У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.net

по теме- Биохимические и иммунохимические методы исследования Кафедра клинической лаб

Работа добавлена на сайт samzan.net: 2015-07-10

Поможем написать учебную работу

Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.

Предоплата всего

от 25%

Подписываем

договор

Выберите тип работы:

Скидка 25% при заказе до 7.4.2025

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Ярославская государственная медицинская академия федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Учебно - методическая разработка

для курсантов ФПДО к практическому занятию по теме:

«Биохимические и иммунохимические  методы исследования»

Кафедра клинической лабораторной диагностики

с курсом ФПДО

                                   

            

Ярославль, 2008 год

Тема занятия:

«Биохимические и иммунохимические методы исследования»

Место проведения занятия:

Кафедра «Клинической лабораторной диагностики»

Учебная база: Поликлиника №2

Учебная комната №1

Учебная база: Клиническая больница №5

Лаборатория Центра изучения тромбозов

Учебная база: Клиническая наркологическая больница

Химико-токсикологическая лаборатория

Оснащение занятия: 

Методическое:

-компьютерная версия презентации занятия;

-биологические объекты (сыворотка крови, моча);

-экстракты из биологических объектов;

-данные рН-метрии.

Материальное:

- мультимедийные установки;

- иммунохроматографические тест-системы «Фактор-Мед»;

- планшеты и реактивы для иммуноферментного анализа «Neogen»;

- автоматический биохимический анализатор «Sapphire-400»;

- автоматические полярофлюороиммунные анализаторы Abbott «TDx», «IMx» и «AxSYM»;

- газовый хроматограф «Agilent 6950» и хромато-масс-спектрометр «Agilent 6850/5973N».

Продолжительность занятия: 

Количество часов, отведённых на изучение данной темы -28 учебных часов.

Лекции – 12 часов.

Практическая часть – 16  часов.

Актуальность темы:  

В настоящее время исследования в области клинической химии охватывает многие области лабораторной диагностики, такие как общая биохимия крови и мочи, эндокринология, нарушения метаболизма, диагностика наркоманий и острых отравлений, терапевтический лекарственный мониторинг и др. В то же время, для проведения данного вида исследований на современном метрологически и экономически обоснованном аналитическом уровне требуется определенное инструментальное обеспечение. 

Общие биохимические анализы, как правило, выполняются с помощью колориметрических и нефелометрических реакций, и развитие данного вида исследований идёт по пути полной автоматизации всех этапов анализа. Однако данный тип реакций зачастую не обладает необходимой чувствительностью и селективностью (эндокринология, лекарственный мониторинг, наркология и др.). В этом случае используются иммунные методы (экспресс-диагностика с помощью иммунохроматографических тест-полосок, инструментальные иммунофермент-ные и полярофлюороиммунные исследования). В случае анализа продуктов нарушения метаболизма аминокислот, нуклеотидов, стероидов и т.п., когда невозможно провести анализ иммунными методами, а также в целях доказательной медицины, необходимо использование хроматографических методов в сочетании с различными типами детекторов – спектральными и электрохимическими. Хроматографические методы позволяют проводить анализ метаболических профилей (метаболома крови, слюны, мочи), который является одним из мощнейших инструментов диагностики врожденных и приобретенных нарушений метаболизма, применяются для диагностики различных бактериальных заболеваний. В химико-токсикологичеких лабораториях, для выявления фактов употребления наркотических и одурманивающих веществ, необходимо использование хромато-масс-спектрометрии для подтверждения предварительных иммунных тестов. Этот метод также незаменим для диагностики острых отравлений, при ненаправленном химико-токсикологическом анализе. Для элементного анализа в настоящее время используются химические реакции, пламенная фотометрия, атомно-абсорбционная спектроскопия, атомно-эмиссионная спектроскопия с индуктивно-связанной плазмой, в том числе с масс-селективным детектором, ионометрия, ионная хроматография, капиллярный электрофорез и др.

