Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
Волгоградский государственный медицинский университет
Министерства Здравоохранения Российской Федерации
Кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии с курсом клинической микробиологии
Реферат по теме:
«Клебсиеллы. Их роль в патологии. Микробиологическая диагностика. Проблема специфической профилактики.»
Выполнила: студентка 3 курса
медико-биологического факультета 4 группы
Севостьянова А. М.
Проверила:
Михайлова Л.В.,
Доцент кафедры
Волгоград 2013
Глава 1. Клебсиеллы.Общая характеристика 3
Глава 2. Классификация клебсиелл 7
Глава 3. Клебсиеллёзы 10
Глава 4. Лабораторная диагностика, лечение 11
Список литературы 17
Клебсиеллы. Общая Характеристика.
(Klebsiella) - род палочковидных капсульных неподвижных аспорогенных грамотрицательных хемоорганотрофных факультативно-анаэробных бактерий из сем Enterobacteriaceae .Г+Ц52 -56 мол.%. У большинства штаммов есть постоянная выраженная капсула. В окрашенных по Граму мазках К. имеют вид прямых палочек размерами 0,5 - 0,8x1-5 мкм с закругленными концами. В тушевых препаратах форма бактерий эллипсоидная, размеры 2 - 5x5 - 8 мкм. Все виды хорошо растут на простых мясных средах в широком диапазоне температур. Оптимальная температура 35 -36°С, рН 7,0- 7,4. На плотных средах К. образуют гладкие, крупные, выпуклой формы, слизистой консистенции колонии. В падающем свете они влажные, блестящие, серовато-белые, в проходящем - гомогенно-мутные с перламутровым оттенком. В бульоне дают диффузный рост. В полужидком агаре растут на поверхности среды и в верхней части укола. Протеолитическая активность К. выражена в слабой степени - сероводород, индол не образуют. Желатин и сыворотку не разжижают. Гликолитическая активность выражена в разной степени. Тесты на ферментацию дульцита, мочевины, утилизацию цитрата, малоната, декарбоксилазы, МР и ФП вариабельны. Растут на средах с цианистыми солями. По специфичности О-Аг разделяют на 5 серогрупп, К-Аг - на 72 серовара. Для патологии человека имеют значение: К. огаепае -озены, К. rhinoscleromatis - склеромы, К. pneumoniae - широко распространены в природе, разнородны по своим свойствам и функциям. Размеры широко колеблются. Капсула и слизистый рост выражены не у всех штаммов. Многие штаммы имеют фимбрии. Используют цитраты в качестве единственного источника углерода. Ферментируют большое число углеводов с выделением газа, в т. ч. лактозу, глюкозу, сахарозу, адонит, инозит, образуют лизиндекарбоксилазу, гидролизуют мочевину; реакции с МР и ФП, ферментация дульцита вариабельны. Сбраживают сахара с образованием 2,3–бутандиола, этанола и органических кислот. Антигенная формула - 01, 03, 04, 05:К1-КЗ, К7-К72. Некоторые штаммы, особенно респираторного происхождения, высоковирулентны для мышей и КЭ. Обитают в воде, почве, в пищевых продуктах, в кишечнике и дыхательных путях человека, др. млекопитающих, птиц. Условно-патогенны для человека. В 9-м изд. Определителя Берги клебсиеллы озены, склеромы и пневмонии в ранге подвидов объединены в один вид - К.pneumoniae. Кроме того, выделено еще три новых вида - К.oxytoca, К.planticola, К.terrigena.
Клебсиеллы - грамотрицательные эллипсоидные бактерии, имеют форму толстых коротких палочек с закругленными концами, размером 0,3-0,6 х 1,5-6,0 мкм, капсульная форма имеет размеры 3-5 х 5-8 мкм. Размеры подвержены сильным колебаниям, особенно у клебсиелл пневмонии. Жгутики отсутствуют, бактерии спор не образуют, у части штаммов имеются реснички. Обычно видна толстая полисахаридная капсула; бескапсульные формы могут быть получены при воздействии на бактерии низкой температуры, сыворотки, желчи, фагов, антибиотиков и при мутациях. Расположены попарно или поодиночке.
Клебсиеллы хорошо растут на простых питательных средах, факультативные анаэробы, хемоорганотрофы. Оптимальная температура роста 35-37 °С, рН 7,2- 7,4, но могут расти при 12-41 °С. Способны расти на среде Симмонса, т. е. использовать цитрат натрия в качестве единственного источника углерода (кроме К. rhinoscleromatis). На плотных питательных средах образуют мутные слизистые колонии, причем в молодых 2-4-часовых колониях бактерии озены располагаются рассеянно-концентрическими рядами, риносклеромы - концентрическими, пневмонии - петлеобразно, что легко определяется при микроскопии колонии с малым увеличением и может быть использовано для их дифференциации. При росте в МПБ клебсиеллы вызывают равномерное помутнение, иногда со слизистой пленкой на поверхности; на полужидких средах рост более обилен в верхней части среды. Содержание в ДНК Г + Ц - 52-56 мол %.
