Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
1. Предмет изучения медицинской микробиологии:
• микроорганизмы — представители нормальной микрофлоры тела человека и возбудители различных заболеваний человека;
• методы лабораторий диагностики, специфической профилакти¬ки и этиотропной терапии вызываемых ими заболеваний.
2.Основные этапы развития микробиол.Л.Пастер и его роль в развитии и становлении микробиологии как науки. французским ученым Луи Пастером (1822–1895), с именем которого связано развитие второго, физиологического периода микробиологии и эпохальные открытия сущности брожения (1857), невозможности самопроизвольного зарождения (1860), причин порчи пива и вина (1865), болезней шелковичных червей (1868), микробной обусловленности и заразности инфекционных болезней (1881), методов изготовления вакцин и способов предохранения от куриной холеры, сибирской язвы и бешенства (1882–1885).
3.Значене работ Роберта Коха в мед-ой микробиологии:совершенствование методов микробиологических исслед.,открытие возбуд.туберкулеза,холеры.
Большую роль в истории развития микробиологии сыграли труды немецкого ученого Р. Коха (1843–1910), который разработал метод выделения чистых культур микроорганизмов на плотных питательных средах, в частности ввел в практику агар–агар, желатину, свернутую сыворотку, кусочки овощей, предложил методы окраски бактерий анилиновыми красителями, усовершенствовал микроскоп, благодаря чему выделил и описал возбудителей сибирской язвы, туберкулеза и холеры, а его ученики и последователи к концу 19 в. открыли почти всех других возбудителей бактериальных инфекций
4. Теория И.И.Мечникова о невосприимчивости организма к инфекционным заболеваниям. Учение о гуморальных механизмах иммунитета (П.Эрлих, К.Борде, Э.Бринг, А.М.Безредко, И.Бернет, Л.А.Зильбер, Н.Ф.Здродовский).
выдающийся русский ученый И. И. Мечников (1845–1916) – творец фагоцитарной теории иммунитета, за разработку которой ему была присуждена Нобелевская премия. Он положил начало учению об антагонизме микробов, о причинах преждевременного старения и возможности продления жизни человека, внес большой вклад в изучение туберкулеза, холеры, сифилиса. И. И. Мечников является создателем русской школы микробиологов, труды которых легли в основу развития современной медицины .Пауль Эрлих (1854-1915).1891- Занимался поисками путей получения химических соед.,способных подавлять жизнедеятельность возбудителей заболеваний. Особое значении имели работы по лечению сифилиса органическими соединениями мышьяка.1907-сообщил об открытии –эффективного средства против сифилиса ,которое ученый назвал сальварсаном.вещество известно под названием препарата 606.
Широкую известность за рубежом получили работы советских ученых: П.Ф. Здродовского(1890-1976)- по исследованию риккетсиозов,вирусно-генетическая теория канцерогенеза. Л.А Зильбер,П.Ф.Здродовский- внесли существенный вклад в развитие микробиологии,вирусологии и иммунологии.
5. Открытие Д.И.Ивановским вирусов. Значение этого открытия для биологии и медицины.
Д. И. Ивановский в 1892 г. открыл вирусную природу мозаичной болезни листьев табака и по праву является основоположником вирусологии
6. Роль отечественных и советских ученых в развитии медицинской микробиологии (Г.Н.Ценковский, Г.Н.Габричесвский, Н.Ф.Гамалея, Д.Н.Заболотский, Л.А.Тарасевич).
Л. С. Ценковский (1822-1877) изучал генетические связи протистов, низших водорослей, слизистых грибов и бактерий с животными и растениями. Он впервые в России изготовил и применил на практике вакцину против сибирской язвы овец.
Г.Н.Габричевский (1860-1907) в России было организовано производство противодифтерийной сыворотки,создана вакцина от скарлатины. Основал первый в России бактериологический институт и первую кафкдру микробиологии в Московском Гос-ом университете. ,
Н.Ф.Гамалея, (1859-1949)-принадлежат заслуги в обл.ликвидации оспы в нашей стране.Он был автором многочисленных научных исследований,в том числе посвященных бешенству,холере,чуме.
Д.К.Заболотный (1866-1929)работы которого по микробиологии и эпидемиологии чумы,холеры,брюшного тифа и экспериментального сифилиса получили широкую известность.В 1898г-руководил первой в России кафедрой микроб.при Женском мед.институте. Были установлены пути передачи чумы от грызунов.
JI. А. Тарасевич (1868—1927) — один из крупнейших организаторов борьбы с эпидемиями заразных болезней в России. Тарасевич много работал над проблемой иммунологии и фагоцитоза, изучал заболевания туберкулезом среди калмыков, внедрял в практику вакцинацию против туберкулеза и кишечных инфекций.
Л. А. Тарасевич был прекрасным организатором, объединившим отечественных микробиологов и эпидемиологов путем организации научных обществ и съездов. Его имя носит крупнейший в СССР Институт по контролю биологических препаратов, основателем которого он был.
9Принципы систематики микроорганизмов таксономические категории: царство, отдел, класс, порядок, семейство, триба, род, вид, подвид. Инфравидовые категории: биовар, серовар, фаговар. Вид, как основная таксономическая категория.Биологическая систематика, или таксономия (от греч. taxis — расположение, порядок, nomos—закон),—наука о распределении животных и растительных микроорганизмов по группам или отдельным систематическим категориям в зависимости от сходных признаков. Низшей основной единицей систематики является вид. Сходные виды объединены в роды, которые составляют семейства, складывающиеся в порядки и классы Виды систематики: -естественная(основным принципом яв-ся объединение микроорг. В различные категории по общности клеточного организма); -исскуственная.
В основе современной таксономии микроорг. Лежат признаки:1-морфологические;2-биологические;3-физиологические(аэробы или анаэробы);4-молек-биологические(генетическая структура микроорг. Чувствительность к антибиотикам);
Основной таксономической единицей яв-ся вид.Вид микроорг-сов-ть особей имеющий единый генотип,который в стандартных условиях проявляется сходными фенотипическими признаками
Различают:-морфовары,биовары,ферментовары,фаговары,серовары, резистенсвары,эковары и патовары,,которые отличаются по морфологическим,биологическим,ферментативным признакам,резистентностью к антибиотикам и фагам. ШТАММ – объединяет мк одного и того же вида, но выделенные из опред источника и в опред время.
КЛОН – это культура мк, полученная из единичной клетки, к/я размножилась и дала начало целой популяции.
Когда образуется большое скопление клеток, то среди них могут быть клетки с отклонениями – биовары (биологические варианты), хемовары, фаговары, серовары (серологические варианты, имеющие разные антигенные свойства) , резистенсвары.
По морфологическим признакам выделяют 3 основных группы:
- Кокковидные
- Палочковидные
- Извитые формы
Внутри группы так же идет деление: в группе кокковидных - микрококки, диплококки, тетракокки, кокки расположенные в виде цепочек, скоплений, пакетов. В группе палочковидных - короткие, длинные, толстые, тонкие, могут выстраиваться друг за другом, в виде частокола, под углом. Коккобактерии - очень мелкие палочки. Среди извитых форм - в виде запятой, в виде латинской С. Эта форма тех или иных микроорганизмов может изменяться в зависимости от способа культивирования, внутри макроорганизма, поэтому часто отмечается полиморфизм.
Номенклатура – список названий разл групп мк. Кажд мк им св назв в осн к/го положена бинарная система, т.е. название мк состоит из названия рода и вида (Staphilococcus aureus). Как правило, родовое название пишется с заглавной буквы, м.б. сокращённым, видовое – полностью.
11 Основные методы исследования морфологии микробов. Микроскопия с использованием светового микроскопа, темного поля, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная.
- микроскопический метод: световая, фазово-контрастная, флуоресцентная, электронная; -культуральный метод (бактериологический, вирусологический);-биологический метод (заражение лабораторных животных);-молекулярно-генетический метод (ПЦР полимеразная цепная реакция)-серологический метод - выявления антигенов микроорганизмов или антител к ним;
Для световой микроскопии биологические объекты обычно окрашивают с целью выявления тех или иных их свойств. При этом ткани должны быть фиксированы, т.к. окраска выявляет определенные структуры только убитых клеток. В живой клетке краситель обособляется в цитоплазме в виде вакуоли и не прокрашивает ее структуры. Световой микроскоп- При обычной световой микроскопии наблюдаемый объект (в том числе и микробы) рассматриваются в проходящем свете. Темнопольная микроскопия — метод микроскопического исследования объектов, не поглощающих свет, плохо видимых при методе светлого поля. При темнопольной микроскопии объекты освещаются косыми лучами или боковым пучком света. При этом в объектив микроскопа попадают только лучи, рассеянные объектами, находящимися в поле зрения. Фазово-контрастная микроскопия — метод микроскопического наблюдения прозрачных, неокрашенных, не поглощающих света объектов, основанный на усилении контраста изображения. Люминесцентная микроскопия — метод световой микроскопии, позволяющий наблюдать первичную или вторичную люминесценцию микроорганизмов. Люминесценция — особый вид свечения, которое возбуждается коротковолновой частью видимого света либо ультрафиолетовыми лучами. Электронная микроскопия — метод морфологического анализа с помощью потока электронов. Роль оптических линз выполняют электрические и магнитные поля. Метод используется для выявления вирусов с диагностической целью, например рота-вирусов в фильтратах фекалий.
12. Субклеточные формы бактерий. Протопласты, сферопласты, L-формы. Они бывают различной формы - шаровид ной, палочковидной и извитой. Шаровидные бактерии носят общее название - кокки. Встречаются они в виде одиночных клеток - микрококки, соединенных попарно - Диплококки, по четыре - тетракокки, в виде цепочек- стрептококки; иногда кокки составляют группировки в виде одиночных пакетов по восемь клеток или из нескольких пакетов - сардины. Они образуют также скопления, напоми нающие виноградные грозди, - стафилококки.Палочковидные бактерии имеют форму одиночных, соеди ненных попарно или цепочкой палочек. Соотношение между длиной и толщиной палочек может быть различным.Извитые (изогнутые) бактерии различаются не только по длине и толщине, но и по степени извитости (изогнутости). Па лочки, изогнутые в виде запятой, называются вибрионами; па лочки с одним или несколькими завитками - спириллами; длинные палочки с множеством завитков - спирохетами. Форма бактериальной клетки и ее размеры не являются по стоянными. Они могут изменяться в зависимости от условий обитания микроба, а также от возраста микробной клетки. Сферопласт бактериальная клетка с частично разрушенной клеточной стенкой, характеризующаяся неустойчивостью к изменениям осмотического давления. Протопласты- клетки микроорганизмов, полностью утратившие клеточную стенку. Могут образовываться в результате мутаций. L-формы - это бактерии, полностью или частично лишенные клеточной стенки (протопласт +/- остаток клеточной стенки), поэтому имеют своеобразную морфологию в виде крупных и мелких сферических клеток. Способны к размножению.
13. Тинкториальные свойства микроорганизмов. Красители. Простые и сложные методы окрашивания. Механизм воздействия красителя со структурами бактериальной клетки. Особенности строения Грам- и Грам+ бактерий.
Различают простые и сложные методы окраски. Простые за ключаются в окраске препарата одним красителем; сложные методы (по Граму, Цилю — Нильсену и др.) включают последо вательное использование нескольких красителей и имеют диффе ренциально-диагностическое значение. Отношение микроорганиз мов к красителям расценивают как тинкториальные свойства. Существуют специальные методы окраски, которые используют для выявления жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида и разных цитоплазматических включений.
Простой метод. Фиксированный мазок окрасить каким-либо одним красителем, например фуксином водным (1—2 мин) или метиленовым синим (3—5 мин), промыть водой, высушить и микроскопировать. Сложные методы. Последовательно нанести на препа рат определенные красители, различающиеся по химическому составу и цвету, протравы, спирты, кислоту и др. Это позволяет выявить определенные структуры клеток и дифференцировать одни виды микроорганизмов от других. Существуют несколько основных окрасок: по Грамму, по Цилю-Нельсону Нейссера, Бури-Гинса, Грамположительные кокки: стафилококки (от стафило - гроздья) - имеют форму виноградных гроздьев; стрептококки - имеют вид цепочек; энтерококки - располагаются парами или короткими цепочками. Вызывают инфекционные эндокардиты (в 9% случаев), поражения мочеполовой системы и дисбактериозы кишечника. Грамотрицательные кокки: нейссерии (обычно располагаются попарно); гонококки (Neisseria gonorrhoeae) - возбудители гонореи; менингококки (Neisseria meningitidis) - возбудители назофарингитов, менингитов
14. Морфология и структура актиномицетов и спирохет. Классификация. Методы окрашивания.
Спирохеты— спирально извитые одноклеточные организмы. Число витков у спирохет может достигать 10—15. Спирохеты очень подвижны. Они могут сгибаться, сокращаться, совершать быстрые вращательные и прямолинейные движения за счет сокращений их фибриллярного аппарата. Размножаются спирохеты поперечным делением на две равноценные особи. Среди спирохет имеются возбудители инфекционных заболеваний человека: возвратного,тифа, сифилиса и лептоспирозов. Некоторые спирохеты являются сапрофитами. Они встречаются на слизистой оболочке полости рта и половых органов здоровых людей. Спирохеты, особенно трепонемы, в отличие от других бактерий плохо воспринимают анилиновые красители. Их, так же как простейших, окрашивают краской Романовского - Гимзы.
Актиномицеты, или лучистые грибы, — низшие растительные организмы, широко распространенные в природе, особенно в почвах, богатых органическими веществами. Многие актиномицеты имеют промышленное значение для получения антибиотиков. ктиномицеты имеют форму тонкой длинной ветвящейся нити, напоминающей гифы грибов, диаметром 0,2—1 мкм. Актиномицеты обладают некоторыми признаками, общими как с бактериями, так и с грибами. Как бактерии они содержат ядро типа нуклеоида, состоят из одной клетки, покрытой оболочкой, грамположительны. Часть актиномицетов (стрептомицеты) размножается спорами, поэтому они занимают как бы промежуточное положение между бактериями и грибами.
ОКРАСКА. Препаровальной иглой отделяют небольшой участок колонии и помещают в каплю воды на предметном стекле, покрывают вторым предметным стеклом и слегка прижимая, раздавливают мицелий. Из полученного материала петлей, обычным способом готовят мазки, окрашивают по Граму и Цилю-Нильсену. Друзу извлекают из патологического материала петлей, помещают в каплю воды на предметное стекло, слегка придавливают покровным, затем вводят под стекло каплю щелочного раствора метиленового синего и микроскопируют с сухим объективом, можно использовать фазовый контраст.
10. Морфология бактерий. Структура бактериальной клетки.
Морфология: 1) Шаровидные – кокки (микрококки, диплококки, тетракокки, стрептококки, сарацины стафилококки); 2) Палочковидные - цилиндрические (одиночные, диплобактерии, стрептобактерии); 3) Извитые – изогнутые (вибрионы, спириллы, спирохеты); Некоторые бактерии меняют форму в зав-ти от стадии развития – плеоморфизм.
Бактериальная клетка состоит из клеточной стенки, цитоплазматической мембраны, цитоплазмы с включениями и ядерного аппарата, называемого нуклеоидом. Имеются другие структуры: мезосома, вакуоли, включения полисахаридов, капсула (микрокапсула, слизь), жгутики, пили. Некоторые бактерии способны образовывать споры.
Структуру и морфологию бактерий изучают с помощью различных методов микроскопии: световой, фазово-контрастной, интерференционной, темнопольной, люминесцентной и электронной.Клеточная стенка-прочная,упругая структура,придающая бактерии определенную форму и вместе с подлежащей цитоплазматической мембраной сдерживающая высокое осмотическое давление в бак.кл. В клеточной стенки грамположительных бактерий содержится небольшое количество полисахаридов, липидов, белков. Основным компонентом клеточной стенки этих бактерий является многослойный пептидогликан (муреин, мукопептид), составляющий 40—90% массы клеточной стенки. Цитоплазматическая мембрана при электронной микроскопии ультратонких срезов представляет собой трехслойную мембрану. Цитоплазма состоит из растворимых белков,рибонуклеиновых кислот, включений и многочисленных мелких гранул — рибосом, ответственных за синтез (трансляцию) белков. В цитоплазме имеются различные включения в виде гранул гликогена, полисахаридов, бета-оксимасляной кислоты и полифосфатов (волютин). Они являются запасными веществами для питания и энергетических потребностей бактерий. Волютин обладает сродством к основным красителям и легко выявляется с помощью специальных методов окраски (например, по Нейссеру) в виде метахроматических гранул. Характерное расположение гранул волютина выявляется у дифтерийной палочки. Нуклеоид — эквивалент ядра у бактерий. Он расположен в центральной зоне бактерий в виде двунитевой ДНК. Ядро бактерий, в отличие от эукариот, не имеет ядерной оболочки, ядрышка и основных белков (гистонов). Обычно в бактериальной клетке содержится одна хромосома, представленная замкнутой в кольцо молекулой ДНК. Капсула - слизистая структура толщиной более 0,2мкм, прочно связанная с клеточной стенкой бактерий и имеющая четко очерченные внешние границы. В чистых культурах бактерий капсула образуется реже. Она выявляется при специальных методах окраски мазка (например, по Бурри-Гинсу). Жгутики бактерий определяют подвижность бактериальной клетки. Жгутики представляют собой тонкие нити, берущие начало от цитоплазматической мембраны. Толщина жгутиков 12-20 нм, длина 3-15 мкм. Они состоят из 3 частей: спиралевидной нити, крюка и базального тельца, содержащего стержень со специальными дисками (1 пара дисков - у грамположительных и 2 пары дисков - у грамотрицательных бактерий). Споры - своебразная форма покоящихся фирмикутных бактерий, т.е. бактерий
с грамположительным типом строения клеточной стенки. Споры образуются при неблагоприятных условиях существования бактерий (высушивание). Образование спор способствует сохранению вида и не является способом размножения, как у грибов. Споры кислотоустойчивы, поэтому окрашиваются по методу Циля-Нильсена в красный, а вегетативная клетка в синий цвет. Форма спор может быть овальной, шаровидной; расположение в клетке -терминальное, т.е. на конце палочки (у возбудителя столбняка),
субтерминальное - ближе к концу палочки (у возбудителей ботулиэма, газовой гангрены) и центральное (у сибиреязвенной бациллы).
15. Морфология и структура риккетсий, хламидий и микоплазм. РИККЕТСИИ Риккетсии - прокариотические микроорганизмы, названные в •честь американского микробиолога Г. Риккетса; погибшего в результате лабораторного заражения сыпным тифом. Риккетсии относятся к порядку Rickettsiales. Они представляют собой мелкие .(0,3–0,6х0,4–2 мкм) полиморфные бактерии, имеющие кокковидную, палочковидную или нитевидную форму. Клеточная стенка построена по типу грамотрицательных бактерий Риккетсии являются облигатными внутриклеточными паразитами. Многие виды патогенны для людей, вызывая острые лихорадочные заболевания риккетсиозы. ХЛАМИДИИ Хламидии представляют собой мелкие бактериоподобные неподвижные бескапсульные грамотрицательные бактерии. Они относятся к порядку Chlamidiales, включающему патогенных для человека внутриклеточных паразитов. Вне клеток хозяина хламидии существуют в виде элементарных телец сферической формы размерами 0,3 мкм. В клетке хозяина они превращаются в ретикулярные тельца, которые начинают делиться. В результате деления в клетке образуются внутрицитоплазма-тические включения - микроколонии хламидии, содержащие промежуточные формы их развития. Покидая клетку, они превращаются в элементарные тельца. Цикл развития хламидии продолжается в течение 40–72 ч.
МИКОПЛАЗМЫ Микоплазмы - полиморфные мелкие сферические или овоид-ные микроорганизмы диаметром 0,2 мкм. Наряду с ними встречаются крупные шаровидные клетки, достигающие в диаметре 1,5 мкм, и нитевидные ветвящиеся клетки длиной до 150 мкм. Характерной особенностью микоплазм является отсутствие клеточ ной стенки.
Клетки микоплазм окружены цитоплазматической мембраной, покрытой снаружи капсулоподобным слоем. У некоторых видов внешний слой цитоплазматической мембраны имеет большую толщину Микоплазмы неподвижны, не образуют спор. Наряду с непатогенными существуют патогенные виды, вызывающие различные заболевания у людей.
16. Структура и функции компонентов бактериальной клетки (клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, капсула, включения, споры).
Бактериальная клетка состоит из клеточной стенки, цитоплазматической мембраны, цитоплазмы с включениями и яд ра, называемого нуклеоидом. Имеются дополни тельные структуры: капсула, микрокапсула, слизь, жгутики, пили. Некоторые бактерии в неблагоприятных условиях спо собны образовывать споры.
Клеточная стенка. В клеточной стенке грамположительных бактерий содержится небольшое количество полисахаридов, липидов, белков. Основным компонентом толстой клеточной стенки этих бактерий является многослойный пептидогликан. Основным компонентом этих мембран является бимолекулярный (двойной) слой липидов. Внутренний слой наружной мембраны представлен фосфолипидами, а в наружном слое расположен липополисахарид.
