Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
8.Bunyaviridae
Таксономия и классификация. Семейство Bunyaviridae насчи-тывает более 250 серотипов вирусов, входящих в состав 5 ро-дов. Патогенные для человека буньявирусы относятся к 4 родам:Orthobunyavirus, Phlebovirus, Nairovirus и Hantavirus. Прототипом вирусов данного семейства является впервые вы-деленный в Центральной Африке и переносимый комарами ви-рус Буньямвера. Название вируса дано по местности Буньямвера в Уганде. Морфология. Вирионы имеют овальную или сферическую фор-му, диаметр 80—120 нм. Это сложные РНК-геномные вирусы, со-держащие три внутренних нуклеокапсида со спиральным типом симметрии. Каждый нуклеокапсид состоит из нуклеокапсидного белка N, уникальной одноцепочечной минус-РНК и фермента транскриптазы (РНК-зависимой РНК-полимеразы). Три сегмента НК, связанные с нуклеокапсидом, обозначают по размерам как {long) — большой, М (medium) — средний и S (short) — малый.Буньявирусы не содержат М-белка, поэтому они более пластич-ны. Сердцевина вириона, содержащая рибонуклеопротеид (РНП),окружена липопротеидной оболочкой, на поверхности которойнаходятся шипы — гликопротеины Gn и Gc, которые кодируютсяМ сегментом РНК.
Антигены. Белок N является группоспецифическим антигеном,который выявляется в РСК. Гликопротеины (Gn и Gc) — типоспе-цифические антигены, выявляемые в РН и РТГА. Это протектив-ные антигены, индуцирующие образование вируснейтрализующихантител. Они также являются гемагглютинами. Гликопротеины —основные детерминанты патогенности, обусловливающие клеточ-ную органотропность вирусов и эффективность их передачи чле-нистоногими. Репродукция буньявирусов происходит в цитоплазмеклетки. Выход вирусных частиц происходит путем экзоцитоза, аиногда лизиса клетки.
Устойчивость к действию физических и химических факторов. Бу-ньявирусы чувствительны к действию эфира и детергентов, инак-тивируются при нагревании при 56 "С в течение 30 мин и почтимгновенно при кипячении, но длительно сохраняют инфекцион-ную активность при замораживании, Буньявирусы стабильны прирН 6,0—9,0, инактивируются обычно применяемыми дезинфици-рующими средствами.
Эпидемиология, патогенез и клиническая картина. Буньявирусышироко распространены на всех континентах, а вызываемые имииоолсвания относятся кзоонозным природно-очаговым инфекци-ям. Большая часть вирусов данного семейства относится к эколо-шческой группе арбовирусных инфекций (от англ. arthropod-borneviruses — вирусы, рожденные или передаваемые членистоногими),шк как они передаются кровососущими членистоногими насеко-мыми (полный текст «Арбовирусные инфекции» изложен в мате-р и ал ах диска). Последние являются не только их переносчиками,но и основным резервуаром и постоянными хозяевами в природ-ных очагах. Буньявирусы, как и другие представители арбовирусов,обладают способностью размножаться при двух температурных ре-жимах: 36—40 "С и 22~25 °С, что позволяет им репродуцироватьсяи организме не только позвоночных, но и переносчиков. Боль-шинство буньявирусов передается комарами. Наировирусы боль-шей частью передаются клещами, а флебовирусы — москитами икомарами. Некоторые флебовирусы и буньявирусы могут переда-ваться мокрецами Culicoides.Для заболеваний, вызванных данными вирусами, характерна се-юмпость. На территории России основное значение имеют клеши.11о звоночными хозяевами буньявирусов являются грызуны, птицы,яйцеобразные, жвачные животные, приматы. Заражение людей мо-жет происходить не только трансмиссивно через укусы кровососу-щими членистоногими, но и при контакте с больными людьми врезультате попадания на поврежденную кожу и слизистые оболочкикрови, а также других биологических выделений, содержащих вирус. ирусы рода Хантаан составляют исключение из правила в дан-ном семействе, так как их основными хозяевами являются грызу-ны. Вместе с аренавирусами и филовирусами они выделены в эко-логическую группу нетрансмиссивных геморрагических лихорадокили робовирусов (от англ. rodent-borne viruses — вирусы, рожденныегрызунами). Свидетельств участия в их передаче членистоногих необнаружено (подробнее «Робовирусные инфекции» см. на диске).Большинство буньявирусов вызывают лихорадочные заболе-вания, геморрагические лихорадки и энцефалиты. Наибольшеемедицинское значение имеют вирус геморрагической лихорадкиКрым—Конго (род Nairovirus) и вирусы геморрагической лихорад-ки с почечным синдромом (род Hantavirus), которые наиболее па-тогенны для человека.
Иммунитет. После перенесенных заболеваний остается стойкийиммунитет.
