Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Красноярский государственный медицинский университет имени
профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения
Российской Федерации
ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Минздрава России
Кафедра микробиологии им. доц. Б.М. Зельмановича
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ДЛЯ ОБУЧАЮЩИХСЯ
по дисциплине «Микробиология лекарственных средств»
(дисциплина по выбору)
для специальности 060301 – Фармация (очная форма обучения)
К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ № 6
ТЕМА: «Санитарно-бактериологическое исследование
смывов с объектов внешней среды (продолжение)»
Утверждены на кафедральном заседании
протокол № ____ от «___»____________ 20__ г.
Заведующая кафедрой микробиологии им. доц. Б.М. Зельмановича
к.б.н., доцент ___________________Перьянова О.В.
Составители:
к.б.н., доцент ____________________Хохлова О.Е.
Красноярск
2012
1. Занятие № 5
Тема: «Санитарно-бактериологическое исследование смывов с объектов внешней среды (продолжение)».
Начиная с разработки новых фармацевтических препаратов, на всех этапах от производства до потребителя, необходимо оценивать вероятность риска выпуска некачественных средств и совершенствовать систему контроля, добиваясь обеспечения их качества. Особое место при этом занимают биологические методы исследований, относящиеся в первую очередь к области фармакологии и микробиологии. Основная задача санитарно-микробиологического исследования смывов с объектов внешней среды – гигиеническая и эпидемиологическая оценка с целью предотвращения контаминации лекарственных средств в процессе их изготовления и, следовательно, предупреждение заражения возбудителями инфекционных болезней.
- общая: обучающийся должен обладать ОК: способностью и готовностью анализировать социально-значимые проблемы и процессы, использовать на практике методы медико-биологических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОК-1, ОК-5) и ПК-27, ПК-30, ПК-31, ПК-33,ПК-34, ПК-35, ПК-36, ПК-49.
- учебная: знать особенности биологии микроорганизмов, взаимодействие с макроорганизмом, определяющие их роль в развитии инфекционного процесса и в порче лекарственного сырья и готовых лекарственных форм; нормативные документы, регламентирующими правила работы с объектами, представляющими биологическую опасность; правила работы в аптечном учреждении, на фармацевтическом производстве; устройство микробиологической лаборатории и правила техники безопасности при работе с микроорганизмами; влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы, цели и методы асептики, антисептики, консервации, стерилизации, дезинфекции; аппаратуру и контроль качества стерилизации; роль микроорганизмов в порче лекарственного сырья и готовых лекарственных форм; фитопатогенную микрофлору и ее роль в порче лекарственного растительного сырья; состав микрофлоры организма человека и ее значение; санитарно-показательные микроорганизмы воды и их значение для оценки санитарного состояния окружающей среды; микробиологические методы оценки качества лекарственных средств в соответствии требованиями нормативных документов;
уметь определять показатели микробиологической чистоты воды, выполнять работу в асептических условиях; выделять чистую культуру микроорганизмов (сделать посевы, идентифицировать чистую культуру); анализировать лекарственные препараты, лекарственное сырье, объекты окружающей среды, смывы с рук и посуды по показателям микробиологической чистоты
владеть базовыми технологиями переработки информации: текстовые, табличные редакторы, поиск в сети Интернет; навыками интерпретации; навыками оценки микробиологической чистоты лекарственных препаратов,
5. План изучения темы:
5.1. Контроль исходного уровня знаний:
Собеседование по контрольным вопросам:
Тесты.
5.2. Основные понятия и положения темы
Ориентировочный перечень объектов, подлежащих контролю методом смывов включает: рабочее место дефектара; стол для приготовления инъекционных растворов; стол для приготовления глазных капель; весы для взвешивания сухих веществ у дефектара; тара для хранения прокладок и пробок, используемых для укупорки инъекционных растворов и глазных капель; ступки; весы роговые; кран водопроводный в ассистентской; руки персонала; полотенце; санитарная одежда.
Отбор проб для санитарно-микробиологического исследования предметов, аппаратуры, рабочих поверхностей проводятся с помощью следующих методов:
1. смыв с использованием стерильного тампона или салфетки; или ополаскивания мелких предметов и внутренней поверхности флаконов;
2. контактный метод – метод “отпечатков”;
Метод смывов: При отборе проб с крупных плоскостей (поверхности рабочих столов, стен, ванн и др.) используют стерильные ватные или марлевые тампоны размером 2 х 2 см и не более 2-х слоев. Перед употреблением их смачивают физиологическим раствором хлористого натрия или питательной жидкой средой.
