натрия нитрита и взбалтывают. Полученный раствор приливают к 3 мл щелочного раствора β-нафтола, появляется вишнево-красное окрашивание или образуется оранжево-красный осадок.
0,05 г препарата нагревают с 5 мл раствора натрия гидроксида и приливают 0,1 н. раствор иода до не исчезающего желтого окрашивания, появляется запах йодоформа.
0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды с 5 каплями разведенной соляной кислоты и прибавляют 2 мл раствора хлорамина. Через 2-3 мин добавляют 2 мл эфира и взбалтывают. Эфирный слой окрашивается в оранжевый цвет.
Температура плавления 89-91,5 °С.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 1 г препарата в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину этанола должен быть прозрачным и бесцветным
Кислотность. К полученному раствору прибавляют 3 капли раствора фенолфталеина. Розовое окрашивание должно появиться от прибавления не более 0,1 мл 0,05 н. раствора натрия гидроксида.
Хлориды. Раствор 1 г препарата в 10 мл этанола должен выдерживать испытание на хлориды (не более 0,002% в препарате).
Органические примеси. 0,5 г препарата растворяют в 5 мл концентрированной серной кислоты. Окраска полученного раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5 а.
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).
Количественное определение. Около 0,2 г препарата (точная масса) растворяют в смеси 10 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты. Затем добавляют воды до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида и при постоянном перемешивании титруют 0,1 М раствором натрия нитрита, добавляя его вначале со скоростью 2 мл в 1 мин, а в конце титрования (за 0,5 мл до эквивалент-ного количества) по 0,05 мл через 1 мин. Точку эквивалентности устанавливают с помощью внутреннего индикатора тропеолина 00 в смеси с метиленовым синим. Титрование проводят при температуре не выше 18-20°С до перехода окраски от красно-фиолетовой к голубой.
1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,01652 г С9Н11NО2, которого в препарате должно быть не менее 99,5%.
Хранение. Список Б. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.
Высшая разовая доза внутрь 0,5 г.
Высшая суточная доза внутрь 1,5 г.
Местноанестезирующее средство.
36
Задание 2. Фармакопейный анализ препарата
Novocainum
Новокаин
Procaini Hydrochloridum
β –Диэтиламиноэтилового эфира п-аминобензойной кислоты гидрохлорид
С13Н20N2О2 * НCl М.в. 272,78
Описание. Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок, без запаха, горького вкуса. На языке вызывает чувство онемения.
Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, мало растворим в хлороформе, практически не растворим в эфире.
Подлинность. Растворяют 0,05 г препарата в 2 мл воды, подкисленной 5 каплями разведенной соляной кислоты, прибавляют 3 капли 0,1 М раствора натрия нитрита и взбалтывают. Полученный раствор приливают к 3 мл щелочного раствора β-нафтола, появляется вишнево-красное окрашивание или образуется оранжево-красный осадок.
0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 3 капли разведенной серной кислоты и 1 мл 0,1 н. раствора калия перманганата, фиолетовая окраска моментально исчезает (отличие от совкаина).
0,2 г препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 0,5 мл раствора натрия гидроксида, выделяется бесцветный маслянистый осадок.
Температура плавления 154-156 °С.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 0,5 г препарата в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным и бесцветным.
Кислотность. При прибавлении к этому раствору 1 капли раствора метилового красного может появиться розовое окрашивание, которое должно перейти в желтое от прибавления не более 0,15 мл 0,05 н. раствора натрия гидроксида.
Органические примеси. Раствор 0,2 г препарата в 2 мл концентрированной серной кислоты должен быть бесцветным.
Раствор 0,5 г препарата в 5 мл азотной кислоты также должен быть бесцветным.
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата должна не превышать 0,1% и не давать реакции на тяжелые металлы.
Количественное определение. Около 0,3 г препарата (точная масса) растворяют в смеси 10 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты. Затем добавляют воды до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида и при постоянном перемешивании титруют 0,1 М раствором натрия нитрита, добавляя его вначале со скоростью 2 мл в 1 минуту, а в конце титрования (за 0,5 мл до экви валентного количества) по 0,05 мл через 1 минуту. В случае применения внутреннего
37
индикатора используют нейтральный красный или тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим.
1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,02728 г С13Н20N2О2* НCl, которого в препарате должно быть не менее 99,5%.
Хранение. Список Б. В хорошо укупоренных банках оранжевого стекла.
Высшая разовая доза внутрь 0,25 г.
Высшая суточная доза внутрь 0,75 г.
Высшая разовая доза внутримышечно (2% раствор ) 0,1 г.
Высшая суточная доза внутримышечно (2% раствор ) 0,1 г.
Высшая разовая доза в вену (0,25% раствор) 0,05 г.
Высшая суточная доза в вену (0,25% раствор) 0,05 г.
П р и м е ч а н и е. Для инфильтрационной анестезии: первая разовая доза в начале операции не свыше 1,25 г при применении 0,25% раствора и 0,75 г при применении 0,5%. В дальнейшем на каждый час операции не свыше 2,5 г при применении 0,25% раствора и 2 г при применении 0,5%. Местноанестезирующее средство.
Задание 3. Фармакопейный анализ препарата
Dicainum
Дикаин
Tetracaini Hydrochloridum
β –Диметиламиноэтилового эфира п-аминобензойной кислоты гидрохлорид
С15Н24N2О2* НCl М.в. 300,83
Описание. Белый кристаллический порошок без запаха.
Растворимость. Легко растворим в воде и в спирте, трудно растворим в хлороформе, практически не растворим в эфире.
Подлинность. 0,01 г препарата помещают в фарфоровую чашку, смачивают 2-3 каплями концентрированной азотной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. К охлажденному остатку прибавляют несколько капель 0,5 н. спиртового раствора гидроксида калия, появляется кроваво-красное окрашивание.
0,1 г препарата растворяют в 10 мл воды, приливают 1 мл 25% раствора роданида аммония, образуется кристаллический осадок. Осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из 5 мл воды и сушат при 80 0С в течение двух часов. Температура плавления полученного осадка 130-132 0С.
0,01 г препарата растворяют в 1 мл воды и прибавляют 0,5 мл разведенной азотной кислоты и 0,5 мл раствора нитрата серебра, образуется белый творожистый осадок растворимый в растворе аммиака.
Температура плавления 147-150 °С.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 0,5 г препарата в 5 мл воды должен быть прозрачным, окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5 б.
38
Кислотность. рН 1% раствора 4,5-6,0 (потенциометрически).
Органические примеси. 0,2 г препарата растворяют в 2 мл концентрированной серной кислоты. Окраска полученного раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5 б.
Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата (точная навеска) сушат при 100 – 105 °С до постоянного веса. Потеря в весе не должна превышать 0,5%.
Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна не превышать 0,1%.
Количественное определение. Около 0,3 г препарата (точная масса) растворяют в смеси 10 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты. Затем добавляют воды до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида и при постоянном перемешивании титруют 0,1 М раствором натрия нитрита, добавляя его вначале со скоростью 2 мл в 1 минуту, а в конце титрования (за 0,5 мл до эквивалентного количества) по 0,05 мл через 1 минуту. В случае применения внутренних индикаторов используют нейтральный красный или тропеолин 00.
1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,03008 г С15Н24N2О2* НCl, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 99,5%.
Хранение. Список А. В хорошо укупоренной таре.
Высшая разовая доза для анестезии верхних дыхательных путей 0,09 г, или 3 мл 3% раствора (однократно).
Высшая разовая доза для перидуральной анестезии 0,075 г, или 25 мл 0,3% раствора (однократно).
Местноанестезирующее средство
Задание 4. Фармакопейный анализ препарата
Novocainamidum
Новокаинамид
Procainamidi Hydrochloridum
β –Диэтиламиноэтиламида п-аминобензойной кислоты гидрохлорид
С13Н21N3О2 * НCl М.в. 271,79
Описание. Белый или белый со слегка кремоватым оттенком кристаллический порошок, без запаха.
Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, мало растворим в хлороформе, практически не растворим в эфире.
Подлинность. Растворяют 0,05 г препарата в 2 мл воды, подкисленной 5 каплями разведенной соляной кислоты, прибавляют 3 капли 0,1 М раствора натрия нитрита и взбалтывают. Полученный раствор приливают к 3 мл щелочного раствора β-нафтола, появляется вишнево-красное окрашивание или образуется оранжево-красный осадок.
0,01 г препарата растворяют в 1 мл воды и прибавляют 0,5 мл разведенной азотной кислоты и 0,5 мл раствора серебра нитрата, образуется белый творожистый осадок растворимый в растворе аммиака.
39
0,01 г препарата растворяют в 1 мл воды, прибавляют 0,01 г ванадата аммония, 1-2 капли концентрированной серной кислоты и нагревают, появляется вишнево-красное окрашивание (отличие от новокаина).
Температура плавления 165-169 °С.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 0,5 г препарата в 5 мл воды должен быть прозрачным и бесцветным.
Кислотность. рН 10%-ного раствора 5,0-6,5.
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата должна не превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).