Цитоплазматическая мембрана располагается под клеточной стенкой (между ними - периплазматическое пространство). По строению является сложным липидобелковым комплексом, таким же, как у клеток эукариот. Цитоплазматическая мембрана выявляется только при электронной микроскопии. Капсула - слизистая структура толщиной более 0,2мкм, прочно связанная с клеточной стенкой бактерий и имеющая четко очерченные внешние границы. В чистых культурах бактерий капсула образуется реже. Она выявляется при специальных методах окраски мазка (например, по Бурри-Гинсу). Жгутики бактерий определяют подвижность бактериальной клетки. ). Споры - своебразная форма покоящихся фирмикутных бактерий, т.е. бактерий
с грамположительным типом строения клеточной стенки. Споры образуются при неблагоприятных условиях существования бактерий (высушивание). Образование спор способствует сохранению вида и не является способом размножения, как у грибов. Споры кислотоустойчивы, поэтому окрашиваются по методу Циля-Нильсена в красный, а вегетативная клетка в синий цвет. Форма спор может быть овальной, шаровидной; расположение в клетке -терминальное, т.е. на конце палочки (у возбудителя столбняка),
субтерминальное - ближе к концу палочки (у возбудителей ботулиэма, газовой гангрены) и центральное (у сибиреязвенной бациллы).
17. История развития вирусологии. Принципы классификации и номенклатуры вирусов.
Открытие вирусов Д.И.Ивановским в 1892г. положило начало развитию науки вирусологии. Более быстрому ее развитию способствовали: изобретение электронного микроскопа, разработка метода культивирования микроорганизмов в культурах клеток. Классификация и морфология:
в зависимости от -хозяина: р!, ж!, б!, чка.
от локализации в : в цтпл, в яд.
от типа НК: ДНК– и РНК–овые.
от строения: простые, сложные
ПРОСТЫЕ В! состоят из НК, покрытой белковой оболочкой (КАПСИД), к/я защищает НК от разл воздействий. Она состоит из отдельных субъединиц (КАПСОМЕРОВ), их кол-во разл у разн В!!.
СЛОЖНЫЕ – т/же им НК, капсид, СУПЕРКАПСИДНАЯ ОБОЛОЧКА, в состав которой кроме белка входят липиды и углеводы. У нек сложных в!! на поверхности есть выросты – нейраминидазы и гемагглютинины (вирус гриппа).
18. Структура вириона и его биологические особенности.
Размеры вибрионов различных вирусов варьируют в широких пределах:от 15-18 до 300-400 нм.Они имеют разнообразную форму: палочковидную,нитевидную,сферическую форму параллелепипеда,сперматозоидную. Структура простого вириона-нуклеокапсида-свидетельствует о том,что вирусная нуклеиновая кислота-ДНК или РНК-надежно защищена белковой оболочкой - капсидом.Последний имеет строгую упорядоченную структуру, в основе которой лежат принципы спиральной или кубической симметрии.Капсиды палочковидных и нитевидных вирионов состоят из структурных субъединиц .
Сферическая структура вирионов определяется капсидом,построенном по принципам кубической симметрии,в основе которой лежит фигура икосаэдра- двадцатигранника.Капсид состоит из асимметричных субъединиц,которые объединены в морфологические субъединицы-капсомеры.Варионы со сложным капсидом,построенным более чем из 60 структур субъединиц,содерат группы из 5субъед.-пентамеры,или из 6 субъединиц-гексамеры.Нуклеокапсид сложноорганизованных вирионов,называемый «сердцевиной», покрыт внешней оболочкой- суперкапсидом.
19. Основные стадии взаимодействия вирусов с клетками хозяев при продуктивной инфекции.
Взаимодействия вируса с клетками хозяина-это сложный многоступенчатый процесс,который начинается с адсорбции вирусных частиц на рецепторах клетки хозяина и продолжается внутрь клетки. В результате такого взаимодействия развивается либо продуктивная,либо абортивная,либо интегративная форма клеточной инфекции.При продуктивной ф-происходит размножение вируса,абортивная-ее нарушение на одном из этапов,при интегративной-интеграция вирусной нуклеиновой кислоты в клеточный геном.
1-я стадия-адсорбция-характеризуется прикреплением вириона к клеточным рецепторам.
2-я стадия-проникновение вируса в клетку хозяина-происходит несколькими путями.
3-я стадия-транспорт вируса внутри клетки.Он происходит с помощью внутриклеточных мембранных пузырьков,в которых вирус переносится на рибосомы,эндоплазматическую сеть или в ядро.
4я»раздевание» риниона-зак.в их дептеинизации и освобождении от суперкапсида и капсида,препятствующих репликации вирусной нуклеиновой кислоты.
5-я- эклипс-фазой,которая характкр. Исчезновением вириона,поскольку он перестает обнаруживаться при электронной микроскопии.
6-я-сборка вириона-состоит в образовании нуклеокапсидов.
7-я-выход вирусных частиц из клетки- происходит 2-я путями.Простые,лишенные суперкапсида,другие имеющие липопротеидную внешнюю оболочку,выходят из клетки путем почкования,в рез.в течение длительного времени она сохраняет свою жизнеспособность.такой путьь характерен для вируса гриппа.
20. Фаги (вирусы бактерий). Морфологические и структурные особенности фагов. Фазы взаимодействия вирулентного фага с бактериальной клеткой. Вирулентные и умеренные фаги. Лизогения. Фаговая конверсия.
Естественной средой обитания фагов является бактериальная клетка, поэтому фаги распространены повсеместно (например, в сточных водах). Фагам присущи биологические особенности, свойственные и другим вирусам.
Наиболее морфологически распространенный тип фагов характеризуется наличием головки, отростка со спиральной симметрией (часто имеет полый стержень и сократительный чехол), шипов и отростков т.е. внешне несколько напоминают сперматозоид.
Взаимодействие фагов с клеткой строго специфично, т.е. бактериофаги способны инфицировать только определенные виды и фаготипы бактерий. Бактериофаги — вирусы бактерий, обладающие способностью специфически про никать в бактериальные клетки, репродуцироваться в них и вы зывать их растворение (лизис).
Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги.
Ви рулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, авто номно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. Про цесс взаимодействия вирулентного фага с бактерией протекает в виде нескольких стадий и весьма схож с процессом взаимодей ствия вирусов человека и животных с клеткой хозяина. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено мом фага называют профаг. Профаг, ставший частью хромосо мы клетки. Био логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бакте рий, содержащая профаг, получила название лизогенной. Это название отражает способность профага самопроизвольно или под действи ем ряда физических и химических факторов исключаться из хро мосомы клетки и переходить в цитоплазму, Лизогенные культуры по своим основным свойствам не от личаются от исходных, но они невосприимчивы к повторному заражению гомологичным или близкородственным фагом и, кроме того, приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение свойств мик роорганизмов под влиянием профага получило название фаго вой конверсии. Последняя имеет место у многих видов мик роорганизмов и касается различных их свойств: культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам.
21. Практическое использование фагов. Практическое применение фагов. Бактерио фаги используют в лабораторной диагнос тике инфекций при внутривидовой иденти фикации бактерий, т. е. определении фаговара (фаготипа). Для этого применяют метод фаготипирования, основанный на строгой специфичности действия фагов: на чашку с плотной питательной средой, засеянной «газоном» чистой культурой возбудителя, на носят капли различных диагностических типоспецифических фагов. Фаговар бактерии определяется тем типом фага, ко торый вызвал ее лизис (образование сте рильного пятна, «бляшки», или «негативной колонии», Выделение бак терий одного фаговара от разных больных указывает на общий источник их заражения. По содержанию бактериофагов в объектах окружающей среды (например, в воде) можно судить о присутствии в них соответствующих патогенных бактерий.
Фаги применяют также для лечения и про филактики ряда бактериальных инфекций. Производят брюшнотифозный, сальмонеллезный, дизентерийный, синегнойный, ста филококковый, стрептококковый фаги и комбинированные препараты. Бактериофаги назначают по показаниям перорально, парен терально. Бактериофаги широко применяют в генной инженерии и биотехнологии в качестве векторов для получе ния рекомбинантных ДНК
22 Классификация бактерий по типам питания. Механизмы питания бактерий.
.По типу питания микроорганизмы делятся на:-по источнику углерода: -автотрофы – синтезируют все углеродсодержащие вещества из СО2;-гетеротрофы – в качестве источника углерода используют органические вещества;-по источнику энергии:фототрофы(используют солнечный свет);Хемотрофы(испол.окислительно-востановит.-ые р-ии);-по источнику электронов(ионов Н+):-литотрофы(донором яв-ся неорганич.соединения.Аммоний.; -органотрофы(донором яв-ся органические соед.)Механизм: Различают несколько механизмов питания микробных кле ток. Питательные вещества могут поступать из внешней сре ды в микробную клетку через клеточную стенку, капсулу, слизистые слои и цитоплазматическую мембрану.Проникновение питательных веществ в клетку может осу ществляться с помощью диффузии и стереохимического спе цифического переноса питательных веществ.Типы питания микробов. Различают углеродное и азотное питание микроорганизмов. По типу углеродного питания мик робы принято делить на аутотрофы и гетеротрофы.
23 Ферменты бактерий и их биологическая роль. Методы изучения ферментативной активности бактерий и использование её для идентификации.
Ферменты – специфические белковые катализаторы, которые присудствуют во всех живых клетках и за каждое превращение отвечает фермент.
Регуляторные, которые работают на уровне генома воспринимает все метаболические сигналы и изменяют каталитическую активность.
Эффекторные ферменты – определяют метаболизм в б/к можно выделить 6 класов этих ферментов: -Оксидоредуктазы – катализируют о-в реакции между субстратом (НАД, НАДФ, каталаза, ДГ);-Трансферазы – катализирует реакции переноса химических групп и одноуглеродных остатков;-Гидролазы – катализируют реакции гидролиза связей (протеиназа, липаза, гликозидаза);-Лиазы – катализирует реакции присоединения и обрыва групп по 2-м связям (альдолаза, фумаразы, декарбоксилазы, дезаминазы);
-Изомеразы – катализируют реакции изомеризации (топаза);
-Лигазы – катализируют реакции синтеза.
Синтез ферментов видоспецифичен, постоянен и поэтому набор ферментов у бактерий используется для их видовой идентификации. Ферменты которые синтезируются независимо от условий обитания клетки – конститутивные. Ферменты синтез которых зависит от определенного субстрата в среде обитания – индуцивельные.
Получение микробных ферментов важная отрасль промышленной микробиологии, широко используется в биотехнологии. Промышленная микробиология получает: амилазы, липазы… как лекарста, питательные добавки, пектиназы – для осветления соков, рибонуклеазы, ДНК-лагазы, полимеразы – в генной инженерии для моделирования нуклеиновых кислот.
По локализации: 1)эндоферменты-локализуются внутри клетки.; 2)экзоферменты-выделяются в окружающую среду: а)ферменты,осуществляющие «внешнее питание»;б)ферменты патогенности; По концентрации: 1)конструтувные-постоянно синтезируются в определенных концентрациях.2)индуцибельные-находятся в клетке в следовых концентрациях.Ферментный состав яв-ся стабильным признаком для каждого вида микроорганизмов,поэтому обнаружение ферментативной активности чистых культур микроорганизмов применяют при их идентификации. При идентификации микроорганизмов:1-сахаролитические(разлагают углегоды,многоатомные спирты);2-протеолитические(разлагают белки,АК); 3-ферменты патогенности.
24.Основные принципы культивирования бактерий. Культуральные свойства. Колония. Пигменты бактерий.
Универсальным инструментом для производства посевов явля ется бактериальная петля. Кроме нее, для посева уколом при меняют специальную бактериальную иглу, а для посевов на чашках Петри — металлические или стеклянные шпатели. Для посевов жидких материалов наряду с петлей используют пасте ровские и градуированные пипетки. Первые предварительно из готовляют из стерильных легкоплавких стеклянных трубочек, которые вытягивают на пламени в виде капилляров. Конец ка пилляра сразу же запаивают для сохранения стерильности. У пастеровских и градуированных пипеток широкий конец за крывают ватой, после чего их помещают в специальные пеналы или обертывают бумагой и стерилизуют.
При пересеве бактериальной культуры берут пробирку в левую руку, а правой, обхватив ватную пробку IV и V пальцами, вынимают ее, пронося над пламенем горелки. Удерживая дру гими пальцами той же руки петлю, набирают ею посевной ма териал, после чего закрывают пробирку пробкой. Затем в пробирку со скошенным агаром вносят петлю с посевным материалом, опуская ее до конденсата в нижней ча сти среды, и зигзагообразным движением распределяют мате риал по скошенной поверхности агара. Вынув петлю, обжигают край пробирки и закрывают ее пробкой. Петлю стерилизуют в пламени горелки и ставят в штатив. Пробирки с посевами надг писывают, указывая дату посева и характер посевного мате риала (номер исследования или название культуры).
Посевы «газоном» производят шпателем на питательный агар в чашке Петри. Для этого, приоткрыв левой рукой крышку, пет лей или пипеткой наносят посевной материал на поверхность питательного агара. Затем проводят шпатель через пламя горел ки, остужают его о внутреннюю сторону крышки и растирают материал по всей поверхности среды. После инкубации посева появляется равномерный сплошной рост бактерий.
25. Питательные среды и их классификация.
Для культивирования бактерий используют питательные среды, к которым предъявляется ряд требований.1. Питательность. Бактерии должны содержать все необходимые питательные вещества.2. Изотоничность. Бактерии должны содержать набор солей для поддержания осмотического давления, определенную концентрацию хлорида натрия.3. Оптимальный рН (кислотность) среды. Кислотность среды обеспечивает функционирование ферментов бактерий; для большинства бактерий составляет 7,2–7,6.4. Оптимальный электронный потенциал, свидетельствующий о содержании в среде растворенного кислорода. Он должен быть высоким для аэробов и низким для анаэробов.5. Прозрачность (чтобы был виден рост бактерий, особенно для жидких сред).6. Стерильность.Классификация питательных сред.1. По происхождению:1) естественные (молоко, желатин, картофель и др.);2) искусственные – среды, приготовленные из специально подготовленных природных компонентов (пептона, аминопептида, дрожжевого экстракта и т. п.);3) синтетические – среды известного состава, приготовленные из химически чистых неорганических и органических соединений.2. По составу:1) простые – мясопептонный агар, мясопептонный бульон;2) сложные – это простые с добавлением дополнительного питательного компонента (кровяного, шоколадного агара): сахарный бульон, желчный бульон, сывороточный агар, желточно-солевой агар, среда Китта—Тароцци.3. По консистенции:1) твердые (содержат 3–5 % агар-агара);2) полужидкие (0,15—0,7 % агар-агара);3) жидкие (не содержат агар-агара).4. По назначению:1) общего назначения – для культивирования большинства бактерий (мясопептонный агар, мясопептонный бульон, кровяной агар);2) специального назначения:а) элективные – среды, на которых растут бактерии только одного вида (рода), а род других подавляется (щелочной бульон, 1 %-ная пептонная вода, желточно-солевой агар, казеиново-угольный агар и др.);б) дифференциально-диагностические – среды, на которых рост одних видов бактерий отличается от роста других видов по тем или иным свойствам, чаще биохимическим (среда Эндо, Левина, Гиса, Плоскирева и др.);в) среды обогащения – среды, в которых происходит размножение и накопление бактерий-возбудителей какого-либо рода или вида (селенитовый бульон).Для получения чистой культуры необходимо владеть методами выделения чистых культур:1. Механическое разобщение (метод штриха обжигом петли, метод разведений в агаре, распределение по поверхности твердой питательной среды шпателем, метод Дригальского).2. Использование элективных питательных сред.Колония – это видимое невооруженным глазом, изолированное скопление бактерий на твердой питательной среде.
26 Дыхание бактерий. Методы культивирования и выделения чистых культур анаэробов.
Дыхание микроорганизмов. Путем дыхания микроорганизмы добывают энергию. Дыхание- биологический процесс переноса электронов через дыхательную цепь от доноров к акцепторам с образованием АТФ. В зависимости от того, что является конечным акцептором электронов, выделяют аэробное и анаэробное дыхание. По типу дыхания выделяют четыре группы микроорганизмов. 1.Облигатные (строгие) аэробы. Им необходим молекулярный (атмосферный) кислород для дыхания.2.Микроаэрофилы нуждаются в уменьшенной концентрации (низком парциальном давлении) свободного кислорода. Для создания этих условий в газовую смесь для культивирования обычно добавляют CO2, например до 10- процентной концентрации. 3.Факультативные анаэробы могут потреблять глюкозу и размножаться в аэробных и анаэробных условиях. Среди них имеются микроорганизмы, толерантные к относительно высоким (близких к атмосферным) концентрациям молекулярного кислорода - т.е. аэротолерантные, а также микроорганизмы которые способны в определенных условиях переключаться с анаэробного на аэробное дыхание.4.Строгие анаэробы размножаются только в анаэробных условиях т.е. при очень низких концентрациях молекулярного кислорода, который в больших концентрациях для них губителен. Биохимически анаэробное дыхание протекает по типу бродильных процессов, молекулярный кислород при этом не используется.Аэробное дыхание энергетически более эффективно (синтезируется большее количество АТФ). Основные методы создания анаэробных условий для культивирования микроорганизмов.1.Физический- откачивание воздуха, введение специальной газовой безкислородной смеси (чаще- N2- 85%, CO2- 10%, H2- 5%).2.Химический- применяют химические поглотители кислорода.3.Биологический- совместное культивирование строгих аэробов и анаэробов (аэробы поглощают кислород и создают условия для размножения анаэробов).
4.Смешанный- используют несколько разных подходов.
27. Рост и размножение бактерий. Скорость и фазы размножения бактериальных популяций в стационарных условиях в жидкой питательной среде.
Жизнедеятельность бактерий характеризуется ростом — фор мированием структурно-функциональных компонентов клетки и увеличением самой бактериальной клетки, а также размноже нием — самовоспроизведением, приводящим к увеличению ко личества бактериальных клеток в популяции.
Бактерии размножаются путем бинарного деления пополам, реже путем почкования. Актиномицеты, как и грибы, могут раз множаться спорами. Актиномицеты, являясь ветвящимися бактериями, размножаются путем фрагментации нитевидных клеток. Грамположительные бактерии делятся путем врастания синтези рующихся перегородок деления внутрь клетки, а грамотрицательные — путем перетяжки, в результате образования гантелевид-ных фигур, из которых образуются две одинаковые клетки.
Делению клеток предшествует репликация бактериальной хро мосомы по полуконсервативному типу (двуспиральная цепь ДНК раскрывается и каждая нить достраивается комплементарной ни тью), приводящая к удвоению молекул ДНК бактериального ядра — нуклеоида.
Репликация ДНК происходит в три этапа: инициация, элон гация, или рост цепи, и терминация.
Размножение бактерий в жидкой питательной среде. Бактерии, засеянные в определенный, не изменяющийся объем питатель ной среды, размножаясь, потребляют питательные элементы, что приводит в дальнейшем к истощению питательной среды и пре кращению роста бактерий. При выращивании бактерий на жидкой питательной среде наблюдается придонный, диффузный или поверхностный (в виде пленки) рост культуры. Рост периодической культуры бактерий, выращиваемых на жидкой питательной среде, 1. лаг-фаза;
2. фаза логарифмического роста;
3. фаза стационарного роста, или максимальной концентрации
бактерий;
4. фаза гибели бактерий.
Эти фазы можно изобразить графически в виде отрезков кри вой размножения бактерий, отражающей зависимость логариф ма числа живых клеток от времени их культивирования.
28. Микрофлора человека. Роль микробов – постоянных обитателей тела человека в физиологических процессах. Препараты (колибактерин, бифидумбактерин, бификол, лактобактерин). Их практическое значение.
Организм человека заселен (колонизирован) более чем 500 ви дов микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору человека, находящихся в состоянии равновесия (эубиоза) друг с другом и организмом человека. Микрофлора представляет со бой стабильное сообщество микроорганизмов, т.е. микробиоценоз. Она колонизирует поверхность тела и полости, сообщающиеся с окружающей средой. Место обитания сообщества микроорга низмов называется биотопом. В норме микроорганизмы отсутству ют в легких и матке. Различают нормальную микрофлору кожи, слизистых оболочек рта, верхних дыхательных путей, пищева рительного тракта и мочеполовой системы. Среди нормальной микрофлоры выделяют резидентную и транзиторную микрофлору. Резидентная (постоянная) облигатная микрофлора представ лена микроорганизмами, постоянно присутствующими в орга низме. Транзиторная (непостоянная) микрофлора не способна к длительному существованию в организме.
29 Методы культивирования вирусов.
Для культивирования вирусов используют культуры клеток, куриные эмбрионы и чувствительных лабораторных животных. Эти же методы используют и для культивирования риккетсий и хламидий — облигатных внутриклеточных бактерий, которые не растут на искусственных питательных средах.
Культуры клеток. Культуры клеток готовят из тканей живот ных или человека. Культуры подразделяют на первичные (неперевиваемые), полуперевиваемые и перевиваемые.
Приготовление первичной культуры клеток складывает ся из нескольких последовательных этапов: измельчения ткани, разъединения клеток путем трипсинизации, отмывания получен ной однородной суспензии изолированных клеток от трипсина с последующим суспендированием клеток в питательной среде, обеспечивающей их рост, например в среде 199 с добавлением телячьей сыворотки крови.
Перевиваемые культуры в отличие от первичных адаптированы к условиям, обеспечивающим им постоянное существование in vitro, и сохра няются на протяжении нескольких десятков пассажей.
Перевиваемые однослойные культуры клеток приготов ляют из злокачественных и нормальных линий клеток, обладаю щих способностью длительно размножаться in vitro в определен ных условиях. К ним относятся злокачественные клетки HeLa, первоначально выделенные из карциномы шейки матки, Нер-3 (из лимфоидной карциномы), а также нормальные клетки ам ниона человека, почек обезьяны и др.
К полуперевиваемым культурам относятся диплоид ные клетки человека. Они представляют собой клеточную систе му, сохраняющую в процессе 50 пассажей (до года) диплоидный набор хромосом, типичный для соматических клеток использу емой ткани. Диплоидные клетки человека не претерпевают зло качественного перерождения и этим выгодно отличаются от опу холевых.