Клебсиеллы ферментируют углеводы с образованием кислоты или кислоты и газа, восстанавливают нитраты в нитриты. Желатин не разжижают, индола и сероводорода не образуют. Обладают уреазной активностью, не всегда створаживают молоко. Менее всего биохимическая активность выражена у возбудителя риносклеромы.
У клебсиелл имеются О- и К-антигены. По О-антигену клебсиеллы подразделяют на 11 серотипов, а по капсульному К-антигену - на 82. Серологическое типирование клебсиелл основано на определении К-антигенов. Группоспецифический антиген обнаружен почти у всех штаммов клебсиелл. Некоторые К-антигены родственны К-антигенам стрептококков, эшерихий и сальмонелл. Обнаружены О-антигены, родственные О-антигенам Е. coli.
Основными факторами патогенности клебсиелл являются К-антиген, подавляющий фагоцитоз, и эндотоксин. Помимо них, К. pneumoniae может продуцировать термолабильный энтеротоксин - белок, по механизму действия подобный токсину энтеротоксигенной кишечной палочки. Клебсиеллы обладают выраженными адгезивными свойствами.
Патогенность и патогенез.
Вирулентность клебсиелл пневмонии обусловлена их адгезией, связанной с капсульным полисахаридом, пилями и белком наружной мембраны, последующим размножением и колонизацией энтероцитов. Капсула также защищает бактерии от действия фагоцитирующих клеток. При разрушении бактериальных клеток освобождается эндотоксин (ЛПС). Кроме того, клебсиеллы пневмонии секретируют термостабильный энтеротоксин, усиливающий выпот жидкости в просвет тонкой кишки, что играет существенную роль в патогенезе ОКЗ, и мембранотоксин с гемолитической активностью. Клебсиеллы являются возбудителями пневмонии, ОКЗ, риносклеромы, озены. Они также могут вызывать поражения мочеполовых органов, мозговых оболочек взрослых и детей, токсико-сеп-тические состояния и ОКЗ у новорожденных. Клебсиеллы могут вызывать внутрибольничные инфекции. Для пневмонии, вызванной К. pneumoniae, характерны образование множественных очагов в дольках легкого с последующим их слиянием и ослизнением пораженной ткани, содержащей большое количество клебсиелл. Возможно образование гнойных очагов в других органах и развитие сепсиса. При склероме, вызванной К. rhinoscleromatis, поражается слизистая оболочка носа (риносклерома), носоглотки, трахеи, бронхов. В тканях образуются гранулемы с последующими склеротическими изменениями. При озене, вызванной К. ozenae, поражается слизистая оболочка носа и придаточных полостей с последующей атрофией носовых раковин и выделением зловонного секрета.
Иммунитет.
Клебсиеллы вызывают гуморальный и клеточный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают протективными свойствами. Развитие ГЗТ связано с внутриклеточной локализацией клебсиелл.
Экология и эпидемиология.
Клебсиеллез является антропонозной инфекцией. Источник инфекции - больные и носители. Заражение происходит через респираторные пути. Клебсиеллы входят в состав кишечного биоценоза, обнаруживаются на коже и слизистых оболочках. Они устойчивы к факторам окружающей среды и сравнительно долго сохраняются в почве, воде, в помещениях. В молочных продуктах выживают и размножаются при хранении их в холодильниках. При нагревании погибают уже при температуре 65°С, чувствительны к растворам обычных дезинфектантов.
Классификация клебсиелл.
По современной классификации род klebsiella входит в семейство энтеробактерии (лат.enterobacteriaceae), порядок энтеробактерии (лат. enterobacteriales), класс гамма-протеобактерии (лат.γ proteobacteria), тип протеобактерии (лат. proteobacteria), царство Бактерии. Клебсиеллы относятся к так называемым колиформным бактериям.
В состав рода клебсиеллы входят следующие виды:
Клебсиелла пневмонии.
Клебсиелла пневмонии (лат. klebsiella pneumoniae), устаревшее название палочка Фридлендера, — наиболее важный, с точки зрения медицины, вид клебсиелл. Клебсиелла пневмонии, являясь условно-патогенной бактерией, в норме присутствует в толстой кишке человека. В то же время, klebsiella pneumoniae, а также klebsiella oxytoca вызывают поражения мочевыводящих путей, мозговых оболочек, суставов, глаз, а также бактериемии и септикопиемии. В меньшей степени встречаются, несмотря на название вида, пневмонии, вызванные klebsiella pneumoniae.