Количественное определение. Около 0,3 г препарата (точная масса) растворяют в смеси 10 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты. Затем добавляют воды до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида и при постоянном перемешивании титруют 0,1 М раствором натрия нитрита, добавляя его вначале со скоростью 2 мл в 1 минуту, а в конце титрования (за 0,5 мл до эквивалентного количества) по 0,05 мл через 1 минуту. В случае применения внутренних индикаторов используют тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим.
1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,02718 г С13Н21N3О2* НCl, которого в препарате должно быть не менее 99,0%.
Хранение. Список Б. В хорошо укупоренных банках темного стекла.
Высшая разовая доза внутрь 1,0 г.
Высшая суточная доза внутрь 4,0 г.
Высшая разовая доза в вену 1,0 г.
Высшая суточная доза в вену 3,0 г.
Антиаритмическое средство.
ЗАНЯТИЕ № 10. Анализ препаратов пара-аминосалициловой кислоты, диэтиламиноацетанилидов и их аналогов
Актуальность: Препараты пара-аминосалициловой кислоты применяются как противотуберкулезные средства, в частности ПАСК натрий. Ацетанилиды и их аналоги по строению являются сильными местноанестезирующими средствами, вызывающими все виды анестезии (инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и других) и применяются ввиде инъекционных растворов.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ по амидной, третичной, первичной ароматической аминогруппе, карбоксильной группе и фенольному гидроксилу (органическая химия).
2.Сущность методов кислотно-основного титрования, нитритометрии, броматометрии и йодхлорметрии, спектрофотометрии в УФ области спектра, адсорбционных методов (аналитическая химия).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Диалкиламиноацетанилиды: тримекаина гидрохлорид, лидокаина гидрохлорид (ксикаин).
Близкие по структуре местные анестетики: бупивакаин, артикаина гидрохлорид (ультракаин).
Производные пара - аминосалициловой кислоты. Паск - натрий.
Общая характеристика, источники и способы получения, латинские названия препаратов,
40
физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа доброкачественность, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии, с. 42).
План занятия
Задание 1. Фармакопейный анализ «Раствора лидокаина 2%-2 мл для инъекций» по общей фармакопейной статье (ОФС) – «определение номинального объема».
Задание 2. Фармакопейный анализ «Раствора лидокаина 2-2 мл для инъекций» по частной фармакопейной статье (ФС).
3. Оформление и защита протоколов, приведение в порядок рабочего места.
Задание 1. Работа по ОФС “Инъекционные лекарственные формы” Определение номинального объема инъекционного раствора лидокаина
Каждый студент вскрывает 1 ампулу и шприцем выбирает весь объем раствора лидокаина, фиксирует его в рабочем журнале, записывает значения у других студентов и делает вывод о соответствии требованиям ОФС.
Все объемы растворов студенты сливают в один стакан для проведения дальнейшего анализа по ФС «Раствор лидокаина 2% 2 мл для инъекций».
Задание 2. Фармакопейный анализ «Раствора лидокаина 2%-2 мл для инъекций» по частной фармакопейной статье (ФС)
2.1. Измерение рН (смотри ФС).
2.2. Идентификация препарата методом ТСХ (смотри ФС). Приготовить исследуемый раствор лидокаина для ТСХ в уменьшенном объеме по сравнению с ФС (0,5 мл в 2 мл этанола). Нанести на линию старта хроматографической пластинки с помощью капилляров приготовленный исследуемый раствор лидокаина и, в другую точку, готовый стандартный раствор лидокаина (для ТСХ) в количестве 5-6 капель, высушить пластинку и поместить в хроматографическую камеру с предварительно добавленной системой растворителей. Провести хроматографирование и после высушивания пластинки проявить ее уканным в ФС реактивом, рассчитать величину Rf и Rs (смотри ГФ XI, ч. 1, ОФС «Хроматография», стр. 99).
2.3. Идентификация методом УФ спектрофотометрии (смотри ФС). Приготовить исследуемый раствор лидокаина для УФ спектрофотометрии, как указано в пункте «Количественное определение», но в уменьшенном виде (смотри долее пункт 2.4. задания). Приготовить раствор сравнения для спектрофотометрии в уменьшенном количестве по сравнению с ФС (2 мл этанола, 1 мл 0,1 н. НСl и довести водой до 10 мл в мерной пробирке). Снять спектр исследуемого препарата и стандартного раствора лидокаина (РСО) в интервале длин волн 250-300 нм. Построить спектр лидокаина исследуемого препарата и стандартного раствора (РСО) на миллиметровой бумаге (каждому студенту).
2.4. Количественное определение раствора лидокаина методом УФ спектрофотометрии. Приготовить исследуемый раствор лидокаина в уменьшенном количестве по сравнению с ФС (1 мл 2% раствора лидокаина помещают в мерную колбу на 50 мл, добавляют 10 мл воды, 10 мл спирта 95%, перемешивают, прибавляют 5 мл 0.1 М раствора кислоты хлористоводородной и доводят раствор до
41
метки водой, перемешивают). Замерить значение оптической плотности исследуемого и стандартного (РСО-готовый раствор) растворов лидокаина при длине волны 262,5 нм (аналитическая длина волны, соответствующая максимуму поглощения лидокаина).
Рассчитать содержание лидокаина в инъекционном растворе по измененной формуле в ФС.
2.5. Провести реакцию на подлинность на хлорид ион (смотри ФС).
2.6. Провести определение прозрачности и цветности (смотри ФС).
На основании проведенных исследований раствора лидокаина 2%-2мл для инъекций сделать заключение о соответствии требованиям ФС.
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ ПРЕДПРИЯТИЯ
РАСТВОР ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ 1 %, 2 % и 10 %
Настоящая фармакопейная статья предприятия распространяется на лидокаина гидрохлорид (2-Диэтиламино-2',6'ацетоксилидида гидрохлорид), раствор для инъекций 1%, 2% и 10%, применяемый в качестве лекарственного средства.
СПЕЦИФИКАЦИЯ
ЛИДОКАИНА ГИДРОХЛОРИД раствор для инъекций 1%, 2%, 10%
ОАО «Биосинтез»
|
ПОКАЗАТЕЛИ |
МЕТОДЫ |
НОРМЫ |
|
Описание |
Визуально |
Прозрачная бесцветная или слегка окрашенная жидкость. |
|
Подлинность |
Спектрофотометрический Реакция с раствором серебра нитрата Реакция на натрий (ГФХI,вып. 1, с. 159) |
УФ спектры растворов препарата и РСО в области от 250 до 300 нм должны иметь максимумы и минимум при одних и тех же длинах волн Образуется белый осадок Характерная реакция Б на натрий 1 % и 2 % растворов препарата |
|
Прозрачность |
ГФ ХI, вып. 1,с. 198 |
Препарат должен быть прозрачным. |
|
Цветность |
ГФ ХI, вып. 1,с. 194 |
Препарат должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном № 7б. |
|
рН |
ГФ ХI, вып.1,с.11З |
От 5,0 до 7,0. |
|
Механические включения |
РД 42-501-98 |
Препарат должен выдерживать требования. |
|
Первичные ароматические амины |
Качественная реакция |
Желтое окрашивание раствора не должно превышать окрашивания эталонного раствора (не более 0,04 %). |
|
Номинальный объем |
ГФ ХI, вып.2, с. 140 |
Объем должен быть больше номинального. |
|
Пирогенность |
ГФ ХI, вып.2, с.183 |
Препарат должен быть апирогенным. |
|
Стерильность |
ГФ XI, вып.2, с. 187 |
Препарат должен быть стерильным. |
|
Количественное определение |
Спектрофотометрический |
Содержание лидокаина гидрохлорида в 1 мл препарата должно быть соответственно от 0,009 до 0,011 г, от 0,018 до 0,022 г и от 0,095 до 0,105 г. |
|
Упаковка |
По 5 или 1 0 мл (для 1 % и 2 % препарата) и по 2 мл (для 2 % и 1 0 % препарата) в ампулы; 10 ампул по 2 мл или 10 мл вместе с ножом ампульным и инструкцией по применению в коробки из картона. 5 ампул по 5 мл в контурную ячейковую упаковку, по 2 контурные ячейковые упаковки вместе с ножом ампульным и инструкцией по применению в коробки из картона. |
|
|
Маркировка |
В соответствии с ФСП. |
|
|
Хранение |
Список Б. В защищенном от света месте. |
|
|
Срок годности |
2 года |
|
Состав. |
|||
|
Лидокаина гидрохлорида (в пересчете на безводное вещество) (ВФС 42-2080-91 или импортного, зарегистрированного в РФ) |
10,0 г, |
20,0 г, |
100,0 г |
|
Натрия хлорида (ФС 42-2572-95) |
6,0 г, |
6,0 г, |
|
|
Натра едкого 1 М раствора (ГФ XI, вып.2, с.61) |
до рН 5,0-7,0 |
до рН 5,0-7,0 |
до рН 5,0-7,0 |
|
Воды для инъекций (ФС 42-2620-97) |
- до 1 л |
Описание. Прозрачная бесцветная или слегка окрашенная жидкость.
Подлинность. Ультрафиолетовые спектры поглощения растворов препарата и рабочего стандартного образца (РСО) лидокаина гидрохлорида, приготовленные для количественного определения, в области от 250 до 300 нм должны иметь максимумы и минимум при одних и тех же длинах волн.