Лабораторная диагностика буньявирусных инфекций основанана выделении вирусов и обнаружении антител к ним в парныхсыворотках, а также проведении ПЦР. Эти вирусы относятся квозбудителям особо опасных инфекций, поэтому выделение ихпроводится лишь в режимных лабораториях. Материалом для ис-следования служат кровь, взятая в остром периоде заболевания(при москитных лихорадках не позже 24—48 ч от начала заболе-вания), или кусочки тканей и органов (мозг, печень, селезенка,легкие и почки), полученные на аутопсии. Вирус может быть вы-явлен в организме кровососущих членистоногих переносчиков иво внутренних органах погибших инфицированных животных.Для культивирования вирусов применяют культуры клеток изпереносчиков, почки эмбрионов человека, ВНК-21, фибробластыкуриного эмбриона, где они не оказывают выраженного цитопа-тического действия. Вирусы можно культивировать в куриных эм-брионах. К буньявирусам восприимчивы новорожденные белыемыши, белые крысы и хомячки. Универсальной моделью для вы-деления арбовирусов является интрацеребральное заражение но-ворожденных белых мышей, у которых они вызывают развитиеэнцефалита, заканчивающегося летально. Индикацию вирусовосуществляют на основании развития заболевания и гибели жи-вотных. Также заражают культуру клеток с последующей инди-кацией в РИФ, так как для бунънвирусов нехарактерно развитиевыраженного ц и топ ато генног о действия. Идентификацию вирусовпроводят в РН на мышах-сосунках, РСК, РТГА, РИГА, а также спомощью РИФ, ИФА и РИА.
Лечение и профилактика. Препараты для специфического лече-ния не разработаны. В ряде случаев применяют иммунные сы-воротки переболевших лиц, рибавирин, интерферон и реаферон.
Профилактика основана на защите от комаров, клещей и другихкровососущих насекомых. Для создания искусственного активногоприобретенного иммунитета применяют убитые вакцины.
Flaviviridae
Название семейства Flaviviridae происходит от лат. flavus — жел-гый по названию заболевания «желтая лихорадка», которое вы-и.шает вирус данного семейства. Патогенные для человека вирусы«ходят в состав двух родов: рода Flavivirus, в состав которого входятко збудители арбовирусных инфекций, и рода Hepacivirus, в составкоторого входят вирус гепатита С (HCV) и вирус гепатита G (HGV)Типовым представителем семейства Flaviviridae является вирусжелтой лихорадки, относящийся к роду Flavivirus.
Морфология, химический состав, особенности репродукции. Этосложные вирусы сферической формы, диаметром 40—60 нм. Геномнирусов состоит из линейной однонитевой плюс-нитевой РНК,окруженной капсидом с кубическим типом симметрии. Нуклеокап-сид окружен суперкапсидом, который содержит на своей поверхно-сти 2 гликопротеина. При репродукции вирусы проникают в клеткупутем рецепторного эндоцитоза, взаимодействуя с поверхностнымифосфо- и гликолипидами. В последующем происходит слияние ви-русной оболочки со стенкой вакуоли. Вирусы реплицируются в ци-топлазме, сборка происходит во внутриклеточных вакуолях. В поло-сти вакуолей вирусные частицы часто образуют кристаллоподобныеобразования, формируемые вирусными белками.Устойчивость к физическим и химическим факторам. Вирусы чув-ствительны к действию эфира, детергентов и формалина. Устойчи-ность флавивирусов к действию физических и химических факто-ров такая же, как и у алъфавирусов.
Антигенная структура. Гликопротеин, являющийся гемагглюти-иином, содержит видо- и родоспецифические антигенные детер-минанты. Характерной особенностью флавивирусов является ихспособность образовывать в инфицированных клетках раствори-мый антиген, обладающий активностью в РСК и РИД. Антителак нему обладают нейтрализующей активностью. Представителифлавивирусов внутри семейства и рода по антигенному родствув РТГА сгруппированы в 15 антигенных комплексов или групп:комплекс вирусов клещевого энцефалита, японского энцефалита,лихорадки денге и т.д. Вирус желтой лихорадки стоит вне этихкомплексов.
Особенности культивирования. Вирусы культивируют во мно-гих первичных и перевиваемых культурах клеток, цитопатическоедействие хорошо проявляется в культурах клеток СПЭВ, ВНК-21.Универсальной моделью для выделения флавивирусов являетсяинтрацеребральное заражение новорожденных белых мышей, атакже 3—4-недельных белых мышей, у которых отмечается разви-тие параличей. В качестве экспериментальной модели используютобезьян. Вирусы культивируют также путем заражения куриныхэмбрионов на ХАО и в желточный мешок. Гибель куриных эм-брионов отмечается через 72 ч. Для вирусов лихорадки денге вы-сокочувствительной моделью является интраторакальное и интра-капутальное заражение комаров.
Эпидемиология, патогенез и клинические проявления. Флавиви-русы широко распространены в природе и, как и другие арбовиру-сы, вызывают природно-очаговые заболевания с трансмиссивныммеханизмом заражения. Основным резервуаром и источникомфлавивирусов в природе являются кровососущие членистоногиепереносчики, у которых доказано наличие трансфазовой и транс-овариальной передачи флавивирусов. Большая часть флавивиру-сов распространяется комарами (вирусы лихорадки денге, вирусжелтой лихорадки, японского энцефалита, лихорадки ЗападногоНила), некоторые передаются клещами (вирусы клещевого энце-фалита, омской геморрагической лихорадки, вирус болезни лесаКиассанур и др.). Комариные флавивирусные инфекции распро-странены преимущественно в южных широтах, в то время какклещевые встречаются повсеместно. Важную роль в поддержаниифлавивирусов в природе играют прокормители кровососущих чле-нистоногих переносчиков — теплокровные позвоночные живот-ные: грызуны, птицы, летучие мыши, приматы и т.д., у которыхинфекция обычно протекает бессимптомно, но сопровождаетсявыраженной вирусемией, что способствует трансмиссивному ме-ханизму заражения. Человек — случайное, тупиковое звено в эко-логии флавивирусов, однако для лихорадки денге и городского
.к иная ш желтой лихорадки больной человек также является основнымрезервуаром и источником вируса.Помимо основного трансмиссивного механизма заражения иПутипередачи, заражение флавивирусами может происходить кон-гактным, аэрогенным и пищевым путями.