О размножении (репродукции) вирусов в культуре клеток судят по цитопатическому действию (ЦПД), кото рое может быть обнаружено микроскопически и характеризуется морфологическими изменениями клеток.
Характер ЦПД вирусов используют как для их обнаружения (индикации), так и для ориентировочной идентификации, т. е. определения их видовой принадлежности.
30 Методы обнаружения (индикации) вирусов.
. Методы обнаружения вирусов в материале от больных животных и трупов. Для обнаружения вируса чаще всего используют экспресс-методы, которые позволяют в материале: 1-обнаружить вирусные белки (антигены), для этой цели используют серологические реакции: РИФ, ИФА, РНГА, РСК, РДП
2-обнаружить вирусные нуклеиновые кислоты с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) или ДНК-зонда;3-обнаружить вирионы вирусов. Электронная микроскопия позволяет обнаружить вирусы любых размеров, а крупные вирусы (вирусы оспы) можно увидеть под световым микроскопом. Этот метод называется вирусоскопия.
Электроная микроскопия используется в основном в исследовательских целях. 4. Обнаружить тельца - включения под световым или люминесцентным микроскопом.
Тельца-включения – это внутриклеточные включения, образующиеся в клетках при репродукции в них некоторых вирусов.;
5. обнаружить вирусные гемагглютинины, которые являются белками некоторых вирусов (орто-, парамиксовирусов и др).Гемагглютинирующие вирусы способны аггютинировать эритроциты животных определенных видов в условиях соответствующих температуры и рН среды. Иногда используют реакцию гемагглютинации (РГА) для обнаружения гемагглютинирующего вируса в материале ;6. для обнаружения вируса в активной форме (инфекционной) используют довольно длительные вирусологические исследования. С этой целью применяют метод биопробы на живых чувствительных к предполагаемому вирусу системах: лабораторных животных, куриных эмбрионах, культурах клеток. В редких случаях приходится использовать естественно восприимчивых животных.
^ Методы выделения вирусов из материала больных животных и трупов.
Выделение вируса из исследованного материала - самый важный этап в диагностике вирусных болезней. Его проводят на живых чувствительных к предполагаемому вирусу системах: на животных: куриных эмбрионах и культурах клеток.
Для заражения чувствительных систем из материала (кусочки органов и тканей) готовят суспензию. С этой целью материал измельчают, растирают в ступке со стерильным кварцевым песком, разводят стерильным физиологическим раствором или растворомХенкса (1:5-1:10), освобождают от крупных частиц путем центрифугирования в течении 20-30 мин.при 2000-3000 мин-1. За тем суспензию освобождают от бактерий и грибов, используя для этой цели антибиотики ( обычно смесь пенициллина стрептомицина по 200-1000 ЕД на 1 мл жидкости и нистатина), или пропускают через бактериальные фильтры (редко). Контролируют эффективность такой обработки посевом на питательные среды для аэробов, анаэробов и грибов. После получения отрицательного результата бактериологического контроля вируссодержащий материал используют для заражения живых объектов.
Полученной таким образом суспензией заражают чувствительные к предполагаемому вирусу живые объекты (животных, куриные эмбрионы, культуры клеток,) и регестрирует появления у них признаков размножения вируса, что служит показателем наличия вируса в исследуемом материале. Однако вирус не всегда проявляет действие в первом пассаже. В этом случае необходимо прровести 3-4 “пассажа”, чтобы вирус адаптировался к используемому живому объекту и накопился в количестве, достаточном для проявления своего действия.
31.Организация генетического материала бактериальной клетки.1.материальной основой наследственности,определяющей генетические свойства всех организмов,в том числе бактерий и вирусов,является ДНК. 2.В бактериях могут присутствовать внехромосомные факторы наследственности:плазмиды,ls-последовательности,транспозоны.3. У бактерий помимо основного механизма передачи генов есть и другие формы передачи генетического материала между отдельными особями в популяции-рекомбинации:конъюгация,трансформация,в том числе фаговая конверсия. 4.Весь генетический материа бактериальной клетки осободно располагается в цитоплазме и лишен мембра и оболочек.Генотип-сов-ть всех генов микробной клетки.Фенотип-сов-ть св-в микроорганизмов,которые выявляются в определенных условиях.
32. Генетический обмен и рекомбинации у бактерий: трансформация, конъюгация, их механизмы.
Конъюгация бактерий состоит в переходе генети ческого материала (ДНК) из клетки-донора («мужской») в клет ку-реципиент («женскую») при контакте клеток между собой.
Мужская клетка содержит F-фактор, или половой фактор, который контролирует синтез так называемых половых пилей, или F-пилей. Клетки, не содержа щие F-фактора, являются женскими; при получении F-фактора они превращаются в «мужские» и сами становятся донорами. F-фактор располагается в цитоплазме в виде кольцевой двунитчатой молекулы ДНК, т. е. является плазмидой. Молекула F-фак тора значительно меньше хромосомы и содержит гены, контро лирующие процесс конъюгации, в том числе синтез F-пилей. Трансдукция — передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту при участии бактериофага. Различают неспецифическую (общую) трансдукцию, при которой возможен перенос любого фрагмен та ДНК донора, и специфическую — перенос определен ного фрагмента ДНК донора только в определенные участки ДНК реципиента. Неспецифическая трансдукция обусловлена включе нием ДНК донора в головку фага дополнительно к геному фага или вместо генома фага (дефектные фаги). Специфическая транс дукция обусловлена замещением некоторых генов фага генами хромосомы клетки-донора. Фаговая ДНК, несущая фрагменты хромосомы клетки-донора, включается в строго определенные участки хромосомы клетки-реципиента. Трансформация заключа ется в том, что ДНК, выделенная из бактерий в свободной ра створимой форме, передается бактерии-реципиенту. При транс формации рекомбинация происходит, если ДНК бактерий род ственны друг другу.
33. Мутации у бактерий, их разновидности. Причины и механизмы возникновения. Мутагены. Фенотипическое проявление мутаций у бактерий.
Изменения последовательности азотистых оснований в ДНК.
Виды:
Выпадение (делеция) или вставка (инсерция) одного или нескольких оснований со сдвигом рамки считывания.
Замена пар оснований (транзиция) – без сдвига рамки (пурин на пурин, пиримидин на пиримидин).
Дупликация.
Дислокация.
Инверсия.
Причины мутации:
Внутренние. Мутации, обусловленные внутренними ошибками, называют спонтанными, их частота 1/10000000 азотистых оснований.
ошибки ДНК-полимеразы – 1 ошибка на 10 тысяч прочитанных нуклеотидов (1/10000).
Недостаточность механизма репарации, т.е. исправления ошибок. Система ферментов репараз в норме исправляет почти все ошибки ДНК-полимеразы.
Внешние, обусловлены воздействием внешних факторов, физических и химических, повышают вероятность частоты мутаций в десятки и сотни тысяч раз. Излучения, соли азотистой кислоты, акридиновые красители – эти факторы называют мутагенными, а вещества – мутагенами. Такой вид мутаций называется индуцированными.
Мутации могут быть летальными, сублетальными и нейтральными. Популяции микробов содержат многие миллиарды особей, среди которых имеются клетки с различными нейтральными мутациями, т.е. никак себя не проявляют.Однако при воздействии селективного фактора, например антибиотика, ранее нейтральные мутации становятся жизненно необходимыми, полезными, поэтому в новых условиях выживают и размножаются только те особи, которые имеют определенные мутации. Устойчивые к стрептомицину бактерии имели точковую мутацию в гене одного из рибосомальных белков. В исходной популяции этот признак остается нейтральным. Но если воздействовать на культуру стрептомицином, то выживают и размножаются потомки этих мутантов, остальные погибнут.
Таким образом, используя для лечения антибиотики, особенно в неправильных дозировках, человек сам селекционирует штаммы бактерий с лекарственной устойчивостью.
Классификация мутаций.
По происхождению: Спонтанные.
Индуцированные (химическими, физическими, биологическими факторами)
По уровню:
На молекулярном уровне – замена пар оснований, выпадение или всьавка пар оснований.
На генном и геномном уровне – делеция, инверсия, дупликация, дислокация.
На клеточном уровне – с приобретением признака, с утратой признака (прямые и обратные).
На уровне популяций.
По функции:
Летельные
Сублетальные
Нейтральные
По фенотипу:
Морфологические
Функциональные (резистегтность, ауксотрофность.
38. Методы стерилизации и аппаратура. Контроль качества стерилизации. Стерилизация предполагает полную инактивацию микробов в объектах, подвергающихся обработке.
Существует три основных метода стерили зации: тепловой, лучевой, химической. Тепловая стерилизация основана на чувстви тельности микробов к высокой температуре. При 60 "С и наличии воды происходит денату рация белка, деградация нуклеиновых кислот, липидов, вследствие чего вегетативные фор мы микробов погибают. Споры, содержащие очень большое количество воды в связанном состоянии и обладающие плотными оболоч ками, инактивируются при 160—170 °С. Для тепловой стерилизации применяют, в основном, сухой жар и пар под давлением. Стерилизацию сухим жаром осуществля ют в воздушных стерилизаторах. Стерилизуют сухим жаром лабораторную посуду и другие изделия из стекла, инстру менты, силиконовую резину, т. е. объекты, которые не теряют своих качеств при высокой температуре. Химическая стерилизация предполагает ис пользование токсичных газов: оксида этиле на
Эти вещества являются ал-килирующими агентами, их способность в присутствии воды инактивировать активные группы в ферментах, других белках, ДНК и РНК приводит к гибели микроорганизмов.
Стерилизация газами осуществляется в присутствии пара при температуре от 18 до 80 °С в специальных камерах
Лучевая стерилизация осуществляется либо с помощью гамма-излучения, либо с помо щью ускоренных электронов.
Лучевая стерилизация является альтернати вой газовой стерилизации в промышленных условиях, и применяют ее также в тех случаях, когда стерилизуемые предметы не выдержи вают высокой температуры
Еще одним способом стерилизации является фильтрование. Фильтрование с помощью раз личных фильтров (керамических, асбестовых, стеклянных), а в особенности мембранных уль трафильтров из коллоидных растворов нитроцеллюкозы
В настоящее время все более широкое при менение находят современные методы стери лизации, созданные на основе новых техно логий, с использованием плазмы, озона.
35 Плазмиды вирулентности, их значение в экспрессии факторов патогенности.
.Плазмиды — внехромосомные мобильные генетические структуры бактерий, представляющие собой замкнутые кольца двунитчатой ДНК. По размерам составляют 0,1—5 % ДНК хромосомы. Плаз миды способны автономно копироваться (реплицироваться) и существовать в цитоплазме клетки, поэтому в клетке может быть несколько копий плазмид. Плазмиды могут включаться (интег рировать) в хромосому и реплицироваться вместе с ней. Разли чают трансмиссивные и нетрансмиссивные плазмиды. Трансмиссив ные (конъюгативные) плазмиды могут передаваться из одной бактерии в другую.
Среди фенотипических признаков, сооб щаемых бактериальной клетке плазмидами, можно выделить следующие:
1) устойчивость к антибиотикам;
2) образование колицинов;
3) продукция факторов патогенности;
4) способность к синтезу антибиотических веществ;
5) расщепление сложных органических ве ществ;
6) образование ферментов рестрикции и модификации.
Термин «плазмиды» впервые введен американским ученым Дж. Ледербергом (1952) для обозначения полового фактора бак терий. Плазмиды несут гены, не обязательные для клетки-хозя ина, придают бактериям дополнительные свойства, которые в определенных условиях окружающей среды обеспечивают их вре менные преимущества по сравнению с бесплазмидными бакте риями.Некоторые плазмиды находятся под стро гим контролем. Это означает, что их реплика ция сопряжена с репликацией хромосомы так, что в каждой бактериальной клетке присутс твует одна или, по крайней мере, несколько копий плазмид.
Число копий плазмид, находящихся под слабым контролем, может достигать от 10 до 200 на бактериальную клетку. Для характеристики плазмидных реплико-нов их принято разбивать на группы совмести мости. Несовместимость плазмид связана с не способностью двух плазмид стабильно сохра няться в одной и той же бактериальной клетке. Несовместимость свойственна тем плазмидам, которые обладают высоким сходством репликонов, поддержание которых в клетке регули руется одним и тем же механизмом. Некоторые плазмиды могут обратимо встраиваться в бактериальную хромосому и функционировать в виде единого репликона. Такие плазмиды называются интегративными или эписомами.
У бактерий различных видов обнаружены R-плазмиды, несу щие гены, ответственные за множественную устойчивость к лекарственным препаратам — антибиотикам, сульфаниламидам и др., F-плазмиды, или половой фактор бактерий, определяющий их способность к конъюгации и образованию половых пилей, Ent-плазмиды, детерминирующие продукцию энтеротоксина.
Плазмиды могут определять вирулентность бактерий
39. Действие химических веществ на микроорганизмы. Асептика, антисептика, дезинфекция. Понятие о дезинфекции.
Действие химических веществ. Химические вещества могут ока зывать различное действие на микроорганизмы: служить источ никами питания; не оказывать какого-либо влияния; стимули ровать или подавлять рост. Химические вещества, уничтожающие микроорганизмы в окружающей среде, называются дезинфи цирующими. Антимикробные хи мические вещества могут обладать бактерицидным, вирулицидным, фунгицидным действием и т.д.
Химические вещества, используемые для дезинфекции, отно сятся к различным группам, среди которых наиболее широко представлены вещества, относящиеся к хлор-, йод- и бромсодержащим соединениям и окислителям.
Антимикробным действием обладают также кислоты и их соли (оксолиновая, салициловая, борная); щелочи (аммиак и его соли,
Стерилизация – предполагает полную инактивацию микробов в объектах, подвергшихся обработке. Дезинфекция — процедура, пре дусматривающая обработку загрязненного микробами предмета с целью их уничтоже ния до такой степени, чтобы они не смогли вызвать инфекцию при использовании дан ного предмета. Как правило, при дезинфек ции погибает большая часть микробов (в том числе все патогенные), однако споры и некоторые резистентные вирусы могут остаться в жизнеспособном состоянии.
Асептика – комплекс мер, направленных на предупреждение попадания возбудителя инфекции в рану, органы больного при операциях, лечебных и диагностических процедурах. Методы асептики применяют для борьбы с экзогенной инфекцией, источниками которой являются больные и бактерионосители.
Антисептика – совокупность мер, направленных на уничтожение микробов в ране, патологическом очаге или организме в целом, на предупреждение или ликвидацию воспалительного процесса.
40. Антибиотики, их происхождение и способы получения. Классификация антибиотиков по химическому составу.
Антибиотики — химиотерапевтические вещества, продуцируемые микроорганизмами, животными клетками, растениями, а также их производные и синтетические продукты, которые обладают избирательной спо собностью угнетать и задерживать рост микроорганизмов, а также подавлять развитие злокачественных новообразований
По спектру действия антибиотики делят на пять групп в зави симости от того, на какие микроорганизмы они оказывают воз действие. Кроме того, существуют противоопухолевые антибио тики, продуцентами которых также являются актиномицеты. Каж дая из этих групп включает две подгруппы: антибиотики широ кого и узкого спектра действия. Способы получения.
Существует три основных способа получе ния антибиотиков:
• биологический синтез (так получают при родные антибиотики — натуральные продук ты ферментации, когда в оптимальных ус ловиях культивируют микробы-продуценты, которые выделяют антибиотики в процессе своей жизнедеятельности);
• биосинтез с последующими химическими модификациями (так создают полусинтетичес кие антибиотики). Сначала путем биосинтеза получают природный антибиотик, а затем его первоначальную молекулу видоизменяют путем химических модификаций, например присо единяют определенные радикалы, в результате чего улучшаются противомикробные и фарма кологические характеристики препарата;
• химический синтез (так получают синте тические аналоги природных антибиотиков, например хлорамфеникол/левомицетин). Это вещества, которые имеют такую же структуру.
42. Побочное действие антибиотиков на организм человека (токсическое, аллергенное, иммунодепрессивное, дисбиоз и др.). Принципы рациональной антибиотикотерапии.
Осложнения со стороны макроорганизма
Наиболее частыми осложнениями анти микробной химиотерапии являются:
Токсическое действие препаратов. Как правило, развитие этого осложнения зависит от свойств самого препарата, его до зы, способа введения, состояния больного и проявляется только при длительном и систе матическом применении антимикробных химиотерапевтических препаратов, когда созда ются условия для их накопления в организме. Особенно часто такие осложнения бывают, когда мишенью действия препарата являются процессы или структуры, близкие по составу или строению к аналогичным структурам кле ток макроорганизма. Токсическому действию антимикробных препаратов особенно подвер жены дети, беременные, а также пациенты с нарушением функций печени, почекПредупреждение последствий такого рода осложнений состоит в назначении, по возможности, препаратов узкого спектра действия, сочетании лечения основного заболевания с противогрибковой терапией (например, назначением нистатина), витаминотерапей, применением эубиотиков и т. п.
Отрицательное воздействие на иммунную систему. К этой группе осложнений отно сят прежде всего аллергические реакции. Причинами развития гиперчувствительности может быть сам препарат, продукты его распа да, а также комплекс препарата с сывороточ ными белками. Возникновение такого рода осложнений зависит от свойств самого пре парата, от способа и кратности его введения, индивидуальной чувствительности пациента к препарату. Аллергические реакции разви ваются примерно в 10 % случаев и проявля ются в виде сыпи, зуда, крапивницы, отека Квинке. Относительно редко встречается та кая тяжелая форма проявления аллергии, как анафилактический шок. Такое осложнение чаще дают бета-лактамы
Предупреждение осложнений состоит в тща тельном сборе аллергоанамнеза и назначении препаратов
Эндотоксический шок (терапевтический). Это явление, которое возникает при лече нии инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями. Введение антибиотиков вызывает гибель
и разрушение клеток и вы свобождение больших количеств эндотокси на.
Взаимодействие с другими препаратами. Антибиотики могут способствовать потен цированию действия
Побочное воздействие на микроорганизмы. Применение антимикробных химиопрепа-ратов оказывает на микробы не только прямое угнетающее или губительное воздействие, но также может привести к формированию ати пичных
форм микробов
Широкое использование антимикробных ле карственных средств ведет также к форми рованию антибиотикозависимости (редко) и лекарственной устойчивости
43 Лекарственная устойчивость микробов, биохимические и генетические основы, проблемы преодоления лекарственной устойчивости.
.Природная устойчивость. Некоторые виды микробов природно ус тойчивы к определенным семействам антиби отиков или в результате отсутствия соответс твующей мишени (например, микоплазмы не имеют клеточной стенки, поэтому не чувстви тельны ко всем препаратам, действующим на этом уровне), или в результате бактериальной непроницаемости для данного препарата (на пример, грамотрицательные микробы менее проницаемы для крупномолекулярных соеди нений, чем грамположительные бактерии, так как их наружная мембрана имеет «маленькие» поры).
Приобретенная устойчивость. Приобретение резистентности — это биологическая закономерность, связанная с адаптацией микроорганизмов к условиям внешней среды
Генетические основы приобретенной резис тентности. Устойчивость к антибиотикам определяется и поддерживается генами резистентности (r-генами) и условиями, способствующими их распространению в микробных популяциях. Приобретенная лекарственная устойчивость может возникать и распространяться в попу ляции бактерий
в результате:• мутаций в хромосоме бактериальной клетки
Мутации возникают независимо от применения анти биотика, т. е. сам препарат не влияет на час тоту мутаций и не является их причиной, но служит фактором отбора.- трансмиссивных плазмид резис тентности (R-плазмид). Плазмиды резистен тности (трансмиссивные) обычно кодируют перекрестную устойчивость к нескольким семействам антибиотиков. -переноса
Обычно антимикробный эффект препарата осуществляется таким образом: агент должен связаться с бактерией и прой ти сквозь ее оболочку, затем он должен быть доставлен к месту действия, после чего пре парат взаимодействует с внутриклеточными мишенями.
Препаратам Реализация приобретенной устойчивости. Изменения в геноме бактерий приводят к тому, что меняются и некоторые свойства бактериальной клетки, в результате чего она становится устойчивой к антибактериальным
44. Понятие о биотехнологии. Основные направления, принципы биотехнологии и ее роль в медицине.
Биотехнология представляет собой область знаний, которая воз никла и оформилась на стыке микробиологии, молекулярной биологии, генетической инженерии, химической технологии и ряда других наук. Рождение биотехнологии обусловлено потреб ностями общества в новых, более дешевых продуктах для на родного хозяйства, в том числе медицины и ветеринарии, а также в принципиально новых технологиях. Биотехнология — это получение продуктов из био логических объектов или с применением биологических объек тов.
Клетки животных и растений, микробные клетки в процессе жизнедеятельности (ассимиляции и диссимиляции) образуют но вые продукты и выделяют метаболиты, обладающие разнообраз ными физико-химическими свойствами и биологическим дей ствием
Биотехнология использует эту продукцию клеток как сырье, которое в результате технологической обработки превращается в конечный продукт. С помощью биотехнологии получают мно жество продуктов, используемых в различных отраслях:
• медицине (антибиотики, витамины, ферменты, аминокисло ты, гормоны, вакцины, антитела
, компоненты крови, диаг ностические препараты, иммуномодуляторы, алкалоиды, пи щевые белки, нуклеиновые кислоты, нуклеозиды, нуклеоти-ды, липиды, антиметаболиты, антиоксиданты, противоглис тные и противоопухолевые препараты
отраслевые направ ления
В настоящее время в биотехнологии выделяют медико-фарма цевтическое, продовольственное, сельскохозяйственное и эколо гическое направления. В соответствии с этим биотехнологию можно разделить на медицинскую, сельскохозяйственную, про мышленную и экологическую. Медицинская в свою очередь под разделяется на фармацевтическую и иммунобиологическую, сель скохозяйственная — на ветеринарную и биотехнологию расте ний, а промышленная — на соответствующие
Инфекция,иммунитет.
