У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.net

реферат дисертації на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук Київ ~ Дисер.html

Работа добавлена на сайт samzan.net:

Поможем написать учебную работу

Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.

Предоплата всего

от 25%

Подписываем

договор

Выберите тип работы:

Скидка 25% при заказе до 29.12.2024

ПЕРЕЛІК РОБІТ, ОПУБЛІКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

  1.  Погрібний П.В. Ендогенні пептидні антибіотики як фактори імунітету тварин // Біополімери і клітина. –. –Т.14, №6. –С.512-518.
  2.  Phylchenkov A., Slukvin I., Pogrebnoy P.V., Kudryavets Yu., Didkovskaya L., Kulik G., Chernishov V., Bykorez A. Application of flow cytometry with anti-EGF-receptor antibody and I-EGF binding assay for detection of EGF-receptors in certain human tumor cell lines// Эксперим. онкология.-1992.-Т.14, №1.- С.45-49. (Автором проведено дослідження in vitro з використанням анти-ЕФРр антитіл  і  І-ЕФР, підготовлено статтю до друку).
  3.  Кулик Г.А., Кононенко Л.И., Погребной П.В., Быкорез А.И. Влияние 12-0-тетрадеканоилфорбол-13-ацетата и аденозин-3’-фосфата на димеризацию рецепторов эпидермального фактора роста и ассоциацию димеров с цитоскелетом клеток линии А431 // Эксперим. онкология. –. –Т.14, № 6. –С.27-32. (Автором проведено дослідження in vitro та ковалентне мічення ЕФРр, сформульовано висновки роботи).
  4.  Погребной П.В., Гарманчук Л.В., Серов С.М., Кленчин В.А., Лукьянов А.В., Тарнавский Д., Маркеева Н.В., Быкорез А.И. Экспрессия гена ТФР альфа, перенесенного рекомбинантным ретровирусным вектором в клетки А431 // Молекулярная биология. –. –Т.27, №4. –С.833-838. (Автором проведено трансфекцію клітин А431 ретровірусним  вектором  та  проаналізовано  отримані клони, підготовлено статтю до друку).
  5.  Погребной П.В., Гарманчук Л.В., Лукьянов А.В., Тарнавский Д., Быкорез А.И. Трансформирующий фактор роста типа альфа стимулирует экспрессию белка-аналога рецептора эпидермального фактора роста // Эксперим. онкология. –. –Т.15, №5. –С.30-32. (Автором сформульовано задачі дослідження, проведено дослідження in vitro, підготовлено статтю до друку).
  6.  Погребной П.В., Гарманчук Л.В., Лукьянов А.В., Маркеева Н.В., Белоус Н.И., Быкорез А.И. Уменьшение экспрессии рецептора эпидермального фактора роста в клетках сублиний А431/1522-4 со встроенным геном трансформирующего фактора роста типа альфа// Эксперим. онкология. –. –Т.16, №1. –С.37-40. (Автором сформульовано задачі дослідження, проведено дослідження in vitro, проаналізовано результати, підготовлено статтю до друку).
  7.  Kulik G.A., Kartel A.A., Kononenko L.I., Tarnavski D.V., Pogrebnoy P.V., Bykorez A.I. Transforming growth factor-α and epidermal growth factor stimulate oligomerization and autophosphorylation of epidermal growth factor receptor in A431 living cells// Эксперим. онкология. –. –Т.16, №1. –С.33-36. (Автором проведено дослідження in vitro, сформульовано задачі дослідження, проведено аналіз даних літератури, підготовлено статтю до друку).
  8.  Маркеева Н.В., Гарманчук Л.В., Погребной П.В. Аутофосфорилирование рецептора эпидермального фактора роста в клетках линии А431 и сублинии А431/1522-4 при действии ЭФР/ТФР-α// Эксперим. онкология. –. –Т.16, №4-6. –С.453-457. (Автором проведено дослідження in vitro з використанням ізотопу фосфору, підготовлено статтю до друку).
  9.  Глушков А.Н., Аносова Т.П., Аносов М.П., Гарманчук Л.В., Погребной П.В. Выявление антител против рецептора эпидермального фактора роста в сыворотке крови онкологических больных // Эксперим. онкология. –. –Т.18, №1. –С.81-83. (Автором проведено аналіз сироваток крові хворих, підготовлено статтю до друку).
  10.  Соловьян В.Т., Андреев И.О., Колотова Е.Ю., Погребной П.В., Тарнавский Д.В. Упорядоченная деградация ядерной ДНК как специфическая геномная реакция, сопровождающая апоптоз, ответ на стресс и дифференцировку // Биополимеры и клетка. –. –Т.12,№ 3. –С.67-76. (Автором проведено дослідження in vitro та молекулярно-біологічні дослідження ДНК клітин, підготовлено статтю до друку).