Патогенез сходен с патогенезом заболеваний, вызываемых дру-гими арбовирусами (см. патогенез буньявирусных и альфавирусныхинфекций). Флавивирусы более патогенны, они вызывают тяжелопротекающие заболевания, сопровождающиеся поражением пече-ни и геморрагическим синдромом (желтая лихорадка, лихорадкадснге, омская геморрагическая лихорадка, болезнь леса Киасса-нур) или развитием энцефалитов (клещевой энцефалит, японскийэнцефалит).
Иммунитет после перенесенных заболеваний напряженный,повторные заболевания не наблюдаются.
Лабораторная диагностика основана на выделении вирусов путеммнтрацеребрального заражения мышей, культур клеток, куриных(мбрионов и заражения комаров, а также обнаружении антител впарных сыворотках. Материалом при проведении вирусологиче-ского исследования служаткровь, взятая в первые дни заболеванияп в период повторного приступа лихорадки, цереброспинальнаяжидкость, секционный материал (мозг, печень, селезенка, лим-фатические узлы), внутренние органы погибших диких животных,переносчики — клещи, комары, москиты, а также молоко коз, ко-ров и овец (вирус клещевого энцефалита), озерная вода, в которойнаходились тушки павших животных (вирус омской геморрагиче-ской лихорадки). Индикация вирусов проводится на основанииi ибели мышей и куриных эмбрионов, в культурах клеток с помо-щью РГА с эритроцитами гусей, по обнаружению цитопатическогодействия и бляшкообразованию. Идентификация проводится с по-мощью РН, РТГА, РСК, РИГА, РИД, РИФ, ИФА. П о сравнению сРСК и РТГА РН наиболее специфична при работе с арбовирусами,позволяет осуществлять их типовую дифференциацию.Обнаружение антител в парных сыворотках проводят с помо-щью РТГА, РТНГА, РСК, РРГ, РН, РнИФ, ИФА. Диагности-ческим считается нарастание титров антител более чем в 4 раза.Обнаружение lgM свидетельствует о свежем инфицировании. Прижцефалитах важную роль играет обнаружение антител в церебро-спинальной жидкости, так как их раннее обнаружение свидетель-ствует о текущей инфекции.
Экспресс-диагностика флавивирусных инфекций осуществля-ется на основании обнаружения антигенов с помощью РНГА,РИФ, ИФА и РИА. Из молекулярно-генетических методов диа-гностики применяют молекулярную гибридизацию нуклеиновыхкислот и ПЦР.
Лечение и профилактика. Из противовирусных препаратов длялечения применяют рибавирин, интерферон, реаферон, биназу.Для экстренной профилактики и лечения используют гетерогенныеи гомологичные иммуноглобулины. При проведении вакцинопро-филактики для создания активного искусственного приобретенно-го иммунитета применяют в основном убитые формалином вакци-ны, за исключением живой вакцины против желтой лихорадки
*Togaviridae
Название семейства Togaviridae происходит от лат. toga — плащили накидка, что отражает сложное строение вириона, наличиеу вирусов внешней липидсодержащей оболочки (суперкапсида),окружающей РНП наподобие плаща. Семейство состоит из 4 ро-дов, два из которых — род Alphavirus и род Rubivirus — играют рольв патологии у человека. Альфавирусы относятся к экологическойгруппе арбовирусов. Типовым представителем рода является вирусСиндбис (SIN). Род Rubivirus включает вирус краснухи, которыйпередается воздушно-капельным путем и не относится к арбови-русам.
Вирус краснухи, помимо приобретенной краснухи, вызываетврожденную краснуху и прогрессирующий краснушный панэнце-фалит.В 1942 г. австралийский офтальмолог N. Gregg показал особуюопасность вируса краснухи для плода при заболевании ею бере-менных женщин. Онотметил развитие у новорожденных классиче-ской триады врожденной краснухи:катаракты, глухоты и пороковсердца. Вирус был выделен в культуре клеток в 1962 г. одновре-менно двумя группами исследователей — Т. Weller и F. Neva и
P. Parkman и др.
Таксономическое положение вируса. Вирус краснухи относится ксемейству Togaviridae, роду Rubivirus. Название происходит от лат.rubrum — красный, что связано с покраснением кожи у больных всвязи с появлением на ней пятнисто-папулезной сыпи.
Морфология и химический состав вируса. Вирион вируса крас-нухи имеет сферическуюформу, диаметр 60—70 нм. Геном вирусасостоит из однонитевой гглюс-нитевой РНК, окруженной капси-дом с кубическим типомсимметрии и внешней липидсодержащеиоболочкой, на поверхности которой находятся шипы. В структуревириона три белка — С, Е1 и Е2, два последние из них — глико-протеины,расположенные во внешней оболочке вириона.
Устойчивость к действию физических и химических факторов. Ви-рус краснухичувствителен к эфиру и детергентам. Он малоустой-чив к действию физических ихимических факторов, неустойчивв окружающей среде. Вирус инактивируется при 100 °С за 2 мин.Разрушение вируса происходит под действием органических рас-творителей,хлорактивных соединений, формалина, УФ-лучей,солнечного света. При низких температурах в замороженном со-стоянии он сохраняетсвою активность годами.