Внедрение в практику лабораторной диагностики современных аналитических инструментов не уменьшает, а зачастую увеличивает важность предварительных операций включающих приготовление стандартных, буферных и др. растворов,  пробоподготовку, в том числе экстракцию и рН-метрию, работу с весовым и мерным оборудованием и т.п.

Целевая установка: 

Учебная – обучить курсантов современным методам иммунохимических исследований.

Научить осуществлять правильный выбор метода анализа исходя из поставленной задачи исследования.

Развивающая – приобретение навыков в выполнении современных иммунохимических методов исследования биологических объектов. Умение излагать материал последовательно и логично, приводить примеры, пользоваться терминологией, соответствующей теме занятия. Развить критическое мышление.

Конкретные задачи: 

1. Разобрать технику проведения современных методов иммунохимического анализа.

2. Ознакомиться с аналитическими характеристиками каждого метода.

3. Научиться осуществлять правильный алгоритм анализа исходя из поставленной задачи исследования.

4. Ознакомиться с предварительными методами анализа (правила взвешивания, приготовления растворов, пробоподготовки).

5. Использовать полученные знания в ходе практических заданий.

Курсант должен знать:

- цели и задачи клинической химии;

- объекты исследования и правила их забора у пациента;

- понимать значимость исследуемых показателей

- нормальные значения основных показателей;

- наиболее значимые изменения в указанных анализах.

Курсант должен уметь:

- провести забор биологического материала;

- провести клиническое исследование с помощью изучаемых методов;

- трактовать основные изменения в обозначенных методах исследования;

- строить логические заключения, делать выводы из полученных данных

  лабораторных анализов, использовать критическое мышление;

- активно участвовать в ходе занятия, аргументировать свои рассуждения.

Тип занятия:

Комбинированное занятие – семинар с элементами проблемного обучения, с последующим закреплением знаний практическими навыками.

Внутрипредметные связи

Терапия

Хирургия

Эндокринология

Наркология и психиатрия и др.

Межпредметные связи

Биология

Аналитическая химия

Токсикологическая химия

Патологическая физиология

Нормальная физиология

Общая химия

Органическая химия

Неорганическая химия и др.

«Современные  биохимические методы исследования»

    →

      Вопросы для повторения:

  1.  Способы выражения концентрации растворов.
  2.  Закон действующих масс. Скорость и константа скорости химической реакции.  
  3.  Молекулярность реакций.
  4.  Порядок реакций. Определение порядка реакции (зависимость скорости от концентрации реагента).
  5.  Единицы измерения скорости и константы скорости химических реакций. Экспериментальный расчет константы скорости мономолекулярной и бимолекулярной реакции. Определение порядка реакции.
  6.  Определение констант необратимых реакций 0,1 и 2 порядков. Необратимые реакции первого и второго порядка. Время полупревращения реакций нулевого и дробного порядка.Характеристические функции кинетики необратимых химических реакций
  7.  Единицы измерения скорости первого и второго порядка.  Размерность констант скоростей реакций различных порядков. Кинетические закономерности реакций первого и второго порядков. Определение порядка реакции с помощью графиков.
  8.  Время полупревращения реагента (субстрата) t1/2 для реакций первого и второго порядка
  9.  Термодинамика ферментативного катализа.  Энтальпия, энтропия, определение, физический смысл
  10.  Влияние температуры на скорость химических и ферментативных реакций. Уравнение Вант-Гоффа.
  11.  Определение изменения свободной энергии. Связь между DG и константой равновесия. Термодинамическая вероятность протекания реакций. Сопряженные реакции.
  12.  Диффузионный и кинетический режимы реакций.
  13.  Формирование фермент-субстратного комплекса.
  14.  Уравнение Михаэлиса-Ментен. Стационарная кинетика. Условия выполнения уравнения Михаэлиса-Ментен.Физический смысл   параметров уравнения Михаэлиса-Ментен. Методы определения Vm и Kм
  15.  Определение констант диссоциации фермент-субстратных комплексов. Обратимые реакции. Смещение химического равновесия.
  16.  Влияние температуры на скорость реакций. Правило Вант-Гоффа.
  17.  Кинетика ферментативных реакций на поверхности. Иммобилизованные ферменты
  18.  Односубстратные двусторонние реакции с одним продуктом
  19.  Измерение скоростей бимолекулярных (бисубстратных, двухсубстратных) реакций в реальном времени.
  20.  Строение активных центров ферментов. Классификация.
  21.  Односубстратные двусторонние реакции с одним продуктом
  22.  Измерение скоростей бимолекулярных (бисубстратных) реакций в реальном времени.