1 Инфекция (инфекционный процесс) и инфекционная болезнь. Условия возникновения инфекционного процесса.
.Инфекция- совокупность всех биологических явлений и процессов, возникающих в организме при внедрении и размножении в нем микроорганизмов, результат взаимоотношений между макро- и микроорганизмом в виде адаптационных и патологических процессов в организме т.е. инфекционного процесса. Инфекционная болезнь- наиболее выраженная форма инфекционного процесса.В общебиологическом плане взаимоотношения микро- и макроорганизмов представляют собой симбиоз (т.е. сожительство), так как все живые существа сосуществуют в природе. Человек сосуществует на планете Земля с микроорганизмами, растениями, животными. Основными формами взаимодействия микро- и макроорганизмов (их симбиоза) являются: мутуализм, комменсализм, паразитизм. Мутуализм- взаимовыгодные отношения (пример- нормальная микрофлора).Комменсализм- выгоду извлекает один партнер (микроб), не причиняя особого вреда другому. Необходимо отметить, что при любом типе взаимоотношений микроорганизм может проявить свои патогенные свойства (пример- условно- патогенные микробы- комменсалы в иммунодефицитном хозяине). Паразитизм- крайняя форма антогонистического симбиоза, когда микроорганизм питается за счет хозяина, т.е. извлекает выгоду, нанося при этом вред хозяину.Микробный паразитизм носит эволюционный характер. В процессе перехода от свободноживущего к паразитическому типу жизнедеятельности микроорганизмы теряют ряд ферментных систем, необходимых для существования во внешней среде, но приобретают ряд свойств, обеспечивающих возможность паразитизма. Возникновение, течение и исход инфекци онного процесса определяются тремя группа ми факторов: 1) количественные и качествен ные характеристики микроба — возбудителя инфекционного процесса; 2) состояние макроорганизма, степень его восприимчивости к микробу; 3) действие физических, химичес ких и биологических факторов окружающей микроб и макроорганизм внешней среды,
Первые два биологических фактора являются непос редственными участниками инфекционного процесса, развивающегося в макроорганизме под действием микроба. При этом микроб определяет специфичность инфекционного процесса, а решающий интегральный вклад в форму проявления инфекционного процесса, его длительность, степень тяжести проявлений и исход вносит состояние макроорганизма, пре жде всего факторы его неспецифической ре зистентности
19. Иммунофлюоресцентный метод (РИФ, реакция иммунофлюоресценции, реакция Кунса) - метод выявления специфических Аг с помощью Ат, конъюгированных с флюорохромом. Обладает высокой чувствительностью и специфичностью.
Применяется для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний (идентификация возбудителя в исследуемом материале), а также для определения Ат и поверхностных рецепторов и маркеров лейкоцитов (иммунофенотипирование) и др. клеток.
Обнаружение бактериальных и вирусных антигенов в инфек ционных материалах, тканях животных и культурах клеток при помощи флюоресцирующих антител (сывороток) получило широкое применение в диагностической практике. Приготовление флюоресцирующих сывороток основано на спо собности некоторых флюорохромов (например, изотиоцианата флюоресцеина) вступать в химическую связь с сывороточными белками, не нарушая их иммунологической специфичности.
Различают три разновидности метода: прямой, непрямой, с комплементом. Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа.
Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов
обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки.
, после чего тщательно промывают изото ническим раствором хлорида натрия
Механизм. На предметном стекле готовят мазок из исследуемого ма териала, фиксируют на пламени и обрабатывают иммунной кроличьей сывороткой, содержащей антитела против антигенов возбудителя. Для образования комплекса антиген — антитело препарат помещают во влажную камеру и инкубируют при 37 °С в течение 15 мин
2 Роль микроорганизмов в инфекционных процессах. Патогенность и вирулентность. Факторы патогенности микроорганизмов .Инфекционное заболевание возникает не при каждом попадании патогенного микроорганизма в организм человека. Требуются определенные условия для реализации: - достаточная доза микроорганизмов (понятие о критических дозах). Чума- несколько бактериальных клеток, дизентерия- десятки, для некоторых возбудителей- тысячи- сотни тысяч; - естественный путь проникновения. Существует понятие о входных воротах инфекции, различных для различных групп инфекций- раневых, респираторных, кишечных, урогенитальных с различными механизмами заражения (глаза, кожа, дыхательные пути, желудочно- кишечный тракт, мочеполовая система и др.); - характеристики возбудителя, его болезнетворные свойства, способность преодолевать защитные механизмы хозяина; - состояние организма хозяина (наследственность- гетерогенность человеческой популяции по восприимчивости к инфекции, пол, возраст, состояние иммунной, нервной и эндокринной систем, образ жизни, природные и социальные условия жизни человека и др.).Патогенность – способность микробов вызывать инфекционный процесс у чувтвительного к ним человека. рулентность-степень патогенности связанная с живой,активно метаболизирующей клеткой возбудителя,которую суммарно можно выразить в условно принятых единицах:Ld-50?DLM/ерхности (колонизация), проникать в клетки (инвазия) и противостоять факторам защиты организма (агрессия).
Адгезия является пусковым механизмом инфекционного процесса. Под адгезией понимают способность микроорганизма адсорбироваться на чувствительных клетках с последующей колонизацией
Агрессия. Под агрессивностью понимают способность возбудителя противостоять защитным факторам макроорганизма
Экзотоксины продуцируют как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии.
Эндотоксины по своей химической структуре являются липополисахаридами, которые содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий и выделяются в окружающую среду при лизисе бактерий
3 Токсины бактерий, их природа и свойства. Анатоксины.
Важную роль в развитии инфекционного процесса играют токсины. По биологическим свойствам бактериальные токсины делятся на экзотоксины и эндотоксины. Экзотоксины продуцируют как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии. По своей химической структуре это белки Механизм действия белковых токсинов сводится к повреждению жизненно важных процессов в клетке: повышение проницаемости мембран, блокады синтеза белка и других биохимических процессов в клетке или нарушении взаимодействия и взаимокоординации между клетками. Экзотоксины являются сильными антигенами, которые и продуцируют образование в организме антитоксинов.полипептидную цепь
По степени связи с бактериальной клетки экзотоксины делятся условно на три класса.
• Класс А - токсины, секретируемые во внешнюю среду;
• Класс В - токсины частично секретируемые и частично связанные с микробной клеткой;
• Класс С - токсины, связанные и с микробной клеткой и попадающие в окружающую среду при разрушении клетки
Экзотоксины обладают высокой токсичностью
Эндотоксины по своей химической структуре являются липополисахаридами, которые содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий и выделяются в окружающую среду при лизисе бактерий. Эндотоксины не обладают специфичностью, термостабильны, менее токсичны, обладают слабой иммуногенностью.
По молекулярной организации экзотоксины делятся на две группы:
• экзотоксины состоящие из двух фрагментов;
• экзотоксины, составляющие единую
Анатоксины-получают из экзотоксинов при t-ре 39-40,добавляют ,0,3-0,4% формалина в течении 3-4нед.
4. Формы инфекций. Персистенция микробов. Понятие о рецидиве, реинфекции и суперинфекции Взаимоотношения между патогенными микробами и организмом выражаются в различных формах. Степень их проявления показывает соотношение сил между двумя борющимися организмами, т. е. силу действия патогенного микроба и ответную реакцию макроорганизма. Это соотношение сил прежде всего определяется социальными условиями, естественной сопротивляемостью и иммунологической защищенностью организма. По характеру проявления инфекции подразделяются на острые, хронические, скрытые (латентные) и вторичные. Такое деление инфекций на различные формы не является последовательным и обязательным для всех инфекционных заболеваний.Острые инфекции возникают сразу же после инкубационного периода как логическое продолжение в более активно реагирующем организме. В острой форме чаще протекают грипп, корь, скарлатина и другие болезни.Хронические инфекции. В некоторых случаях острая форма может перейти в хроническую ―• возбудитель остается в организме надолго (месяцами, годами). Эта форма характерна для туберкулеза, бруцеллеза, сифилиса, малярии, дизентерии. Такие больные являются источником инфекции, поэтому необходимо их выявлять, обязательно лечить, а при необходимости ― госпитализировать.Бессимптомная (инаппарантная) форма представляет собой острое заболевание, при котором отсутствуют симптомы. Инфекция завершается выздоровлением и освобождением организма от возбудителя.Латентные инфекции протекают скрыто, без клинических проявлений. При определенных условиях они могут перейти в явную форму болезни.Вторичные инфекции ―это новые инфекции, возникающие в ослабленном первичной болезнью организме. Например, при кори может развиваться воспаление легких, иногда с проявлением гнойного плеврита в виде осложнений.Реинфекции ― повторное заражение организма после выздоровления тем же видом микроба. Такое состояние возможно при гонорее.Суперинфекции ― повторное заражение организма (тем же микробом), еще не выздоровевшего от первичной инфекции.Рецидивы ― периодическое появление симптомов одного и того же заболевания (возвратный тиф, малярия и др.)Персистенция- способность патогенных видов микроорганизмов к длительному выживанию в организме хозяина.
5. Динамика развития инфекционных заболеваний.
Не существует ни одного инфекционного заболевания, которое началось бы тотчас вслед за попаданием микроба в организм.От момента проникновения микроба до появления первых признаков болезни всегда проходит некоторый промежуток времени, который называется инкубационным периодом.Длительность инкубационного периода различна: от нескольких часов (при чуме или гриппе), нескольких дней (при дизентерии, кори), нескольких недель (при сифилисе), нескольких месяцев ( при сывороточном гепатите) до нескольких лет (при лепре) Динамика развития инфекционной болезни.
Инфекционные заболевания характеризуются цикличностью, сменой периодов.1.Инкубационный период- от момента заражения до первых клинических признаков (процесс активного размножения возбудителя).2.Продромальный период (предвестников) характеризуется общими неспецифическими проявлениями- недомоганием, головной болью, повышением температуры и другими симптомами преимущественно токсического генеза.3.Период развития (разгара) болезни характеризуется типичными (специфическими) для данной инфекции клиническими проявлениями.4.Период реконвалесценции (выздоровления). В качестве исхода болезни может наступить выздоровление, развиться носительство или летальный исход.
6. Понятие об иммунитете. Виды иммунитета.
Иммунитет – это способ защиты организма от генетически чужеродных веществ – антигенов экзогенного и эндогенного происхождения, направленный на поддержание и сохранение гомеостаза, структурной и функциональной целостности организма, биологической (антигенной)индивидуальности каждого организма и вида в целом.
Различают несколько основных видов иммунитета.
Врожденный, иди видовой, иммунитет, он же наследственный, генетический, консти туциональный — это выработанная в про цессе филогенеза генетически закреплен ная, передающаяся по наследству невоспри имчивость данного вида и его индивидов к какому-либо антигену (или микроорганиз му), обусловленная биологическими осо бенностями самого организма, свойствами данного антигена, а также особенностями их взаимодействия
Видовой иммунитет может быть абсолют ным и относительным
Приобретенный иммунитет — это невос приимчивость к антигену чувствительного к нему организма человека, животных и пр., приобретаемая в процессе онтогенеза в результате естественной встречи с этим антигеном организма, например, при вак цинации.
Приобретенный иммунитет может быть ак тивным и пассивным. Активный иммунитет обусловлен активной реакцией, активным вовлечением в процесс иммунной системы при встрече с данным антигеном Пассивный иммуни тет у новорожденных детей создается имму ноглобулинами при плацентарной внутриут робной передаче антител от матери ребенку ииграет существенную роль в защите от многих детских инфекций в первые месяцы жизни ребенка
В инфекционной и неинфекционной пато логии и иммунологии для уточнения харак тера иммунитета в зависимости от природы и свойств антигена пользуются также такой терминологией: антитоксический, противо вирусный, противогрибковый, противобактериальный, противопротозойный, трансплан тационный, противоопухолевый и другие ви ды иммунитета.
7.Факторы естественной резистентности организма (защитные функции кожи, слизистых оболочек, нормальной микрофлоры и др.).Естественную резистентность (устойчивость) организма к огромному множе-тву окружающих его инфекционных гентов обеспечивает также целый ряд специфических факторов защиты, которые не распознают попадающие в организм различными путями вещества как снетически чужеродный материал, но в большинстве случаев действуют не менее эффективно, чем факторы приобретенного иммунитета, способствуя их удалению. Среди факторов естественной резистентности принято выделять:1) естественные барьеры (кожа и сли-пстые оболочки - поверхности, которые первыми вступают в контакт с возбудителями инфекций);2) систему фагоцитов, включающую гейтрофилы и макрофаги;3) систему комплементов (совокупность сывороточных белков), тесно взаимодействующую с фагоцитами;4) интерфероны;5) различные вещества, в основном белковой природы, участвующие прежде всего в реакциях воспаления; некоторые в них (лизоцим) обладают прямым бактерицидным действием. Кожа и слизистые- первая линия защиты против возбудителей. Кроме функции механического (анатомического) барьера кожа обладает бактерицидной активностью. Слизь, лизоцим, желудочный сок, слезная жидкость, слюна, деятельность мерцательного эпителия способствует защите слизистых оболочек.Нормальная микрофлора организма препятствует колонизации организма посторонней микрофлорой (конкуренция за субстраты, различные формы антагонизма, в т.ч. выделение антибиотических веществ, изменение рН и др.).
8 Фагоцитоз. История открытия (И.И.Мечников). Виды фагоцитирующих клеток. Стадии фагоцитоза. Незавершенный фагоцитоз.
. Фагоцитоз и система комплемента- вторая линия защиты организма против микроорганизмов, преодолевших поверхностные барьеры
Значение фагоцитирующих клеток для защиты организма впервые доказал И.И.Мечников, разработавший фагоцитарную теорию иммунитета.Стадии фагоцитоза.
Процесс фагоцитоза (поглощения твердофазного объекта) состоит из пяти стадий.
1.Активация (усиление энергетического метаболизма). Факторами активации и хемотаксиса являются бактериальные продукды (ЛПС, пептиды), компоненты комплемента (С3 и С5), цитокины и антитела.2.Хемотаксис.3.Адгезия.
4.Поглощение.5.Исход фагоцитозаВозможно три исхода фагоцитоза:
- завершенный фагоцитоз;- незавершенный фагоцитоз;
- процессинг антигенов.
Завершенный фагоцитоз- полное переваривание микроорганизмов в клетке- фагоците. Незавершенный фагоцитоз- выживание и даже размножение микроорганизмов в фагоците. Это характерно для факультативных и особенно - облигатных внутриклеточных паразитов.
9. Гуморальные факторы естественного иммунитета. Система комплемента. Пути активации комплемента – классический и альтернативный. Лизоцим, интерферон, их химический состав и функции.ГУМОРАЛЬНЫЕ ФАКТОРЫ
ЛИЗОЦИМ – термостабильный белок, типа муколитического фермента. Содержится в слезах, слюне, перитонеальной жидкости, плазме и сыворотке крови, в лейкоцитах, материнском молоке и др. ПРОДУЦИРУЕТСЯ моноцитами и тканевыми макрофагами, вызывает лизис многих бактерий, неактивен в отношении вирусов.
МЕХАНИЗМ – гидролиз связей между N-ацетилмурамовой кислотой и N-ацетилглюкозамином в ПС пептидогликанового слоя Б! стенки изменение ее проницаемости, диффузия содержимого в окр среду → гибель.
СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТА – многокомпонентная самособирающуюся систему белков сыворотки крови, к/я играет важную роль в поддержании гомеостаза. Активируется в процессе самосборки, т.е. последовательного присоединения к образующемуся комплексу отдельных фракций (их 9). Продуцируются они печени, мононуклеарными фагоцитами и содержатся в сыворотке крови в неактивном состоянии.
Процесс активации комплемента инициируется 2 путями:
Классический путь (1-4-2-3-5-6…). Инициирующим фактором является иммунный комплекс Аг-Ат, причем только содержащие Fc-фрагменты – IgG и IgM могут связывать С1-фракцию комплемента. При присоединении С1 к иммунному комплексу образуется Cl-эстераза → формируется энзиматически активный комплекс (С4b+С2а) – С3-конвертазой. Этот фермент расщепляет С3 на С3а и С3b. При взаимодействии субфракции С3b с С4 и С2 образуется пептидаза, действующая на С5. Если инициирующий иммунный комплекс связан с мембраной, то самособирающийся комплекс С1-4-2-3 обеспечивает фиксацию активированной фракции С5, а затем С6 и С7. Последние три компонента фиксируют С8 и С9. При этом С5а+С6+С7+С8+С9= мембраноатакующий комплекс, после его присоединения лизируется (гемолиз эритроцитов или бактериолизис).
Особенность альтернативного пути (D-B (P)) в том, что инициация может происходить без участия иммунного комплекса за счет ЛПС стенки гр–, поверхностных структур вирусов, иммунных комплексов, включающих IgA и IgE. В этом случае необходимо участие сывороточного белка (пропердин), который активен лишь в присутствии ионов Mg2+ и факторов В и D. Фактор D в активной форме – протеиназа, расщепляет фактор В с образованием фрагмента Вb, к/й в комплексе с С3b является С3-конвертазой.
10. Приобретенный иммунитет, его формы Приобретённый иммунитет (специфический) — невосприимчивость организма к инфекционным заболеваниям, возникающая в течение жизни организма. Различают естественный и искусственный приобретённый иммунитет. Обе эти формы иммунитета могут быть активными (организм сам вырабатывает Антитела после перенесённого заболевания или активной иммунизации (См. Иммунизация)) и пассивными (за счёт готовых антител, искусственно вводимых при пассивной иммунизации, например при введении противодифтерийной сыворотки или при проникновении их к плоду от матери через плаценту или к ребёнку через материнское молоко).
11 Антигены. Их характеристика. Антигенная структура бактериальной клетки.Антигены-в-ва любого происхождения,в том числе и микробного,которые способны вызывать в организме специфическую иммунную р-ию и принимать участие в ее осуществлении. Свойства антигенов, наряду с чужеродностью, определяет их иммуногенность- способность вызывать иммунный ответ и антигенность- способность (антигена) избирательно взаимодействовать со специфическими антителами или антиген- распознающими рецепторами лимфоцитов. Антиге ны бактериальной клетки. В структуре бактериальной клетки разли чают жгутиковые, соматические, капсульные и некоторые другие антигены. Жгутиковые, или Н-антигены, локализуют ся в локомоторном аппарате бактерий — их жгутиках. Они представляют собой эпитопы сократительного белка флагеллина.
Соматический, или О-антиген, связан с клеточной стенкой бактерий. Его основу со ставляют ЛПС. О-антиген проявляет термос табильные свойства — он не разрушается при длительном кипячении
Капсулъные, или К-антигены, располагаются на поверхности клеточной стенки. Встречаются у бактерий, образующих капсулу.
12. Иммунная система организма. Иммунокомпетентные клетки, их основные функции.
Структура иммунной системы. Иммунная система представлена лимфоидной тканью. Это спе циализированная, анатомически обособленная ткань, разбросан ная по всему организму в виде различных лимфоидных образо ваний. К лимфоидной ткани относятся вилочковая, или зобная, железа, костный мозг, селезенка, лимфатические узлы (группо вые лимфатические фолликулы, или пейеровы бляшки, минда лины, подмышечные, паховые и другие лимфатические образо вания, разбросанные по всему организму), а также циркулиру ющие в крови лимфоциты. Лимфоидная ткань состоит из ретикулярных клеток, составляющих остов ткани, и лимфо цитов, находящихся между этими клетками
Кооперация иммунокомпетентных клеток. Иммунная реакция организма может иметь различный характер, но всегда начинается с захвата антигена макрофагами крови и тканей или же со связывания со стромой лимфоидных органов. Нередко антиген адсорбируется также на клетках паренхиматозных органов. В макрофагах он может полностью разрушаться, но чаше подвергается лишь частичной деградации. В частности, большинство антигенов в лизосомах фагоцитов в печение часа подвергается ограниченной денатурации и протеолизу. Оставшиеся от них пептиды (как правило, два-три остатка аминокислот) комплексируются с экспрессированными на внешней мембране макрофагов молекулами МНС.
Макрофаги и все другие вспомогательные клетки, несущие на внешней мембране антигены, называются антигенпрезентирующими, именно благодаря им Т- и В-лимфоциты, выполняя функцию презентации, позволяют быстро распознавать антиген.
Иммунный ответ в виде антителообразования происходит при распознавании В-клетками антигена, который индуцирует их пролиферацию и дифференциацию в плазмоцит.
Цитокины. Все процессы кооперативных взаимодействий им-мунокомпетентных клеток, независимо от характера иммунного ответа, обусловливаются особыми веществами с медиаторными свойствами, которые секретируются Т-хелперами, Т-киллерами, мононуклеарными фагоцитами и некоторыми другими клетками, участвующими в реализации клеточного иммунитета.
13. Антитела (иммуноглобулины), их структура. Классы иммуноглобулинов, их свойства и функции.Антитела - специфические белки гамма- глобулиновой природы, образующиеся в организме в ответ на антигенную стимуляцию и способные специфически взаимодействовать с антигеном (in vivo, in vitro). В соответствии с международной классификацией совокупность сывороточных белков, обладающих свойствами антител, называют иммуноглобулинами.Уникальность антител заключается в том, что они способны специфически взаимодействовать только с тем антигеном, который вызвал их образование.
Иммуноглобулины ( Ig ) разделены в зависимости от локализации на три группы:
- сывороточные (в крови);
- секреторные ( в секретах- содержимом желудочно- кишечного тракта, слезном секрете, слюне, особенно- в грудном молоке) обеспечивают местный иммунитет (иммунитет слизистых);
- поверхностные ( на поверхности иммунокомпетентных клеток, особенно В- лимфоцитов).