2,5 мл 1% препарата, или 1,25 мл 2% препарата (раствор готовить в уменьшенном количестве, смотри задание 2.2., а именно – 0,5 мл препарата в 2 мл спирта), или 0,25 мл 10% препарата помешают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 95 % до метки и перемешивают.
0,005 мл полученного раствора (5 мкг лидокаина гидрохлорида) наносят на линию старта импрегнированной пластинки Силуфол УФ 254 размером 8 x 15 см. Рядом наносят 0,005 мл 0,1 % раствора (5 мкг) стандартного образца вещества свидетеля (СОВС) лидокаина гидрохлорида.
Пластинку с нанесенными пробами подсушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру со смесью спирт н-бутиловый – кислота уксусная ледяная – вода (5:4:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, подсушивают на воздухе в течение 30 мин или в токе теплого воздуха в течение 15 мин, опрыскивают модифицированным реактивом Драгендорфа и тотчас просматривают хроматофамму. На хроматограмме
испытуемого препарата основное пятно должно находиться на уровне пятна свидетеля. Допускается пятно на старте.
43
К 4 мл 1% препарата, или 2 мл 2% препарата, или 0,4 мл 10% препарата прибавляют 5 мл спирта 95%, 0,5 мл кислоты азотной разведенной и 0,5 мл раствора серебра нитрата. Образуется белый осадок, растворяющийся при прибавлении 1 мл раствора аммиака концентрированного.
1% и 2% препарат дает характерную реакцию Б на натрий (ГФ XI, вып. 1, с. 159).
Примечание. 1. Приготовление 0,1% раствора СОВС лидокаина гидрохлорида. 0,05 г лидокаина гидрохлорида (ВФС 42-2080-91 или импортного, зарегистрированного в РФ) (в пересчете на безводное вещество) помешают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 5,0 мл воды, перемешивают до растворения, доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают.
Срок годности раствора 1 сут.
2. Приготовление модифицированного реактива Драгендорфа. К
0,85 г висмута нитрата основного прибавляют 40 мл воды и 12 мл кислоты уксусной ледяной, тщательно взбалтывают в течение 3 мин и фильтруют (раствор 1).
8 г калия йодида растворяют в 20 мл воды (раствор 2).
Растворы 1 и 2 сливают в соотношении 1:2.
К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл 1% раствора кислоты аскорбиновой (ФС 42-2668-89), 5 мл спирта 95% (раствор для опрыскивания).
Срок годности раствора 1-1 мес.
Раствор 2 и раствор для опрыскивания готовят непосредственно перед использованием.
3.Приготовление импрегнированной хроматографической пластинки. Хроматографическую пластинку Силуфол УФ 254 помещают в камеру с 10 % раствором натрия хлорида и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры и подсушивают на воздухе в течение 1 ч, затем сушат в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 10 мин. Охлаждают на воздухе. Пластинки можно использовать в течение 2 сут.
Прозрачность. Препарат должен быть прозрачным (ГФ XI, вып.1, с. 198).
Цветность. Препарат должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном № 7 б (ГФ XI, вып.1, с. 194).
рН. От 5,0 до 7,0 (потенциометрически; ГФ XI, вып.1, с.113).
Механические включения. Препарат должен выдерживать требования, указанные в «Инструкции по контролю на механические включения инъекционных лекарственных средств» РД 42-501-98.
Первичные ароматические амины. К 2,5 мл 1 % препарата, или 1,25 мл 2 % препарата, или 0,25 мл 10 % препарата прибавляют воду до объема 10 мл, 1 мл 1 М раствора натра едкого и экстрагируют хлороформом 3 раза по 5 мл (каждый раз в течение 3 мин). Объединенные хлороформные извлечения сушат над 3 г натрия сульфата безводного в колбе вместимостью 50 мл в течение 10 мин и фильтруют в выпарительную чашку. Колбу с натрия сульфатом безводным и фильтр промывают 5 мл хлороформа, который присоединяют к объединенным хлороформным извлечениям, и выпаривают досуха в токе холодного воздуха. Остаток растворяют в 2 мл спирта метилового. Раствор помешают в пробирку с притертой пробкой вместимостью 15 мл (испытуемый раствор).
Во вторую такую же пробирку помешают 2 мл эталонного раствора.
В каждую из пробирок прибавляют 1 мл 1% раствора п-диметиламинобензальдегида в спирте метиловом, 2 мл кислоты уксусной ледяной и выдерживают в течение 10 мин. Появившееся желтое окрашивание анализируемого раствора не должно превышать окрашивания эталонного раствора (не более 0,04 %).
44
Примечание. 1. Приготовление эталонного раствора.
Пипеткой отбирают 0,1 мл 2,6-ксилидина (ТУ 88-15326-11-87), помешают в колбу
мерную вместимостью 200 мл, доводят объем раствора спиртом метиловым до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора спиртом метиловым до метки и перемешивают.
1 мл эталонного раствора содержит около 0,000005 г 2,6-ксилидина.
Раствор должен быть свежеприготовленным.
2. Приготовление 1 % раствора п-диметиламинобезальдегида. 0,1 г п-диметиламинобензальдегида растворяют в 10 мл спирта метилового.
Раствор должен быть свежеприготовленным.
Номинальный объем. Препарат должен быть больше номинального (ГФХI, вып.2,с.140).
Пирогенность. Препарат должен быть апирогенным (ГФ XI, вып.2, с. 183). Тест-доза - 0,44 мл 1 % или 0,22 мл 2 % препарата на 1 кг массы животного, 10% раствор лидокаина предварительно разводят изотоническим 0,9 % раствором натрия хлорида для инъекций до 2% раствора и вводят в дозе соответствующей этой концентрации.
Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ГФ XI, вып. 2, с. 167)
Количественное определение. 10 мл 1% препарата, или 5 мл 2% препарата (раствор готовят в уменьшенном количестве, смотри пункт 2.4. задания), или 1 мл 10% препарата помещают в мерную колбу вместимость 250 мл, прибавляют 50 мл воды, 50 мл спирта 95 %, перемешивают, прибавляют 25 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 262,5 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора рабочего стандартного образца (РСО) лидокаина гидрохлорида.
В качестве раствора сравнения используют 0,01 М водно-спиртовый раствор кислоты хлористоводородной.
Содержание лидокаина гидрохлорида в 1 мл препарата в граммах (X) вычисляют по измененной в сответствии ФС формуле, учитывая измененные объемы препарата и разведения:
α0 • D1 • 50 α0 • D1 • 1
X = ---------------- = ---------------
V • D0 • 100 V • D0 • 2
где D1– оптическая плотность испытуемого раствора;
D0 – оптическая плотность раствора РСО лидокаина гидрохлорида;
α0 – навеска РСО лидокаина гидрохлорида в пересчете на безводное вещество, в граммах (для наших расчетов 0,04 г);
Формула расчета по ФС:
α0 • D1 • 250 α0 • D1 • 5
X = ---------------- = ---------------
V • D0 • 200 V • D0 • 4
Содержание C14H22N2O∙HCl (лидокаина гидрохлорида) в I мл препарата должно быть соответственно от 0,009 до 0,011 г, от 0,018 до 0,022 г и от 0,095 до 0,105 г.
45
Примечание. 1.Приготовление раствора РСО лидокаина гидрохлорида. Около 0,075 г (точная навеска) лидокаина гидрохлорида (ВФС 42-2080-91 или импортного, зарегистрированного в РФ) (в пересчете на безводное вещество) помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 40 мл воды, перемешивают до растворения навески, прибавляют 40 мл спирта 95%, 20 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
1 мл раствора РСО содержит около 0,000375 г лидокаина гидрохлорида в пересчете на безводное вещество.
Срок годности раствора 1 сут.
2. Приготовление 0,01 М раствора кислоты хлористоводородной.
2,5 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл спирта 95%, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
Срок годности раствора 1 сут.
Упаковка. По 5 или 10 мл (для 1 % и 2 % препарата) и по 2 мл (для
2% и 10% препарата) в ампулы нейтрального стекла марки НС-1, НС-3 по ОСТ 64-2-485-85 или импортные по ИСО 9187.
10 ампул по 2 мл или 10 мл помещают в коробки из картона для потребительской тары по ГОСТ 7933-89 с вкладышем из бумаги пачечной по ГОСТ 6290-74.
5 ампул по 5 мл помещают в контурную ячейковую упаковку из пленки поливинилхлоридной по ГОСТ 25250-88. По 2 контурных упаковки помещают в пачку из картона для потребительской тары по ГОСТ 7933-89.
В каждую пачку, коробку вкладывают инструкцию по применению, нож ампульный по ТУ 9472-011-45961725-97 или скарификатор по ТУ 9432-001-07610517-97 или ТУ 9432-001-34513656-97.
Коробки оклеивают этикеткой-бандеролью из бумаги этикеточной по ГОСТ 7625-86 или писчей по ГОСТ 18510-87.
Пачки или коробки помещают в групповую упаковку.
Групповая упаковка и транспортная тара в соответствии с ГОСТ 17768-90.
Маркировка. На ампуле методом глубокой печати быстрозакрепляющейся краской по ТУ 64-7-88-86 указывают название препарата на русском языке, концентрацию, объем в миллилитрах, номер серии.