       План самостоятельной работы курсанта  на практическом занятии:

  1.  Изучение правил забора объектов для рассматриваемых методов лабораторных исследований.
  2.  Разбор методов лабораторной диагностики биологических материалов.
  3.  Умение интерпретировать изучаемые параметры и показатели, полученные в результате проведённых лабораторных методов исследования.

        Вопросы для самоконтроля:

  1.  Методы колориметрического, нефелометрического и турбодиметрического анализа, их диагностическое значение.
  2.  Методы экспресс-анализа, иммунохроматография. Диагностическая значимость.
  3.  Методы иммуноферментного и полярофлюороиммунного анализа: техника проведения и оценка полученных результатов.
  4.  Методы хроматографического анализа: методики выполнения и интерпретация полученных данных.
  5.  Методы доказательной химии. Требования к данным видам исследований.

 Литература, рекомендуемая для самоподготовки          

             Основная (согласно программе):

     1. Василенко В.Х., Гребенев АЛ. Пропедевтика внутренних болезней.

         М.,  Медицина, 1982. Стр.119-126, 282-287, 313-317, 340-344.

     2. Гребенев АЛ. Пропедевтика внутренних болезней.

         М., Медицина, 1995. Стр.303-311, 338-342, 378-381, 566-569.

     3. Козловская Л.В., Николаев АЮ. Учебное пособие по клиническим    

         лабораторным методам исследования. М., Медицина, 1984.Стр. 207 -285.

     4. Практикум по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред.  

         проф. Н.П.Шилкиной. Ярославль, 1987. Стр. 36-71.

  1.  Практикум по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред.

    проф. Н.П.Шилкиной. Ярославль, 1999. Стр. 36-62.

                               

                 

                  Дополнительная литература:

  1.  Миронова И.И., Романова Л.А., Долгов В.В.

         «Общеклинические исследования» М., 2005, стр. 87 – 118.

  1.  Долгов В.В., Шевченко О.П. «Лабораторная диагностика»

          М., 2005, стр. 121- 123.

  1.  Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. Биохимия для врача. Екатеринбург: Уральский рабочий, 1994.
  2.  Титов В.Н. «Лабораторные и инструментальные исследования в диагностике», М., 2004, стр. 490 – 514.
  3.  Кнорре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 2000.
  4.  Зупанец И.А., Мисюрева С.В., Попов С.Б. «Клинические лабораторные методы исследования» Харьков, 2000, стр. 81-93.

 

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Ярославская государственная медицинская академия федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Учебно - методическая разработка

для преподавателей к практическому занятию с курсантами ФПДО

по теме:

«Биохимические и иммунохимические  методы исследования»

Кафедра клинической лабораторной диагностики

с курсом ФПДО

                                   

            

Ярославль, 2008 год

Тема занятия:

«Биохимические и иммунохимические методы исследования»

Место проведения занятия:

Кафедра «Клинической лабораторной диагностики»

Учебная база: Поликлиника №2

Учебная комната №1

Учебная база: Клиническая больница №5

Лаборатория Центра изучения тромбозов

Учебная база: Клиническая наркологическая больница

Химико-токсикологическая лаборатория

Оснащение занятия: 

Методическое:

-компьютерная версия презентации занятия;

-биологические объекты (сыворотка крови, моча);

-экстракты из биологических объектов;

-данные рН-метрии.  

Материальное:

- мультимедийные установки;

- иммунохроматографические тест-системы «Фактор-Мед»;

- планшеты и реактивы для иммуноферментного анализа «Neogen»;

- автоматический биохимический анализатор «Sapphire-400»;

- автоматические полярофлюороиммунные анализаторы Abbott «TDx», «IMx» и «AxSYM»;

- газовый хроматограф «Agilent 6950» и хромато-масс-спектрометр «Agilent 6850/5973N».