Антигенная структура. Вирус краснухи представлен одним серо-типом. Он имеетвнутренний нуклеокапсидный антиген С, выяв-ляемый в РСК. Протективным антигеномявляется Е2, к которомувырабатываются вируснейтрализующие антитела. Е2 также явля-ется гемагглютинином,агглютинируя эритроциты голубей, гусей и1—3-дневных цыплят. Е1 участвует в прикреплении вируса к клет-ке и формированиидимера с Е2.Особенности культивирования. Вирус краснухи вызывает разви-тие цитопатическогодействия и образование бляшек под агаро-вым покрытием лишь в некоторыхперевиваемых культурах кле-ток: ВНК-21, Vero и др., а также в первичных культурахклетокиз тканей человеческого плода, в которых он вызывает очаговуюдеструкцию клеточного монослоя и образование цитоплазмати-ческих эозинофильныхвключений. Культивирование в другихкультурах клеток не вызывает развития цитопатического действия.Поэтому в них вирус обнаруживают по феномену интерференции,при этом в качестве индуктора для суперинфекции используютвирус ECHO-11 и вирус везикулярного стоматита, размножениекоторых в культурах клеток всегда сопровождается развитием ци-топатическогодействия. К вирусу чувствительны куриные и ути-ные эмбрионы.
Эпидемиология. Краснуха — антропонозное заболевание. Ис-точниками вируса являются человек, больной клинически выра-женной или бессимптомной формой краснухи, представляющиймшдемическую опасность со второй половины инкубационногопериода и в течение 7 дней с момента появления сыпи, а такжедети с врожденной краснухой, выделяющие вирус в окружающуюсреду с носоглоточным секретом, а также с мочой и испражнения-ми is течение многих месяцев (до 2 лет). Отличительной чертойшражения вирусом является наличие двух самостоятельных путейпередачи: воздушно-капельного у лиц, общавшихся с источникоминфекции, и трансплацентарного от матери к плоду. При этомгрансплацентарная передача вируса является связующим звеном вцени аэрогенного механизма заражения, так как дети с врожден-ной краснухой передают вирус окружающим воздушно-капельнымпутем. Вирус, персистирующий в организме больного врожденнойкраснухой, обладает повышенной вирулентностью.
Патогенез и клинические проявления. Различают две формы бо-лезни: приобретенную и врожденную краснуху, которые имеютсущественные различия в клинических проявлениях и механизмахзаражения. Входными воротами инфекции при приобретеннойкраснухе являются слизистые оболочки верхних дыхательных пу-тей, откуда вирус проникает в регионарные лимфатические узлы,где размножается и поступает в кровь. С током крови вирус раз-носится по органам и оседает в лимфатических узлах и эпители-альных клетках кожи, где и развивается иммунная воспалительнаяреакция, сопровождающаяся появлением пятнисто-папулезнойсыпи. Инкубационный период 11—24 дня, в среднем 16—21 день.Заболевание начинается с незначительного повышения температу-ры и легких катаральных симптомов, конъюнктивита, а также уве-личения заднешейных и затылочных лимфатических узлов. В по-следующем появляется пятнисто-папулезная сыпь, расположеннаяко всему телу. Вирус выделяется из организма больных с секретомслизистых оболочек верхних дыхательных путей, а также с мочойи фекалиями. Он исчезает из крови через 2 суток после появлениясыпи, но сохраняется в секрете слизистых оболочек верхних ды-хательных путей втечение 2 нед. У детей краснуха, как правило,протекает легко.
Иммунитет. Независимо от формы заболевания у переболевшихлиц остается стойкий, напряженный иммунитет.
Врожденная краснуха — факультативная медленная вируснаяинфекция, развивающаяся в результате внутриутробного транс-плацентарного заражения плода, персистенции вируса в его тканях, где он оказывает тератогенное действие. Она характеризуетсяразвитием катаракты, глухоты и пороков сердца, а также другиханомалий развития. Слепота в сочетании с глухотой и поражениемЦНС приводят к умственной отсталости. Особую опасность пред-ставляет заражение краснухой в I триместре беременности, так какв этом периоде происходит формирование всех основных тканей иорганов плода. Около 1/4 детей, зараженных в этот период, рож-даются с симптомами врожденной краснухи, а у 85% детей реги-стрируются другие формы патологии развития. Тератогенное дей-ствие вируса обусловлено торможением митотическои активностиклеток, ишемией плода в результате поражения сосудов плаценты,иммуносупрессивного действия избыточной антигенной нагрузкина развивающуюся иммунную систему, а также прямым цитопа-тогенным действием вируса на клетки плода. У новорожденных сврожденной краснухой определяются IgM как показатель внутри-утробной инфекции. Иммунитет после врожденной краснухи ме-нее стоек, так как формирование его происходит в условиях не-зрелой иммунной системы плода. У лиц с врожденной краснухойв течение второго десятилетия жизни может развиться прогресси-рующий краснушный панэнцефалит (ГТКПЭ) — медленная вирус-ная инфекция, характеризующаяся комплексом прогрессирующихнарушений двигательной и умственной функции ЦНС и завер-шающаяся летальным исходом.
Лабораторная диагностика краснухи основана на выделении ви-руса из смывов со слизистой оболочки носа и зева, крови, мочи,реже испражнений, а также внутренних органов погибших детейи обнаружении антител в парных сыворотках и цереброспиналь-ной жидкости при врожденной краснухе и ПКПЭ, а также по-становке ПЦР. Так как вирусологический метод сложен и трудо-емок, основной комплекс методов диагностики краснухи включаетопределение специфических антител к вирусу в ИФА: обнаруже-ние специфических IgM или нарастание IgG в парных сыворот-ках, определение индекса авидности IgG и выявление РНК вирусакраснухи.