Характеристика основных классов иммуноглобулинов.
Ig G. Мономеры, включают четыре субкласса. Концентрация в крови- от 8 до 17 г/л, период полураспада- около 3- 4 недель. Это основной класс иммуноглобулинов, защищающих организм от бактерий, токсинов и вирусов. В наибольшем количестве IgG- антитела вырабатываются на стадии выздоровления
после инфекционного заболевания
IgM. Молекула этого иммуноглобулина представляет собой полимерный Ig из пяти субъединиц, соединенных дисульфидными связями и дополнительной J- цепью, имеет 10 антиген- связывающих центровIgM способны агглютинировать бактерии, нейтрализовать вирусы, активировать комплемент, активизировать фагоцитоз, связывать эндотоксины грамотрицательных бактерий. IgM обладают большей, чем IgG авидностью Основная роль IgA- обеспечение местного иммунитета слизистых. Они препятствуют прикреплению бактерий к слизистым, обеспечивают транспорт полимерных иммунных комплексов с IgA, нейтрализуют энтеротоксин, активируют фагоцитоз и систему комплемента.IgE. Представляет мономер, в сыворотке крови находится в низких концентрациях. Основная роль- своими Fc- фрагментами прикрепляется к тучным клеткам (мастоцитам) и базофилам и опосредует реакции гиперчувствительности немедленного типа. К IgE относятся “антитела аллергии”- реагины. иммунодиффузии в геле (по Манчини)- разновидность реакции преципитации и ИФА.IgD. Мономеры IgD обнаруживают на поверхности развивающихся В- лимфоцитов, в сыворотке находятся в крайне низких концентрациях. Их биологическая роль точно не установлена. Полагают, что IgD участвуют в дифференциации В-клеток, способствуют развитию антиидиотипического ответа, участвуют в аутоиммунных процессах.
С целью определения концентраций иммуноглобулинов отдельных классов применяют несколько методов, чаще используют метод радиальной.
14. Иммунный ответ организма. Кооперация иммунокомпетентных клеток в иммунном ответе.
Патрульные макрофаги, обнаружив в крови чужеродные белки (клетку), предъявляют его Т-хелперам (происходит процессинг АГ макрофагами). Т-хелперы передают АГ информацию на В-лимфоциты, которые начинают бласттрансформироваться и пролиферировать, выделять нужный иммуноглобулин.
Меньшая часть Т-хелперов (индукторы) побуждают макрофагов и макрофаги начинают продуцировать интерлейкин I – активатор основной части Т-хелперов. Те, возбуждаясь, в свою очередь объявляют всеобщую мобилизацию, начиная бурно выделять интерлейкин II (лимфокин), который ускоряет пролиферацию и Т-хелперов, и Т-киллеров. Последние имеют специальный рецептор именно к тем белковым детерминантам, которые были предъявлены патрульными макрофагами.
Т-киллеры устремляются к клеткам-мишеням и разрушают их. Одновременно интерлейкин II способствует росту и созреванию В-лимфоцитов, которые превращаются в плазматические клетки. Тот же интерлейкин II вдохнет жизнь в Т-супрессоры, которые замыкают общую реакцию иммунного ответа, останавливая синтез лимфокинов. Размножение иммунных клеток прекращается, но остаются лимфоциты памяти.
Кооперация клеток в иммунном ответе.
В формировании иммунного ответа включаются все звенья иммунной системы- системы макрофагов, Т- и В- лимфоцитов, комплемента, интерферонов и главная система гистосовместимости.
В кратком виде можно выделить следующие этапы.
1. Поглощение и процессинг антигена макрофагом.
2. Представление процессированного антигена макрофагом с помощью белка главной системы гистосовместимости класса 2 Т- хелперам.
3. Узнавание антигена Т- хелперами и их активация.
4. Узнавание антигена и активация В- лимфоцитов.
5. Дифференциация В- лимфоцитов в плазматические клетки, синтез антител.
6. Взаимодействие антител с антигеном, активация систем комплемента и макрофагов, интерферонов.
7. Представление при участии белков МНС класса 1 чужеродных антигенов Т- киллерам, разрушение инфицированных чужеродными антигенами клеток Т- киллерами.
8. Индукция Т- и В- клеток иммунной памяти, способных специфически распознавать антиген и участвовать во вторичном иммунном ответе ( антигенстимулированные лимфоциты).
15. Противовирусный иммунитет. Основой противовирусного иммунитета является клеточный иммунитет. Клетки-мишени, ин фицированные вирусом, уничтожаются цитотоксическими лим фоцитами, а также NK-клетками и фагоцитами, взаимодействую щими с Fc-фрагментами антител, прикрепленных к вирусспецифическим белкам инфицированной клетки. Проти вовирусные антитела способны нейтрализовать только внеклеточно расположенные вирусы, как и факторы неспецифическо го иммунитета — сывороточные противовирусные ингибиторы. Такие вирусы, окруженные и блокированные белками организ ма, поглощаются фагоцитами или выводятся с мочой, потом и др. (так называемый «выделительный иммунитет»). Интерфероны усиливают противовирусную резистентность, индуцируя в клет ках синтез ферментов, подавляющих образование нуклеиновых кислот и белков вирусов. Кроме этого, интерфероны оказывают иммуномодулирующее действие, усиливают в клетках экспрес сию антигенов главного комплекса гистосовместимости (МНС). Противовирусная защита слизистых оболочек обусловлена сек реторными IgA, которые, взаимодействуя с вирусами, препятст вуют их адгезии на эпителиоцитах.
16. Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Феномен флоккуляции. Получение антитоксических сывороток. Измерение их активности. В основе этой реакции лежит способность специфической ан титоксической сыворотки нейтрализовать экзотоксин. Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувст вительные клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами, т. е. их нейтрализацией.Реакцию нейтрализации (РН) проводят путем введения смеси антиген—антитело животным или в чувствительные тест-объекты (культуру клеток, эмбрионы). При отсутствии у животных и тест-объектов повреждающего действия микро организмов или их антигенов, токсинов говорят о нейтрализу ющем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о спе цифичности взаимодействия комплекса антиген—антитело.
Для прове дения реакции исследуемый материал, в котором предполагается наличие экзотоксина, смешивают с антитоксической сывороткой, выдерживают в термостате и вводят животным (морским свин кам, мышам). Контрольным животным вводят фильтрат исследу емого материала, не обработанный сывороткой. В том случае, если произойдет нейтрализация экзотоксина антитоксической сыво роткой, животные опытной группы останутся живыми. Конт рольные животные погибнут в результате действия экзотоксина.
17. Серологические реакции. Их классификация, механизм, компоненты, применение.
Иммунные реакции используют при диа гностических и иммунологических исследо ваниях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют серологические методы, т. е. методы изучения антител и антигенов с помо щью реакций антиген—антитело, определяе мых в сыворотке крови и других жидкостях, а также тканях организма.
Обнаружение в сыворотке крови боль ного антител против антигенов возбудите ля позволяет поставить диагноз болезни. Серологические исследования применяют также для идентификации антигенов микро бов, различных биологически активных ве ществ, групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, иммунных комплексов, рецепто ров клеток и др.
При выделении микроба от больного про водят идентификацию возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунных диагностических сывороток, т. е. сывороток крови гипериммунизированных животных, содержащих специфические ан титела. Это так называемая серологическая идентификация микроорганизмов.
В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции агглютинации, преци питации, нейтрализации, реакции с участи ем комплемента, с использованием меченых антител и антигенов (радиоиммунологичес кий, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный методы). Перечисленные реакции различаются по регистрируемому эффекту и технике постановки, однако, все они осно ваны на реакции взаимодействия антигена с антителом и применяются для выявления как антител, так и антигенов. Реакции иммуните та характеризуются высокой чувствительнос тью и специфичностью.
18. Реакции иммунитета, применяющиеся при диагностике вирусных инфекций (реакция вирусонейтрализации, торможения гемагглютинации, подавления гемадсорбции и др.).
Реакции иммунитета – это взаимодействие антигена с продуктами иммунного ответа. В любой реакции иммунитета выделяют две фазы:
1) специфическую – обусловлена взаимодействием антигена с антителом и образованием комплекса АГ – АТ;
2) неспецифическую.
Все реакции иммунитета делятся на:
1) простые; участвуют два компонента (антиген и антитело);
2) сложные; участвуют три компонента и более (антиген, антитело, комплемент и т. д.).
Выделяют также:
1) прямые; результат учитывается визуально без специальных индикаторных систем;
2) непрямые; для учета требуются специальные системы индикации. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) - метод идентификации вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного, основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов препаратом, содержащим вирус, в присутствии иммунной к нему сыворотки крови.
Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде, подавлении ан тигенов вирусов антителами иммунной сы воротки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. РТГА применяют для диагностики мно гих вирусных болезней, возбудители которых (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещево го энцефалита и др.) могут агглютинировать эритроциты различных животных.
20. Иммунодефициты — это нарушения нор мального иммунного статуса, обусловлен ные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа.Первичные, или врожденные, иммунодефициты.
В качестве первичных иммунодефицитов выделяют такие состояния, при которых нарушение иммунных гуморальных и кле точных механизмов связано с генетическим блоком, т. е. генетически обусловлено неспо собностью организма реализовывать то или иное звено иммунологической реактивности.Причинами врожден ных иммунодефицитов могут быть удвоение хромосом, точечные мутации, дефект фер ментов обмена нуклеиновых кислот, генети чески обусловленные нарушения мембран, повреждения генома в эмбриональном пе риоде и дрПроявляться первичные иммунодефициты могут в виде недостаточности фагоцитоза, системы комп лемента, гуморального иммунитета
Вторичные, или приобретенные, иммунодефициты
Вторичные иммунодефициты в отличие от первичных развиваются у лиц с нормально функционировавшей от рождения иммунной системой. Они формируются под воздействи ем окружающей среды на уровне фенотипа и обусловлены нарушением функции иммунной системы в результате различных заболеваний или неблагоприятных воздействий на орга низмВторичные иммунодефицита могут быть: после перенесенных инфекций (особенно ви русных) и инвазий (протозойные и гельминтозы); при ожоговой болезни;
Иммунодефициты, как первичные, так и особенно вторичные, широко распростране ны среди людей. Они являются причиной проявления многих болезней и патологичес ких состояний, поэтому требуют профилак тики и лечения с помощью иммунотропных препаратов.
21. Вакцинопрофилактика инфекционных заболеваний. Классификация вакцин. Побочные реакции и осложнения.
Вакцина — медицинский препарат, предназначенный для создания иммунитета к инфекционным болезням.
Классификации вакцин:
1.Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий. Примером таких вакцин являются БЦЖ и вакцина против натуральной оспы человека, в качестве которой используется непатогенный для человека вирус оспы коров.
2.Инактивированные (убитые) вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своём составе проективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины). В препараты иногда добавляют консерванты и адьюванты. Побочные эффекты и осложнения отличаются для различных вакцин. Достаточно часто встречаются такие реакции, как умеренное повышение температуры, болезненность в месте инъекции. У детей часто наблюдается продолжительный плач, ухудшение аппетита. Возможны аллергические реакции,Некоторые живые вакцины вызывают реакции, напоминающие лёгкое течение заболеваний. Например, прививка от кори, краснухи и эпидемического паротита часто (5 %) вызывает умеренную сыпь.
22. Иммуные сыворотки. Классификация. Получение, применение, осложнения при использовании и их предупреждение.
Иммунные сыворотки: иммунологические препараты на основе антител.
1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыво ротки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.
2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к воз будителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.
3.Противовирусные сыворотки (коревая, гриппоз ная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.
Иммунные сыворотки получают путем гипе риммунизации животных (ло шади) специфическим антигеном (анатоксином, бактериальными или вирусными культурами и их антигенами) с пос ледующим, в период максимального антителообразования, выделением из крови иммунной сыворотки. Иммунные сы воротки, полученные от животных, называют гетерогенными, так как они содержат чужерод ные для человека сывороточные белки
Иммунные сыворотки создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для ле чения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета.
22Препараты иммуноглобулинов (гомологичные, гетерологичные), их получение и применение Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки- иммуноглобулины.
Иммуноглобулины, иммунные сыворотки подразделяют на:
1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыво ротки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.
2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к воз будителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.
3.Противовирусные сыворотки (коревая, гриппоз ная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.
Иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для ле чения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета.
При необходимости экстренного создания иммунитета, для лечения развивающейся инфекции применяют иммуноглобулины, содержащие готовые антитела.
24 Гиперчувствительность немедленного типа (В – зависимая). Механизм развития. Меры предупреждения анафилаксии. Диагностика Иммунный ответ – это механизм защиты, но в ряде случаев он м.б. причиной патологических процессовВыделяют 4 основных типа аллергических реакций. Тип 1. Анафилактические реакции - немедленного типа, атопические, реагиновые. Они вызываются взаимодействием поступающих извне аллергенов с антителами класса IgE, фиксированными на поверхности тучных клеток и базофилов. Реакция сопровождается активацией и дегрануляцией клеток- мишеней с высвобождением медиаторов аллергии (главным образом гистамина). Примеры реакций типа 1 - анафилактический шок, атопическая бронхиальная астма, поллиноз.
Тип 2. Цитотоксические реакции. В них участвуют цитотоксические антитела (IgM и IgG), которые связывают антиген на поверхности клеток, активируют систему комплемента и фагоцитоз, приводят к развитию антитело- зависимого клеточно- опосредованного цитолиза и повреждения тканей. Пример- аутоиммунная гемолитическая анемия.
Тип 3. Реакции иммунных комплексов. Комплексы антиген- антитела откладываются в тканях (фиксированные иммунные комплексы), активируют систему комплемента, привлекают к месту фиксации иммунных комплексов полиморфноядерные лейкоциты, приводят к развитию воспалительной реакции. Примеры- острый гломерулонефрит, феномен Артюса
Лабораторная диагностика аллергии проводится с учетом механизмов. Для этого пытаются определить преимущественный тип аллергии, а также определить аллерген.
Для этого при реакциях анафилактического типа ставят кожно-аллергические пробы с аллергенами из стандартных наборов: пылевых, пыльцовых, пищевых, лекарственных и др. На месте введения через 20–30 мин возникает покраснение, может образоваться волдырь..
При аллергических реакциях II типа основные методы лабораторной диагностики применяются с целью выявления в сыворотке крови антиэритроцитарных, антилейкоцитарных и антитромбоцитарных АТ, оказывающих цитолитическое действие в присутствии комплемента на соответствующие клетки-«мишени».
При аллергических реакциях III типа основное внимание уделяется методам выявления ЦИК в крови или фиксированных в тканях органа-«мишени».
25Гиперчувствительность замедленного действия (Т – зависимая). Механизм развития. Диагностика.
Гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) - клеточно- опосредованная гиперчувствительность или гиперчувствительность типа 4, связанная с наличием сенсибилизированных лимфоцитов. Эффекторными клетками являются Т- клетки ГЗТ, имеющие CD4 рецепторы в отличие от CD8+ цитотоксических лимфоцитов. Сенсибилизацию Т- клеток ГЗТ могут вызывать агенты контактной аллергии (гаптены), антигены бактерий, вирусов, грибов, простейших. Близкие механизмы в организме вызывают антигены опухолей в противоопухолевом иммунитете, генетически чужеродные антигены донора- при трансплантационном иммунитете.
Т- клетки ГЗТ распознают чужеродные антигены и секретируют гамма- интерферон и различные лимфокины, стимулируя цитотоксичность макрофагов, усиливая Т- и В- иммунный ответ, вызывая возникновение воспалительного процесса. Лабораторная диагностика. Для изучения клеточно-опосредованной сенсибилизации при аллергии IV типа используют кожные пробы с предполагаемыми аллергенами, результаты которых учитывают через 24–48ч, а также используют ряд тестов: РБТЛ, РТММ.
27.иммунный статус-это комплекс клинико-лабораторных показателей,отражающих структурно-функциональное состояние иммунной с-мы индивида в данный период времени.Методы оценки им.статуса.материал для исследования: кровь с добавлением 20-25ЕД-гепарина,взятая у обследуемых из вены утром натощак.Выделение лимфоцитов: проводится с помощью фиколл-верографического метода.
4. Нейсcерии – грамотрицательные аэробные кокки, относящиеся к роду Neisseria, включающему 8 видов: Neisseria meningitides, Niesseria gonorrhoeae, N. flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca.
Морфология: неподвижные неспорогенные грамотрицательные диплококки, образующие капсулу, полиморфны – встречаются в виде мелких или крупных форм а так же в виде полочек, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями
Культуральные свойства: аэробы, хемоорганотрофы; для роста требуют свежеприготовленные влажные среды с добавлением нативных белков крови, сыворотки или асцитической жидкости
На плотных питательных средах через 24ч, при содержании протеина II образуют слегка мутные бесцветные колонии, не содержащие его образуют круглые прозрачные колонии в виде капель
росы, на жидких питательных средах растут диффузно и образуют плёнку, через несколько часов оседающую на дно.
Резистентность: очень неустойчивы в окружающей среде, чувствительны к действию антисептиков, высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклину, стрептомицину. Способны к утилизации пенициллинов при приобретении бета-лактамаз.
Патогенез: Входные ворота – цилиндрический эпителий мочеполовых путей. Гонококки прикрепляются к эпителию посредством поверхностных белков, вызывают гибель и слущивание клеток, захватываются клетками, где размножаются,
Иммунитет – почти отсутствует.
Микробиологическая диагностика:
Бактериоскопическое исследование: Материалом для исследования служит гнойное отделяемое из уретры, влагалища, примой кишки, глотки, сыворотки крови. Готовят мазки, окраска по Граму,
грам+ диплококки бобовидной формы., находятся внутри лейкоцитов. Положительный диагноз ставится при острой форме гонореи до применения антибиотиков.
Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри со специальными питательными средами — КДС, сывороточным агаром. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением в определенной концентрации казеина, дрож жевого экстракта и сыворотки крови.
Серодиагностика. В некоторых случаях ставят РСК Борде — Жангу. В качестве антигена используют взвесь убитых гонокок ков. Реакция Борде—Жангу имеет вспомогательное значение при диагностике гонореи. Она положительна при хронической и осложненной гонорее.
Лечение: антибиотикотерапия (пенициллин, тетрациклин, канамицин), иммунотерапия .
Раздел 3.Частная микробиолгия.
1 Стафилококки.Семейству Мicrococcacae, роду Staphylococcus. К данному роду относятся 3 вида: S.aureus, S.epidermidis и S.saprophyticus.
Морфологические свойства: Все виды стафилококков представляют собой округлые клетки. В мазке располагаются не симметричными гроздьями. Клеточная стенка содержит большое количество пептидогликана
. Грамположительны. Спор не образуют, жгутиков не имеют. У некото рых штаммов можно обнаружить капсулу. Могут образовывать L-формы.
Культуральные свойства: Стафилококки — факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых средах. На плотных средах образуют гладкие, выпуклые колонии с различным пигментом, не име ющим таксономического значения. Могут расти на агаре с высоким содержанием NaCl. Обладают сахаролитичес-
кими и протеолитическими ферментами
Стафилококки пластичны, быстро приобретают устой чивость к антибактериальным препаратам
Факторы патогенности: Условно – патогенные. Микрокапсула защищает от фагоцитоза, способствует адгезии микробов
Резистентность. Устойчивость в окружа ющей среде и чувствительность к дезинфектантам обычная
Патогенез. Источником инфекции стафилококков - человек и некоторые виды животных
). Механизмы передачи — респираторный, контактно-бы товой, алиментарный.
Иммунитет: Постинфекционный – клеточно-гуморальный, нестойкий, ненажряженный
Микробиологическая диагностика. Материал для исследования – гной, кровь, моча, мокрота, испражнения
Бактериоскопический метод: из исследуемого материала (кроме крови) готовят мазки, окрашивают по Граму. Наличие грам «+» гроздевидных кокков, располагающихся в виде скоплений.
Бактериологический метод: Материал засевают петлей на чашки с кровяным и желточно-солевым агаром для получения изолированных
колоний.
Серологический метод: в случаях хронической инфекции, определяют титр анти-а-токсина в сыворотке крови больных.
Лечение и профилактика. Антибиотики широкого спектра действия
вакцинация стафилококковым анатоксином.
2.Стрептококки. роду Streptococcus. Род состоит из более чем 20 видов
Морфологические и культуральные свойства. Стрептококки — это мелкие шаровидные клетки, располагающиеся цепочками, грамположительные, спор не образуют, неподвижные.
Большинство штаммов образует капсулу, состоящую из гиалуроновой кисло ты
На плотных средах обычно образуют мелкие серые колонии.
На жидких средах стрептококки обычно дают придонный рост. Стрептококки — факультативные анаэробы. По характеру роста на кровяном агаре они делятся на культуральные варианты: а-гемолитические (зеленящие), в-гемолитические (полный гемолиз) и негемолитические.
Резистентность. Чувствительны к физи ческим и химическим факторам окружающей среды, могут длительно сохранять жизнеспособ ность при низких температурах. Устойчивость к антибиотикам приобретается медленно
Патогенность. На основе полисахаридного антигена делятся на серогруппы (А, В, С...О). Стрептококки группы А вырабатывают более 20 веществ, обладающих антигенностью и агрессивностью. На поверхности клетки имеется белковый антиген М, который тесно связан с вирулентностью (препятствует фагоцитозу). Этот белок определяет типовую принадлежность стрептококков.
Иммунитет: постинфекционный нестойкий,
Микробиологическая диагностика. Материал для исследования – гной, моча, кровь, мокрота.