Продолжительность занятия: 

Количество часов, отведённых на изучение данной темы -28 учебных часов.

Лекции – 12 часов.

Практическая часть – 16  часов.

Актуальность темы:  

В настоящее время исследования в области клинической химии охватывает многие области лабораторной диагностики, такие как общая биохимия крови и мочи, эндокринология, нарушения метаболизма, диагностика наркоманий и острых отравлений, терапевтический лекарственный мониторинг и др. В то же время, для проведения данного вида исследований на современном метрологически и экономически обоснованном аналитическом уровне требуется определенное инструментальное обеспечение. 

Общие биохимические анализы, как правило, выполняются с помощью колориметрических и нефелометрических реакций, и развитие данного вида исследований идёт по пути полной автоматизации всех этапов анализа. Однако данный тип реакций зачастую не обладает необходимой чувствительностью и селективностью (эндокринология, лекарственный мониторинг, наркология и др.). В этом случае используются иммунные методы (экспресс-диагностика с помощью иммунохроматографических тест-полосок, инструментальные иммунофермент-ные и полярофлюороиммунные исследования). В случае анализа продуктов нарушения метаболизма аминокислот, нуклеотидов, стероидов и т.п., когда невозможно провести анализ иммунными методами, а также в целях доказательной медицины, необходимо использование хроматографических методов в сочетании с различными типами детекторов – спектральными и электрохимическими. Хроматографические методы позволяют проводить анализ метаболических профилей (метаболома крови, слюны, мочи), который является одним из мощнейших инструментов диагностики врожденных и приобретенных нарушений метаболизма, применяются для диагностики различных бактериальных заболеваний. В химико-токсикологичеких лабораториях, для выявления фактов употребления наркотических и одурманивающих веществ, необходимо использование хромато-масс-спектрометрии для подтверждения предварительных иммунных тестов. Этот метод также незаменим для диагностики острых отравлений, при ненаправленном химико-токсикологическом анализе. Для элементного анализа в настоящее время используются химические реакции, пламенная фотометрия, атомно-абсорбционная спектроскопия, атомно-эмиссионная спектроскопия с индуктивно-связанной плазмой, в том числе с масс-селективным детектором, ионометрия, ионная хроматография, капиллярный электрофорез и др.

Внедрение в практику лабораторной диагностики современных аналитических инструментов не уменьшает, а зачастую увеличивает важность предварительных операций включающих приготовление стандартных, буферных и др. растворов,  пробоподготовку, в том числе экстракцию и рН-метрию, работу с весовым и мерным оборудованием и т.п.

Целевая установка: 

Учебная – обучить курсантов современным методам иммунохимических исследований.

Научить осуществлять правильный выбор метода анализа исходя из поставленной задачи исследования.

Развивающая – приобретение навыков в выполнении современных иммунохимических методов исследования биологических объектов. Умение излагать материал последовательно и логично, приводить примеры, пользоваться терминологией, соответствующей теме занятия. Развить критическое мышление.

Воспитательная – в процессе проведения занятия следует стремиться выработать у курсанта интерес к изучаемым методам исследования.

Конкретные задачи: 

1. Разобрать технику проведения современных методов иммунохимического анализа.

2. Ознакомиться с аналитическими характеристиками каждого метода.

3. Научиться осуществлять правильный алгоритм анализа исходя из поставленной задачи исследования.

4. Ознакомиться с предварительными методами анализа (правила взвешивания, приготовления растворов, пробоподготовки).

5. Использовать полученные знания в ходе практических заданий.

Курсант должен знать:

- цели и задачи клинической химии;

- объекты исследования и правила их забора у пациента;

- понимать значимость исследуемых показателей

- нормальные значения основных показателей;

- наиболее значимые изменения в указанных анализах.