  11.  Погребной П.В., Гарманчук Л.В., Маркеева Н.В., Протас А.Ф., Быкорез А.И. Особенности влияния мелиттина и его триптолитического фрагмента на активность протеинкиназы С // Биополимеры и клетка. –. –Т.12, № 3. –С.41-46. (Автором проведено дослідження активності протеїнкінази С та аналіз отриманих триптолітичних фрагментів, підготовлено статтю до друку).
  12.  Sololov’yan V.T., Andreev I.O., Kolotova T.Yu., Pogribniy P.V., Tarnavsky D.T., Kunach V.A. The cleavage of nuclear DNA into high molecular weight DNA fragments occurs not only during apoptosis but also  accompanies  changes in  functional activity of the nonapoptotic cells // Exp.Cell Res. –. –V.235. –С.130-137.(Автором проведено дослідження in vitro та молекулярно-біологічні дослідження ДНК клітин, підготовлено статтю до друку).
  13.  Погребной П.В., Гарманчук Л.В., Маркеева Н.В., Хобта А.И., Серов С.М., Быкорез А.И. Гиперэкспрессия трансформирующего фактора роста альфа клетками M-HeLa/1522 // Эксперим. онкология. –. –Т.19, №1. –С.50-55. (Автором проведено трансфекцію клітин M-HeLa ретровірусним  вектором  та  проаналізовано  отримані клони, підготовлено статтю до друку).
  14.  Погребной П.В., Хобта А.И., Гарманчук Л.В., Маркеева Н.В. Ингибирование  киназной активности рецептора ЭФР гидрофобным пептидом, секретируемым клетками А431/1522 // Эксперим. онкология. –. –Т.19, № 4. –С.296-299. (Автором проведено дослідження in vitro кіназної активності ЕФРр, підготовлено статтю до друку).
  15.  Гарманчук Л.В., Хобта А.И., Маркеева Н.В., Погребной П.В., Быкорез А.И. Изменение соотношений молекулярных форм трансформирующего фактора роста альфа и мРНК рецептора ЭФР при гепатоканцерогенезе, индуцированном N-нитрозодиэтиламином у крыс // Эксперим. онкология. –. –Т.20, №1. –С.29-32. (Автором проведено біохімічне дослідження молекулярних форм ЕФРр, проаналізовано результати, підготовлено статтю до друку).
  16.  Pogrebnoy P.V., Hobta A.I., Soldatkina M.A., Garmanchouk L.V., Markeeva N.V., Eremenko T. A protein kinase inhibitor from A431 subline overexpressing TGFa possesses antimicrobial activity // New Microbiologica. –. –V.21, №3. –Р.269-273. (Автором проведено дослідження in vitro та мікробіологічні дослідження, підготовлено статтю до друку).
  17.  Hobta A.I., Pogrebnoy P.V. Mammalian peptide antibiotics as regulatory and anticancer agents // Exp. Oncol. –. –V.20, № 3-4. –P.170-179. (Автором проведено збір та аналіз даних літератури, підготовлено огляд до друку).
  18.  Погребной П.В., Кухаренко А.П., Тихонкова И.А., Пальчевский С.С., Савинская Л.А., Погребная А.П., Валевка Т.И., Маркеева Н.В., Солдаткина М.А., Мацука Г.Х., Гут И.Т., Филоненко В.В. Получение и характеристика моноклональних антител против р70S6-киназы α// Эксперим. онкология. –. –Т.21, №3-4. –с.232-238. (Автором проведено вдосконалення методики отримання гібридомних клітин, отримано анти-р70S6К-моноклональні антитіла, підготовлено статтю до друку).
  19.  Лісовський І.Л., Хобта А.І., Солдаткіна М.А., Литвин Д.І., Маркеєва Н.В., Сидорик Л.Л., Погрібний П.В. Експресія гена дефенсину-6 (HD-6) у лініях пухлинних клітин людини// Биополимеры и клетка.- 2000.- Т.16, №6.- С.525-529. (Автором проведено дослідження in vitro та молекулярно-біологічні дослідження, проаналізовано отримані дані).
  20.  Lisovskiy I.L., Soldatkina M.A., Lytvyn D.I., Markeeva N.V., Turchak O.V., Nespryad’ko S.V., Vinnitskaya A.B., Pogrebnoy P.V. Expression of defensins genes in А431 and М-Hela cell lines and in tumors of human vulval and cervical carcinoma  // Эксперим. онкология. –. –Т.23, №2. –С.119-122. (Автором проведено дослідження in vitro та молекулярно-біологічні дослідження, проаналізовано отримані дані, підготовлено статтю до друку).
  21.  Lisovskiy I.L., Soldatkina M.A., Lytvyn D.I., Markeeva N.V., Turchak O.V., Nespryad’ko S.V., Vinnitskaya A.B., Nosach L.N., Povnitsa O.U., Pogrebnoy P.V. Pattern of expression of beta-definsin-2 (hBD-2) and EGFR mRNA in malignant cells of human cervix and vulvae // Эксперим.  онкология. –. –Т.23, №4. –С. 248-252. (Автором проведено забір клінічних зразків та молекулярно-біологічні дослідження, проаналізовано отримані дані, підготовлено статтю до друку).