Бактериоскопический метод: окраска по Граму мазков из патологического ма териала. При положительном результате обнаруживают цепочки грам «+» кокков.
Бактериологический метод: Исследуемый материал за севают на кровяной агар в чашку Петри.
Серодиагностика: устанавливают наличие специфических антигенов в крови больного с помощью РСК или реакции преципитации.
Лечение: Антибиотики широкого спектра действия (пенициллины, устойчивые к в-лактамазе)
Профилактика: специфической – нет. Неспецифическая - выявление, лечение больных.
3. Менингококковая инфекция — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением слизистой оболочки носоглот ки, оболочек головного мозга и септицемией; антропоноз.
Таксономия: возбудитель Neisseria meningitidis (менингококк) относится к отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.
Морфологические свойства. Мелкие диплококки. Характерно расположение в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Не подвижны, спор не образуют, грамотрицательные, имеют пили, капсула непостоянна.
Культуральные свойства. Относятся к аэробам, культивируются на средах, содержащих нормальную сыворотку или дефибринированную кровь лошади, растут на искусственных питательных средах, содержащих спе циальный набор аминокислот. Элективная среда должна содер жать ристомицин. Повышенная концентрация СО2 в атмосфере стимулирует рост менингококков. Факторы патогенности: капсула – защищает от фагоцитоза. AT, образующиеся к полисахаридам капсулы, проявляют бак терицидные свойства. Токсические проявле ния менингококковой инфекции обусловле ны высокотоксичным эндотоксином.
Резистентность. Малоустойчив во внешней среде, чувствителен к высушиванию и охлаждению. В течение нескольких минут погибает при повышении температуры более 50 °С и ниже 22 °С. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и сульфамидам.
Эпидемиология, патогенез и клиника. Чело век — единственный природный хозяин менингококков.
Механизм передачи инфекции от больного или носителя воз душно-капельный.Инкубационный период составляет 1—10 дней (чаще 2—3 дня.Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерали зованных формах болезни стойкий, напряженный.
Микробиологическая диагностика: Материал для исследо вания - кровь, спинномозговая жидкость, носогло точные смывы.
Бактериоскопический метод – окраска мазков из ликвора и крови по Граму для определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и их количества.
Бактериологический метод – выделение чистой культуры. Носоглоточная слизь, кровь, ликвор. Посев на плотные, полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь.
Серологический метод – используют для обнаружения растворимых бактериальных АГ в ликворе,
Лечение. В качестве этиотропной терапии используют ан тибиотики - бензилпенициллин (пенициллины, левомицетин
Профилактика. Специфическую профилактику проводят менингококковой химической полисахаридной вакциной серогруппы
А.Неспецифическая профилактика сводится к соблюдению санитарно-противоэпидемического режима в дошкольных, школь ных учреждениях .
5.эшериии. Эшерихиозы - инфекционные болезни, возбудителем которых является Escherichia coli
E.coli — представителями нормальной микрофлоры толстой киш ки.
Морфологические и тинкториальные свойства. E.coli — это мелкие грамотрицательные палочки с закругленными концами. В мазках они располагаются беспорядочно, не образуют спор, перитрихи. Некоторые штаммы имеют микрокапсулу, пили.
Культуральные свойства. Кишечная палочка — факультативный анаэроб, оптим. темп. для роста - 37С. E.coli не требовательна к питательным средам и хоро шо растет на простых средах, давая диффузное помутнение на жидких и образуя колонии на плотных сре дах. Для диагностики эшерихиозов используют дифференциально-диагности ческие среды с лактозой — Эндо, Левина.
Антигенная структура. Кишечная палочка обладает со матическим О-, жгутиковым Н и поверхностным К -антигена ми. О-антиген имеет более 170 вариантов, К-антиген — более 100, Н-антиген — более 50.
патогенности. Образует эндотоксин,обладающий энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием.
Эпидемиология. Источник энтеральных эшерихиозов - больные люди. Механизм заражения — фекально-оральный, пути передачи—алиментарный, контактно-бытовой.
Патогенез. Полость рта. Попадает в тонкую кишку, адсорбируется в клетках эпителия с помощью пилей и белков наружной мембраны. Бактерии размножаются, погибают, осво бождая эндотоксин
Клиника. Инкубационный период составляет 4 дн. Бо лезнь начинается остро, с повышения температуры тела, болей в животе поноса, рвоты.
Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет не прочный и непродолжительный.
Микробиологическая диагностика. Основной метод — бак териологический. Определяют вид чистой культуры (грамотрицательные палочки,
6. Брюшной тиф и паратифы А и В — острые кишечные инфек ции, характеризующиеся поражением лимфатического аппарата
ки шечника,Их возбудителями явля ются соответственно Salmonella typhi, Salmonella paratyphi А и Salmonella schottmuelleri
Морфологические и тинкториальные свойства. Сальмонеллы — мелкие грамотрицательные палочки с закругленными конца ми. В мазках располагаются беспорядочно. Не образуют спор, имеют микрокапсулу, перитрихи.Культуральные свойства. Сальмонеллы — факульта тивные анаэробы. Оптимальными для роста являются темпера тура 37С. Растут на простых питательных средах. Элективной средой для сальмонелл является желчный бульон.Антигенные свойства и классификация. Сальмо неллы имеют О- и H-антигены, состоящие из ряда фракций.
Факторы патогенности. Сальмонеллы образуют эндо токсин, обладающий энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием. С белками наружной мембраны связаны адгезивные свойства, наличие микрокапсулы Резистентность. Сальмонеллы довольно устойчивы к низ кой т-ре. Очень чувствительны к дезинфицирующим веществам, высокой температуре, ультрафиолетовым лучам.В пищевых продуктах (мясе, молоке) сальмонеллы могут не только долго сохраняться, но и размножатьсяЭпидемиология. Брюшной тиф и паратиф А — антропонозные инфекции; источником заболевания являются больные люди и бактерионосители. Источником паратифа В могут быть также сельскохозяйственные животные. Механизм заражения фекально-оральный. Среди путей передачи преобладает водный.
Патогенез. Возбудители попадают в организм через рот, достигают тонкой кишки, где в ее лимфатических образованиях размножаются и затем попадают в кровь (стадия бактериемии). С током крови они разносятся по всему организму, внедряясь в паренхиматозные органы (селезенку, печень, почки, костный мозг).
Клиника.Инкубационный период составляет 12 дней. Болезнь начинается остро: с повышения температуры тела, по явления слабости, утомляемости; нарушаются сон и аппетит.
Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет проч ный и продолжительный.Микробиологическая диагностика. Основной метод диа гностики — бактериологический: посев и выделение S. typhi из крови (гемокультура), фекалий (копрокультура), мочи
Серологический ме тод обнаружения 0- и Н- антител в РПГА. Бактерионосителей выявляют по обнаружению Vi-антител в сыворотке
Лечение. Антибиотики. Иммуноантибиотикотерапия.
Профилактика. Санитарно-гигиенические мероприятия.
Вакци нация - брюшнотифозная химическая и брюшно-тифозная спиртовая вакцина.
7.сальмонеллы. Острая кишечная зоонозная инфекция, вызываемая сероварами сальмонелл, характери зующаяся поражением ЖКТ.
Морфологические свойства: подвижные, грам «-» палочки, капсулы нет. Хорошо растут на простых питательных и желчесодержащих средах. На плотных – образуют колонии в R-и S-формах, на жидких – помутнение. На лактозособержащих средах образуют бесцветные
колонии.Антигенная структура: соматический О-антиген, жгутиковый Н-антиген, Некоторые – К-антиген. Основные факторы передачи — мясо, молоко, яйца, вода. Патогенез и клиника. Заболевание протекает в локальной форме гастроэнтери та, ведущий синдром - диарейный.
Иммунитет: Ненапряженный, серовароспецифический, опосредован секреторным IgA, который предотвращает процесс пенетрации сальмонеллами слизистой тонкого кишечни ка. В крови могут определяться антитела. Микробиологическая диагностика. Бактериологическому исследованию под вергают рвотные массы, промывные воды же лудка, испражнения, желчь, мочу, кровь. Для серологического исследования приме няют РНГА, ИФА. Важное диагностическое значение имеет нарастание титра антител в динамике заболевания.Лечение. Применяется патогенетическая терапия, направленная на нормализацию вод но-солевого обмена.
Профилактика. Специфическая профилактика сальмонеллеза у с/х животных и пти ц. Неспецифичес кая профилактика - проведение ветеринарно-санитарных мероприятий.
8 Шигеллы.. Род Shigella включает 4 вида: S. dysenteriae — 12 сероваров, S.flexneri — 9 сероваров, S. boydii — 18 сероваров, S. sonnei — 1 серовар.Морфология. Шигеллы представле ны неподвижными палочками. Спор и капсул не образуют.
Культуральные свойства. Хорошо культи вируются на простых питательных средах. На плотных средах образуют мелкие глад кие, блестящие, полупрозрачные колонии; на жидких — диффузное помутнение. Жидкой средой обогащения является селенитовый бу льон
Резистентность. Наиболее неустойчив во внешней среде
Шигеллы переносят высушивание, низкие темпе ратуры, быстро погибают при нагревании. Антигенная структура. Соматический О-антиген, в зависи мости от строения которого происходит их подразделение на серовары, Факторы патогенности. Способность вызывать инвазию с пос ледующим межклеточным распространением и размножением в эпителии слизистой толстого кишечника.
Эпидемиология: Заболевания - шигеллезы, антропонозы с фекально-оральным механизмом переда чи. Заболевание, вызываемое S. dysenteriae, имеет контактно-бытовой путь передачи. S. flexneri — водный, a S. sonnei — алиментар ный.Патогенез и клиника: Инфекционные заболева ния, характеризующиеся поражением толсто го кишечника, с развитием колита и интокси кацией.Шигеллы взаимодействуют с эпителием слизистой тол стой кишки. Прикрепляясь инвазинами к М-клеткам, шигеллы поглощаются макрофагами.
Иммунитет. Секреторные IgA, пре дотвращающие адгезию, и цитотоксическая антителозависимая активность лимфоцитов
Микробиологическая диагностика.
Бактериологи ческий: материалом для исследования - испражнения. Для посева отбираются гнойно-кровяные образования из кала,
Лечение и профилактика: Для лечения - бактериофаг орального применения, ан тибиотики после определения антибиотикограммы; в случае возникновения дисбактерио за — препараты пробиотиков для коррекции микрофлоры. Не специфическая профилак тика.
26.Ку-лихорадка. Таксономия и общая характеристика. Возбудитель — Coxiella burnetii. Имеет более мелкие, чем риккетсии, размеры, поли морфен; чаше в форме коккобацилл. Окрашивается в красный цвет при окрас ке по Здродовскому, по Романовскому. Внутриклеточный паразит. Хорошо размножается в клещах, куль турах клеток.
Устойчив к факторам внешней среды, длительно сохраняется на предметах.Эпидемиология. Источник возбудителя - крупный и мелкий рогатый скот. Инфекция неконтагиозна, поддержи вается за счет грызунов, с участием клещей. Клиника: Болезнь протекает в острой, подострой или хро нической форме.
Инкубационный период при острой фор ме 12 дней. Заболевание носит характер лихорадки с поражением дыхательной системы
Микробиологическая диагностика: Особенности коксиелл, связанные с их фа зовым состоянием, затрудняют лабораторную
Профилактика: Существует живая вакцина на
Лечение: Препаратами тетрациклинового (тетрациклин, доксициклин) и хинолонового ряда. Лечение хронических форм и осложнений требует длительного, комбинированного применения анти биотиков.
Профилактика: Существует живая вакцина на основе штамма М-44
10.Возбудитель чумы. Возбудитель – Yersinia pestis.
Морфологические свойства: грамотрицательные палочки, овоидной формы, окрашиваются биполярно. Подвижны, имеют капсулу, спор не образуют.Культуральные свойства. Факультативные анаэробы. Температурный оптимум +25С. Хорошо культивируются на простых питательных средах. Ферментируют большинство углеводов без образования газа Вирулентные штаммы образуют шероховатые (R) колонии, переходные (RS) и сероватые слизистые гладкие авирулентные(S) формы Антигенная структура. Группа белково – полисахаридных О-антиген и термолабильный капсульный V,W антигены Резистентность: чувствителен к антибиотикам
Патогенные свойства. Обладает патогенным потенциалом, подавляет функции фагоцитарной системы, подавляет окислительный взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в них размножается.
Клинические особенности: Инкубационный период – несколько часов до 8 сут Эпидемиология: Чума - классический природноочаговый зооноз диких животных. Основные носители в природе - сурки, суслики, в городских условиях - крысы. В передаче возбудителя - блохи животных, способные заражать человека. Иммунитет: клеточно-гуморальный, ограничен по длительности и напряженности.
Микробиологическая диагностика: Бактериоскопическое исследование. Из исследуе мого материала готовят мазки, окрашивают по Граму и водным раствором метиленового синего.
Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за севают на чашки с питательным агаром. Экспресс-методы лабораторной диагностики:1.Иммунофлюоресцентный метод позволяет обнаружить присутст вие возбудителя как в патологическом материале
2.РПГА - для обнаружения антигенов бактерий в материале с помощью стандартной противочумной сыворотки
Лечение: антибиотики –стрептомицин, препараты тетрациклинового ряда. Профилактика: специфическая профилактика - живая ослабленная чумная вакцина EV
12.бруцеллы. Таксономия: Возбудители бруцеллеза B.melitensis, B.abortus, B.suis, B.canis, B.ovis ,роду Brucella
Морфологические и тинкториальные свойства: Мелкие, грамотрицательные палочки овоидной формы. Не имеют спор, жгутиков, иногда образуют микрокапсулу. Культуральные свойства: облигатные аэробы. Требовательны к питатель ным средам и растут на специальных средах (пече ночных, кровяной агар).
Их особенностью является медленный (в течение 2 нед) рост. В жидких средах – равномерное помутнение с небольшим осадком. На плотных – мелкие, круглые гладкие голубые колонии. Диссоциация от S- к R-формам колоний. Антигенная структура. O-антиген – соматический, и капсульный антигены. Факторы патогенности: Образуют эндотоксин, обладающий высокой инвазивной активностью Резистентность. Быстро погибают при кипяче нии, устойчивы к низкой температуре: в замороженном мясе они со храняются до 5 мес, в молочных продуктах — до 1,5 мес. Эпидемиология. Зоонозная инфекция. Источник - крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, овцы, выделяющие
Патогенез. Проникают в организм через слизи стые оболочки или поврежденную кожу, попадают сначала в регионарные лимфатические узлы, затем в кровь, Клиника: Инкубационный период составляет обычно 1—3 нед. Длительная лихорадка, озноб, потливость, боли в суставах Иммунитет: После перенесенного заболевания формирует ся непрочный иммунитет. Клеточно-гуморальный, нестерильный, относительный Микробиологическая диагностика:
Бактериологическое исследование. Для получе ния гемокультуры кровь засевают в два флакона печеночного бульона Серодиагностика. Реакция агглютина ции Райта Для серодиагностики используют РПГА, РИФ, РСК, метод опреде ления неполных антител. вакциной или бруцеллина Профилактика: Живая бруцеллезная вакцина
Лечение: Антибиотики широкого спектра действия. Специфическая иммунотерапия убитой лечебной бруцеллезной
13.Возбудитель туляремии. Возбудитель – Francisella tularensis.
Морфология: мелкие кокковидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор, могут образовывать капсулу. Культуральные свойства: Факультативный аэроб, оптим. температура+37С. На простые питательных средах не растет. Культивируется на желточных средах, на средах с добавлением крови и цистеина. Рост медленный. Образуют мелкие колонии, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие. Антигенные свойства: Содержит соматический О-и поверхностный Vi- антигены.
Вирулентными являются S-формы колоний. Патогенные свойства связаны с оболоченным антигенным комплексом и токсическими веществами типа эндотоксина. Эпидемиология: природно-очаговое заболевание. Источник инфекции – грызуны. Передача возбудителя через клещей, комаров. Человек заражается контактным, алиментарным, трансмиссивными путями. Резистентность: в окружающей среде сохраняется долго, нестоек к высокой температуре, чувствителен к антибиотикам (тетрациклин, левомицетин).
Патогенез: На месте внедрения возбудителя (кожа, слизи стые оболочки глаз развивается первичный воспалительный очаг, откуда воз будитель распространяется по лимфатическим сосудам и узлам,
Клиника. Инкубационный период 3—7 дней. Болезнь начинается остро, внезапно с повышения темпера туры тела. Иммунитет. После перенесенной инфекции иммунитет со храняется длительно, иногда пожизненно; развивается аллергизация организма к антигенам возбудителя. Микробиологическая диагностика:
Бактериоскопическое исследование: Из исследуе мого материала готовят мазки, окрашивают по Грамму. В чис той культуре - мелкие кокки. В мазках из органов преобладают палочковидные
формы. Спор не образуют, грамотрицательные, Бактериологическое исследование и биопроба. Применяются для выделения чистой культуры бактерий туляремии Серодиагностика. Ставится реакция агглютинации с туляремийным диагностикумом.
Лечение: антибиотики стрептомицинового и тетрациклинового ряда
Профилактика: специфическая профилактика - применяют живую туляремийную вакцину.
14.сибирская язва. Сибирская язва - острая антропонозная инфекцион ная болезнь, вызываемая Bacillus anthracis, харак теризуется тяжелой интоксикацией, поражением кожи, лимфатических узлов
Морфологические свойства. Очень крупные грамположительные палочки с обрубленными концами, в мазке из чистой куль туры располагаются короткими цепочками (стрептобациллы). Неподвижны; образуют расположенные центрально споры, а также капсулу
Культуральные свойства. Аэробы. Хорошо растут на простых питательных средах в диа пазоне температур 10—40С, температурный оптимум роста 35С. На жидких средах дают придонный рост
Антигены и факторы патогенности. Содержат родовой соматический полисахаридный и видовой белковый капсульный антигены. Образуют белковый экзотоксин, Резистентность. Вегетативная форма неустойчива к фак торам окружающей среды.Чувствительны к пенициллину и другим антибиотикам; споры устойчивы к антисептикам. Эпидемиология и патогенез. Источник инфекции — больные животные, чаще крупный рогатый скот, овцы, свиньи
Человек заражается в основном контактным путем, реже али ментарно,
Клиника. Различают кожную, легочную и кишечную формы сибирской язвы. При кожной (локализованной) форме на месте внедрения возбудителя появляется характерный сибиреязвенный
Карбункул Иммунитет. После перенесенной болезни развивается стой кий клеточно-гуморальный иммунитет. Микробиологическая диагностикаБактериоскопическое исследование. Изучение окрашенных по Граму мазков из патологического материала позволяет обнаружить возбудителя, представляющего собой грамположительную крупную неподвижную стрептобациллу.
Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за севают на чашки с питательным и кровяным агаром,
Лечение: антибиотики и сибире язвенный иммуноглобулин. Для антибактериальной терапии препарат выбора – пенициллин.
Профилактика. Для специфической профилактики исполь зуют живую сибиреязвенную вакцину. Для экстренной профилактики назначают сибиреязвенный иммуноглобулин.
17. Ботулизм — острое инфекционное заболевание, ха рактеризующееся интоксикацией организма с пре имущественным поражением центральной нервной системы. Болезнь возникает в результате употреб ления пищевых продуктов,
Таксономия. Возбудитель ботулизма относится к отделу Firmicutes, роду Clostridium. Морфологические и тинкториальные свойства. C.botulinum — грамположительные палочки с закругленными концами, образуют споры и имеют вид веретена. Капсулой не обладают, перитрихи. Культуральные свойства. Строгий анаэроб. Оптимальными для его роста являются температура 30С. На кровяном агаре образует небольшие прозрачные колонии. можно обнаружить R-формы формы зерен чечевицы и S-формы – пушинок. Антигенные свойства. Имеются группоспецифические жгутиковые – Н и типоспецифические О-АГ бактерий Факторы патогенности. Выделяет экзоток син, самый сильный из всех биологических ядов. Резистентность. Споры обладают очень боль шой резистентностью к высокой температуре (выдерживают ки пячение в течение 3—5 ч). Путь заражения боту лизмом — пищевой. Чаще всего фактором передачи этой ин фекции являются консервы (как правило, домашнего приго товления) — грибные, овощные, мясные, рыбные. Патогенез. Ботулинический токсин попадает с пищей в
ЖКТ Клиника. Инкубационный период продолжается от 6—24 ч до 2—6 дней и более. Обычно болезнь начинается остро, но температура тела остается нормальной Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет не фор мируется.
Микробиологическая диагностика. Исследуют про мывные воды желудка, рвотные массы, остатки пищи, кровь. Лечение. Ан титоксические противоботулинические гетерологичные сыворот ки и гомологичные иммуноглобулины. Профилактика. Соблюдение правил приготовления продуктов, актив ной
профилактики ботулизма разработаны и применяются по показаниям тетра- и трианатоксины домашних консервов.
15.столбняк. Столбняк — тяжелая раневая инфекция, вызываемая Clostridium tetani
Морфологические свойства. Возбудитель - подвиж ная (перитрих) грамположительная палочка, об разует споры, чаще круглые, реже овальные, споры располо жены терминально. В культуре старше 24 ч бактерии становятся грамотрицательными. Капсул не образуют.
Культуральные свойства. Облигатный анаэроб. На жидких питательных средах бактерии растут придонно, продуцируя сильный экзотоксин. На плотных питательных средах образуют прозрачные или слегка сероватые колонии с шероховатой поверхностью.
Антигенная структура По жгутиковому Н-антигену делится на 10 сероваров; О-антиген является общим для всех представителей вида.
Факторы патогенности. Основным фактором патогенности является экзотоксин. Патогенез. Главным патогенетическим фактором является столбнячный токсин. Палочки столбняка остаются в раневой ткани, т.е. на месте внедрения, и не распространяются по организму.