Курсант должен уметь:

- провести забор биологического материала;

- провести клиническое исследование с помощью изучаемых методов;

- трактовать основные изменения в обозначенных методах исследования;

- строить логические заключения, делать выводы из полученных данных

  лабораторных анализов, использовать критическое мышление;

- активно участвовать в ходе занятия, аргументировать свои рассуждения.

Тип занятия:

Комбинированное занятие – семинар с элементами проблемного обучения, с последующим закреплением знаний практическими навыками.

Внутрипредметные связи

Терапия

Хирургия

Эндокринология

Наркология и психиатрия и др.

Межпредметные связи

Биология

Аналитическая химия

Токсикологическая химия

Патологическая физиология

Нормальная физиология

Общая химия

Органическая химия

Неорганическая химия и др.

«Современные  биохимические методы исследования»

    →

      Вопросы для повторения:

  1.  Способы выражения концентрации растворов.
  2.  Закон действующих масс. Скорость и константа скорости химической реакции.  
  3.  Молекулярность реакций.
  4.  Порядок реакций. Определение порядка реакции (зависимость скорости от концентрации реагента).
  5.  Единицы измерения скорости и константы скорости химических реакций. Экспериментальный расчет константы скорости мономолекулярной и бимолекулярной реакции. Определение порядка реакции.
  6.  Определение констант необратимых реакций 0,1 и 2 порядков. Необратимые реакции первого и второго порядка. Время полупревращения реакций нулевого и дробного порядка.Характеристические функции кинетики необратимых химических реакций
  7.  Единицы измерения скорости первого и второго порядка.  Размерность констант скоростей реакций различных порядков. Кинетические закономерности реакций первого и второго порядков. Определение порядка реакции с помощью графиков.
  8.  Время полупревращения реагента (субстрата) t1/2 для реакций первого и второго порядка
  9.  Термодинамика ферментативного катализа.  Энтальпия, энтропия, определение, физический смысл
  10.  Влияние температуры на скорость химических и ферментативных реакций. Уравнение Вант-Гоффа.
  11.  Определение изменения свободной энергии. Связь между DG и константой равновесия. Термодинамическая вероятность протекания реакций. Сопряженные реакции.
  12.  Диффузионный и кинетический режимы реакций.
  13.  Формирование фермент-субстратного комплекса.
  14.  Уравнение Михаэлиса-Ментен. Стационарная кинетика. Условия выполнения уравнения Михаэлиса-Ментен.Физический смысл   параметров уравнения Михаэлиса-Ментен. Методы определения Vm и Kм
  15.  Определение констант диссоциации фермент-субстратных комплексов. Обратимые реакции. Смещение химического равновесия.
  16.  Влияние температуры на скорость реакций. Правило Вант-Гоффа.
  17.  Кинетика ферментативных реакций на поверхности. Иммобилизованные ферменты
  18.  Односубстратные двусторонние реакции с одним продуктом
  19.  Измерение скоростей бимолекулярных (бисубстратных, двухсубстратных) реакций в реальном времени.
  20.  Строение активных центров ферментов. Классификация.
  21.  Односубстратные двусторонние реакции с одним продуктом
  22.  Измерение скоростей бимолекулярных (бисубстратных) реакций в реальном времени.

       План самостоятельной работы курсанта на практическом занятии:

  1.  Изучение правил забора объектов для рассматриваемых методов лабораторных исследований.
  2.  Разбор методов лабораторной диагностики биологических материалов.
  3.  Умение интерпретировать изучаемые параметры и показатели, полученные в результате проведённых лабораторных методов исследования.

        Вопросы для самоконтроля:

  1.  Методы колориметрического, нефелометрического и турбодиметрического анализа, их диагностическое значение.
  2.  Методы экспресс-анализа, иммунохроматография. Диагностическая значимость.
  3.  Методы иммуноферментного и полярофлюороиммунного анализа: техника проведения и оценка полученных результатов.
  4.  Методы хроматографического анализа: методики выполнения и интерпретация полученных данных.
  5.  Методы доказательной химии. Требования к данным видам исследований.