  22.  Hobta A.I., Lisovskiy I.L., Mikhalap S., Kolybo D., Romanyuk S., Soldatkina М., Markeeva N., Garmanchouk L., Sidorenko S., Pogrebnoy P.. Epidermoid Carcinoma derived Antimicrobial Peptide (ECAP) inhibits phosphorylation by protein Kinases in vitro// Cell Biochem Func. –. –№ 19. –Р. 291-298. (Автором проведено дослідження in vitro та імунопреципітацію кіназ, проаналізовано отримані дані, підготовлено статтю до друку).
  23.  Pogribnoy P.V., Lisovskiy I.L., Markeeva N.V., Shnitsar V.M., Zinchenko I.I., Soldatkina M.A.. Produсtion of recombinant of hBD-2 –human antimicrobial peptide expressed in cervical and vulval cancer // Эксперим. онкология. –. –Т.25, №1. –С. 36-39. (Автором проведено клонування та характеристика рекомбінантного пептиду, підготовлено статтю до друку).
  24.  Shnitsar V.M., Soldatkina M.A., Zinchenko I.I., Markeeva N.V., Rodnin N.V.,  Nespyadko S.V., Turchak O.V., Vinnitskaya A.B., Pogrebnoy P.V. Autoantibodies against human beta-defensin-2 in the blood serum of patients with vulval and cervical cancer // Эксперим. онкология. –. –Т.25, №3. –С. 155-157. (Автором проведено дослідження сироваток крові хворих методом ELISA, проаналізовано отримані дані).
  25.  Лісовський І.Л., Солдаткіна М.О., Литвин Д.І., Шніцар В.М., Маркеєва Н.В., Сєров С.М., Погрібний П.В. Гіперекспресія трансформуючого фактору росту  та механізми контролю росту клітин лінії А431/1522 // “Шляхи та перспективи розвитку експериментальної онкології в Україні”, під. ред. Чехуна В.Ф. // “ДІА”, Київ, 2001. –С. 70-77.
  26.  Tarnavski D.V., Garmanchuk L.V., Markeeva N.V., Pogrebnyi P.V.. Expression of TGF-α gene transferred into M-Hela, A431 human cells// Тези The Protein Society, First European Symposium, Switzerland, Davos. –. –Р. 104.
  27.  Hobta A.I., Garmanchouk L.V., Markeeva N.V., Pogrebnyi P.V. The novel antimicrobial peptide production in culture of human carcinoma A431 cells transfected with TGFa gene// Тези 8th European Congress on Biotechnology, Hungary, Budapest. - 1997. –Р. 96-97.
  28.  Hobta A., Lisovskiy I., Soldatkina M., Markeeva N., Pogribnoy P. Inhibition of the protein kinases by ECAP// Тези  26th Meeting of the Federation of European Biochemical Societies, France, Nice. –. –Р. 256.
  29.  Lisovsky I., Hobta A., Soldatkina M., Pogrebnoy P.V. Detection of expression of beta defensin gene in human tumor cells// Тези П съезда онкологов стран СНГ, Украина, Киев. - 2000. –С. 145.
  30.  Lisovsky I., Hobta A., Soldatkina M., Garmanchuk L., Lytvyn D., Pogribnyi P. Induction of cationic antimicrobial peptides in cultured cells exposed to ligands of EGF receptor// Тези 3th Parnas Conference “Mechanisms of cellular signal  transduction and communication”, Ukraine, Lviv. - 2000. –Р. 82.
  31.  Lisovskiy I., Hobta A., Soldatkina M., Garmanchouk L., Markeeva N., Lytvyn D., Pogribnyi P.  Detection of mRNA for beta-defensin 2 in human cell lines of epithelial origin// Тези 18th International Congress of Biochemistry and Molecular Biology, UK, Birmingham. - 2000. –Р. 162.
  32.  Lisovskiy I.L., Soldatkina M.A., Lytvyn D.I., Markeeva N.V., Nosach L.N., Povnitsa O.U., Pogrebnoy P.V. Expression pattern of defensin genes in cervical and vulval cancer cells// Тези Intern.Sympos.Intracellular Signalling in Plant and Animal Systems, Ukraine, Kyiv.-  2001. - Р.76.
  33.  Лісовський І.Л., Солдаткіна М.О., Погрібний П.В. Експресія генів дефенсинів в пухлинах генітальної системи людини//Тези Х з’їзд онкологів України, Україна, Крим. -  2001. - С. 45.
  34.  Pogrebnoy P.V., Markeeva N.V., Lisovskii I.L., Soldatkina M.A. Defensin and EGFR mRNA expression in transformed human cells// Тези 4th Parnas Conference “Molecular mechanisms of cell activation: biological signals and their target enzymes”, Poland, Wroclaw. - 2002. –Р. 70.
  35.  Soldatkina M.A., Markeeva N.V., Lisovskii I.L., Podrebnoy P.V. Defensin and EGFR expression in human cervical, vulval and gastric tumors// Тези 4th Parnas Conference “Molecular mechanisms of cell activation: biological target enzymes”. Poland, Wroclaw. - 2002. –Р. 55.