Представители рода клебсиелл являются причиной небольшого числа внебольничных пневмоний — единицы процентов от всех случаев, однако летальность таких пневмоний, вызванных клебсиеллой, очень велика — 35,7 %.
Клебсиелла пневмонии может встречаться во влагалищной микрофлоре, в частности, после приема антибиотиков, результатом которого было уничтожение нормальной микрофлоры влагалища. Клебсиелла пневмонии в мочеполовых путях часто является следствием внутрибольничных инфекций.
Клебсиелла в гастроэнтерологии.
Клебсиелла (в основном, клебсиелла пневмонии) является представителем нормальной микрофлоры кишечника человека. В то же время, клебсиелла может вызывать ряд гастроэнтерологических заболеваний. Клебсиелла может стать причиной острого гастрита — острого воспаление слизистой оболочки желудка, возникающего по причине воздействия инфекционного фактора непосредственно на слизистую оболочку желудка. Обычно это связано с употреблением недоброкачественной пищи, неправильным хранением смесей и продуктов, несоблюдением гигиенических правил.
Клебсиелла может начитать интенсивно развиваться, вызывая патологический процесс в желудочно-кишечном тракте, в частности, после терапии антибактериальными препаратами, побочным действием которых является подавление основных представителей нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта (бифидобактерий и других), тормозящих чрезмерный рост клебсиелл .
У большинства больных ксибеллез протекает в форме кишечной инфекции и характеризуется острым началом, тошнотой, рвотой, болями в животе, поносом, повышением температуры и общей слабостью. Продолжительность болезни 1–5 дней. Источниками возбудителя инфекции являются больной человек и бактерионоситель. Наиболее частые пути передачи — пищевой, воздушно-капельный и контактно-бытовой. Передача происходит также через загрязненные пищевые продукты, особенно часто через мясные и молочные. Клебсиеллез является одной из распространенных внутрибольничных инфекций. Клебсиелла риносклеромы
Клебсиелла риносклеромы (лат. klebsiella rhinoscleromatis), называемая также палочкой риносклеромы или палочкой Фриша-Волковича, является возбудителем хронического инфекционного заболевания — склеромы, гранулематозного поражения слизистой оболочки носа (риносклерома) и верхних дыхательных путей. Клебсиеллы риносклеромы вызывают хронические воспалительные процессы слизистых оболочек верхних дыхательных путей, бронхов с образованием инфильтратов, которые затем рубцуются. Клебсиеллы риносклеромы обнаруживаются в гранулемах, где они локализуются внутри и вне клеток.
Клебсиелла озены.
Клебсиелла озены (лат. klebsiella ozaenae), называемая в прошлом палочкой озены или палочкой Абеля-Левенберга, выявляется у 80 % больных озеной — зловонным насморком, характеризующимся атрофическим процессом слизистой оболочки и костных стенок полости носа, сопровождающегося образованием секрета, засыхающего в зловонные корки, плотным слоем покрывающие слизистую оболочку. Клебсиеллы озены вызывают хронические заболевания дыхательной системы, поражающиеглотку, гортань, трахеи. Болезнь сопровождается выделением зловонного вязкого секрета.
Клебсиеллы — возбудители заболеваний мочеполовых органов.
Клебсиеллы могут вызывать различные заболевания мочеполовых органов человека, в частности, острый и хронический простатит, цистит, пиелонефрит.
Клебсиелёзы - заболевания, которые вызывают бактерии рода Klebsiella. Они могут быть острыми и хроническими, острые вызывают Klebsiella pneumoniae, Koxytoca, Kplanticola, Kterrigena, хронические - Kozaenae и Krhinoscleromatis. Чаще всего воспалительные и септические процессы вызывает Крпеитопиае - пневмонии, бронхиты, септицемии, отиты, перитониты, желчных и мочевыводящих путей, пищевые токсикоинфекции, госпитальные раневые и ожоговые инфекции подобное. Значительно реже встречаются такие хронические болезни, как зловонный насморк (озена) и риносклерома. В последнее время резистентные к антибиотикам штаммы клебсиелл могут стать возбудителями внутрибольничных инфекций. Основным методом лабораторной диагностики клебсиельозив является бактериологическое исследование. Серологический метод применяют редко. Проводят также микроскопию мазков. Материалом для микробиологического анализа может быть мокроты, слизи из рото-и носоглотки, промывные воды и рвотные массы, гной, кровь, ликвор, моча, желчь, стул, секционный материал, инфильтраты слизистой при риносклероме, корочки при озене, смывы с предметов и т.п..