Литература, рекомендуемая для самоподготовки          

             Основная (согласно программе):

  1.  Василенко В.Х., Гребенев АЛ. Пропедевтика внутренних болезней. М.,  Медицина, 1982. Стр.119-126, 282-287, 313-317, 340-344.
  2.  Гребенев АЛ. Пропедевтика внутренних болезней. М., Медицина, 1995. Стр.303-311, 338-342, 378-381, 566-569.
  3.  Козловская Л.В., Николаев АЮ. Учебное пособие по клиническим  лабораторным методам исследования. М., Медицина, 1984.Стр. 207 -285.
  4.  Практикум по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред.  проф. Н.П.Шилкиной. Ярославль, 1987. Стр. 36-71.
  5.  Практикум по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. проф. Н.П.Шилкиной. Ярославль, 1999. Стр. 36-62.

                               

                 

                  Дополнительная литература:

  1.  Миронова И.И., Романова Л.А., Долгов В.В.
    1.  «Общеклинические исследования» М., 2005, стр. 87 – 118.
  2.  Долгов В.В., Шевченко О.П. «Лабораторная диагностика»
    1.  М., 2005, стр. 121- 123.
  3.  Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. Биохимия для врача. Екатеринбург: Уральский рабочий, 1994.
  4.  Титов В.Н. «Лабораторные и инструментальные исследования в диагностике», М., 2004, стр. 490 – 514.
  5.  Кнорре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 2000.
  6.  Зупанец И.А., Мисюрева С.В., Попов С.Б. «Клинические лабораторные методы исследования» Харьков, 2000, стр. 81-93.

                        

    План - хронокарта занятия

N

Этапы

Занятия

Время

Действия

преподавателя

Действия учащихся

Оснащение

Формы и

методы

работы

1

Организа-

ционный

60

мин.

Определение темы.

Внимательно слушать преподавателя.

Компьютерная

версия презентации

занятия.

Вводная форма (установочная)

2

Контроль

исходного

уровня

знаний.

20

мин.

Фронтальный опрос.

Давать ответы

на поставленные вопросы.

Компьютерная

версия презентации занятия.

Активный

метод

3

Педагоги-

ческий

показ.

90

мин.

Проведение

исследований

на аналитическом оборудовании.

Наблюдать за действиями преподавателя, запоминать, при необходимости записывать, задавать вопросы.

Автоматические анализаторы, реактивы

Объясни-тельно – иллюстра-тивный метод

4

Само-

стоятельная

работа.

120

мин.

Под контролем

преподавателя

выполнение основных

практических методик

на аналитическом оборудовании.

Выполнять основные

практические методики

на аналитическом оборудовании.

Автоматические анализаторы, реактивы

Репродуктив-ный метод.

5

Контроль

конечного

уровня

знаний.

30

мин.

Раздача тестов и контроль

за выполнением задания.

Индивидуальное

решение тестовых заданий.

Тесты.

Репродуктив-ный метод.

6

Взаимо-

проверка

20

мин.

Наблюдение и контроль

за рассуждениями

студентов.

Студенты проверяют друг друга, обсуждают, дополняют.

Автоматические анализаторы, реактивы

Активный

метод.

7

Подведение

итогов и

задание

на дом.

10

мин.

Сообщается оценка деятельности каждого студента. Даётся

домашнее задание.

Сделать выводы.

Записать задание на дом.




1. Методы поиска и анализа информации
2.  Идеологическое и политическое многообразие Принцип идеологического и политического многообразия ст
3. Тема 212 Способи регулювання роботи вентиляторів Регулювання роботи вентиляторів ~ змінення проду
4. УПРАВЛЕНИЕ ПЕРСОНАЛОМ ОРГАНИЗАЦИИ подготовку студентов осуществляет кафедра менеджмента маркет
5. а в его смеси с нгептаном при котором эта смесь эквивалентна по детонационной стойкости исследуемому топли
6. Понятие и источники дипломатического права
7. первых поскольку теория систем происходит от точных наук и поскольку она по крайней мере в глазах своих при
8. Тема 8- Логистика складирования
9. ОМСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Факультет Техфак
10. то конспекты или учебники прижав их к груди в джинсовой куртке