Клиника. Инкубационный период составляет в среднем 6— 14 дней. У больных наблюдаются спазм жевательных мышц, затрудненное глотание, напряжение мышц затылка, Болезнь протекает при повы шенной температуре тела и ясном сознании. Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет не вы рабатывается
Микробиологическая диагностика. Для бактериологического исследования берут материал из раны и очагов воспаления, а также
кровьЛечение Адсорбированный столбнячный анатоксин
Профилактика: Вакцинацию начинают с 3—5-месячного возраста и затем пе риодически проводят ревакцинации
19. Дифтерия — острая инфекционная болезнь, харак теризующаяся фибринозным воспалением в зеве, гортани,
Возбудителем ее является Corynebacterium diphtheriae.
Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель дифтерии характеризуется полиморфизмом: тонкие, слегка изогнутые палочки (наиб. распространенные) встречаются кокковидные и вет вящиеся формы. Бактерии нередко располагаются под углом друг к другу. Они не образуют спор, не имеют жгутиков, у многих штаммов выявляют микрокапсулу. Характерная особенность - наличие на концах палочки зерен волютина (обусловливает булавовидную форму) Возбудитель дифтерии по Граму окрашивается положи тельно.Культуральные свойства. Факульта тивный анаэроб, оптим. темпе ратура. Микроб растет на специальных питатель ных средах, например на среде Клауберга ( Антигенные свой ства. О-антигены – термостабильные полисахаридные, расположены в глубине клеточной стенки. К-антигены – поверхностные, термолабильные Факторы патогенности. Экзотоксин, нарушающий синтез белка и пора жающий в связи с этим клетки миокарда, надпочечников, почек, нервных
Ганглиев Резистентность. Устойчив к высушиванию, действию низких температур, поэто му в течение нескольких дней может сохраняться на предметах, в воде. Эпидемиология. Источник дифтерии — больные люди Заражение происходит чаще через дыхательные пути
Основной путь передачи воздушно-капельный, возможен и контактный путь — через белье, посуду. Иммунитет. После заболевания - стойкий, напряженный антитоксичный иммунитет.
Микробиологическая диагностика. С помощью тампона у больного берут пленку и слизь из зева и носа. Для постановки предварительного диагноза возможно применение бактериоскопического метода. Основной метод диагностики — бактериологический: посев
на среду Клаубера Лечение. Основной метод терапии — немедленное введение специфической антитоксической противодифтерийной лошадиной жидкой сыворотки. Иммуноглобулин человека противодифтерийный
21. Туберкулез—хроническое заболевание человека, сопровождающееся поражением органов дыхания
Болезнь вызывается 3 видами микобактерий: Mycobacterium tuberculosis — человеческий вид, Mycobacterium bovis — бычий вид, Mycobacterium africanum — промежуточный вид
Морфология, тинкториальные и культуральные свойства. Выражен ный полиморфизм грамположительны, неподвижны, спор не образуют, имеют микрокапсулу. Для их выявления применяют окраску по Цилю—Нильсену. Возбудители туберкулеза характеризуются медленным ростом, требовательны к питательным средам.
М.tuberculosis относятся к аэробам На жидких питательных средах дают рост в виде сухой пленки кремового цвета На плотных средах рост в виде кремового, сухого чешуйчатого налета с неровными краями (R-формы M.bovis —растут на средах медленнее, чем M.tuberculosis, пируватзависимы; на плотных питательных средах образуют мелкие шаровидные, серовато-белые колонии (S-формы).
Химический состав: Основными химическими компо нентами микобактерии являются белки, углеводы и липиды Факторы патогенности: основные патогенные свойства обусловлены прямым или иммунологически опосредованным действием липидов и липидсодержащих структур. Антигенная структура: В ходе забо левания к антигенам образуются антипротеиновые, антифосфатидные и антиполисахаридные антитела Патогенез и клиника
Инкубационный период составляет от 3—8 нед. до 1 года и более.
Основными симптомами легочного туберкулеза являются субфебрильная температура тела, кашель с мокротой, кровохар к
Микробиологическая диагностика. Диагностику проводят с помощью бактериоскопии, бактериологического исследования и постановки биологической пробы. Профилактика. Специфическую профилактику проводят путем введения живой вакцины
Лечение. По степени эффективности противотуберкулезные препараты делят на группы: группа А — изониазид, рифампицин; группа В — пиразинамид, стрептомицин,
25. сыпной тиф — острый антропоноз с трансмиссивным механизмом распространения платяными вшами.
Таксономия и общая характеристика: Возбудитель — R. prowazekii, род Rickettsia. Хорошо культивируется в организме платяных вшей, желточных мешках, по Здродовскому окрашивается в красный цвет.
Эпидемиология и механизм заражения. Заражение реализуется либо втиранием фе калий инфицированных вшей через расчесы кожи,
Клиника, диагноз, лечение. Инкубационный период 10 дней. Начало заболевания острое, Болезнь протекает с высокой температурой, симптомами пора жения сердечно-сосудистой и нервной сис тем. Иммунитет — непродолжительный, клеточно-гуморальный
Диагностика: осуществляется по клинико-эпидемиологическим данным, под крепляется лабораторным исследованием на специфические антитела (РСК, РНГА, ИФА и др.).
Лечение: Быстрое этиотропное лечение одно кратным приемом доксициклина, при его отсутствии — препаратами тетрациклинового
Ряда Профилактика. Изоляция завшивлен ных больных, дезинфекция препаратами, содержащими перметрин. Для специфической профилактики разработана живая вакцина из штамма Е
Микробиологическая диагностика. Затруд нена неопределенностью симптоматики на первой неделе заболевания (до появления сыпи) и ее сходством с симптомами при ин фекциях, чаще брюшнотифозной. Диагноз устанавливается на основании клинико-эпидемиологических данных с учетом анамнеза больного Профилактика. Меры профилакти ки те же, что и при эпидемической форме. Специфическая профилактика невозможна
22Возбудитель сифилиса.. Treponema palladium ; T. entericum
Морфология: типичные трепонемы. имеющие 8-12 завитков, двигательный аппарат – 3 периплазматических жгутика у каждого полюса клетки. Окраску по Граму не воспринимают, по Романовскому-Гимзе – слабо розового цвета, выявляется импрегнацией серебром.
Культуральные свойства: вирулентный штамм на пит. средах не растёт, накопление культуры происходит путём заражения кролика в яичко. Вирулентные штаммы культивируют на средах с мозговой и почечной тканью.Биохимические свойства: микроаэрофил
Антигенная структура: солжная, обладает специфическим белковым и липоидным антигенами Факторы патогенности: в процессе прикрепления участвуют адгезины Резистентность: чувствителен к высыханию, солнечным лучам, на предметах сохраняется до высыхания Патогенез: Вызывают сифилис. Из места входных ворот трепонемы попадают в регионарные лимфатические узлы, где размножаются. Иммунитет: защитный иммунитет не вырабатывается.
Микроскопическое исследование. Проводят при первичном си филисе во время появления твердого шанкра. Материал для исследования: отделяемое шанкра, содержи мое регионарных лимфатических узлов, из которых готовят пре парат Серодиагностика.
РИФ — реакция непрямой иммунофлюоресценции — является специфической при диагностике сифилиса. . Лечение: Пенициллины, тетрациклины, висмутсодержащие препараты.
24. Лептоспиры являются возбудителями зоонозной бактериальной инфекции. Возбудитель L. interrhogans poд Leptospira.
Морфология. Лептоспиры представ ляют собой тонкие спирохеты, с изогнутыми концами. Двигательный аппарат - фибрил лы. Легко различимы при микроскопии в темном поле и фазово-контрасте. Цист не образуют.
Культуральные и биохимические свойства. Аэробы. Источником углерода и энергии слу жат липиды. Каталаза-и оксидазаположительны. Культивируются на питательных средах, содержащих сыворотку или сывороточный альбумин, при темпера туре 30С. Особенность роста на жидкой питательной среде — отсутствие помутнения. Делятся поперечным делением. Растут мед ленно. Цист не образуют.
Антигенная структура. Содержат общеродовой антиген белковой природы, выявляемый в PCК Эпидемиология. Лептоспироз относится к природно-очаговым зоонозам, с преимущес твенно фекально-оральным
механизмом пе редачи возбудителя
Патогенез и клиника заболевания. острая инфекционная бо лезнь, которая вызывается различными сероварами. Инкубационный период составляет 7—10 дней. Входные ворота — слизистые оболочки пищеварительного тракта, поврежденная ко жа. Иммунитет: Стойкий, гуморальный, серовароспецифический иммунитет
Микробиологическая диагностика. Материа лом для исследования служат кровь, спин номозговая жидкость, моча, сыворотка кро ви в зависимости от стадии заболевания. Для диагностики используют бактериоскопический (обнаружение лептоспир в темнопольном микроскопе), бактериологический и серологи ческие методы (РА, РСК), а также применяют ПЦР. Биопробу на кроликах.
Профилактика и лечение. Специфическая про филактика проводится вакцинацией по эпиде мическим показаниям убитой нагреванием
27.Хамидии. род Chlamydia. Род представлен видами С.trachomatis, C.psittaci,C.pneumoniae. Болезни, вызываемые хламидиями, называют хламидиозами. Морфология хламидий: мелкие, грам «-» бактерии, шаровидной формы. Не образуют спор, нет жгутиков и капсулы. Клеточная стенка: 2-х слойная мембрана. Имеют гликолипиды. По Граму – красный цвет. Основной метод окраски – по Романовскому – Гимзе.2 формы существования: элементарные тельца (неактивные инфекционные частицы, вне клетки); ретикулярные тельца (внутри клеток, вегетативная форма).Культивирование: Можно размножать только в живых клетках. В желточном мешке развивающихся куриных
Эмбрионов Антигенная структура РСК; видоспецифический антиген белковой природы (в наружной мембране). Обнаруживают с помощью РИФ; вариантоспецифический антиген белко вой природы.
Факторы патогенности. С белками наружной мембраны хламидий связаны их адгезивные свойства. Эти адгезины обнаруживают только у элементарных телец. Хламидии образуют эндотоксин.
Трахома — хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся пораже нием конъюнктивы и роговицы глаз. Антропоноз. Передается контактно- бытовым путем.
Патогенез: поражает сли зистую оболочку глаз. Он проникает в эпителий конъюнктивы и роговицы, где размножается, разрушая клетки. Развивается фолликулярный кератоконъюнктивит
Диагностика: исследование соскоба с конъюнкти вы. В пораженных клетках при окраске по Романовскому—Гимзе обнаруживают цитоплазматические включения фиолетового цвета, расположенные около ядра — тельца Провачека. Лечение: антибиотики (тетра циклин) и иммуностимуляторы (интерферон). Профилактика: Неспецифическая.
Урогенитальный хламидиоз — заболевание, передающееся половым путем. Это — острое/хро ническое инфекционное заболевание
Заражение че ловека происходит через слизистые оболочки половых путей. Основной механизм зараже ния — контактный, путь передачи — по ловой. Иммунитет: клеточный, с сыворотке инфицированных – специфические антитела. После перенесенного заболевания - не формируется. Диагностика: При забо леваниях глаз применяют бактериоскопический метод — в соскобах с эпителия конъюнктивы выявляют внутриклеточные включения. Постановка РИФ, ИФА позволяют обнаружить антигены хламидии в исследуемом материале. Серологический метод - для обнаружения IgM
Лечение. антибиоти ки Профилактика. Только неспецифическая (лечение больных), соблюдение личной гигиены
28.Микоплазмы. Антропонозные бактериальные инфекции человека, поражающие органы дыхания или мочеполовой тракт
Микоплазмы относятся к клас су Mollicutes, который включает 3 порядка: Acholeplasmatales, Mycoplasmatales, Anaeroplasmatales.
Морфология: Отсутствие ригидной клеточной стен ки, полиморфизм клеток, пластичность, осмотическую чувс твительность, резистентность к различным агентам, подавляющим синтез клеточной стенки, в том числе к пенициллину и его производным. Грам «-», луч ше окрашиваются по Романовскому—Гимзе; различают подвижные и неподвижные виды. Клеточная мембрана находится в жидкокристаллическом состоянии; включает белки, погруженные в два липидных слоя, основной компонент которых — холестерин.
Культуральные свойства. Хемоорганотрофы основной источник энергии — глюкоза или аргинин. Растут при температуре 30С. Большинство видов — факультативные анаэ робы; чрезвычайно требовательны к пита тельным средам и условиям культивирования. Питательные среды (экстракт говяжьего сердца, дрожжевой экстракт, пептон, ДНК, глюко за, аргинин). Культивируют на жидких, полужидких и плотных питательных средах Антигенная структура: Сложная, имеет ви довые различия; основные АГ представлены фосфо- и гликолипидами Факторы патогенности: адгезины, токсины, ферменты агрессии и продукты метаболизма. Источник инфекции — больной человек. Механизм передачи — аэрогенный, основной путь передачи — воздушно-капельный.Патогенез: Иммунитет: для респираторного и урогенитального микоплазмоза характерны случаи повторного зараженияМикробиологическая диагностика: мазки из носоглотки, мокрота, бронхиальные смывы. При урогенитальных инфекциях исследуют мочу, соскобы с уретры, влагалища
Для лабораторной диагностики микоплазменных инфекций используют культуральный, серологический и молекулярно-генетический
методыЛечение. Антибиотики. Этиотропная
Химиотерапия. Профилактика. Неспецифическая.
20.Лепра. Морфология
Mycobacterium leprae – имеет форму палочек, прямых или слегка изогнутых с закругленными концами, размер 0,2-0,4*1-8 мкм. В мазках из пораженных тканей располагаются внутриклеточно, реже внеклеточно Жгутиков не имеют, спор и капсул не образуют. Кислото- и спиртоустойчивы. Грамположительные. По методу Циля - Нильсена окрашиваются в красный цвет. Культуральные свойства Возбудитель проказы не растет на искусственных питательных средах, однако по некоторым литературным данным, Mycobacterium leprae выращивают на глицериново-картофельном и кровяном агарах, яичных средах, среде Вассермана. Рост наблюдается через 6-8 недель в виде сухого морщинистого налета
Антигены Известно 2 антигена возбудителя:
Термостабильный (полисахарид), групповой для микобактерий;
Термолабильный (белок), специфичный для Mycobacterium leprae.
Факторы патогенности-Высокое содержание липидов;
-Цитохромоксидаза;-Щелочная фосфатаза;-Фенолоксидаза;
Облигатное внутриклеточное паразитирование.
Патогенез и клинические проявления. Особенности болезни определяются следующими свойствами возбудителя: Медленное размножение – инкубационный период до 20 лет и хроническое течение; Поражение нервной системы ведет к инвалидности; Оптимальная температура ниже 37оС, следовательно, поражаются охлаждаемые ткани; Более частая заболеваемость детей, по всей вероятности, связана с несовершенством их иммунной системы Микробиологическая диагностика.
Исследуемый материал – соскоб слизистой оболочки носа, тканевой сок, пунктат лимфатического узла, кусочки органов. Бактериоскопический метод – окраска по Цилю-Нильсену, Граму. Биологический метод – заражение броненосцев, белых мышей, вскрытие, мазки-отпечатки, посев на питательные среды. Аллергологический метод – реакция Мицуду Биохимический и молекулярно-биологический метод – ПЦР, ДНК-гибридизация Специфической профилактики и лечения нет
18. Бордетеллы. гр- мелкие коккобактерии, спор, жгутиков нет,
среда Борде-Жангу (кровь, картофель, глицерин), мо-лочно-кровяной агар, КУА, колонии в виде капелек ртути.Классификация: дифференцируют по скорости роста, наличию уреазы, тирозиназы, росту на среде Павловского, Аг структуре. Факторы патогенности: пили,
филаментозный гемагглютинин ФГА - связь между микробами, колонизация
коклюшный токсин КТ - (экзотоксин) белок, фракция А определяет патогенез заболевания (стимулирует лимфоцитоз, гистаминсенсибилизация, инсулинактивация, протективная активность), фракция В прикрепляет КТ к рецепторам клеток
29. вирус гриппа. Orthomyxov iridae. вирусологический в аллантоис-ной или амниотической полости 7-12 дневного куриного эмбри-она + РГА
серологический РСК, РТГА, метод Журова (РНГА + РИФ) для определения IgM
экспресс риноцитоскопия в окраске по Павловскому - фуксинофильные включения, люменесцентная микроскопия с акридинаранжевым, РИФ пр, электронная микроскопия. ОРЗ, грипп, энцефалит, пневмония как осложнения. смыв из носоглот-ки, мазки-отпе-чатки из нижней носовой ракови-ны, парные пробы сыворотки. живые (вакцина с темпе-ратурным маркероминтрана-зально), убитые (паренте-рально), субвирионные вакцины. Ig проти-вогрипозный донорский.
30. вирус пара-гриппа Paramixoviridae
вирусологический в первичной и перевиваемой культуре + РН, РГА
серологический РН, РСК, РЗГА
экспресс как при гриппе. ОРВИ, риниты, бронхиты, ложный круп, фарингиты, пневмонии пробы сыворотки. смыв из носоглот-ки, мазки-отпе-чатки из нижней носовой ракови-ны, парные .
респи-ратор-носин-цити-аль-ные
Paramixoviridae.ОРВИ, пневмонии
вирусологический в культуре с образованием симпласта и синцития + РН, РГА.серологический РН, РСК, РЗГА. экспресс как при гриппе.
31.Аденовирусы. Adenoviridae.Зрелый вирус состоит из 252 капсомеров:1)гексоны;2)пентоны,содержащие малые антигены вируса.Антигенная с-ра:1)поверхностные антигены структурных белков;2) антигены гексонов.Пути передачи: воздушно-капельный и контактный. вирусологический в первичной и перевиваемой культуре + РН.серологический РН, РСК, РЗГА.ОРЗ, фарингиты, фа-рингоконъюктивальная лихорадка, пневмонии, конъюктивиты, керато-конъюктивиты(8,19), острые геморрагичес-кие циститы у детей.Материал: смыв из носоглотки.Лечение:средства специфической лекарственной терапии отсутствует.Спец.профилактика:живые вакцины.
35Бешенство.. род Lyssavirus.
Морфология и антигенные свойства. Вирион имеет форму пули, состоит из сердцевины (РНП(рибонуклеопротеин) спи рального типа
Различают два вируса бешенства: дикий вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; фиксированный – не патогенный для человека
Культивирование. Вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (мышей, крыс) и в культуре клеток: фибробластов человека, кури ного эмбриона.
Резистентность: Вирус бешенства неустой чив: быстро погибает под действием солнеч ных и УФ-лучей, а также при нагревании до 60С. Чувствителен к дезинфицирующим веществам, жирорастворителям, щелочам и протеолитическим ферментам.
Эпидемиология. Источниками инфекции в природных очагах являются волки, грызуны. Вирус бешенства накапливается в слюнных железах больного животного и выделяется со слюной. Животное заразно в последние дни инкубационного периода (за 2—10 дней до клинических проявлений болезни). Механизм передачи возбудителя —
контактный при уку сах.
У собаки после инкубационного перио да (14дн.) появляются возбуждение, обильное слюнотечение
Патогенез и клиника. Вирус, попав со слюной больного животного в поврежденные наружные покровы, реплицируется и персистирует в месте внедрения.
Иммунитет: Человек относительно
ус тойчив к бешенству. Постинфекционный иммунитет не изучен, так как больной обычно погибает
Микробиологическая диагностика: Постмортальная диагностика включает об наружение телец Бабеша—Негри
в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга, а также выделение вируса из моз га и подчелюстных
слюнных желез.
Лечение. Симптоматическое; эффективное лечение отсутствует.
Профилактика. Выявление, уничтожение жи вотных. Иммунизация антирабической вакциной собак.
36. Вирусы группы герпеса. Лабораторная диагностика герпесвирусных инфекций.
Семейство Herpetoviridae (герпесвирусов)
Сем. Herpetoviridae подразделяется на три подсемейства: -герпесвирусы, -герпесвирусы, -герпесвирусы, насчитывающих около 50 видов.
Структура и химический состав. Герпесвирусы представляют собой частицы с икосаэдрическим типом симметрии. Они имеют внешнюю оболочку, содержашию липиды, углеводы и белок. Диаметр вириона 150 - 200 нм. ДНК двунитчатая, молекулярная масса 85-150. У разных представителей герпесвирусов в ДНК обнаружены разнообразные нуклеотидные последовательности, что свидетельствует о ее гетерогенности и, возможно, об отдаленном родстве вирусов, включенных в данное семейство. Резистентность. Чувствительны к воздействию физических и химических факторов (нагревание до 55°С, высушивание, эфир, обычные растворы дезинфицирующих веществ). Длительно сохраняются в лиофилизированном состоянии.
Антигены. Герпесвирусы содержат несколько антигенов, связанных с внешней оболочкой и белками капсида, которые различают в РСК, РН и методом флюоресцирующих антител. Культивирование и репродукция. Вирусы различаются по своей способности репродуцироваться в курином эмбрионе. Культивируются в клетках разных тканей. Онкогенность. Многие виды герпесвирусов обладают способностью вызывать онкогенную трансформацию клеток и индуцировать образование опухолей у новорожденных животных. Культивирование и репродукция. Вирусы хорошо культивируются в курином эмбрионе, образуя белые бляшки на хорионаллантоисной оболочке. Подобные бляшки появляются при репродукции вируса в клеточной культуре
Антигены. Различают два серотипа вируса, которые имеют перекрестно реагирующие антигены и отличаются друг от друга типоспецифическими антигенами в РСК и реакции нейтрализации с адсорбированными типоспецифическими сыворотками
Химиотерапия. Для лечения кератитов на ранних стадиях заболевания применяют йоддезоксиуридин, который, являясь антиметаболитом тимина, блокирует синтез вирусной ДНК. Отмечено возникновение резистентных к данному препарату вирусов. Препарат не предупреждает рецидивов.