Тампоны вмонтированы в пробирки, на дно которых наливается смачивающая жидкость (физиологический. раствор, среда Кесслера) в объёме 3-5 мл.
На исследуемую поверхность для ограничения площади обследования накладывают рамку-шаблон площадью 100 см2 (10 х 10 см.), изготовляемый из проволоки диаметром 3-5 мм. Перед взятием пробы шаблон стерилизуют пламенем горелки.
Для взятия пробы тампон опускают до дна пробирки, затем влажным тампоном производят смыв и снова его погружают в жидкость. Перед использованием салфеток их также смачивают стерильной жидкостью и после обтирания ими поверхностей переносят в колбу для последующего исследования.
Мелкие предметы (пробки, прокладки и т.д.) погружают непосредственно в питательную среду (10 мл), встряхивают в течение 10 мин. Полученную смывную жидкость используют для посева.
Для забора смывов с рук: увлажненной стерильной марлевой салфеткой размером 5 х 5 см. протирают руки обследуемого, начиная с менее загрязненных участков кожи (тыльная часть ладони, ладонь, межпальцевые промежутки, ногтевые ложа и подногтевые пространства). Салфетки помещают в колбы с увлажняющей жидкостью и транспортируют в лабораторию с соответствующим сопроводительным документом.
Смыв с халатов: производится с площади в 100 см2. Обязательно исследуются передняя сторона халата и нижние части рукавов.
Смывы аптечной посуды проводят путём ополаскивания бутылок, флаконов и т.д. 10-30 мл стерильного физиологичечкого раствора с последующим мерным высевом. Параллельно исследуется не менее 3-5 ёмкостей.
Метод отпечатков. Метод применяется для определения микробной контаминации ровной гладкой поверхности (как горизонтальной, так и вертикальной).
Кусочки марли в виде кружков диаметром 3-6 см., мембранные фильтры или полоски фильтровальной бумаги (всё должно быть стерильным!) помещают в чашку Петри и заливают расплавленной плотной средой (3%-й МПА или среда Эндо двойной концентрации). После остывания стерильным пинцетом забирают кружочки марли, или полоски бумаги или фильтры, накладывают стороной, пропитанной средой, на исследуемую поверхность, осторожно прижимая пинцетом. Затем переносят в стерильную чашку Петри нижней поверхностью вверх для последующей инкубации в термостате.
Отбор проб для исследования проводят сотрудники Роспотребнадзора. Кратность обследований с отбором проб составляет не менее 2-х раз в квартал.
5.3. Самостоятельная работа по теме:
1. Учесть и оценить результаты санитарно-бактериологического исследования смывов с рук персонала и стола для приготовления инъекционных растворов.
Для определения наличия БГКП в смывах с рук персонала и стола для приготовления инъекционных растворов просматривают посевы на разведенной глюкозо-пептонной среде (ГПС) или средах Кесслера, Кода и при наличии признаков роста (муть, изменение цвета индикатора). производят высев секторами на среду Эндо. Последнюю инкубируют при температуре 370 18-24 ч. и производят просмотр посевов. Из подозрительных лактозоположительных колоний (малиновых с металлическим блеском и без него) делают мазки, красят по Граму и микроскопируют. При наличии грамотрицательных палочек оставшуюся часть колонии пересевают на ГПС с поплавком, инкубируют при температуре 370 18-24 ч. Образование кислоты и газа на ГПС свидетельствует о наличии БГКП.
Для определения наличия золотистого стафилококка в смывах с рук персонала и стола для приготовления инъекционных растворов просматривают посевы на солевом бульоне и при наличии признаков роста (муть) производят высев на среду ЖСА. Последнюю инкубируют при температуре 370 18-24 ч. и производят просмотр посевов. В случае обнаружения колоний, проводят их дальнейшую идентификацию до вида.
Интерпретация результатов: наличие БГКП и патогенных стафилококков в смывах не допускается.
5.4. Итоговый контроль знаний:
- подведение итогов.
Задача № 1.
При санитарно-бактериологическом исследовании смывов с рук персонала аптек получены следующие результаты: БГКП 20 в 1 см3, золотистый стафилококк 10 в 1 см3
Задача № 2.
При санитарно-бактериологическом исследовании смывов с рук персонала аптек получены следующие результаты: БГКП 0 в 1 см3, золотистый стафилококк 0 в 1 см3
6. Домашнее задание для уяснения темы занятия (согласно методических рекомендаций по теме следующего занятия).
7. Рекомендации по выполнению НИРС, в том числе список тем, предлагаемых кафедрой.
8. Рекомендованная литература по теме занятия:
обязательная
дополнительная