На этикетке-бандероли и пачке указывают предприятие-изготовитель, адрес, товарный знак, телефон/факс, название препарата на русском языке, международное непатентованное название, концентрацию, объем препарата в одной ампуле в миллилитрах, количество ампул в упаковке, «Стерильно», «Для инъекций», «Применять по назначению врача», условия хранения, условия отпуска, регистрационный номер, номер серии, срок годности, штрих-код.
Допускается наносить номер серии, срок годности в виде рельефных оттисков на боковой стороне коробки и пачки.
На этикетке групповой упаковки дополнительно указывают количество упаковок.
Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192-96.
Хранение. Список Б. В защищенном от света месте.
Срок годности 2 года.
Местноанестезирующее, антиаритмическое средство.
46
ОФС «ИНЪЕКЦИОННЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ФОРМЫ»
(ГФ XI, ч. 2)
Лекарственные средства для парентерального применения
К лекарственным средствам для парентерального применения относятся стерильные водные и неводные растворы, суспензии, эмульсии и сухие твердые вещества (порошки, пористые массы, таблетки), которые растворяют в стерильном растворителе непосредственно перед введением. Растворы для парентерального применения объемом 100 мл и более относятся к инфузионным.
Лекарственные средства для парентерального применения готовят в условиях, максимально предотвращающих загрязнение готового продукта микроорганизмами и посторонними веществами.
Для приготовления лекарственных средств для парентерального применения используют лекарственные, вспомогательные вещества и растворители, разрешенные к медицинскому применению.
Лекарственные средства для парентерального применения должны быть стерильными, практически свободными от видимых механических включений, выдерживать испытания на пирогенность и токсичность в соответствии с требованиями частных статей. Инъекционные растворы могут быть изотоничными, изогидричными и изоионичными в соответствии с требованиями частных статей.
Растворители. В качестве растворителей применяют воду для инъекций, жирные масла, этилолеат. В составе комплексного растворителя могут быть использованы спирт этиловый, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленоксид 400, бензилбензоат, бензиловый спирт и другие растворители.
Вспомогательные вещества. При изготовлении лекарственных средств для парентерального применения могут быть добавлены консерванты, антиоксиданты, стабилизаторы, эмульгаторы, солюбилизаторы и другие вспомогательные вещества, указанные в частных статьях.
В качестве вспомогательных веществ используют аскорбиновую, соляную, винную, лимонную, уксусную кислоты, натрия карбонат, натрия бикарбонат, натр едкий, натрия или калия сульфит, бисульфит или метабисульфит, натрия тиосульфат, натрия цитрат, натрия фосфат одно- и двузамещенный, натрия хлорид, метиловый эфир оксибензойной кислоты, пропиловый эфир оксибензойной кислоты, ронгалит, динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, спирт поливиниловый, хлоро-бутанол, крезол, фенол и др.
Количество добавляемых вспомогательных веществ, если нет других указаний в частных статьях, не должно превышать следующих концентраций: для веществ, подобных хлорбутанолу, крезолу, фенолу,– до 0,5%; сернистого ангидрида или эквивалентных количеств сульфита, бисульфита или метабисульфита калия или натрия – до 0,2%.
Консерванты применяют в многодозовых лекарственных средствах для парентерального применения, а также в однодозовых препаратах в соответствии с требованиями частных статей.
Лекарственные средства для внутриполостных, внутрисердечных, внутриглазных или других инъекций, имеющих доступ к спинномозговой жидкости, а также при разовой дозе, превышающей 15 мл, не должны содержать консервантов.
Сосуды и укупорочные средства должны обеспечивать герметичность, быть индифферентными к содержимому, сохранять его стабильность при стерилизации, хранении и транспортировании. Марки стекла и других укупорочных средств (резины, пластмассы) должны быть указаны в частных статьях. Сосуды изготавливают из материалов, не затрудняющих визуальный контроль содержимого.
47
Материал пробки должен быть достаточно прочным и эластичным, чтобы обеспечивать отбор содержимого без удаления пробки и отделения ее частиц и герметизацию сосуда после удаления иглы.
Прозрачность. Растворы должны быть прозрачными, по сравнению с водой для инъекций или соответствующим растворителем, если нет других указаний в частных статьях.
Окраска. Окраску лекарственных средств для парентерального применения определяют путем сравнения с эталонами цветности в соответствии со статьей «Определение окраски жидкостей» или указаниями частных статей.
Объем инъекционных растворов в сосудах должен быть больше номинального (табл. 6).
В сосудах вместимостью до 50 мл наполнение проверяют калиброванным шприцем, в сосудах вместимостью 50 мл и более – калиброванным цилиндром при температуре (20 ± 2)оС.
Таблица 6
|
Нормальный объем, мл |
Объем заполнения, мл |
Количество сосудов для заполнения, шт. |
|
|
невязкие растворы |
вязкие растворы |
||
|
1.0 2,0 5,0 10,0 20,0 50,0 Более 50 |
1,10 2,15 5,30 10,50 20,60 51,0 На 2% более нормального |
1,15 2,25 5,50 10,70 20,90 51,50 На 3% более номинального |
20 20 20 10 10 5 |
Объем раствора, выбранного из сосуда шприцем, после вытеснения воздуха и заполнения иглы или после выливания в цилиндр не должен быть меньше номинального.
Лекарственные средства для парентерального применения подвергают стерилизации в соответствии с требованиями статьи «Стерилизация» и указаниями частных статей.
Стерильность определяют согласно статье «Испытание на стерильность» (с. 187).
Токсичность проверяют в соответствии со статьей «Испытание на токсичность (с. 182) согласно требованиям и тест-дозам, указанным в частных статьях.
Пирогенность проверяют в соответствии со статьей «Испытание на пирогенность (с. 183) и согласно тест-дозам, указанным в частных статьях.
Испытанию подлежат все лекарственные средства для парентерального применения при объеме одноразовой дозы 10 мл и более, а также при меньшей дозе, если есть указание в частной статье.
Испытание на механические включения лекарственных средств для парентерального применения проводят по соответствующим инструкциям, утвержденным Министерством здравоохранения СССР.
Определение средней массы сухих лекарственных средств для парентерального применения проводят путем взвешивания порознь 20 предварительно вскрытых сосудов с точностью до 0,001 г. Удаляют содержимое промыванием водой или соответствующим растворителем и сушат при температуре 100-105°С в течение одного часа. Сосуд и укупорочные средства вновь взвешивают. Рассчитывают среднюю массу 20 сосудов и массу содержимого каждого сосуда.
48
Отклонение массы содержимого одного сосуда от средней массы, указанной в разделе «Состав на одну упаковку», должно соответствовать табл. 7, но не превышать ± 15%. Если в двух сосудах отклонение превышает допустимое, но не более ±15%, определение повторяют еще в 40 сосудах, в каждом из которых не должно быть отклонения более допустимого в табл. 7.
Таблица 7
Отклонение массы содержимого одного сосуда
|
Содержимое сосуда, г |
Допустимые отклонения, % |
|
0,1 и менее |
± 10,0 |
|
Более 0,1 и менее 0,3 |
± 7,5 |
|
0,3 и более |
± 5,0 |
Отклонение средней массы содержимого 20 сосудов не должно превышать ± 5% от указанного в частных статьях номинального количества.
Для стерильных сухих лекарственных средств для инъекций и суспензий при массе содержимого сосуда 0,05 г и менее проводят испытание однородности дозирования. Испытанию подвергают содержимое 10 сосудов порознь по методикам количественного определения, указанным в частных статьях. Содержание действующего вещества не должно отклоняться от номинального более чем на ± 15%. Если не более чем в одном сосуде отклонение превышает ± 15 %, но не более ± 25%, проводят дополнительное испытание в 20 сосудах. Отклонения содержания действующего вещества более ± 15% не должно быть ни в одном из 20 сосудов.
Суспензии для парентерального применения после встряхивания не должны расслаиваться в течение не менее 5 минут, если в частных статьях нет других указаний. Суспензия должна свободно проходить в шприц через иглу № 0840, если нет других указаний в частных статьях. Суспензии не вводят в кровеносные и лимфатические сосуды и спинномозговой канал; эмульсии не вводят в спинномозговой канал.
Маркировка. На каждой ампуле (сосуде) указывают название лекарственного средства, его концентрацию или активность, объем или массу, номер серии.
Хранение. В упаковке, обеспечивающей стабильность препарата в течение указанного в частных статьях срока годности.
ЗАНЯТИЕ № 11. Контрольная работа по теме «Препараты ароматических кислот, фенолокислот, аминокислот и их производных. Диалкиламиноацетанилиды.»
Контроль знаний студентов проводится в виде тестового контроля и коллоквиума (собеседования) по билетам.
Литературу, лекарственные вещества и контрольные вопросы по изучаемой теме смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии с. 43-44.
