Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Билеты 29.
Молекулярно-генетические методы (ДНК – диагностика), их назначение.
Молекулярно-генетические методы.
Основа – генно-инженерные манипуляции с ДНК и РНК.
Объекты – ядросодержащие клетки.
Методики:
Гибридизация ДНК с использованием ДНК-зондов.
Секвенирование – точная последовательность генов (точковые мутации, делеции и инверсии)
Полимеразная цепная реакция . 1993 г. Кэрри Мюмме.
А) Выделение ДНК
Б) Денатурация
В) Амплификация – получение множественных копий участков ДНК
Г) Электрофорез – распределение ДНК в специализированном геле.
Значение:
- определение моногенных мультифакториальных заболеваний.
- восприимчивость человека к инфекционным заболеваням.
- диагностика онкопатологий.
- установление отцовства
- криминалистика.
Применение ферментов-рестриктаз для изучения фрагментов ДНК.
Билет 30.
Близнецовый и биохимический методы изучения наследственности. Сущность этих методов, их этапы и назначение.
Близнецовый метод. Предложен в 1975(уточните)г. Гальтоном.
Суть: изучение генетических закономерностей на близнецах.
Значение: Оценка соотносительной роли наследственности и среды в развитии признака заболевания.
Монозиготные близнецы развиваются из одной оплодотворенной яйцеклетки. Они всегда одного пола.
Этапы:
Составление выборки близнецов.
Определение зиготности близнецов на основе конкордантности (процент сходства) и дискондарнтности (процент различия) близнецов по маркерам:
а) пол
б) группа крови, резус-фактор
в) сывороточные белки
г) система лейкоцитарных антигенов (регулируют процессы иммунного ответа, используется в трансплантологии, регуляция процессов эмбриогенеза).
д) полиморфизм ДНК
е) дерматоглифика – рисунки кожи пальцев стоп, ладоней.
3) Формула Хольцингера
Н = (СMZ – CDZ)/(100 – CDZ) * 100%
С – частота встречаемости
Н – коэффициент наследуемости
70% - наследуемость
40-70% - наследственность и среда
<40% - среда
Биохимический метод
Суть: исследование биологической жидкости организма на наличие продуктов обмена веществ (исходных, побочных, конечных).
Объекты: кровь, плазма, моча, пот, культуры клеток (лимфоциты, фибробласты).
Методики:
- качественный тест (реакция Фелинга) – наличие продуктов
- количественный тест (определение концентрации продукта)
- жидкостная и плоскостная хроматография (аминокислоты, олигосахариды, мукополисахариды)
- газовая хроматография (органические кислоты)
- электрофорез (гемоглобинопатия)
- спектроскопия.
Значение:
Диагностика моногенных и мультифакториальных заболеваний (ожирение, сахарный диабет, галактоземия, муковисцидоз, фенилкетонурия).
Определение гетерогенных носителей с помощью нагрузочных тестов (фенилкетонурия).
Изучение молекулярных механизмов взаимодействия генов (бомбейский феномен).
Изучение клинического полиформизма молекулярных болезней.
Установление времени включения генов в процессе онтогенеза.
Билет 31.
Цитогенетический метод, метод генетики соматических клеток и метод биологического моделирования, их сущность, этапы и назначение.
Цитогенетический метод. Применяют с 1956 г.
Суть: микроскопическое изучение хромосомных комплексов в клетках человека; материалом для кариотипирования служат клетки крови, амниотической жидкости и т.д.
Значение:
Диагностика хромосомных заболеваний.
Пренатальная диагностика хромосомных болезней.
Картирование хромосом
Изучение мутагенного действия факторов окружающей среды.
Определение генетического пола.
Непременным требованием для изучения хромосом является наличие делящихся клеток на стадии метафазы.
Метод определения полового хроматина.
Метод генетики соматических клеток.
Основан на размножении клеток in vitro для изучения генетических особенностей целого организма.
Методики:
Культивирование – позволяет получить достаточное количество клеточного материала для цитогенетических, биохимических, иммунологических и других исследований.
Клонирование – получение потомков из одной клетки; дает возможность в генетически идентичных клетках (биохимический анализ наследственно обусловленных процессов).
Селекция – отбор мутантных клеток с определенными свойствами и других клеток с интересующими исследователя характеристиками.
Гибридизация – слияние генетического материала клеток разных видов или разных типов позволяет получить клетки с новыми свойствами, позволяют изучить сцепление генов и гибридизацию генов в хромосомах.
Назначение:
Диагностика наслественных болезней на биохимическом уровне путем изучения механизмов первичного действия генов и их взаимодействия.
Точная диагностика наследственных болезней в пренатальном периоде.
Изучение регуляции активности генов.
Генетическое картирование
Изучение мутагенной и канцерогенной активности различных веществ.
Метод биологического моделирования
Основан на законе гомологичных рядов наследственной изменчивости Н.И. Вавилова:
Генетически близкие виды и роды характеризуются сходными рядами наследственной изменчивости с такой правильностью, что, зная ряд форм в пределах одного вида, можно предвидеть нахождение наследственных форм у других видов и родов.
Этапы:
Подбор биологической модели
Эксперимент
Анализ результатов
Значение:
- изучает патогенез, клинику заболеваний
- методы лечения и профилактики болезней.