АНОТАЦІЯ

Погрібний П.В. Дефенсини та регуляція активності рецептору епідермального фактора росту в пухлинних клітинах людини. –Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальністю 14.01.07 –онкологія. Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є.Кавецького НАН України, Київ, 2004.

Дисертація присвячена встановленню ролі дефенсинів в аутокринній регуляції активності рецептора епідермального фактора росту (ЕФРр) в пухлинних клітинах людини.

Дослідження проведено на трансформованих клітинах людини ліній A431 та M-HeLa і субліній A431/1522 та M-HeLa 1522, що контрольовано гіперекспресують TФР-, та зразках хірургічно видалених пухлин вульви та шийки матки 25 та 15 пацієнтів відповідно.

В експериментах in vitro встановлено, що при дії EФР/TФР- на трансформовані епітеліальні клітини індукується експресія бета-дефенсину-2 людини (hBD-2) на рівні мРНК та білка. Виявлено, що hBD-2 має широкий спектр біологічної активності, а саме антимікробну, протигрибкову, цитотоксичну, здатний концентраційно-залежним шляхом впливати на проліферацію культивованих клітин та інгібувати тирозин- та серин/треонин протеїн-кіназну активність EФРр, Syk, Lyn та PKC. Отримані результати дали можливість запропонувати гіпотетичну схему, згідно якої hBD-2 може приймати участь в регуляції активності ЕФРр.