49
ТЕМА 4. Лекарственные препараты – производные арилалкиламинов и бензолсульфониламидов
ЗАНЯТИЕ № 12. Препараты, производные гидроксифенилалкиламинов, нитрофенилалкиламинов, йодированных производных ароматических аминокислот, аминодибромфенилалкиламинов, оксифенилалифатических аминокислот
Актуальность темы. Гидроксифенилалкиламины или арилалкиламины объединяют несколько групп лекарственных препаратов. Адреналин, ноадреналин, изадрин, фенотерол и другие применяются как адреномиметические средства, оказывая сосудосуживающее, бронхорасширяющее, сосудорасширяющее действие. Леводопа применяется при паркинсонизме, а метилдофа – как гипотензивное средство. Левомицетин и его аналоги – антибиотики широкого спектра действия. Йодированные производные (левотироксин и другие) применяются при заболеваниях щитовидной железы. Бромпроизводные арилалкиламины бромгексин и амброксол используются в медициноской практике в качестве муколитических и отхаркивающих средств.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ по спиртовому гидроксилу, третичной и вторичной аминогруппам, фенольному гидроксилу, галогену органически или ковалентно связанному (органическая химия).
2. Сущность методов кислотно-основного титрования, нитритометрии, аргенто- и меркуриметрии, спектрофотометрии в УФ области спектра, адсорбционных методов - ХТС,ГЖХ,ВЭЖХ (аналитическая химия).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Оксифенилалкиламины: допамин (дофамин), эфедрина гидрохлорид, норадреналина (норэпинефрина) и адреналина (эпинефрина) гидротартраты и гидрохлориды, изадрин (изопреналина гидрохлорид).
Нитрофенилалкиламины: левомицетин (хлорамфеникол) и его эфиры стеарат и сукцинат.
Йодированные производные ароматических и алифатических аминокислот: триомбрин, триомбраст, тиреоидин, левотироксин натрий, трииодтиронина гидрохлорид.
Гидроксифенилалифатичекие аминокислоты: леводопа и метилдофа.
Для препаратов знать вопросы: общая характеристика, источники и способы получения, латинские названия препаратов, физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа, доброкачественность, виды изомерии, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии, с. 45-47).
Производные оксифенилалкиламинов: фенотерол (Беротек), сальбутамол, верапамил.
Производные гидроксипропаноламинов: пропранолола гидрохлорид (анаприлин), атенолол, тимолол, флуоксетин (Прозак).
Аминодибромфенилалкиламины: бромгексина гидрохлорид, амброксола гидрохлорид.
50
Для препаратов: знать физико-химические свойства, уметь выделять в структуре фунуциональные группы, предлагать по ним реакции подлинности и методы количественного анализа (химические и физико-химические).
План занятия
Задание 1. Реакции на подлинность препаратов фенилалкиламинов.
Задание 2. Фармакопейный анализ «Таблетки левомицетина по 0,1, 0,25, 0,5» по частной фармакопейной статье (ФС) и ОФС «Таблетки».
Задание 3. Экспресс-анализ экстемпоральной лекарственной формы:
Возьми: Раствора левомицетина 0,25%-10,0
Натрия хлорида 0,09
3. Оформление и защита протоколов, приведение в порядок рабочего мест.
Задание 1. Реакции на подлинность препаратов арилалкиламинов
При самостоятельной работе обобщите изученный материал в виде таблицы и напишите уравнения реакций.
1. Реакция комплексообразования с железа (III) хлоридом на фенольный
гидроксил (пирокатехиновое кольцо). К 0,05 г порошка изадрина в 1 мл воды и 1 мл 0,1% раствора адреналина (норадреналина) гидрохлорида, прибавляют каплю раствора железа (III) хлорида, появляется изумрудно-зеленое окрашивание, переходящее в вишнево-красное от добавления капли раствора аммиака, а затем в оранжево-красное.
2. Реакция комплексообразования с меди (II) сульфатом на спиртовый(е)
гидроксил(ы) и аминогруппу. К 0,05 г порошка эфедрина, изадрина, анаприлина, левомицетина в 1 мл воды и к 1 мл 0,1% раствора адреналина г/хл (норадреналина) прибавляют 2 капли раствора меди (II) сульфата и каплю раствора натрия гидроксида. Появляется окрашивание. Для эфедрина реакцию проводят (ФС) с добавлением 1 мл эфира. Наблюдают эффект реакции.
3. Реакция окисления йодом на пирокатехиновое кольцо. К 1 мл 1% раствора адреналина г/хл (норадреналина), изадрина (приготовление смотри выше) прибавляют 2 мл буферного раствора (рН 6,5 или 3,65) и 2 мл 0,1 н. раствора йода, появляется красно-фиолетовое или темно-красное окрашивание.
4. Реакция окислительной минерализации с концентрированной серной кислотой на йод ковалентно (органически) связанный. 0,1 г тиреоидина помещают в сухую пробирку, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты и нагревают. Выделяются фиолетовые пары молекулярного йода.
5.Реакция с нингидрином на альфа-аминокарбоксильную группу. К 0,2 г порошка тиреоидина, L-тироксина прибавляют 2 мл свежеприготовленного раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 минут. Появляется сине-фиолетовое окрашивание.
Задание 2. Фармакопейный анализ «Таблетки левомицетина 0,1, 0,25, 0,5» по общей (ОФС) и частной фармакопейной статье (ФС)
51
Tabulettae Laevomycetini 0,1; 0,25 aut 0,5
Таблетки левомицетина 0,1 г, 0,25 г или 0,5 г
Состав на одну таблетку.
Левомицетина 0,1 г, 0,25 г или 0,5 г
Вспомогательных веществ …………………достаточное количество.
Описание. Таблетки белого цвета или белого со слабым желтоватым оттенком.
Подлинность. 0,1 г порошка растертых таблеток дает первую реакцию подлинности, указанную в статье «Laevomycetinum».
Количественное определение. Около 0,07 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу емкостью 250 мл, прибавляют 200 мл горячей воды, перемешивают 1 минуту, охлаждают под струей холодной воды и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют, отбрасывая первую порцию фильтрата 5 мл. 5 мл фильтрата (мерной пипеткой), переносят в мерную, колбуют костью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 278 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
Содержание лезомицетина в одной таблетке в граммах (Х) вычисляют по формуле:
Х(г) = D х 50,0 х Ртабл. / 298 х а ;
где: D – оптическая плотность испытуемого раствора;
а – навеска порошка растертых таблеток в граммах;
Ртабл. – средний вес таблетки в граммах;
298 – удельный показатель поглощения (Е\%см) левомицетина при длине волны 278 нм.
Содержание С11 Н 12 CI2 N 2 O5 соответственно должно быть 0,095-0,105 г; 0,238-0,262 г или 0,475-0,525 г, считая на средний вес одной таблетки.
Хранение. Список Б. В защищенном от света месте.
Laevomycetinum
Левомицетин
С11 Н 12 CI2 N 2 O5 М.в. 323,13
Описание. Белый или белый со слабым желтовато-зеленоватым оттенком кристаллический порошок без запаха, горького вкуса.
Растворимость. Мало растворим в воде, легко растворим в 95% спирте, растворим в этилацетате, практически не растворим в хлороформе.
Подлинность. К 0,1 г препарата прибавляют 5 мл раствора едкого натра и нагревают,
52
появляется желтое окрашивание, переходящее при дальнейшем нагревании в красно-оранжевое. При кипячении этого раствора окраска усиливается, выделяется кирпично-красный осадок и появляется запах аммиака. Фильтрат после подкисления азотной кислотой дает характерную реакцию на хлориды (смотри ОФС «Общие реакции на подлинность», ГФ XI, том 1).
Раствор препарата в 95% спирте вращает плоскость поляризации вправо, в этилацетате – влево.
Температура плавления 149-153 °С.
Удельное вращение от + 18 °С до +21 °С (5% раствор в 95% спирте).
Удельный показатель поглощения Е\%см от 290 до 305 при длине волны 278 нм (0,002% водный раствор).
Кислотность. К 1 г препарата прибавляют 2 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта, хорошо перемешивают в течение 1 минуты и фильтруют. Фильтрат после прибавления 2 капель раствора фенолфталеина и 0,05 мл 0,1 н. раствора едкого натра должен окраситься в розовый цвет, не исчезающий в течение 3 минут.
Хлориды. 0,3 г препарата взбалтывают в течение 1 минуты с 15 мл воды и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01 % в препарате).
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г препарата не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в препарате).
Количественное определение. Около 0,5 г препарата (точная навеска) помещают в коническую колбу емкостью 200-250 мл, прибавляют 20 мл концентрированной соляной кислоты и осторожно, небольшими порциями, 5 г цинковой пыли. Затем прибавляют еще 10 мл концентрированной соляной кислоты, обмывая стенки колбы, и после полного растворения цинковой пыли (можно подогреть) раствор количественно переносят в стакан для диазотирования, охлаждаемый льдом, прибавляют 3 г бромида калия и медленно титруют 0,1 М раствором натрия нитрита. Титрование считают законченным, когда капля жидкости, взятая через 3 минуты после прибавления раствора нитрита натрия, будет вызывать немедленное посинение йодкрахмальной бумаги.
1 мл 0,1 М раствора нитрита натрия соответствует 0,03231 г С11 Н 12 CI2 N 2 O5, которого в препарате должно быть не менее 98,5%.
Хранение. Список Б. В хорошо укупоренных банках оранжевого стекла.
Высшая разовая доза внутрь 1,0 г.
Высшая суточная доза внутрь 4,0 г.