Основным методом диагностики является бактериологический. Материал для посева может быть различным: гной, кровь, ликвор, испражнения, смывы с предметов и др. Его сеют на дифференциально-диагностическую среду К-2 (с мочевиной, рафинозой, бромтимоловым синим), через сутки вырастают крупные блестящие слизистые колонии с окраской от желтой или зелено-желтой до голубой. Далее у бактерий определяют подвижность посевом в среду Пешкова и наличие орнитиндекарбоксилазы. Эти признаки не свойственны клебсиеллам. Окончательная идентификация заключается в изучении биохимических свойств и определении серогруппы с помощью реакции агглютинации живой культуры с К-сыворотками. Выделенная чистая культура проверяется на чувствительность к антибиотикам.
Иногда для диагностики клебсиеллеза может быть использована реакция агглютинации или РСК со стандартным О-клебсиеллезным антигеном или с аутоштаммом. Диагностическое значение имеет четырехкратное нарастание титров антител.
Бактериоскопия.
В мазках, окрашенных по Граму, капсульные формы клебсиелл имеют вид грамотрицательных, эллипсовидные, толстых палочек длиной 5-8 мкм и шириной 3-5 мкм. Безкапсульни формы имеют меньшие размеры (0,3-0,6 х 1-3 мкм), одиночное, парное или цепную расположения. В гистологических срезах с склеромних гранулем видно много гигантских клеток Микулича, наполненных желатиноподибною массой, в которой находятся клебсиеллы, окруженные капсулой.
Бактериологическое исследование.
Бактериологическое исследование проводят по такой же схеме, что и при подобных заболеваниях, вызванных другими видами энтеробактерий. Посев материала производят на селективное среду К-2 (МПА с мочевиной, рафиноза, бромтимоловый синим). Через сутки на нем вырастают крупные, выпуклые, блестящие, слизистые колонии желтого, зеленовато-желтого или голубого цвета. На средах Эндо и Плоскирева большинство клебсиелл образуют колонии с металлическим блеском, характерные для лактозоположительных бактерий. На простом или глицериновом агаре через 2-4 ч выращивания основные виды клебсиелл образуют характерные колонии с различной внутренней структурой, выявляемые при агар-микроскопии таких молодых колоний. В К pneumoniae они петлеобразную устройство, у К. rhinoskleromatis - концентрическую, а в К ozenae - рассеянно концентрическую. Это позволяет дифференцировать названные виды клебсиелл между собой. Пожилые колонии микроскопируют и отсеивают на косой агар для выделения чистых культур. Идентификацию последних проводят посевом в среды пестрого ряда Гисса, желчный бульон, определяют подвижность, наличие уреазы. Клебсиеллы неподвижные, большинство штаммов разлагают глюкозу, лактозу, сахарозу, мочевину, дают положительную реакцию Фогес - Проскауэра, не выделяют сероводород. И все же основной и надежной является серологическая идентификация клебсиелл. Для ее проведения используют две реакции: капсульную агглютинацию на стекле с живой культурой и О-агглютинацию. При постановке первой из них на предметное стекло наносят диагностические протиклебсиельозни капсульные сыворотки, а также каплю 0,9% раствора хлорида натрия (контроль). У капель сывороток и изотонического раствора растирают полную петлю исследуемой культуры, смешивают их, добиваясь тщательной гомогенизации. При положительном результате образуется аглютинат в виде грубых нитей или тяжей. В контрольной капли агглютинации не должно быть. Для О-аилютинации выделены культуры стерилизуют в автоклаве в течение 150 мин при 2-х атм. При этом разрушается капсула, культура не взаимодействует с К-сыворотками и аглютинуеться О-сыворотками. Простерилизованную культуру нужно дважды отмыть в физиологическом растворе путем центрифугирования и с осадком поставить реакцию агглютинации на стекле. Из дополнительных методов идентификации клебсиелл используют фаготипирования. Фаги капсульных бактерий имеют четкую видовую специфичность. Техника проведения реакции агглютинации и фаготипирования подробно изложена в инструкции к соответствующим препаратам. Определяют также чувствительность выделенных культур к антибиотикам с помощью дискодифузийного метода.
Серологические исследования.