Отримано рекомбінантний hBD-2 та анти-hBD-2 моноклональні антитіла, які було використано при проведенні досліджень експресії hBD-2 в пухлинах шийки матки та вульви людини. При дослідженні хірургічно видалених зразків пухлин людини виявлено, що експресія hBD-2 на рівнях мРНК та білка жорстко асоційована з пухлинними клітинами, а також з гіперекспресією ЕФРр та наявністю інфекції папіломатозними вірусами.

Ключові слова: бета-дефенсини, рецептор епідермального фактору росту, експресія, рак вульви, рак шийки матки.

АННОТАЦИЯ

Погребной П.В. Дефенсины и регуляция активности рецептора эпидермального фактора роста в опухолевых клетках человека.

Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук по специальности 14.01.07 –онкология. Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е.Кавецкого НАН Украины, Киев, 2004.

Диссертация посвящена установлению роли дефенсинов в аутокринной регуляции активности рецептора эпидермального фактора роста (ЭФРр) в опухолевых клетках человека.

Исследование проведено на трансформированных клетках человека линий A431 и M-HeLa и сублиний A431/1522 и M-HeLa/1522, которые контролированно гиперэкспресируют TФР-, и образцах хирургически удаленных опухолей вульвы и шейки матки 25 та 15 пациентов соответственно.

Методами генной инженерии созданы экспериментальные клеточные сублинии А431/1522 и M-HeLa/1522, которые контролиролируемо продуцируют функционально активный рекомбинантный ТФР- в зрелой и мембранносвязанной недопроцессированной формах. Показано, що продолжительная аутокринная стимуляция клеток сублинии А431/1522 рекомбинантным ТФР- приводит к снижению уровня фосфорилирования рецептора ЭФР и пролиферации клеток и секреции пептида со свойствами ингибитора киназы рецептора ЭФР. Установлена идентичность ингибитора киназы ЭФРр с бета-дефенсином-2 человека (hBD-2).

В экспериментах in vitro установлено, что в трансформированных эпителиальных клетках, инкубированных с ЭФР или TФР-, экспрессия hBD-2 индуцируется на уровне мРНК и белка. Показано, что hBD-2 имеет широкий спектр биологической активности. Бета-дефенсин-2 человека проявляет антимикробную активность против ряда грам-положительных и грам-отрицательных бактерий в микромолярном диапазоне концентраций и фунгистатическое действие в концентрациях 100 - 200 мкМ. Установлено, что hBD-2 является ингибитором активности киназы ЭФРр и ряда клеточных протеинкиназ (PKCm, Syk і Lyn), причем действие пептида на киназы характеризуется низкой селективностью и проявляется в диапазоне концентраций 10-7-10-6 М. В концентрациях ниже 5 х 10-8 М hBD-2 стимулирует пролиферацию клеток in vitro, в концентрации 6-10-8 -5 х 10-7 М  - угнетает синтез ДНК, а в более высоких концентрациях проявляет цитотоксическое действие и гемолитическую активность.

На основе полученных результатов предложена гипотетическая схема участия hBD-2 в регуляции активности ЭФРр, согласно которой клетки реагируют на экзогенные стимулы (факторы роста, бактерии, ЛПС) активацией протеин-киназы ЭФРр, вследствие чего активируется соответствующий сигнальный каскад и стимулируется пролиферация клеток. В то же время митогенный стимул индуцирует экспрессию гена hBD-2, транскрипцию соответствующей мРНК, синтез пептида и его секрецию эпителиальными клетками. Экзогенный hBD-2 связывается с рецептором ЭФР и ингибирует его протеин-киназную активность, тем самым блокируя чрезмерный пролиферативный ответ клеток.

Клонированием кДНК гена бета-дефенсина-2 в бактериальной культуре в составе рекомбинантной плазмиды в виде химерного белка получен рекомбинантный hBD-2. После очистки рек-hBD-2 было установлено, что по функциональной активности он не отличается от нативного пептида. .