Антибиотик.
Задание 3. Экспресс-анализ лекарственной формы
Состав: Раствора левомицетина 0,25%-10,0
Натрия хлорида 0,09
Описание. Бесцветная прозрачная жидкость.
53
ПОДЛИННОСТЬ
Левомицетин
а) К 10 каплям лекарственной формы добавляют 3 капли раствора меди (II) сульфата и 10 капель раствора натрия гидроксида. Через 1 минуту взбалтывают с 0,5 мл н-бутанола,
который окрашивается в сине-фиолетовый цвет (реакция комплексообразования на спиртовые гидроксилы).
Б) К 10 каплям лекарственной формы прибавляют 1 мл раствора натрия гидроксида и
нагревают до кипения. Раствор приобретает желтый цвет, постепенно
переходящий в красно-оранжевый.
Натрия хлорид
а) На предметное стекло наносят по капле лекарственной формы и раствора
пикриновой кислоты. Образуется пикрат натрия – кристаллы веретенообразной формы с заостренными концами (микроскоп).
б) К 2-3 каплям лекарственной формы прибавляют каплю разведенной азотной
кислоты и 1-2 капли раствора серебра нитрата. Образуется белый осадок,
не растворимый в азотной кислоте и растворимый в растворе аммиака.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Левомицетин
К 3 мл лекарственной формы прибавляют несколько крупинок индикаторной смеси мурексида, 3 капли 10% раствора натрия гидроксида и медленно, по каплям, титруют 0,01 М раствором меди сульфата до изменения окраски от красно-фиолетовой до коричнево-красной, одинаковой с окраской раствора в контрольном опыте.
Контрольный опыт. К 3 мл воды очищенной прибавляют, индикаторную смесь мурексида до окраски раствора лекформы, 3 капли 10% раствора натрия гидроксида и 2 - 3 капли 0,01 М раствора меди (II) сульфата до коричнево-красной окраски раствора.
Натрия хлорид
К 1 мл лекарственной формы прибавляют 1-2 капли раствора калия хромата и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата до оранжево-желтого окрашивания.
Расчитывают содержание лекарственных веществ по формуле:
Х = Т * V *Р / а ;
где: Т – титр определяемого вещества (по определяемому веществу),
для левомицетина:
Т лев. = 2М лев. * С CuSO4 / 1000 = 2 * 323,13 * 0,01/ 1000 = 0,006463 грамм/мл),
для натрия хлорида:
Т NaCI = М NaCI * C AgNO3 / 1000 = 58,44 * 0,1 / 1000 = 0,005844 грамм/мл
V – объем титрованного раствора в мл, пошедший на титрование навески лекформы, мл.
Р – масса лекарственной формы (при приготовлении массо-объемным способом), мл.
а – навеска жидкой лекформы, мл.
Делают заключение о качестве приготовления лекарственной формы в соответствии с приказом № 305 от 16.10.97.
54
ЗАНЯТИЕ № 13. Препараты, производные амида кислоты сульфаниловой
Атуальность темы. Производные бензолсульфаниламидов или сульфаниламидные препараты применяют как антибактериальные средства, они оказывают бактериостатическое или бактерицидное действие на микроорганизмы. Сульфаниламиды близки по химическому строению с пара-аминобензойной кислотой, которая участвует в обменных процессах микробной клетки и, в результате конкурентного действия, нарушают цикл развития микроорганизмов. Их применяют при лечении инфекций, вызванных большой группой грамположительных и грамотрицательных бактерий.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ по первичной ароматической аминогруппе, сульфамидной группе, амидной и карбоксильной группам (органическая химия).
2. Сущность методов кислотно-основного титрования, нитритометрии, бромато-, йодо- и йодхлорметрииметрии, спектрофотометрии в УФ области спектра, адсорбционных методов (ВЭЖХ и ТСХ) (аналитическая химия).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Сульфаниламиды не замещенные – стрептоцид (сульфаниламид).
Сульфаниламиды замещенные по сульфамидной группе – сульфацил-натрий (сульфацетамид-натрий), норсульфазол, сульфапиридазин, сульфадиметоксин, сульфален, бисептол (сульфаметоксазол с триметопримом).
Сульфаниламиды замещенные по амидной группе и ароматической аминогруппе – фталазол (фталилсульфаметизол), салазопиридазин.
Для препаратов знать вопросы: история создания препаратов сульфаниламидов, классификация, общая характеристика, источники и способы получения, латинские названия препаратов, физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа, доброкачественность, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии, с. 48-49).
План занятия
Задание 1. Изучение физических свойств и реакций на подлинность препаратов сульфаниламидов (работа малой группой) – стрептоцида, норсульфазола, фталазола, сульфалена, сульфадиметоксина.
Задание 2. Анализ (определение) неизвестного препарата из списка исследованных сульфаниламидов (индивидуальная задача).
Задание 3. Количественный анализ открытого сульфаниламида.
Задание 1. Реакции на подлинность препаратов сульфаниламидов – стрептоцида, норсульфазола, фталазола, сульфалена, сульфадиметоксина. При самостоятельной работе обобщите изученный материал в виде таблицы.
55
1. Реакция образования азокрасителя на первичную ароматическую аминогруппу (диозотирования и последующего азосочетания). 0,05 г препарата растворяют в 1 мл хлороводородной кислоты, прибавляют 2 мл 1% раствора натрия нитрита и полученный раствор по каплям добавляют к 2 мл щелочного раствора бета-нафтола до образования красного окрашивания раствора (для каждого препарата оттенок окраски отметить в таблице).
2. Реакция комплексообразования с меди (II) сульфатом на сульфамидную группу. 0,05 г препарата взбалтывают с 2 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида в течение 1 минуты и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,5 мл раствора меди (II) сульфата. Образуется характерного цвета осадок (для каждого препарата оттенок окраски отметить в таблице).
3.Реакция на фталазол образования флюоресцеина (специфичная). 0,05 г фталазола помещают в выпарительную чашку, добавляют 0,05 г резорцина и 1-2 капли концентрированной серной кислоты. Подогревают на плитке в течение 1 минуты до образования плава красно-коричневого цвета. Охлаждают под тягой и полученную массу растворяют в 2 мл раствора натрия хлорида (10%), раствор переносят в пробирку и разбавляют водой. Наблюдают зеленую флюоресценцию в УФ свете.
Задание 2. Анализ неизвестного препарата (работа индивидуальная)
Получают задачу у преподавателя и проводят реакции идентификации, на основании которых делают вывод о наличии у студента лекарственного препарата из списка исследуемых в первом задании. Проверяют результат работы у преподавателя.
Задание 3. Количественный анализ открытого препарата
Проводят количественное определение методом, указанным преподавателем (нитритометрическим или алкалиметрическим).
Методики количественного анализа
Нитритометрия. Около 0,2-0,3 г препарата сульфаниламида (точная навеска) помешают в колбу для титрования, добавляют 10 мл разведенной хлороводородной кислоты, 1 г калия бромида, воды очищенной до объема 80 мл и индикаторы в соответствии стребованием ФС и ОФС «Нитритометрия». И н д и к а т о р ы: для стрептоцида – тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим (2:1), изменение окраски от красно-фиолетовой до голубой; для норсульфазола – тропеолин 00, изменение окраски от малиновой до желтой; для сульфалена – йод-крахмальная бумага, до синего окрашивания бумаги. Проводят титрование 0,1 М раствором натрия нитрита со скоростью 2 мл в минуту в начале титрования и за 0,5 мл до конца титрования со скоростью 0,05 мл (1 капля) через минуту (смотри ОФС «Нитритометрия», занятие №6).
1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,01722 г стрептоцида, 0,02553 г норсульфазола, 0,02803 г сульфалена.
Алкалиметрия (кислотно-основное титрование). Около 0,2-0,3 г препарата сульфаниламида (точная навеска) помешают в колбу для титрования, добавляют 10-15 мл 96% этилового спирта, нейтрализованного по тимолфталеину (голубое окрашивание
этанола исчезает) и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до голубого окрашивания раствора.
1 мл 0,1 н. натрия гидроксида соответствует 0,02017 г фталазола, 0,2553 г норсульфазола.
Рассчитывают содержание лекарственного вещества и делают заключение соответственно требованиям НД (ФС).
56
Оформляют протокол:
«Протокол анализа неизвестного препарата»
ФС «Таблетки сульфалена 0,2»
«Tabulette Sulfaleni 0,2»
Описание. Таблетки белого или белого с желтоватым оттенком цвета. По внешному виду должны соответствовать требованиям ГФXI, вып.2, с. 154.
Подлинность. 0,023 (точная навеска) порошка растёртых таблеток встряхивают с 70 мл 0,1 М раствора натра едкого в мерной колбе вместимостью 100 мл в течение 5 мин., доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые 30 мл фильтрата, 5 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора 0,1 М раствором натра едкого до метки и перемешивают. Ультрафиалетовый спектр полученного раствора в области от 230 до 370 нм имеет максимумы поглощения при 249 нм +- 2 нм и 315 нм +- 2 нм и минимум поглощения при 289 нм +- 2 нм.