Серологические исследования проводят путем постановки развернутой реакции агглютинации с сывороткой крови больных и капсульный и безкапсульним антигенами, а также связывания комплемента (титр 1:40 и выше) и более чувствительной и специфической реакции непрямой гемагглютинации с эритроцитарным клебсиельозним диагностикумом. Для постановки последней сыворотку больных разводят в лунках полистироловых планшет от 1:20 до 1:320 в объеме 0,25 мл и добавляют такой же объем 1% взвеси сенсибилизированных эритроцитов. Учет результатов проводят через 2 ч экспозиции планшет при 37 ° С. Диагностический титр 1:160 и выше. Надежнее результаты получают при постановке реакции в динамике, когда обнаруживают 4-кратное нарастание титра антител.
Klebsiella pneumoniae чаще всего вызывают заболевание, протекающее по типу кишечной инфекции и характеризующееся острым началом, тошнотой, рвотой, болями в животе, диареей, лихорадкой и общей слабостью. Продолжительность болезни - 1-5 дней. Клебсиеллы могут вызывать поражение органов дыхания, суставов, мозговых оболочек, конъюнктивы, мочеполовых органов, а также сепсис и гнойные послеоперационные осложнения. Наибольшей тяжестью отличается генерализованное септико-пиемическое течение болезни, приводящее нередко к летальному исходу.
Klebsiella ozaenae поражает слизистую оболочку носа и его придаточных пазух, вызывает их атрофию, воспаление сопровождается выделением вязкого зловонного секрета. К. rhinoscleromatis поражает не только слизистую оболочку носа, но и трахею, бронхи, глотку, гортань, при этом в пораженной ткани развиваются специфические гранулемы с последующим склерозированием и развитием хрящевидных инфильтратов. Течение заболевания хроническое, смерть может наступить на фоне обтурации трахеи или гортани.
Постинфекционный иммунитет непрочный, носит в основном клеточный характер. При хроническом заболевании иногда развиваются признаки ГЧЗ.
Клебсиеллез является чаще всего внутрибольничной инфекцией. Источником служит больной человек и бактерионоситель. Возможно как экзогенное, так и эндогенное заражение. Наиболее частые пути передачи - пищевой, воздушно-капельный и контактно-бытовой. Факторами передачи чаще всего является пищевые продукты (особенно мясные и молочные), вода, воздух. В последние годы частота клебсиеллезов возросла, одна из причин этого - повышение патогенности возбудителя в связи со снижением резистентности организма человека. Этому способствует также широкое использование антибиотиков, изменяющих нормальное соотношение микроорганизмов в естественном биоценозе, иммунодепрессантов и т. д. Следует отметить высокую степень резистентности клебсиелл к различным антибиотикам.
Клебсиеллы чувствительны к действию различных дезинфицирующих веществ, при температуре 65 °С погибают в течение 1 ч. Довольно устойчивы во внешней среде: слизистая капсула предохраняет возбудителя от высыхания, поэтому клебсиеллы могут сохраняться в почве, пыли палат, на оборудовании, мебели при комнатной температуре неделями и даже месяцами.
Лечение клебсиеллезных инфекций.
Для лечения клебсиеллезов применяются антибиотики: ампициллин, аминогликозиды, тетрациклины, левомицетин, рифаксимин, нифуроксазид, левофлоксацин и другие, однако в последнее время широко распространились штаммы клебсиелл, резистентных к антибиотикам. Также используются лекарственные препараты, действующим веществом которого являются бактериофаги: Бактериофаг клебсиелл пневмонии очищенный жидкий и Бактериофаг клебсиеллезный поливалентный жидкий очищенный, Пиобактериофаг (комбинированный препарат; торговые наименования лекарств: Пиобактериофаг комплексный жидкий, Пиобактериофаг поливалентный, Пиополифаг, Секстафаг). Бактериофаги действуют избирательно, только на клебсиелл (или, для комбинированных бактериофагов, на комплекс бактерий), не имеют противопоказаний, но они значительно менее эффективны, чем антибиотики.
При избыточном росте клебсиелл пневмонии Приказом Минздрава РФ № 231 от 9 июня 2003 г. Об утверждении отраслевого стандарта «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» рекомендованы бактериофаги «Бактериофаг клебсиелл пневмонии», «Пиобактериофаг поливалентный очищенный жидкий» и «Бактериофаг клебсиелл поливалентный». Бактериофаг принимают 3 раза в сутки натощак за 1 час до еды. Разовая доза при приеме внутрь:
Вместо одного приема внутрь клизма 1 раз в день:
Специфическая профилактика клебсиеллеза не разработана. Общая профилактика сводится к строгому соблюдению санитарно-гигиенических норм при хранении пищевых продуктов, строгому соблюдению асептики и антисептики в лечебных учреждениях, а также соблюдению правил личной гигиены.
.
Список литературы.