Рек-hBD-2 был использован в качестве антигена для получения анти-hBD-2-моноклональных антител, которые применены при проведении иммуногистохимических исследований экспрессии hBD-2 в опухолях шейки матки и вульвы человека. Исследование хирургически удаленных образцов опухолей человека продемонстрировало, что экспрессия hBD-2 на уровне мРНК и белка жестко ассоциирована с опухолевыми клетками, а также с гиперэкспрессией ЭФРр и наличием инфекции папилломатозными вирусами.

Ключевые слова: бета-дефенсины, рецептор эпидермального фактора роста, экспрессия, рак вульвы, рак шейки матки.

SUMMARY

Pogribniy P.V. Defensins and Regulation of the Activity of Epidermal Growth Factor Receptor in Human Tumor Cells.

Thesis for the degree of Doctor of Biological sciences by speciality 14.01.07 – oncology.- R.E.Kavetsky Institute of Experimental Pathology, Oncology and Radiobiology of NAS of Ukraine, Kyiv, 2004.

The dissertation was aimed on the estimation of the role of defensins in autocrine regulation of epidermal growth factor receptor (EGFr) activity in human tumor cells.

The research was performed on transformed human cell of A431 and M-HeLa lines, sublines A431/1522 and M-HeLa 1522, hyperexpressing TGF-, and samples of surgically resected human vulval and cervical tumors from 25 and 15 patients respectively.

It has been shown in vitro that in transformed epithelial cells the treatment with EGF/TGF- results in the induction of expression of human-beta-defesin-2 (hBD-2) both on mRNA and protein levels. hBD-2 was shown to possess broad range of biological activities, in particular, antimicrobial, antifungal, cytotoxic ones, able to affect proliferation rate of cultured epithelial cells in a concentration-dependent fashion and inhibit  protein kinase activity of EGFr, Syk, Lyn, and PKC. On the base of obtained results, the hypothetic scheme for hBD-2 involvement in regulation of EGFr activity is proposed.

The recombinant hBD-2 and anti-hBD-2 monoclonal antibodies were generated and used in the research of hBD-2 expression in human vulval and cervical tumors. The study of the samples of surgically resected human vulval and cervical tumors has demonstrated that expression of hBD-2 both on mRNA and protein levels is strongly associated with tumor phenotype, and also with hyperexpression of EGFr and infection with papillomatosis viruses.

Key Words: beta-defensins, epidermal growth factor receptor, expression, vulval tumor, cervical tumor.




1. 1 Постановка завдання
2. Доклад по защите дипломного проекта
3.  Теоретические аспекты изучения самооценки детей старшего дошкольного возраста
4. Тема 5 ИНТЕРЕСЫ СТОРОН В ПЕРЕГОВОРНОМ ПРОЦЕССЕ 1
5. темам отличным от геометрии Евклида в которых определено движение фигур причём с той же степенью свободы ч
6. мелкие кошки крупные кошки и гепарды начали развиваться от общих предков неофелид около 40 миллионов лет н
7. Тема- Научные принципы логистического менеджмента 1
8. Гендерная обусловленность социального интеллекта
9. Правовое решение споров и вопросов усыновления
10. Патриции
11. Понятие ГП и его отграничение от смежных отраслей права
12. і. Наступні спроби винайти швейну машину відносяться до другої половини XVIII ст.html
13. тема;Подраздел;Тема; V1-Строение и функции органов и тканей полости рта I-ТЗ 1 Тема 100;ВРЕМЯ0;KT3;MT01; S-З
14. Анжелесе сын официантки рос без отца
15. Лабораторная работа 9 офис 2010
16. Контрольная работа 2 Общие указания Необходимо строго придерживаться сле
17.  Средства труда многократно участвующие в создании товаров и услуг без изменения их натуральновещественн
18. 5789 3 Белоусова Мария Максим Алексеевич Диана Сергеевна
19. темами разработки; способом временного накапливания транспортируемого материала; технологической сх
20. Типичных британской семьи использовали состоять из матери отца и двое детей но в последние годы произошло

Материалы собраны группой SamZan и находятся в свободном доступе