0,15 г порошка растёртых таблеток встряхивают с 3 мл 0,1 М раствора натра едкого и фильтруют. К фильтрату прибавляют 1 мл раствора меди сульфата; выпадает осадок серо-зеленого цвета. При стоянии в течение 5 мин окраска переходит в зеленовато-голубую (отличие от других сульфаниламидных препаратов).
0,25 порошка растёртых таблеток встряхивают с 10 мл кислоты хлористоводородной разведённой в течение 3 мин и фильтруют через бумажный фильтр. 2 мл фильтрата дают характерную реакцию на амины ароматические первичные с образованием оранжево-красного осадка (ГФXI, вып. 1, с. 154).
Определение средней массы, отклонение в массе отдельных таблеток от средней массы и распадаемости. Должны выдерживать требования, указанные в ГФXI, вып. 2, с. 154.
Растворение. Определение проводят в соответствии с требованиями ГФXI, вып. 2, с. 154. Среда – 0,1М раствор кислоты хлористоводородной, объём – 900 мл, скорость вращения корзинки – 100 оборотов/мин.
Для оценки растворения используют прибор типа «Вращающаяся корзинка» (ТУ64-7-298-78 или « Erweka DT-D6», или другой подходящий прибор).
В корзинку помещают 1 таблетку, через 45 мин отбирают пробу раствора пипеткой в количестве 50 мл, фильтруют через фильтр типа «Владипор» (ТУ6-05-1924-82) с диаметром пор 0,45 мкм или стеклянный фильтр типа «ВФ ПОР 40» (ГОСТ 25336-82) или через фильтр из бумаги фильтровальной лабораторной (ГОСТ1206-76), отбрасывая первые 20 фильтрата.
5 мл полученного фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объём раствора 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают.
Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 304 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Параллельно измеряют оптическую плотность 0,002% раствора рабочего стандартного образца (РСО) сульфалена в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной.
В качестве раствора сравнения используют 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной.
57
Количество сульфалена, перешедшего в раствор, в процентах (X) вычисляют по формуле:
Х = D1 * 900 * a0 / D0 * b
Где DI – оптическая плотность испытуемого раствора;
DO – оптическая плотность раствора РСО сульфалена;
aO – навеска РСО сульфалена в граммах;
b – содержание сульфалена в одной таблетке в граммах.
В раствор через 45 мин должно перейти не менее 75% сульфалена.
Примечание. Приготовление 0,002% раствора РСО сульфалена в 0,1М растворе кислоты хлористоводородной. Около 0,02 г (точная навеска) сульфалена (ФС 42-2491-87) растворяют в 5 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объём раствора 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объём раствора 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают. Применяют свежеприготовленный раствор.
Микробиологическая чистота. Препарат должен выдерживать требования по микробиологической чистоте к нестерильным лекарственным средствам для приёма внутрь (ГФ XI, вып. 2, с. 193).
Количественное определение. Около 0,4 г (точная навеска) порошка растёртых таблеток встряхивают с 20 мл кислоты хлористоводородной разведённой в течение 5 мин, прибавляют воды до общего объёма 80 мл и далее поступают, как указано в статье «Нитритометрия» (ГФXI, вып.I, с. 190).
Титрование проводят при охлаждении в ледяной бане, индикатор – йодокрахмальная бумага.
Параллельно проводят контрольный опыт.
I мл 0,1М раствора нитрита натрия соответствует 0,02803 г C11H12N4O3S, которого должно быть от 0,190 до 0,210, считая на среднюю массу одной таблетки.
Упаковка. По 10 таблеток в контурную ячейковую упаковку по ОСТ 64 – 071 91 из плёнки поливинилхлоридной марки ЭП-73 по ГОСТ 25250-88 или импортной и фольги алюминиевой печатной лакированной по ТУ 48-21-270-78 или импортной.
По 300 контурных упаковок вместе с листками-вкладышами по числу упаковок и 5-10 инструкциями по применению вкладывают в картонную коробку – групповую упаковку.
Групповая упаковка и транспортная тара в соответствии с ГОСТ 17768-98.
Маркировка. На контурной упаковке и этикетке для коробки указывают предприятие – изготовитель и его товарный знак, название препарата на латинском и русских языках, дозировку, количество таблеток в одной упаковке, «Применять по назначению врача», регистрационный номер, номер серии, срок годности, цену.
На этикетке для коробки вместо количества таблеток в одной упаковке указывают количество упаковок в коробке, цену не указывают.
На каждую коробку наклеивают листок с предупредительной надписью: «Внимание! При продаже обязательно к каждой упаковке прилагать листок-вкладыш».
Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192-77.
Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 177768-90.
Хранение. Список Б.
Срок годности. 5 лет.
Применение: Антибактериальное средство.
58
ЗАНЯТИЕ № 14. Препараты, производные хлорбензолсульфоновой кислоты, сульфонилмочевины, бензолсульфохлорамида
Атуальность темы. Производные хлорбензолсульфоновой кислоты –(фуросемид, буфенокс) и дихлотиазида (гипотиазид) применяются как диуретические средства. Препараты, производные сульфонилмочевины (букарбан, глибенкламид и другие), используются в медицинской практике в качестве гипогликемических лекарственных средств. Бензолсульфохлорамиды (пантоцид и хлорамин) являются антисептическими средствами. Все препараты содержат в своем составе сульфониламидную группу (- SO2 – NH2), замещенную (сульфамидную) и незамещенную, и поэтому проявляют общие химические свойства (кислотные – за счет сульфамидной группы) и имеют общие методы анализа.
Контрольные вопросы по смежным дисциплинам
1. Качественный анализ по первичной ароматической аминогруппе, сульфамидной группе, амидной и карбоксильной группам, третичной и вторичной аминогруппам (органическая химия).
2. Сущность методов кислотно-основного титрования в водных и неводных средах, нитритометрии, бромато-, йодо- и йодхлорметрииметрии, спектрофотометрии в УФ области спектра, адсорбционных методов (ВЭЖХ и ТСХ) (аналитическая химия).
Контрольные вопросы по изучаемой теме
Производные хлорбензолсульфоновой кислоты – дихлотиазид (гипотиазид),
фуросемид, буфенокс (буметанид).
Производные сульфонилмочевины – букарбан (карбутамид), глибенкламид, гликлазид (предиан), гликвидон (глюренорм), глипезид.
Для препаратов: знать источники и способы получения, латинские названия препаратов, физико-химические свойства, методы качественного и количественного анализа, доброкачественность, хранение, применение, формы выпуска препаратов (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса по фармацевтической химии, с.49-50).
План занятия
Задание 1. Анализ субстанции хлорамина Б (качественный и количественный
Анализ по ФС).
Задание 2. Анализ экстемпоральной лекарственной формы (полный химический контроль).Возьми: раствор сульфацила натрия (альбуцида) 10%-10,0.
Задание 1. Фармакопейный анализ субстанции хлорамина Б (качественный и количественный).
Chloraminum B
Хлорамин Б
C6 H5 N S O2 CI Na * 3 H2 O М. в. 267,68
59
Описание. Белые или слегка желтоватые кристаллы или кристаллический порошок со слабым запахом хлора.
Растворимость. Растворим в воде, очень мало растворим в эфире и хлорформе.
Подлинность. К 0,05 г препарата прибавляют 2 мл воды, 1 мл раствора калия йодида и 1 мл хлороформа. Хлороформный слой окрашивается в розово-фиолетовый цвет.
К 0,05 г препарата прибавляют 2 мл воды и 2 капли метилового красного, раствор окрашивается в желтый цвет (рН = 6 - 7), при стоянии раствор обесцвечивается (окисление индикатора).
Количественное определение. Около 0,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 25 мл воды в мерной колбе емкостью 100 мл. Объем доводят водой до метки. 25 мл раствора переносят (мерной пипеткой) в колбу для титрования с притертой пробкой емкостью 250 мл, прибавляют 10 мл раствора калия йодида и 10 мл разведенной соляной кислоты. Выделившийся йод титруют 0,1 н. раствором натрия тиосульфата (индикатор крахмал).
1 мл 0,1 н. раствора натрия тиосульфата соответствует 0,003546 г активного хлора, которого в препарате должно быть не менее 25% и не более 29%.
Хранение. В хорошо укупоренной таре, в сухом , прохладном, защищенном от света месте.
Антисептическое средство.
Задание 2. Экспресс – анализ экстемпоральной лекарственной формы
Возьми: раствора сульфацила натрия 10%-10,0
Описание. Бесцветная прозрачная жидкость.
Подлинность
Сульфацил натрия. К 2-3 каплям лекформы прибавляют 2-3 капли раствора меди сульфата. Образуется осадок голубовато-зеленого цвета.
Ион натрия.1 каплю лекформы помещают на предметное стекло и добавляют 1 каплю кислоты пикриновой. При частичном испарении образуются кристаллы игольчатой формы (микроскоп).
Количественный анализ
Метод нитритометрии. Берут 0,5 мл лекформы (мерной пипеткой) и помещают в колбу для титрования емкостью 100 мл, прибавляют 5 мл 10% раствора калия бромида, 5 мл разведенной соляной (хлороводородной) кислоты, воды до объема 50 мл, 3 капли индикатора нейтрального красного и титруют 0,1 н. раствором натрия нитрита до перехода малиновой окраски раствора в синюю.