Специфическое лечение и профилактика. Первоочередной зада-чей профилактики является защита беременных от внутриутроб-ного инфицирования плода, а не предохранение от краснухи дет-ских контингентов. С этой целью применяют живую вакцину изаттенуированных штаммов. В национальный календарь профилак-i ических прививок включены вакцинация против краснухи у детейВ 12-15 мес, а также ревакцинация детей в возрасте 6 лет и им-мунизация девочек в возрасте J3 лет, а также выборочную вакци-нопрофилактику у серонегативных женщин детородного возраста.
Иммунитет у привитых сохраняется в течение 20 лет. Заболеваниекраснухой в I триместре беременности является показанием к пре-рыванию беременности.
Filoviridae
Название семейства происходит от лат. filum — нить и отражаетморфологию вирионов. В состав семейства входят два рода: Маг-burgvirus и Ebolavirus.Вирусы этого семейства вызывают тяжелыегеморрагические лихорадки, часто со смертельным исходом.
Морфология и антигенные свойства. Вирион филовирусов име-ет липидную оболочку иформу закрученных нитей длиной 600—800 им и толщиной 50 нм. Нуклеокапсид представляет собой ком -плекс вирусной РНК и 4структурных белков: NP (нуклеопротеид) ,VP30 (кофактор вирусной полимеразы), VP35 (фосфопротеин) иL (вирусная РНК-зависимая РНК-полимераза). С мембраной ви-руса ассоциированы 3структурных белка. Два из них — VP24 иVP40 — расположены с внутренней стороны мембраны и играютроль матриксных белков, а поверхностный GP-комплекс, состоя-щий из двух субъединиц (GP1 и GP2), формирует внешние шипывириона.Геном филовирусов — одноцепочечная РНК негативной по-лярности размером около 19000 пар оснований, фланкированнаяконсервативными некодируюгдими участками. Геном содержит7 открытых рамок считывания — по одной на каждый ген.
Культивирование. Филовирусы культивируют на культурах кле-ток Vero, MA 104 и SW13.Для изучения репликации филовирусовтакже с успехом использовали человеческие микроваскулярныеэндотелиальные клетки и периферические клетки крови (моно-циты и макрофаги).
Резистентность. Филовирусы сохраняют инфекционностьпри комнатной температуре, но разрушаются при 60 "С в тече-ние 30 мин. Теряют свою инфекционность при обработке УФ-,у-излучением, детергентами.
Репродукция. Клетками-мишенями филовирусов являются клет-ки миелоидного ряда (моноциты/макрофаги, гелатоциты, дендрит-ные клетки) и клетки эндотелия,содержащие на своей поверхно-сти специфические лектины, с которыми связываетсясубъединицаGP1. Вирион проникает в клетку в эндосомах. После слияниямембран вириона и эндосомы в цитоплазму клетки высвобожда-ется нуклеокапсид. Репликация вирусного генома происходит вцитоплазме. Белки GP и NP синтезируются на рибосомах шеро-ховатого ретикулума,остальные вирусные белки — на свободныхрибосомах. Сборка вирионов происходит на цитоплазматическоймембране.
Эпидемиология. Природный резервуар филовирусов не установ-лен. Распространениевирусов происходит воздушно-капельным иконтактным путем, особенно при контактах с кровью и выделе-ниями больного. Влабораторных условиях основным источникомзаражения служат медицинские колюще-режущие инструменты.Первые случаи заболеваний, вызываемые вирусом Марбург, былизарегистрированы в Югославии и Германии в связи с завозом ин-фицированных зеленыхмартышек из Уганды в 1967 г. Небольшиеэпидемические вспышки возникали в ЮАР и Зимбабве (1975).Самая крупная вспышка (более 100 случаев) была зарегистриро-вана в Конго (1988).Первые случаи заболевания вирусом Эболабыли зарегистрированы в Заире (1976) и Судане. Самая крупнаявспышка (245 умерших из 346 заболевших) была описана в Конго(1994). Зарегистрированы случаи заболевания в Габоне, Заире иКот-д'Ивуар.
Клиническая картина. Основные симптомы заболевания: лихо-радка, озноб, головнаяболь, миалгия, анорсксия. Основные про-явления геморрагической лихорадки наступаютна 5—7-й день за-болевания. В это время развиваются симптомы геморрагическогопоражения тех или иных систем организма. Прогноз зависит оттипа вируса и скорости манифестации геморрагических проявле-ний. Смертностьсоставляет 22—88%.
Иммунитет. Механизмы выздоровления и формирования им-мунного ответа изученыплохо. Показано, что одним из основныхфакторов в патогенезе этой вирусной инфекции является иммуно-супрессия, механизмвозникновения которой неизвестен. Показа-но, что нейтрализующие антитела к белку GP в экспериментах наживотных обладают защитным свойством.
Микробиологическая диагностика. Материалом для исследова-ния служит кровь. Основным методом лабораторной диагности-ки является ИФА для определения отдельных антигенов вируса иантител к ним. Вирусные антигены определяются начиная с 3-го
дня после начала заболевания до 7—16-го дня после исчезновениясимптомов болезни. IgM-антитела к вирусным белкам появляютсяв крови между 2—12-м днем, а IgG-антитела — между 6—18-м днемпосле появления симптомов болезни. Для выявления генома виру-сов используют метод ОТ-ПЦР со специфическими праймерами.
Лечение симптоматическое.
Специфическая профилактика. Разработана убитая вакцина про-тив болезни Марбург и Эбола. Однако, поскольку ее безопасностьдо конца не изучена, она применяется только для вакцинации ме-дицинского персонала в очагах заболевания и сотрудников науч-ных лабораторий, работающих с филовирусами.