37.Гепатит А. . Типовой вид —имеет один серотип. Это РНК-содержащий вирус, просто организо ванный, имеет один вирусоспецифический антиген. Культивирование: Вирус выращивают в культурах клеток. Цикл репродукции более длительный, чем у энтеровирусов, цитопатический эффект не выражен.
Резистентность: Устойчивос тью к нагреванию; инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Относительно устойчив во внешней среде (воде). Эпидемиология. Источник-больные. Механизм заражения — фекально-оральный. Вирусы передаются через воду, пищевые продукты, руки. Болеют преимущественно дети в возрасте от 4 до 15 лет. Патогенез: Обладает гепатотропизмом. После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда че рез портальную вену они проникают в печень и реплицируются в цитоплазме гепатоцитов. Клиника. Инкубационный период - от 15 до 50 дней. Начало острое, с повышением т-ры и тошнотой,
Иммунитет. После инфекции - стойкий пожизненный иммунитет, связан ный с IgG. В начале заболевания в крови IgM, которые сохраняются в ор ганизме в течение 4 месяцев и имеют диа гностическое
Значение Микробиологическая диагностика. Материа л для исследования - сыворотка и испражнения. Диагностика основана глав ным образом на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА
и иммунной электрон ной микроскопии используют иммуноглобулин. Иммунитет сохраняется около 3 мес. Лечение. Симптоматическое.
Профилактика. Неспецифическая профи лактика. Для специфической пассивной профилак тики
40.Возб.кори. Корь — острая инфекционная болезнь, ха рактеризующаяся лихорадкой, катаральным воспалением слизистых оболочек верхних дыхательных путей и глаз.Таксономия. РНК-содержащий вирус.Структура и антигенные свойства. Вирион окружён оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Под оболочкой находится спиральный нуклеокапсид. Геном вируса — однонитевая
РНК Имеются следующие основные белки: NP — нуклеокапсидный; М — матриксный, Культивирование. Культивируют на
культурах клеток почек обезьян и человека, перевивае мых культурах клеток HeLa, Vero. Возбудитель размножается с образованием гигантских мно гоядерных клеток — симпластов. Резистентность. В окружающей среде нестоек, при комнатной температуре инактивируется через 3-4 ч. Быстро гибнет от солнечного света, УФ-лучей. Восприимчивость животных. Корь воспро изводится только на обезьянах, остальные животные маловосприимчивы
Эпидемиология. Корь — антропонозная инфекция, распространена повсеместно Болеют люди разного возраста, но чаще дети 4—5 лет.
Источник ин фекции — больной челове. Основной путь инфицирования — воздушно-капельный, ре же — контактный
Патогенез. Возбудитель проникает через сли зистые оболочки верхних дыхательных путей и глаз, откуда попадает в подслизистую оболоч ку, лимфатические узлы. Клиника. Инкубационный период 8-15 дней. Вначале отмечаются острые респираторные проявления (ринит, фарингит, конъюнктивит, фотофобия, температура тела 39С). Затем, на 3—4-й день, на слизистых оболочках и коже появляется пятнисто-папулезная сыпь 7—9 дней, сыпь исчезает, не оставляя следов.
Возбудитель вызывает аллергию, подавляет активность Т-лимфоцитов
Иммунитет. После перенесенной кори раз вивается гуморальный стойкий пожизненный иммунитет. Микробиологическая диагностика. Исследуют смыв с носоглотки, соскобы с элементов сыпи, кровь, мочу. Вирус кори можно обнаружить в патологическом материале и в зараженных культурах клеток с помощью РИФ, РТГА и реакции нейтрализации. Для серологической диагностики приме няют РСК, РТГА и реакцию нейтрализации. Лечение. Симптоматическое
детям первого года жизни Специфическая профилактика. Активную специфическую профилактику кори прово дят подкожным введением
42.Гепатит В. Морфология: ДНК-содержаший вирус сферичес кой формы. Состоит из сердцевины, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевинный НВс-антиген и липидсодержащей оболоч ки, содержащей поверхностный HBs-антиген.
Культуральные свойства. Не культиви руется на куриных эмбрионах, не облада ет гемолитической и гемагглютинирующей
активностью. Резистентность. Высокая к факторам окружающей среды и дезинфицирующим веществам. Вирус устой чив к длительному воздействию кислой среды, УФ-излучению, Антигенная структура. Слож ная. В суперкапсиде вируса находится HBs-антиген
Эпидемиология: Развитие инфекционного процесса при попадании в кровь. Заражение проис ходит при парентеральных манипуляциях (инъ екциях, хирургических вмешательствах), пере ливании крови
Патогенез заболевания. Инкуба ционный период 3—6 месяцев. Инфекционный процесс наступает после проникновения вируса в кровь Иммунитет. Гуморальный иммунитет, пред ставленный антителами к HBs-антигену, защищает гепатоциты от вируса
Клеточный иммунитет освобождает организм от инфицирован ных гепатоцитов благодаря цитолитической функции Т-киллеров
Микробиологическая диагностика. Исполь зуют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены и антите ла ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Лечение. Использование интерферона, интерфероногенов: виферона, амиксина. Вакцинации подлежат все новорож денные в первые 24 часа жизни. Специфическая профилактика осущест вляется вакцинацией рекомбинантной ген но-инженерной вакциной
38Онковирус.. РНК-содержащие
Онковирусы являются сложноорганизованными вирусами. Вирионы построены из сердцевины, окружен ной липопротеиновой оболочкой с шипами. Размеры и формы шипов, а также локализа ция сердцевины служат основой для подраз деления вирусов на 4 морфологических
типа (А, В, С, D), Капсид онковирусов построен по кубичес кому типу симметрии Культивирование вирусов: не культивируются на куриных эмбрионах, культивируются в организме чувствительных
животных, в культурах клеток нити ДНК на матрице РНК; ферментативное расщепление матричной РНК; синтез комплементарной нити ДНК на матрице первой
Репродукция вирусов: проникают в клетку путем эндоцитоза. 3 этапа: синтез ДНК,
39. Медленные вирусные инфекции характери зуются следующими признаками: 1) необычно длительным инкубационным периодом (месяцы, годы); 2) своеобразным поражением органов и тканей, преимущественно ЦНС; 3) медленным неуклонным прогрессированием заболевания; 4) неизбежным летальным исходом.
Медленные вирусные инфекции могут вы зывать вирусы, известные как возбудители острых вирусных инфекций. Например, ви рус кори иногда
вирус краснухи Прионы — возбудители конформационных болезней, вызывающих диспротеиноз. Патогенез и клиника. Прионные инфекции характеризуются губкообразными измене ниями мозга
При этом развивают ся церебральный амилоидоз.Иммунитета к прионам не существует.Микробиологическая диагностика. При прионной патологии характерны губкообразные изменения мозга, астроцитоз (глиоз), отсутс твие инфильтратов воспаления; окраска. Мозг окрашивают на амилоид.Проводят генетический анализ прионного ге на; ПЦР для выявления РгР. Профилактика. Введение ограничений на использование лекарственных препаратов жи вотного происхождения. Использование резиновых перчаток при работе с биологичес кими жидкостями больных.
Сан.микробиология.
3Санитарная микробиология — раздел медицинской микробиологии, изучающий мик роорганизмы, содержащиеся в окружающей среде и способные оказывать неблагоприятное воздействие на состояние здоровья человека. Санитарно-показательные микроорганизмы используют в основном для косвенного опре деления возможного присутствия в объектах окружающей среды патогенных микроорга низмов. Их наличие свидетельствует о загряз нении объекта выделениями человека и жи вотных, так как они постоянно обитают в тех же органах, что и возбудители заболеваний, и имеют общий путь выделения в окружаю щую среду. Возбудители воздушно-капельных инфекций имеют общий путь выделения с бактериями (кокками), постоянно обитаю щими на слизистой оболочке верхних дыха тельных путей Санитарно-показательные микроорганизмы должны отвечать следующим основным требованиям: 1. должны обитать только в организме лю дей или животных и постоянно обнаружи ваться в их выделениях; 2. не должны размножаться или обитать в почве и воде;
3. сроки их выживания и устойчивость к различным факторам после выделения из ор ганизма в окружающую среду должны быть равными или превышать таковые у патоген ных микробов; 4. их свойства должны быть типичными и легко выявляемыми для их дифференциации;
5. методы их обнаружения и идентифика ции должны быть простыми, методически и экономически доступными; 6. должны встречаться в окружающей среде в значительно больших количествах, чем па тогенные микроорганизмы; 7. в окружающей среде не должно быть близ ко сходных обитателей — микроорганизмов.
10. Санитарно-бактериологическое исследование воздуха. Методы, аппаратура.С целью снижения микробной обсемененности воздуха проводят влажную уборку по мещения, очис тку поступающего воздуха. Применяют также аэрозольную дезинфекцию и обработку помещений лампами ультрафиолетового излучения. Микробиологический контроль возду ха проводится с помощью методов естест венной или принудительной седиментации микробов. Естественная седиментация (по методу Коха) проводится в течение 10 мин путем осаждения микробов на поверхность твердой питательной среды в чашке Петри. Принудительная седиментация микробов осуществляется путем «посева» проб воздуха на питательные среды с помощью специаль ных приборов (импакторов, импинджеров. фильтров). Импакторы — приборы для принудительного осаждения микробов из воздуха на поверхность питательной среды (прибор Кротова). Импинджеры — приборы, с помощью которых воздух проходит через жидкую питательную среду или изотоничес кий раствор хлорида натрия.
Санитарно-гигиеническое состояние воз духа определяется по следующим микробио логическим показателям:
1. Общее количество микроорганизмов в 1 м воздуха (обсемененность воздуха) — коли чество колоний микроорганизмов, выросших при посеве воздуха на питательном агаре в чашке Петри в течение 24 ч при 37С. 2. Индекс санитарно-показательных микро бов— количество золотистого стафилококка и гемолитических стрептококков в 1 м3 воздуха. Эти бактерии являются представителями мик рофлоры верхних дыхательных путей и имеют общий путь выделения с патогенными микроор ганизмами, передающимися воздушно-капель ным путем. Появление в воздухе спорообразующих бактерий — показатель загрязненности воздуха микроорганизмами почвы, а появление грамотрицательных бактерий — показатель воз можного антисанитарного состояния.
6. Методы санитарно-бактериологического исследования воды.
В воде регистрируют кишечную палочку, БГКП (колиформные палочки), энте рококк, стафилококки. На основании количественного выявле ния этих санитарно-показательных бак терий вычисляются индекс БГКП (число БГКП в 1 л воды), титр энтерококка.
Общее микробное число— коли чество аэробных и факультативно-анаэробных бак терий в 1 мл воды — определяют у всех видов воды. Исследуемую воду вносят по 1 мл в две стерильные чашки Петри и заливают питательным агаром. Результат вычисляют путем суммирования среднего ариф метического числа бактерий, дрожжевых и плесневых грибов. Определение колиформных бактерий. Общие колиформные бактерии — это Гр- аспорогенные палочки, не обладающие оксидазной активностью и сбраживающие лактозу с образовани ем кислоты и газа. Их обнаружение свидетельствует о свежем фекальном загрязнении воды. Определение колифагов. Присутствие колифагов (бактериофа гов, паразитирующих на Е. coli) определяют в воде поверхност ных источников и питьевой воде, в сточных водах. Исследование проводят методом агаровых слоев. При наличии колифагов обра зуются прозрачные бляшки.
Определение спор сульфитредуцирующих клостридий. Присутствие спор клостридий определяют в воде для оценки эффективности работы сооружений по подготовке питье вой воды. В результате прораста ния спор, размножения клостридий и восстановления ими суль фита образуется сульфид железа, который придает среде черный цвет. Для отбора проб используют стерильные флаконы емкостью 500 мл с проб кой. Предварительно проводят обжигание кранов пламенем горя щего тампона, смоченного спиртом, и спускают воду в течение 10— 15 мин при полностью открытом кране. Бумажный колпачок с пробкой снимают с флакона непосредственно перед ее запол нением, не касаясь руками горлышка флакона и пробки.
Пробы воды очищенной, используемой для приготовления ле карственных форм отбирают в количестве 500 мл в стерильные бутылки, за крытые ватными пробками и бумажными колпачками. Пробы от бирают из бюретки, у которой предварительно обжигают кончик с помощью ватного тампона, смоченного спиртом.
Пробы воды очищенной для приготовления инъекционных ра створов и глазных капель отбирают в стерильные флаконы в количестве 20 мл.
4. Исследование питьевой воды
В воде регистрируют кишечную палочку, БГКП (колиформные палочки). К бактериям группы кишечной палочки относят грамотрицательные палочки, сбра живающие с образованием кислоты и газа лактозу или глюкозу. Этот показатель применяют как индикатор фекального загрязнения воды. Колиформные бактерии, фекальные кишечные палочки – показатели свежего фекального загрязнения.
Определение колиформных бактерий. Общие колиформные бактерии — это Гр- аспорогенные палочки, не обладающие оксидазной активностью и сбраживающие лактозу с образовани ем кислоты и газа. Их обнаружение свидетельствует о свежем фекальном загрязнении воды. Общие колиформные бактерии должны отсутствовать в 100 мл. воды.
8. Санитарно-микробиологическое исследование почвы. Ми кробное число, коли-титр, перфрингенс-титр почвы.
Общее микробное число определяют глубинным посевом (на плотной среде) Перфрингенс-титр почвы - минимальное количество почвы, в кото ром еще определяются Clostridium perfringens. При фекальном загрязнении почвы клостридии обнаруживают в титре 0,01 г. Определяют перфрингенс-титр глубинным посевом.
Оценка фекального заражения проводится по индексу БГКП – коли-титр(количество БГКП в 1 г почвы). На свежее фекальное загрязнение указывают: обнаружение эн терококков, большое количество БГКП при отсутствии нитри фицирующих бактерий, относительно высокое со держание вегетативных форм клостридий.Титр БГКП и перфрингенс-титр для сильно загрязненных почв – 0,009; для чистых почв – коли-титр 1,0; перфрингенс-титр – 0,01
23. Контроль перевязочного и хирургического материала на стерильность. Контроль стерильности материала и режима стерилизации в автоклавах прово дится прямым и непрямым (косвенным) способами. Прямой способ — бактериологи ческий; посев с перевязочного материала и белья или использование бактериологи ческих тестов. Для бактериологических тестов используют пробирки с известной спороносной непатогенной культурой микроорганизмов, которые погибают при определенной тем пературе. Материалом обя зательно засевают две среды — тиогликолевую (для роста бакте рий) и среду Сабуро (для роста грибов). Отсутствие роста микробов свидетельствует о сте рильности материала.
Непрямые способы контроля - используют вещества с определенной точкой плавления. Закладывают в биксы при стерилизации.
17 Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочных продуктов. О состоянии молока и молоч ных продуктов судят по микробному числу и коли-титру. Для определения микробного числа молоко разво дят стерильным изотоническим раствором хлорида натрия и по 1 мл каждого разведения выливают на дно стерильных чашек Петри, которые заливают расплавленным и остуженным агаром. Посевы инкубируют при 37 С в течение суток, после чего подсчитывают количество выросших колоний. Для определения коли-титра молоко засевают в 6 пробирок со средой Кесслера. Посевы инкуби руют при 43С в течение суток, после чего из забродивших проб делают посевы на среду Эндо. Из выросших колоний красного цвета готовят мазки, окраши вают по Граму, микроскопируют и делают посев на среду Козера, а также в пептонную воду с 1% глюкозы. При оценке резуль татов учитываются бактерии, вызывающие брожение глюкозы с образованием кислоты и газа, но не дающие роста на нитрат ной среде Козера. Аналогично для молочных продуктов.
Для обнаружения в молоке патогенных бактерий делают посевы на соответствующие элективные и дифференциально диагностические среды с последующим выделением чистых куль тур и их идентификацией..
16. Санитарно-микробиологическое исследование пищевых продуктов. 1.Общее микробное число (обсеменение). Определяют факультативные анаэробные макроорганизмы, выросшие в виде колоний на плотной питательной среде после инкубации при 37С в теч. 24 ч. 2. Обнаружение санитарно-показательных бактерий в продуктах питания — кишечной па лочки, БГКП, энтерококка, золотистого ста филококка, бактерий группы протея, клостридий.
3. Обнаружение сальмонелл - при исследовании продуктов из мяса.
По эпидемиологическим показаниям продукты исследуют на наличие патогенных и условно-патогенных микроорганизмов — возбудителей пищевых отравлений микробной этиологии.
В кисломолочных продуктах исследуют молочнокислую микро флору бактериоскопическим изучением маз ков из них, окрашенных метиленовым синим. Отсутствие характерной молочнокислой мик рофлоры и наличие посторонней микрофло ры (плесневые грибы, дрожжи и др.) указыва ют на неудовлетворительное качество.
Консервированные продукты питания не должны содержать кишечную палочку, про тей и патогенные микробы. При исследова нии таких пищевых продуктов, как консервы овощные, рыбные, мясные, предусмотрено: обнаружение аэробных микроорганизмов; обнаружение анаэробных микроорганизмов; определение ботулинических экзотоксинов.
18. Санитарно-бактериологическое исследование мяса и мясных продуктов. При микроскопическом исследовании мяса определяют коли чество бактерий в мазках-отпечатках, которые готовят из кусоч ков мяса. Мазки окрашивают по Граму и микроскопируют. Мясо считается свежим, если в поле зрения обнаружено не более 10 бактериальных клеток. Бактериологическое исследование мяс ных продуктов: определяют микробное число, а также устанавливают присут ствие БГКП, сальмонелл, бактерий рода Proteus, стафилококков и клостридий.Для определения общего количества микроорганизмов в 1 г продукта делают посев 0,1 и 0,01 г продукта на питательный агар, инкубируют 48ч и подсчитывают число колоний.
Для определения БГКП в 1 г продукта производят посев 5 мл взвеси на элективно - дифференциальную среду для БГКП и содержит питательный. При росте лактозоположительных БГКП синий цвет меняется на темно-зеленый или ярко-желтый.
19 Консервные банки. Остаточная микрофлора консервов представлена главным образом аэробными и анаэробными спорообразующими микроорганизмами, а также термофилами. При неправильном хранении консервов и презервов микроорганизмы могут размножаться и выделять различные продукты метаболизма, в том числе и газообразные. В результате этого появляется вздутие консервных банок — так называемый бомбаж (биологический). Патогенные микробы могут попадать в консервы при инфицировании исходного продукта. Споры этих микробов, например возбудителя ботулизма, сохраняясь при термической обработке консервов, прорастают; в благоприятных условиях и выделяют сильный токсин, который становится причиной тяжелых пищевых отравлений. Для контроля доброкачественности консервов их выдерживают на заводах в термостатах до 10 сут при 37°С. Санитарно-бактериологическое исследование консервов производят, если внешний вид партии вызывает подозрение (наличие деформированных и бомбажных банок), или по эпидемиологическим показаниям. Отбор, проб и бактериологическое исследование производят в соответствии с ГОСТ. Баночные консервы вначале проверяют на герметичность, выдерживая их в горячей воде при 95°С в течение 3 мин. пределяют наличие мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов путем посевов в соответствующие питательные среды, а также анаэробов путем посевов в среду Китта — Тароцци. По техническим условиям ГОСТ консервы не должны содержать патогенных микробов, протея и кишечной палочки и не должны иметь признаков недоброкачественности, обусловленной жизнедеятельностью микроорганизмов.
21-22. Для оценки санитарно-гигиенического состояния предприятий общественного питания, детских, лечебно-профилактических учреждений, предприятий пищевой торговой сети определяют бактериологическую загрязненность рук работающего персонала и предметов окружающей обстановки. Эти исследования необходимы также при выявлении путей распространения инфекционных заболеваний. Бактериальное загрязнение определяют путем изучения микрофлоры смывов, сделанных с рук и поверхностей исследуемых объектовВ зависимости от целей исследования в смывах определяют:
1) наличие БГКП; 2) общую бактериальную обсемененность с пересчетом на 1 см2 исследуемой площади;
3) наличие Staph, aureus и других патогенных микробов
На предприятиях общественного питания, в детских учреждениях обычно исследование ограничивают обнаружением БГКП (как показателя фекального загрязнения объекта) и Staph, aureus. В лечебно-профилактических учреждениях в соответствии с «Инструкцией по бактериологическому контролю комплекса санитарно-гигиенических мероприятий в лечебно-профилактических учреждениях (отделениях хирургического профиля, в палатах и отделениях реанимации и интенсивной терапии)» — приложения к приказу Минздрава СССР № 720-78 г., кроме этих показателей, при необходимости определяют количественную характеристику обсеменения, наличие сине-гнойной палочки. Для обнаружения стафилококков делают посев с тампона на желточно-солевой агар. Кроме того, в качестве среды накопления используют бульон с 6,5% хлорида натрия и бульон с 1 % глюкозы, разлитые по 0,5 мл в пробирки, куда засевают по 0,2—0,3 мл смывной жидкости. Инкубируют при 37°С в течение 24 ч, а затем делают пересев на чашки с желточным агаром. Дальнейшее исследование проводится по общепринятой методике обнаружения стафилококков.
. мывы с рук хирургов для проверки стерильности производят стерильными марлевыми салфетками, которые помещают в широкогорлые пробирки с раствором нейтрализатора (вода или изотонический раствор хлорида натрия) и стеклянными бусами, встряхивают в течение 10 мин, отмывную жидкость засевают по 0,5 мл на две чашки Петри с мясо-пептонным агаром для определения общей микробной