1 мл 0,1 н. раствора натрия нитрита соответствует 0,02542 г сульфацила натрия.
Метод кислотно-основноготитрования (нейтрализации, ацидиметрии). Берут 0,5 мл лекформы (мерной пипеткой) и помещают в колбу для титрования емкостью 50 мл, добавляют 5 мл воды, 2 капли метилового оранжевого и 1 каплю метиленового синего (зеленое окрашивание) и титруют 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной до фиолетового окрашивания раствора.
1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,02542 г сульфацила натрия.
Сравнивают методы по величине относительной ошибки в соответствии с требованием приказа № 305 от 16.10.97 г.
Оформляют протоколы анализа по заданиям 1 и 2.
60
ЗАНЯТИЕ № 15. Контрольная работа по теме «Лекарственные препараты – производные арилалкиламинов и бензолсульфониламидов»
Контроль знаний студентов проводится в виде тестового контроля и коллоквиума (собеседования) по билетам.
Литературу, лекарственные вещества и контрольные вопросы по изучаемой теме смотри в занятиях № 12, 13, 14 (подробнее смотри в МУ для самостоятельной работы студентов 3 курса, с. 51-53).
ЗАНЯТИЕ № 16. Зачет по практическим навыкам
ЗАНЯТИЕ № 17. Тестированный контроль по общим методам анализа лекарственных препаратов, изученных на III курсе
Перечень вопросов для сдачи практических навыков и тестового контроля
2. Качественный и количественный анализ по функциональным группам («Анализ органических лекарственных веществ по функциональным группам» методические рекомендации для студентов очного отделения фармацевтического факультета-2007 г.
3. Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей (ГФ XI, ч. 1, с. 165).
9. Препараты неорганической природы, производные кислорода, бора, кальция,
магния, цинка, бария, галогениды щелочных металлов.
10. Препараты органической природы: спирты, галогено- и альдегидопроизводные,
аскорбиновая кислота, аминокислоты, антибиотики и другие препараты, изученные
в весеннем семестре.
Перечень практических умений студентов по фармацевтической химии
Студент должен уметь:
1. Владеть навыками использования физических и физико-химических методов для проведения анализа лекарственных средств в соответствии с требованиями общих (ОФС), частных статей (ФС) и ГФ, приказов;
характеризовать внешний вид препарата и его возможные изменения на основе
физико-химических закономерностей;
определять растворимость и реакцию среды лекарственных средств;
определять физические константы и показатели (температура плавления, удельное вращение, удельный показатель поглощения, плотность, величина Rf, рН растворов, показатель рефракции или преломления), характеризующие подлинность и чистоту препаратов;
проводить спектрофотометрическое определение в видимой и УФ области спектра, хроматографические исследования для установления подлинности и доброкачественности лекарственных средств;
61
определять подлинность и чистоту лекарственных средств в соответствии с требованиями общих (ОФС) и частных статей (ФС);
проводить количественное определение лекарственных форм промышленного изготовления (субстанции, таблеток, инъекционных растворов) и внутриаптечной продукции (экстемпоральных лекарственных форм-порошков, растворов, микстур, глазных капель) с применением методов анализа: кислотно-основное титрование,
йодометрия, аргентометрия, броматометрия, комплексонометрия, нитритометрия, метод Къельдаля, сжигание в кислороде, неводное титрование.
оформлять документацию о соответствии качества лекформ и препаратов требованиям ГФ и другой нормативной документации.
опросный;
письменный;
органолептический;
физический;
химический.
химической несовместимости и стабильности лекарственных веществ;
технологически обоснованного способа приготовления лекарственных форм;
обеспечение способов и сроков хранения лекарственных средств.
62
допустимых примесей в лекарственных препаратах по ГФ ХI.
63
Получение, физико-химические свойства, анализ, применение, хранение.
64
и химические свойства, анализ, применение, хранение.
65
Алгоритмы ответов на экзаменационные вопросы
Анализ по функциональным группам (ФГ)
1). Привести примеры лекарственных веществ, содержащих указанную функциональную группу, выделить ее.
2). Предложить все возможные реакции идентификации на данную ФГ и написать химические уравнения. На основе этих рекций предложить методы количественного анализа (если необходимо, дописать уравнения реакций), обосновать эквивалент в химических методах анализа и предложить формулы расчета содержания веществ.
Группа лекарственных веществ
1). Написать структурные формулы препаратов, латинские и химические названия.
2). Описать физические и химические свойства лекарственных веществ.
3). Предложить общие и частные химические и физико-химические методы (спектрофотометрия в УФ, видимой и ИК области спектра, ТСХ, ВЭЖХ, ГЖХ) методы установления подлинности и доброкачественности лекарственных средств и препаратов.
4). Предложить методы количественного определения лекарственных средств в субстанциях и лекарственных формах: химические (кислотно-основного титрования в водных и неводных средах, методы окислительно-восстановительного титрования, методы осаждения) и физико-химические методы (спектрофотометрия в УФ и видимой области спектра, ФЭК, поляриметрия, рефрактометрия, ВЭЖХ, ГЖХ).
5). Применение, хранение.
Интерпретация (расшифровка) фармакопейной статьи (ФС по ГФ Х) на лекарственные препараты
1). Объяснить физические свойства лекарственного вещества – растворимость, окраску, агрегатное состояние.
2). Назвать тип реакции подлинности и написать химическое уравнение реакции на катионы, анионы или функциональную группу.
66
3). Обосновать физические константы (дать определение, написать формулы расчета): температуры плавления, температуры кипения, плотности, удельного вращения, удельного или молярного показателя поглощения.
4). Написать уравнения реакций, лежащих в основе определения примесей, назвать метод и описать технику определения примеси (эталонный, безэталонный метод).
5). Назвать метод количественного определения, указанный в ФС, написать уравнения
реакций, составить расчетные формулы, объяснить значение эквивалента и титра.
6). Объяснить условия хранения, исходя из химических процессов, происходящих с веществом при неправильном хранении.
Анализ экстемпоральных многокомпонентных лекарственных форм (полный химический контроль)
1). Предложить методику качественного анализа ингредиентов лекформы, т.е. специфичных реакций подлинности на каждое лекарственное вещество (катионы и анионы неорганических или функциональные группы органических лекарственных веществ) и написать уравнения предложенных химических реакций.
2). Предложить методы количественного анализа ингредиентов лекформы, которые можно использовать в условиях аптеки. Методика анализа должна позволить рассчитать содержание каждого ингредиента лекформы. Написать и обосновать эквивалент вещества, формулы расчета титра и содержания каждого лекарственного вещества. Уметь использовать приказ № 214 и № 305 для оценки качества данной лекарственной формы.
67
Содержание
Программа по фармацевтической химии…………………………………………………..3
Литература……………………………………………………………………………………5
План практических занятий ………………………………………………………………...6
Занятие № 1. Анализ антибиотиков b-лактамидов………………………………………...7
Занятие № 2. Анализ антибиотиков аминогликозидов и макролидов………………….10
Занятие № 3. Анализ препаратов моно- и бициклических терпенов. Витамин А……..13
Занятие № 4. Контрольная работа № 1 по темам занятий №1–3………………………..16
Занятие № 5. Анализ препаратов фенолов, хинонов и их производных………………..17
Занятие № 6. Анализ производных пара- и мета-аминофенола. Анализ антибиотиков ряда тетрациклина………………………………………………………………………….23
Занятие № 7. Контрольная работа № 2 по темам занятий №5–6………………………..28
Занятие № 8. Анализ препаратов ароматических кислот и их производных…………..29
Занятие № 9. Анализ препаратов пара-аминобензойной, фенилуксусной и фенилпропионовой кислот и их производных…………………………………………...35
Занятие № 10. Анализ препаратов производных пара-аминосалициловой кислоты. Диэтиламиноцетанилиды и их аналоги по действию……………………………………40
Занятие № 11. Контрольная работа № 3 по темам занятий №8–10……………………..49
Занятие № 12. Арилалкиламины, оксифенилалкиламины, нитрофенилалкиламины и их производные. Йодированные производные ароматических и арилалифатических аминокислот………………………………………………………………………………...50
Занятие № 13. Препараты производные амида сульфаниловой кислоты………………55
Занятие № 14. Препараты производные хлорбензолсульфоновой кислоты, сульфонилмочевины, бензолсульфохлорамида…………………………………………..59
Занятие № 15. Контрольная работа № 4 по темам занятий №12–14……………………61
Занятие № 16. Зачет по практическим навыкам (вопросы для подготовки)…………....61
Занятие № 17. Тестовый контроль по общим методам анализа (вопросы для подготовки)………………………………………………………………………………….61
Вопросы для подготовки к экзамену по фармацевтической химии 3 курса……………62
Алгоритмы ответов на вопросы экзамена по фармацевтической химии 3 курса………66
68
Учебное издание
Подписано в печать
Формат 60х90/16. Бумага офсетная.
Печать ризографическая.
Гарнитура Таймс Нью Роман.
Тираж экз.
Алтайский государственный медицинский университет
г. Барнаул, пр. Ленина, 40
Типография ГОУ ВПО «Алтайский государственный
медицинский университет Росздрава»
г. Барнаул, пр. Ленина, 40