Клещевой энцефалит
Таксономическое положение и биологические свойства. Вирусклещевого энцефалита (ВКЭ) выделен в 1937 г. на Дальнем Вос-токе Л.А. Зильбером исоавт. Является типовым представителемвирусов комплекса клещевого энцефалита рода Flavivirus, в составкоторого входят вирус омской геморрагической лихорадки, вирусболезни леса Киассанур и другие сходные по биологическим свой-_ _ . _ .—_ _ __—_ у ствам и в антигенном отношении вирусы. Это типичный арбо-вирусумеренного пояса, он включает три подтипа: европейский,дальневосточный и сибирский.Геном ВКЭ представлен однонитевой плюс-РНК. Зрелый вируссодержит три структурных белка: капсидный белок С, мембран-ный белок М иповерхностный белок Е. Белок Е обусловливаеттропизм вирусов к клеткам. На его поверхности располагаютсядетерминанты висцеротропности и нейровирулентности. В гено-ме ВКЭ закодированынеструктурные белки NS1—NS5 и вируснаяРНК-полимераза. Они участвуют в репликации вируса. Несмотряна небольшую устойчивость вируса к дейетвию физических и хи-мических факторов, ворганизме переносчиков он сохраняет своюжизнеспособность в широком диапазоне температур — от —150 °Сдо 30 "С, что способствует его широкому распространению. Вируспроявляет высокую резистентность к действию кислых значенийрН, что важно при алиментарном пути заражения.
Эпидемиология. Переносчиком и основным долговременным ре-зервуаром вирусаявляются иксодовые клещи (таежный — /. persul-catus и лесной — /. ricinus).Поддержание длительной циркуляциивируса осуществляется за счет грызунов, птиц, диких и домашнихживотных. Для клещевого энцефалита характерна весенне-летняясезонность.Основной механизм заражения трансмиссивный. Человек за-ражается при укусеинфицированным клещом. Нередко для раз-вития заболевания достаточно лишьнаползания на кожу клещейи нимф. Проникновение вируса в организм возможно также кон-тактным путем черезмелкие повреждения кожи. Доказан и али-ментарный путь заражения приупотреблении сырого молока коз иовец (молочная лихорадка или двухволновый менингоэнцефалит).
Патогенез и клиническая картина. Инкубационный период8—23 дня. Различают висцеральную и невральную стадии клеще-вого энцефалита. Вирусразмножается в месте входных ворот ин-фекции под кожей, откуда он попадает в кровь,вызывая первич-ную вирусемию. Далее вирус проникает в лимфатические узлы,селезенку, эндотелий кровеносных сосудов, где активно размно-жается. При пищевомпути заражения входными воротами явля-ется слизистая оболочка глотки и тонкойкишки. В конце инку-бационного периода в результате активного размножения вирусавозникает вторичная вирусемия, длящаяся 5 дней. Вирусы гема-Гигенно, а возможно, и периневрально проникают в головной иI ной мозг. Процесс носит чрезвычайно диффузный характер,Поражая все отделы ЦНС. Особенно страдают крупные двигатель-с клетки в серомвеществе спинного мозга и ядрах двигательныхЧерепно-мозговых нервов в стволе головного мозга. Здесь отмеча-1ТСИ наибольшеескопление вирусов, вызывающих некроз клеток.Несмотря на вирусемию, больной человек является «тупиком» для•ируса, так как не может быть донором для клешей.Различают три клинические формы клещевого энцефалита: ли-м>р;1дочную,менингеальную и очаговую, которая протекает наи-более тяжело и сопровождаетсяразвитием параличей шеи и верх-пи \ конечностей.
Иммунитет. После перенесенного заболевания остается стой-кий иммунитет. ВКЭотносится к факультативным возбудителяммедленных вирусных инфекций. В ряде случаев у 2—12% больныхотмечается прогредиентное течение заболевания (от лат. gradatio —постепенное усиление, неуклонное прогрессирование) с переходоми хроническую форму на фоне активного антителообразования.11 с репетирующий ВКЭ меняет свои свойства. Он не экспрессируетантигены на поверхности клеток и не оказывает цитопатическогон-петвия.
Лабораторная диагностика клещевого энцефалита основана наобнаружении вируса и его антигенов в исследуемом материале,постановке ПЦР, а также обнаружении антител. Вирус выделяютin крови и цереброспинальной жидкости больных, а также вну-|[к-миих органов и мозгаумерших путем интрацеребрального за-ражения новорожденных белых мышей икультур клеток. Иден-шфикацию вируса проводят в РТГА, РН и РСК, а в монослоекультур клеток в РИФ. Обнаружение антител в парных сыворот-ках ицереброспинальной жидкости проводят с помощью РСК иPITA. Для обнаружения специфических igM и IgG к белку Е ВКЭприменяют ИФА. Разработана лантанидная иммунофлюоресцент-ная система длявыявления специфических антител классов М иG, а также антигенов ВКЭ. Обнаружение антигенов в исследуемомматериале, в том числе в клещах, снятых с укушенных людей, про-водят с помощьюИФА-Е. Экспресс-диагностика клещевого эн-цефалита основана на обнаружениивирусного антигена в крови спомощью РИГА и ИФА, выявлении IgM-антител на первой неделешболевания в цереброспинальной жидкости и обнаружении РНКвируса с помощью ПЦР в крови и цереброспинальной жидкостиу людей.
