Если у вас возникли сложности с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой - мы готовы помочь.
Предоплата всего
Подписываем
Состав питательных сред для проведения
практических занятий (12.12.13)
Образование кислоты из арабинозы. Для определения способности бактерий образовывать кислоту готовят среду состава (г):
(NH4)2HPO4 – 0,1; дрожжевой экстракт – 0,02; MgSO4 – 0,02; KCl – 0,02; 0,04%-ный водный раствор бромтимолового синего – 1,5 мл; вода дистиллированная – 100 мл, разливают ее по 5 мл в пробирки и стерилизуют при 1 атм. Отдельно готовят 10 % раствор арабинозы в дистиллированной воде, стерилизуют его при 0,5 атм и перед внесением суспензии бактерий добавляют к среде в пробирках (посев на чашки секторами) до концентрации 0,5 – 1%. Продолжительность культивирования бактерий от до 2 до 7 суток. Образование кислоты отмечают по изменению цвета индикатора от синего до желтого.
Образование кислоты из ксилозы и маннита определяют на той же среде, но вместо раствора арабинозы используют 10%-ные стерильные водные растворы ксилозы и маннита.
Образование ацетоина (реакция Фогес – Проскауэра, VP – тест). Способность к образованию ацетоина определяют на среде состава (г): пептон – 0,7; глюкоза – 0,5; NaCl – 0,5; вода дистиллированная – 100 мл; рН – среды – 6,5. Среду разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют при 0,5 атм. После 5 – 7 суток инкубации определяют значение pH среды по капельной реакции с метилрот, а затем – ацетоин. Для этого к 3 мл культуры добавляют 1 мл свежеприготовленного 10 % - ного спиртового раствора - нафтола и 1 мл 20 % - ного водного раствора KOH и смесь хорошо перемешивают. Малиново-красное окрашивание свидетельствует об образовании ацетоина.
Рост на среде при рН 5,7 определяют на глюкозо-пептонной среде (среда Сабуро) состава (г): гидролизат казеина – 0,5 мл; пептон – 0,5; глюкоза – 2; дистиллированная вода – 100 мл; рН среды 5,6 – 5,7. Среду разливают в пробирки и стерилизуют при 0,5 атм. После заражения среды бактериями пробирки рекомендуется держать в наклонном положении при 300 6 суток. О росте судят по появлению пленки и помутнению среды.
Рост на среде с 7 % NaCl. Возможность роста бактерий на среде с 7 % NaCl определяют на среде состава: МПБ – 100 мл, NaCl – 7 г. Среду разливают в пробирки по 3 мл, стерилизуют при 1 атм и после заражения бактериями инкубируют в наклонном положении от 3 до 7 суток. Способность к росту оценивают по появлению пленки или помутнению среды.