Специфическое лечение и профилактика. Для лечения и экстрен-ной профилактики клещевого энцефалита применяют специфиче-ский гомологичный донорский иммуноглобулин против клещевогоэнцефалита. При отсутствии данного препарата назначают специ-фический гетерологичный лошадиный иммуноглобулин. При не-возможности введения иммуноглобулина используют индукторинтерферона (йодантипирин). Серотерапию необходимо начинатьне позднее 3—4-го дня заболевания. Для вакцинации лиц, прожи-вающих на эндемичных по клещевому энцефалиту территориях,а также выезжающих на эти территории в весенне-летний периодиспользуют убитые культуральные вакцины.Для исключения пищевого пути заражения в природных очагахклещевого энцефалита необходимо потреблять только кипяченоемолоко.
Rhabdoviridae
Рабдовирусы (Rhabdoviridae) — семейство РНК-содержащихоболочечных вирусов, включающее около I80 вирусов живот-ных и растений; род Lyssavirus содержит вирус бешенства, родVesiculovirus — вирус везикулярного стоматита, а род Ephemerovirus —вирус эфемерной лихорадки крупного рогатого скота и др.
Структура. Размер вирионов 120—350x60—80 нм. Они имеютпуле- или конусообразную форму (рис. 17.2). Для вирусов, пора-жающих позвоночных, характерна пулевидная форма, а для вирусавезикулярного стоматита — бациллярная с закругленными с обеихсторон концами. Отсюда и название Rhabdoviridac (от греч. rhab-dos — прут, палка).Рабдовирусы имеют двуслойную липопротеиновую оболочку ирибонуклео протеин (нуклеокапсид) спиральной симметрии. Изну-триоболочкавыстланаМ-белком(от англ. matrix), а снаружи от нееотходят шипы гликопротеина G (длина 5—10 нм, диаметр 3 нм).
Репродукция. Рабдовирусы связываются гликопротеинами обо-лочки с рецепторами клетки и проникают в нее путем клатрин-опосредованного эндоцитоза. Затем формируются ранняя и поздняяэндосомы. Из последней рибонуклеопротеин попадает в цитоплаз-му клетки, где с помощью РНК-зависимой РНК-полимеразы син-тезируются неполные плюс-нити РНК (5 индивидуальных иРНКдля синтеза вирусных белков) и полные плюс-нити РНК, являющиеся матрицей для синтеза геномной РНК. Преобразованныеи аппарате Гольджи вирусные белки включаются в плазмолеммуклетки. Рибонуклеопротеин образуется путем взаимодействия ге-номной (минус-нити) РНК с белками N, Р и L. Вирусы выходят из клетки почкованием
Вирус бешенства
Вирус бешенства вызывает бешенство (Rhabies, синонимы: во-добоязнь, гидрофобия) — зоонозную инфекцию, развивающуюся мосле укуса или ослюнения раны животным, инфицированным козбудителем. В результате поражаются нейроны ЦНС с разви-тием симптомов возбуждения, параличом дыхательной и глота-тельной мускулатуры. Болезнь заканчивается летально. Вируснаяэтиология бешенства доказана П. Ремленже в 1903 г. Возбудитель —РНК-содержащий вирус семейства Rhabdoviride рода Lyssavirus, который включает также другие вирусы, сходные с вирусом бешен-ства (лиссавирус австралийских летучих мышей, лиссавирусы евро-пейских летучих мышей типа I и 2, Дувенхаге, Лагос-бат, Мокола
и др.), выделенные от различных животных, насекомых в Африке.
Морфология и антигенные свойства. Вирион имеет форму пули (см. рис. 17.2), размер 75—180 нм. Он состоит из сердцевины (спи-рального рибон у кл со протеин а и матриксного белка), окруженной липопротеиновой оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Гли-копротеин G отвечает за адсорбцию и внедрение вируса в клетку, обладает антигенными и иммуногенными свойствами. Рибонуклео-протеин состоит из геномной однонитевой линейной минус-РНК и белков: N-белка, укрывающего, как чехол, геномную РНК, L-белка и Р-белка, являющиеся полимеразой (транскриптазой) вируса. Ри-бонуклеопротеин является группоспецифическим антигеном. Различают два идентичных по антигенам вируса бешенства: ди-кий (уличный) вирус и фиксированный (virus fixe). Дикий (улич-ный) вирус циркулирует среди животных и патогенен для человека. Фиксированный вирус получен Л. Пастером в виде антирабиче-ской вакцины многократным пассированием дикого вируса через мозг кроликов. Он утратил патогенность для человека, не образует включений и не выделяется со слюной.
Культивирование вируса осуществляют путем внутримозгово-го заражения лабораторных животных (кроликов, белых мышей,крыс, морских свинок, хомячков, овец и др.) и в культуре клетокпочек хомячка, нейробластомы мыши, фибробластов человека,куриного эмбриона и др. В нейронах головного мозга заражен-ных животных образуются цитоплазматические включения вирусаовальной формы, впервые описанные В. Бабешем (1892) и А. Не-гри (1903). Они получили название телец Бабеша—Негри (эозино-фильные включения размером 1 — 15 мкм, состоящие из вирусногорибонуклеопротеина).
Резистентность. Вирус бешенства быстро погибает под дей-ствием солнечных и УФ-лучей, а также при нагревании до 60 °С. Он чувствителен к жирорастворителям, дезинфицирующим веще-ствам, пропиолактону, щелочам и протеолитическим ферментам; сохраняется при низких температурах (от —20 до —70 °С).
Эпидемиология. Бешенство широко распространено, кро-ме островных государств, осуществляющих карантинные и про-филактические мероприятия. Резервуар и источник инфекции в природных очагах — лисы, волки, енотовидные собаки, песцы, еноты, шакалы, ежи, грызуны, насекомоядные, летучие мыши, а в антропургических очагах — обычно собаки и кошки. У собаки после инкубационного периода (14—16 дней) появляются возбуж-дение, обильное слюнотечение, рвота, водобоязнь. Она грызет ме-сто укуса, посторонние предметы, бросается на людей, животных. Возбудитель накапливается в слюнных железах больного живот-ного и выделяется со слюной. Через 1—3 дня наступают паралич и смерть.
Механизм передачи возбудителя контактный при укусах, реже при обильном ослюнении поврежденных наружных покровов. Воз-можен аэрогенный механизм передачи вируса, например в пеще-рах, населенных летучими мышами, которые многомесячно могут выделять вирус бешенства со слюной.
Патогенез и клиническая картина. Инкубационный период у че-ловека при бешенстве от 10 дней до 3мес, иногда до года и более,что зависит от характера и локализации повреждения. Короткийинкубационный период отмечается при множественных укусах вголову, более продолжительный — при укусах в конечности. Ин-кубационный период при передаче вируса летучими мышами бо-лее короткий (не более 3—4 нед). После попадания вируса впо-ирежденные наружные покровы он реплицируется, персистируя вместе внедрения. Затем возбудитель распространяется по аксонампериферических нервов и достигает клеток головного и спинногомозга, где размножается. В цитоплазме нейронов мозга, чаще вгипокампе, обнаруживаются тельца Бабеша—Негри. Размножив-шийся вирус попадает из мозга по центробежным нейронам в раз-личные ткани, в том числе в слюнные железы. Выделяется вируссо слюной за 8 сут до начала и в течение всей болезни.Заболевание начинается с недомогания, беспокойства, бессон-ницы. Затем развиваютсярефлекторная возбудимость, спазмати-ческие сокращения мышц глотки и гортани; дыхание шумное,судорожное. Судороги усиливаются при попытке пить, при видельющейся воды (гидрофобия), от дуновения (аэрофобия), ярко-го света (фотофобия), шума (акустофобия) и при других воздей-ствиях. Развиваются галлюцинации, а в конце болезни (на 3—7-йдень) — параличи мышц конечностей и дыхания. Реже болезньпротекает без возбуждения и водобоязни; развиваются паралич ислюнотечение (тихое бешенство). Летальность около 95%.
Иммунитет. Чувствительность человека к бешенству варьирует:при укусах бешеным волком заболевают около 50% непривитыхлюдей, а бешеной собакой — около 30%. Постинфекционныйиммунитет не изучен, так как больной обычно погибает. Имму-низация инактивированной антирабической вакциной вызываетактивацию клеточного иммунитета, выработку антител и интер-феронов.
Лабораторная диагностика. При постмортальной диагно-стике обнаруживают цитоплазматические включения (тельцаБабеша—Негри) в мазках-отпечатках или срезах из ткани гип-покампа, пирамидальных клеток коры большого мозга и клеток Пуркинье мозжечка. Включения выявляют методами окраски пРомановскому—Гимзе, Манну, Туревичу, Муромцеву и др. Вирус-ные антигены в клетках обнаруживают с помощью РИФ. Кромеэтого выделяют вирус из мозга и подчелюстных слюнных желез:мышей-сосунков заражают интрацеребрально. Срок наблюдениядо 28 дней. Обычно зараженные животные погибают через неде-лю. Вирусы идентифицируют с помощью ИФА, а также в РН намышах.Для прижизненной диагностики исследуют отпечатки рогови-цы, биоптаты кожи с помощью РИФ; выделяют вирус из слюны,цереброспинальной и слезной жидкости путем интрацеребральногоинфицирования мышей-сосунков. Возможно определение антителу больных с помощью ИФА, непрямо й РИФ, РСК, РН, РНГА.
Профилактика. Выявляют, изолируют или уничтожают возмож-ные источники инфекции: бродячих собак, кошек и других живот-ных. Важно соблюдение правил содержания домашних животных.Проводятся карантинные мероприятия при импорте животных.Иммунизируют антирабической вакциной служебных и домашнихсобак. Пострадавшему промывают рану водой с мылом, обраба-тывают спиртом или препаратами йода. Края раны иссекают и впервые 3 дня не зашивают. Специфическую профилактику прово-дят антирабической вакциной и антирабической сывороткой илииммуноглобулином.Первую вакцину против бешенства получил Л. Пастер путемпассирования возбудителя бешенства через мозг кролика. К 133-му пассажу уличного вируса бешенства, т.е. заражения от кроликак кролику, первоначальный инкубационный период снизился с15—20 до 7 дней. В последующем инкубационный период не изменялся. Полученный вирус с постоянным инкубационным пе-риодом Л. Пастер назвал фиксированным, в отличие от уличного.Фиксированный вирус утратил вирулентность для других видовживотных. Кроме этого Л. Пастер высушивал инфицированныймозг над едким калием. Первая вакцинация была проведена им вIK85 г. мальчику, укушенному бешеной собакой.Проводят активно-пассивную иммунизацию. При пассив-ной иммунизации вводят антирабический иммуноглобулин илиантирабическую сыворотку. При активной иммунизации вводятконцентрированную культуральную антирабическую вакцину,инактивированную УФ- или у-лучами: условный курс прививок2—4 инъекции вакцины (с 10-дневным наблюдением за укусив-шим животным); безусловный курс согласно инструкции. Разра-батывается генно-инженерная вакцина, содержащая гликопротеинG вируса.